全 文 ：第 32 卷 第 2 期
2 0 1 4 年 2 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE AＲCHIVES OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 32 No． 2
Feb． 2 0 1 4
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刊
DOI:10． 13193 / j． issn． 1673-7717． 2014． 02． 035
中药三叶青微粉粒度测定的研究
罗素菜1，曹岗1，朱承伟1，葛卫红1，蔡宝昌1，2
(1．浙江中医药大学中药炮制技术研究中心，浙江 杭州 310053;
2．南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室，江苏 南京 210049)
摘 要:目的:建立三叶青微粉细胞破壁率的检测方法。方法:采用粒度比较法，将参考样品图片与试样图片
进行比较，估计试样粉末的大致破壁程度。结果:三叶青粉末破壁率 ＜ 50%，破壁程度属于 4 级(++++)。结论:细
胞破壁率与粒径值具有相关性，可采用粒度半定量分析粉末的破壁程度。
关键词:三叶青;粒度;破壁率
中图分类号:Ｒ284． 3 文献标志码:A 文章编号:1673 － 7717(2014)02-0328-02
Study on Determination of Particle Size in Ｒadix Tetrastigmatis Micro － Powder
LUO Sucai1，CAO Gang1，ZHU Chengwei1，GE Weihong1，CAI Baocang1，2
(1． Ｒesearch Center of Traditional Chinese Medicine Processing Technology，
Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，Zhejiang，China;
2 Jiangsu Province Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Processing，
Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210049，Jiangsu，China)
Abstract:Objective:To establish the method of determining the particle size in Ｒadix Tetrastigmatis micro － powder．
Methods:Samples were determined by comparison of particle size． The reference sample pictures and sample pictures were
compared and the wall － breaking level in sample powder was estimated． Ｒesults:The wall － breaking rate of power was
less than 50% ． The broken degree was level 4． Conclusion:Wall － breaking rate and size values are relevant． The semi －
quantitative analysis of particle size can be used to determine wall － breaking level．
Key words:Ｒadix Tetrastigmatis;particle size;wall － breaking rate
收稿日期:2013 － 09 － 07
基金项目:浙江省中医药现代化专项［杭经医化(2010J350 号］
作者简介:罗素菜(1986 －) ，女，浙江台州人，硕士研究生，研究方
向:中药炮制与饮片质量标准研究。
通讯作者:曹岗(1984 －) ，男，江南解州人，助理研究员，研究方向:
中药炮制与饮片质量标准研究。E-mail:caogang33 @
163． com。
三叶青为葡萄科崖爬藤属植物，全草均可入药，以地下
块根和果实的药用效果最好，具有清热解毒、活血止痛、祛
风化痰、消肿等功效，常用于高热惊厥，小儿感受冒发热，喉
痒肿痛，咳嗽，肺炎，肝炎，肠炎，痢疾，支气管炎及支气管哮
喘，风湿病，疔疮毒疖，跌打损作伤等，也可用于一些病毒性
疾病，及慢性和迁延性疾病［1 － 2］。三叶青中的化学成分有
黄酮类化合物、淀粉、还原糖、甾类化合物、氨基酸等［3 － 4］，
其主要成分为黄酮类化合物。目前对三叶青的活性成分与
药理作用的关系及作用机理的研究还处于模糊状态。迄今
为止三叶青在临床上主要以饮片煎煮的形式用于治疗疾
病。但是鉴于三叶青是珍贵药材，煎煮服用不能使三叶青
的药用价值充分的体现，因此，提出了一种微米级新型饮片
－三叶青超微粉的概念，主要通过振荡粉碎机使其细胞壁
破裂，促使有效成分快速释放。而细胞壁是否完好直接影
响三叶青有效成分的溶出，关系到临床药效的强弱，因此，
细胞破壁率常被认为是评价中药粉末质量的重要指标之
一。但目前尚无具体的文献报道关于用何种方法控制微米
中药粉末粒径，使其准确、全面地界定每种中药超微粉碎的
程度［5 － 6］。
不同的中药有不同的显微特征，三叶青的显微特征包
括黏液细胞，木栓细胞，草酸钙针晶，淀粉粒，纤维及导管
等［7 － 8］。其中黏液细胞较多［9］，呈类圆形或椭圆形，在显微
镜下易被观察，但是我们无法确定有效成分就存在黏液细
胞里面，而且通过多种文献对多种中药材的各种细胞尺度
进行研究分析，最后认为细胞最小尺寸可按 10 μm 进行确
认，本课题亦以此为标准测定粒度大小。本文采用半定量
分析方法对三叶青微粉的粒度进行测定，初步探讨该方法
对中药微粉粒度测定的可行性。
1 材料与方法
1． 1 仪器与试剂
尼康 E200 显微镜，物镜测微尺，TO － K 型振荡粉碎机
粉碎，超声清洗器，电子分析天平，稀甘油，正辛醇，无水乙
醇。
1． 2 样品来源
三叶青饮片购自广西，经浙江中医药大学中药饮片厂
质检部鉴定为葡萄科崖爬藤属植物三叶青 Tetrastigma
hemsleyanum Diels et Gilg．的块根。三叶青饮片经常规粉碎
后，取 600 g左右粉末(过 200 目)装于 TO － K型振荡粉碎
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机中粉碎 16 h，即得。
2 实验方法
2． 1 制片
三叶青粉粒径小，在制片时易发生凝聚现象，影响检测
结果，我们一般采用分散剂对粉末进行分散，使其在载玻片
上分散均匀，稳定。为此我们对分散剂，分散剂用量，分散
方法进行了考察。
2． 1． 1 分散剂的选择 一般常用的分散剂有甘油，水，无水
乙醇，正辛醇等，我们分别用以上 4种分散剂对三叶青粉进行
分散。结果表明，正辛醇与甘油作为分散剂，分散效果较好，得
到的样片颗粒分布比较均匀，重叠少，但考虑到正辛醇对人体
的眼睛，皮肤，黏膜和呼吸道有刺激作用，而且具有刺激性气
味，故本实验选用甘油作为分散剂，结果见插页Ⅸ图 1。
2． 1． 2 分散剂用量的选择 取 0． 1 g三叶青粉，分别加甘
油制成浓度为 5 mg /mL，10 mg /mL，20 mg /mL的混悬液，结
果表明，浓度为 5 mg /mL 比较适宜，所得样片分布疏密适
宜，重叠较少，所取图片颗粒数目较多，结果见插页Ⅹ图 2。
2． 1． 3 分散方法的选择 取少量粉末，加适量的甘油，充
分振荡，发现粉末凝聚成一小团，很难振荡成分散均匀的混
悬液，故采用超声波处理。结果表明，超声 10 min 后，三叶
青粉末可充分、均匀地分散于甘油中，所得的样片颗粒分布
均匀，稳定。
2． 1． 4 样片的制备 取粉末 20 mg，加入适量的甘油，充分
振荡后再超声 10 min，制成浓度为 5 mg /mL的混悬液。然后
用移液管吸取 30 μL滴于载玻片上，盖上盖玻片，即可。
2． 2 粒度检测
三叶青粉末中粒度大小不同，细胞壁破壁的程度也不
同，把三叶青粉末的粒度大小与已知的参考强度进行比较，
就可以确定三叶青的破壁程度，因此本实验的粒度半定量
分析就是采用粒度比较法，已知的参考样品是粒度小于 10
μm的珍珠粉。用尺度总长为 1 mm 的物镜测微尺置显微
镜下观校正目镜测微尺，取下物镜测微尺换上参考样品，在
100倍的显微镜下(10 × 10) ，采集参考样片的图像并观察
其粒径的大小。随后取下参考样片换上试验样片，采集图
片的方法同上，但操作时应注意客观性，代表性，随机采集。
每个试样需取 10%(v /v)的溶液制成样片，每个样片采集
25 个视野。
2． 3 结果判断
图片采集完后，将参考样品图片与试样图片进行比较，
估计试样粉末的大致破壁程度，可见插页Ⅹ图 3。本实验
依照三叶青细胞破壁程度可分为四级:1 级(+) ，破壁率大
于 90%，粉末粒度基本小于 10 Um，偶见个别颗粒大于 10
μm;2 级(++) ，破壁率在 70% ～90%之间，可见少量粉末颗
粒大于 10 μm;3 级(+++) ，破壁率在 50% ～70%之间，可见
较多的粉末粒径大于 10 μm;4 级(++++) ，破壁率小于
50%，大部分粉末粒径大于 10 μm［10 － 11］。
3 方法学考察
3． 1 重复性
取同一三叶青粉末 6 份，同法制片，置于显微镜下观
察，发现破壁程度大致相同，由此表明本方法重复性较好。
3． 2 稳定性
取适量的三叶青粉末，按上述方法制备混悬液，室温放
置，分别于 0，4，8，12，24 h于显微镜下观察，结果发现在各
时间点采集的图片都大致相同，由此可以说明混悬液在 24
h内比较稳定。
4 实验结果
三叶青微粉制成混悬液后，取一定量的体积制成 12 张
样片，每张样片的破壁程度见表 1。
表 1 三叶青微粉的破壁程度
样片号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
破壁率 ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50% ＜ 50%
等级 4级 4级 4级 4级 4级 4级 4级 4级 4级 4级 4级 4级
结果 破壁程度属于 4级
从表 1 可以得知，三叶青粉末的破壁程度属于第 4 个
等级(++++) ，未达到我们的要求，因此，三叶青的粉碎工艺
还需进一步研究。
5 讨 论
超细粉碎工艺对于不同质地的中药饮片，粉碎效果不
同。本试验曾对细胞破壁率与粒径值的相关性进行了探索
性研究，结果表明，细胞破壁率与粒径值具有相关性，测定
粉末粒径值可以估算其细胞破壁率。
通过对各倍数显微镜采集的图片进行对比分析，发现
在 100 ×放大倍数下采集图片的可视面积比在 400 ×倍下
的更大，测得颗粒更多，便于统计;而在 40 ×放大倍数下，
由于光线的不均匀及可视面积的颗粒粒径非常小，难以比
较粒度的大小，所以选择在 100 ×的放大倍数下进行测量。
本文首次对三叶青粉进行细胞破壁程度的测定，采用
粒度半定量法考察超细粉碎对三叶青饮片细胞破壁率的影
响，该方法简便，快速，且费用低，对于测定中药粉末的细胞
破壁率具有借鉴作用，也为中药超细粉体的质量研究提供
了细胞破壁率测定的新思路。
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