全 文 ：129　
沙果渣多酚抗氧化活性的研究
朱丹 1 , 牛广财 2 , 蔡亚平 1 , 肖翠红 1 , 姜述君1
(1.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院 , 大庆　163319;
2.黑龙江八一农垦大学食品学院 , 大庆　163319)
　　摘　要:目的:研究沙果渣多酚对自由基和油脂的抗氧化性能 , 为沙果多酚的开发利用提供依据。方法:
采用羟基自由基体系 、 超氧阴离子自由基体系 、 DPPH·体系和油脂过氧化值测定法 , 测定沙果渣多酚对羟基
自由基 、 超氧阴离子自由基 、 DPPH·自由基以及抑制大豆油过氧化作用的效果。结果:在试验浓度范围内 ,
沙果渣多酚对· OH、 O-2 · 、 DPPH·均有较强的清除能力 , 并且清除能力随沙果渣多酚浓度的增加而增强 ,
其清除率与沙果渣多酚的浓度间有一定的量效关系;所有添加沙果渣多酚的试验组 POV值均明显低于空白对
照组的 POV值 , 并且随着沙果渣多酚添加量的增加 , 其 POV逐渐降低 , 添加 0.16%沙果渣多酚的抗氧化效
果和 0.02%的抗氧化剂 BHT相近。结论:沙果渣多酚具有明显的清除自由基能力和对大豆油的抗氧化作用 ,
可以作为一种有效的天然抗氧化剂来开发利用。
关键词:沙果渣;多酚;抗氧化;自由基;油脂
中图分类号:TS255.1　TQ460.3　文献标识码:A　　　文章编号:1006-2513(2010)05-0129-04
Studyonantioxidationactivityofpolyphenolfrom
malusasiaticapomace
ZHUDan1 , NIUGuangcai2 , CAIYa-ping1 , XIAOCui-hong1 , JIANGShu-jun1-
(1.LifeScienceandTechnologyColege, HeilongjiangBayiAgriculturalUniversity,
Daqing163319, China;2.FoodColege, HeilongjiangBayiAgricultural
University, Daqing163319)
Abstract:Objective:Tostudytheantioxidantefectsofpolyphenolfrommalusasiaticapomaceonfreeradicalandoil
andprovidetheevidenceforexploitationandutilizationofmalusasiaticapomacepolyphenolresources.Methods:The
scavengingcapacitiesonthefreeradicalandantioxidanteffectsofpolyphenolfrommalusasiaticapomaceonoilwerede-
terminedbyOHsystem, O-2 system, DPPHsystemandPOVmethod.Results:Withacertainrangeofconcentrations,
polyphenolfrommalusasiaticapomaceshowedstrongscavengingcapacitiesontheOH, O-2 andDPPHfreeradical, and
theefectwasenhancedwithanincreaseintheconcentration, andthescavengingratewascertaindose-dependent
manner.ThePOVvalueofthetreatmentgroupwhichaddedpolyphenolfrommalusasiaticapomacewasobviouslylower
thanthatofthecontrolgroup, andthePOVvaluedecreasedgradualywithanincreaseofpolyphenoladdition.Oxida-
tionresistanceefectof0.16% polyphenolfrommalusasiaticapomacewassimilartothatof0.02% antioxidantBHT.
Conclusion:Thepolyphenolfrommalusasiaticapomacehascharacteristicsofscavengingfreeradicalanddefiniteantiox-
idantefectonoil, anditcanbeappliedasanefectivenaturalantioxidant.
Keywords:malusasiaticapomace;polyphenol;antioxidation;freeradical;oil
收稿日期: 2010-01-31
基金项目:黑龙江省大庆市科学技术计划项目。
作者简介:朱丹 (1972-), 女 , 副教授 , 硕士 , 研究方向为植物生物技术与植物资源开发利用。
130　
沙果 (Malusasiatica)为蔷薇科植物林檎的
果实 , 又名海棠果 、 五色果 、 联珠果等 , 是黑龙
江省夏秋季节大量上市的水果 。沙果中含有较多
的植物多酚类物质。植物多酚是一类天然的强还
原性物质 , 也是一类具有独特生理活性和药理活
性的天然产物。大量研究表明 , 植物多酚在抗氧
化 、抗肿瘤 、 抗病毒 、 抑菌 、 抑制心血管疾病 、
抗辐射等很多方面具有良好的作用 , 在食品 、 医
药 、化妆品 、日用化学品以及保健品等高科技领
域具有广阔的应用前景[ 1] 。近年来 , 人工合成抗
氧化剂由于食用安全性等问题 , 许多国家都对其
使用进行了限制 , 人们越来越重视天然抗氧化剂
的开发应用 [ 2] 。因此 , 开发利用天然抗氧剂已成
为当今食品科学发展的必然。目前 , 对沙果渣中
多酚类化合物的研究尚未见报道。为更好的开发
利用沙果渣资源 , 本文对沙果渣中多酚类物质抗
氧化活性进行了研究 , 旨在为该资源的开发利用
提供科学依据。
1　材料与方法
1.1　材料
沙果渣:黑龙江省隆赫达食品有限公司沙果
榨汁后的鲜渣 , 经 50℃干燥后粉碎 , 过 40目筛 ,
脱脂后采用 60%乙醇提取 , 按下文 1.3.1工艺流
程制备沙果渣多酚样品;以没食子酸为标样 , 采
用 Folin-Ciocalteu法 , 在 765nm波长下测定吸光
度 , 求得标准曲线方程为:y=0.1377x-0.0384,
R2 =0.9990 (式中:y—没食子酸标准溶液吸光
度;x—没食子酸标准溶液浓度);按 Y=C×V/
m(式中:Y—样品多酚含量 mg/g, C—样品多
酚质量浓度 mg/mL, V—提取液体积 mL, m—沙
果渣质量 g)计算样品中多酚含量为 3.13mg·
g-1。
1.2　试剂与仪器
1, 1-二苯基 -2 -苦肼基自由基 (DPPH
· ), Sigma公司;Folin-Ciocalteu试剂 , 上海喜
润化学工业公司;邻二氮菲 、 FeSO4 、 2, 6 -二
叔丁基对甲酚 (BHT)、 邻苯三酚 、 没食子酸 、
三羟甲基氨基甲烷 、浓盐酸 、过氧化氢 、 硫代硫
酸钠 、 三氯甲烷 、冰醋酸 、碘化钾 、乙醇等 , 国
药集团化学试剂有限公司;食用大豆油 (三级),
黑龙江九三油脂有限公司。
T6新世纪紫外 /可见分光光度计 , 北京普析通
用仪器有限公司;B490旋转蒸发器 , BUCHI公
司;JD1003B-3B电子天平 , 沈阳龙腾电子有限
公司 。
1.3　试验方法
1.3.1　沙果渣多酚提取工艺流程
沙果果渣※干燥※粉碎过 40目筛※脱脂※溶
剂浸提※收集浸提液※真空浓缩※干燥※沙果渣
多酚 。
1.3.2　羟基自由基 (· OH)清除率测定 [ 3]
取 5mmol/L的邻二氮菲溶液 1.5mL, 加入
pH=7.4的磷酸盐缓冲液 2.0mL, 充分混匀后 ,
加入 7.5mmol/L的 FeSO4溶液 1.0mL, 立即混匀 ,
再加入 1.0mL/L的 H2O21.0mL, 最后以蒸馏水补
充至 10.0mL, 37℃保温 1h, 在 510nm处测定吸
光度 (此为损伤管吸光度);之后加入不同浓度
的样品溶液 1mL, 再加 1.0mL/L的 H2O2 1.0mL,
未损伤管不加样品和 H2O2。按下式计算 · OH清
除率 (%)。
· OH清除率 =[ (A样品 -A损伤 )/(A未损伤 -
A损伤)] ×100%
1.3.3　超氧阴离子自由基 (O2 -· )清除率测
定 [ 3]
取 4.5mLTris-HCl缓冲溶液 , 于 20℃水浴
中预热 20min, 分别加入 1mL不同浓度的样品液
和 0.4mL25mmol/L的邻苯三酚溶液 , 混匀后 ,
于 25℃水浴中反应 5min, 然后加入 8mol/L的
HCl溶液 1mL终止反应 , 然后在 299nm处测定吸
光度 A1 , 空白以蒸馏水代替样品液 , 测定吸光度
A0。按下式计算清除率:
O-2 ·清除率(%)=(1-A1 /A0)×100%
1.3.4　DPPH·清除率测定 [ 4]
在 2mL2×10-4mol/LDPPH·溶液中 , 加入
2mL样品后摇匀 , 于室温下放置 30min, 用无水
乙醇作参比液 , 在 517nm下测定其吸光值 Ai;同
时测定 2mL2×10-4mol/LDPPH·溶液加入 2mL
无水乙醇混合液的吸光值 Ac;再测定 2mL样品液
与 2mL无水乙醇混合液的吸光值 Aj。按下式计算
样品对 DPPH·的抑制率:
DPPH·的抑制率 =[ 1 -(Ai-Aj)/Ac] ×
100%
131　
1.3.5　对油脂的抗氧化性测定[ 5]
称取 30.00g油脂 6份置于容器中 , 1份为空
白对照组 , 4份分别按油重的 0.02%、 0.04%、
0.08%、 0.16%添加沙果渣多酚 , 另 1份按油重
的 0.02%添加 BHT为对照组。混合均匀 , 置于
(60±0.5)℃的恒温烘箱中 , 每隔 12h搅拌 1次 ,
并交换其在烘箱中的位置。定时取样 , 检测大豆
油的过氧化值 (PeroxideValue, POV)。过氧化值
测定按 GB/T5009.37-2003进行操作 , 每个数值
测定 3次 , 取平均值 。
2　结果与分析
2.1　沙果渣多酚对· OH自由基的清除作用
· OH是活性氧中最活泼的氧自由基之一 ,
它几乎能与活细胞中任何分子发生反应 , 可介导
机体组织脂质过氧化 , 蛋白质解聚 、聚合 , 核酸
断裂和多糖裂解等生化过程 , 引发组织细胞病变
而导致各种疾病发生和加速机体衰老。沙果渣多
酚对· OH的清除作用见图 1。由图 1可见 , 沙果
渣多酚在实验浓度 (0.2 ～ 3.2mg/mL)范围内 ,
对 ·OH均有较强的清除能力 , 并且随着多酚浓
度的增加 , 其对 · OH的清除作用逐渐增强 , 在
3.2mg/mL浓度时 , 沙果渣多酚对· OH的清除率
可以达到 78.5%, 表明其清除能力与沙果渣多酚
浓度间有一定的量效关系。上述结果证明 , 沙果
渣多酚含供氢体 , 具有提供氢质子的能力 , 可使
具有高度氧化性的自由基还原 , 从而能终止自由
基连锁反应 , 起到清除或抑制自由基的目的。
图 1　沙果渣多酚对· OH的清除效果
Fig.1　Effectsofpolyphenolfrommalusasiatica
pomaceonscavenging· OH
2.2　沙果渣多酚对超氧阴离子自由基 (O-2 · )
的清除作用
由图 2可知 , 沙果渣多酚对超氧阴离子自由
基 (O-2 · )具有较强的清除能力 , 并且清除率
随多酚浓度的增加而增大 , 表明其清除能力与沙
果渣多酚的浓度间有一定的量效关系 。当多酚浓
度在 1.6mg/mL时 , 清除邻苯三酚自氧化反应产
生的 O-2 ·清除率为 54.2%。
图 2　沙果渣多酚对 O-2 ·的清除效果
Fig.2　Effectsofpolyphenolfrommalusasiatica
pomaceonscavengingO-2 ·
2.3　沙果渣多酚对 DPPH·的清除作用
由图 3可知 , 沙果渣多酚在 0.2mg/mL～
0.4mg/mL时 , 其清除 DPPH·的能力较弱 , 清除
率在 11.3%左右 。但当浓度大于 0.4mg/mL时 ,
图 3　沙果渣多酚对 DPPH·的清除效果
Fig.3　Effectsofpolyphenolfrommalusasiatica
pomaceonscavengingDPPH·
132　
清除 DPPH·的能力开始增强 , 随着浓度的
增加 , 清除率迅速上升 , 在试验浓度范围内 , 清
除率由 11.3%增加到了 73.4%。表明沙果渣多酚
对DPPH·的清除效果与多酚浓度之间具有明显的
量效关系。
2.4　沙果渣多酚对油脂的抗氧化作用
大豆油是亚洲人最喜欢的食用油之一 , 由于
含有不饱和脂肪酸 , 容易发生氧化 , 其中维生
素 、必需脂肪酸等营养成分遭到破坏。如果在油
脂中添加抗氧化剂 , 就可以大大减少油脂的氧化
酸败 , 提高保质期 。由图 4可知 , 所有添加沙果
渣多酚的试验组 POV值均明显低于空白对照组的
POV值 , 可见沙果渣多酚具有明显的抗油脂氧化
的作用。从沙果渣多酚对大豆油的抗氧化效果来看 ,
图 4　沙果渣多酚对大豆油的抗氧化效果
Fig.4　Antioxidantactivitiesofpolyphenolfrom
malusasiaticapomaceonsoybeanoil
随着添加量的增加 , 其抗氧化效果逐渐提高 ,
0.16%沙果渣多酚添加量的抗氧化效果接近传统
抗氧化剂 BHT的效果。表明沙果渣多酚对大豆油
的抗氧化效果与添加量之间具有明显的量效关
系。
3　结论
通过沙果渣中提取的多酚对 · OH的清除作
用 、 O-2 ·的清除作用 、 DPPH·的清除作用 , 以
及油脂的抗氧化作用等多种抗氧化能力的检测 ,
表明沙果渣多酚具有较强的自由基清除能力及很
强的抗氧化活性;而且在各体系中 , 沙果渣多酚
的抗氧化活性与其浓度之间均有良好的量效关
系。因此 , 沙果渣多酚具有良好的抗氧化活性 ,
是一种较好的天然抗氧化物质 , 可进一步作为抗
氧化功能性食品或食品添加剂 , 具有较好开发和
应用前景 。
参考文献:
[ 1] 林樱姬 , 赵萍 , 王雅.植物多酚的提取方法和生物活性研究
进展 [ J] .陕西农业科学 , 2009, (6): 105-107.
[ 2] 许秋雁 , 欧阳玉祝.海金沙中多酚的超声提取工艺研究
[ J] .中国食品添加剂 , 2009, (6): 67-71.
[ 3] 颜栋美 , 姚艾东.金花茶多酚抗氧化性能的研究 [ J] .河南
工业大学学报 (自然科学版), 2009, 30 (2):42-45.
[ 4] 赵国建 , 李桂峰 , 董周永 , 等.石榴籽中多酚的提取及其抗
氧化作用研究 [ J] .西北植物学报 , 2008, 28 (12): 2532
-2537.
[ 5] 杨桂福.枇杷叶黄酮对油脂的抗氧化性能研究 [ J] .黑龙江
医药 , 2009, 22 (2):150-152.
2010第十届全国秋季食品添加剂和配料展览会(FIC2010秋季展)
展出时间:2010年 11月 4 ～ 6日
展出地点:郑州国际会展中心(河南郑州市郑东新区中央商务区内环路 1号)
主办单位:中国食品添加剂和配料协会
联系方式:
电　话:010-59795833　 　传　真:010-59071335, 59071336
网　址:www.fic-a.com　 　联系人:张越宸　陈艳燕　尹胜利　王岩松