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广东省不同产地南板蓝根解热、抗炎、免疫调节效应的对比研究



全 文 :新中医 2011 年 11 月 第 43 卷第 11 期
JOURNAL OF NEW CHINESE MEDICINE November 2011 Vol.43 No.11
南板蓝根为爵床科植物马蓝[Baphicacanthus cus ia(Nees) Bremek.]的干燥根茎及根,1995年版《中华人民共和国药典》
[收稿日期] 2011-05-17
[作者简介]罗霄山(1973-),女,主任药师,主要从事中药质量标准研究和药物调剂等方面工作。
[通讯作者]张丹雁,E-mail:dy64@21cn.com。
广东省不同产地南板蓝根解热、
抗炎、免疫调节效应的对比研究
罗霄山1,杜铁良2,陈玉兴2,张丹雁3,赵自明2,黄雪君2,曾晓会2
1. 广东省第二中医院,广东 广州 510095
2. 广东省中医研究所,广东 广州 510095
3. 广州中医药大学,广东 广州 510405
[摘要]目的:对比研究广东省江门、湛江、梅州、韶关四地所产南板蓝根解热、抗炎、免疫调节效应的异同。方法:观察
上述来源南板蓝根对内毒素致发热大鼠体温,二甲苯致耳肿胀小鼠耳片肿胀度,大鼠棉球肉芽肿重量,环磷酰胺致小鼠免疫抑制
脾脏、胸腺指数的影响。结果:江门、湛江、韶关产南板蓝根能显著降低发热大鼠的体温(P < 0.05,P < 0.01);四地所产南板蓝
根均可显著降低小鼠耳肿胀度(P < 0.01),湛江、韶关产南板蓝根均可显著降低大鼠棉球肉芽肿干重(P < 0.01);韶关、湛江、
江门产南板蓝根能提高小鼠脾脏指数(P < 0.01),韶关、湛江产南板蓝根能提高小鼠胸腺指数(P < 0.05,P < 0.01)。四地所产南
板蓝根的解热、抗炎、免疫调节综合效应强度为韶关 > 湛江 > 江门 > 梅州。结论:广东省四地所产南板蓝根均具有一定的解热、
抗炎、免疫调节效应;其中以韶关产药理作用最强、梅州产最弱。
[关键词]板蓝根;产地;解热;抗炎;免疫调节;动物实验;大鼠;小鼠
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 0256-7415(2011) 11-0113-04
Comparative Study on Antipyretic Effects, Anti -inflammation, Immunoregulation of
Radix Isatidis Grown in Different Regions of Guangdong Province
LUO Xiaoshan, DU Tieliang, CHEN Yuxing, et al
Abstract:Objective:To observe the differences of antipyretic effects, anti- inflammation, immunoregulation of Radix
Isatidis grown in J iangmen,Zhanjiang,Meizhou,Shaoguan of Guangdong province. Methods:We observed the effects of
Radix Isatidis grown in different places on body temperature of lipopolysaccharide (LPS)- induced fever rats,mice auricular
edema induced by dimethylbenzene, the mass of tampon- induced granuloma in rats,and spleen index and thymus index in
cyclophosphamide (CTX)- induced immunosuppress ion mice. Results:Radix Isatidis grown in J iangmen,Zhanjiang,Shaoguan
had obvious antipyretic effect on rats (P < 0.05 or P < 0.01),and Radix Isatidis from the four regions markedly reduced the
auricular edema in mice (P < 0.01). Zhanjiang and Shaoguan Radix Isatidis could decrease dry weight of granuloma in rats (P <
0.01). Radix Isatidis grown in Shaoguan, Zhanjiang and J iangmen could increase spleen index (P < 0.01), Shaoguan and
Zhanjiang Radix Isatidis could increase thymus index (P< 0.05 or P< 0.01). The intens ity of antipyretic effect,anti- inflammatory,
immunoregulation of Radix Isatidis was in decreas ing sequence in Shaoguan,Zhanjiang,J iangmen and Meizhou. Conclusion:
Radix Isatidis grown in J iangmen, Zhanjiang,Meizhou, Shaoguan of Guangdong province has certain antipyretic effect,
anti- inflammation and immunoregulation. Of them,Shaoguan Radix Isatidis has the bes t effect,and Meizhou Radix Isatidis is
the las t one.
Keywords:Radix Isatidis;Producing Area;Antipyretic Effects;Anti- inflammation; Immunoregulation;Animal Experi-
ment;Rats;Mice
113· ·
DOI:10.13457/j.cnki.jncm.2011.11.071
新中医 2011 年 11 月 第 43 卷第 11 期
JOURNAL OF NEW CHINESE MEDICINE November 2011 Vol.43 No.11
将其作为新增品种收载。本品性寒、味苦,归心、肝、胃经,
具有清热解毒、凉血消肿之功,在我国华南、西南等地区广泛
应用,临床上多用于防治流感、流脑及治疗肝炎等疾病[1],广
泛应用于多种复方制剂中。近年来,随着对南板蓝根认识和研
究的日趋深入,现已证实南、北板蓝根化学成分有着较大的差
异[1],由于南板蓝根产地的差异性,其对临床疗效是否有影
响,已引起研究者广泛的重视。笔者通过对广东省梅州、江
门、湛江、韶关四地所产南板蓝根的解热、抗炎、免疫调节等
药理作用的比较研究,为南板蓝根的研究开发和临床应用提供
实验依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 南板蓝根药材采集于广东省韶关、梅州、
江门、湛江等地,经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定为爵
床科植物马蓝 Baphicanthus cus ia (Ness)Bremek.,药用部位
为根及根茎。内毒素,BIOSHARP,LOT2011/08;二甲苯,
洛阳市化学试剂厂,批号 090528;环磷酰胺,山西普德药业
有限公司,批号 20080104。
1.2 仪器 JJ3000动物电子秤,G&G公司产品;BS224S 电
子天平(1/万),德国 SARTORIUS产品;可调移液器(5~50μL),
Dragon- med公司产品,编号 DS00495;DHG- 9203A电热恒
温鼓风干燥箱,上海精宏实验设备产品;自制 8mm 打孔器。
1.3 动物 SPF级 NIH小鼠,雌雄各半,18~22g;SPF级
SD大鼠,雌雄各半,180~220g,均由广东省医学实验动物
中心提供。动物实验环境:广东省中医研究所 SPF级动物实
验室,设施使用许可证号:SYXK(粤)2005- 0059。
1.4 方法
1.4.1 不同产地南板蓝根对内毒素致大鼠发热的影响 参考
文献[2~3]进行。取 SPF级 SD大鼠,雌雄各半,体重为 180~
220g,于实验条件下适应环境后,每天测量肛温 1次,连续 3
天,使大鼠适应测量肛温的试验操作。选择肛温范围在
36.5~37.5℃,且肛温波动在 0.5℃以内的大鼠用于实验(单次
肛温超过 38.3℃或 2 次肛温差别超过 0.5℃的大鼠剔除不用),
取 2 次肛温的平均值作为基础体温。取上述筛选合格的大鼠
72只,雌雄各半,按体重分层随机分为 9 组,分别为对照组,
江门产南板蓝根(JMBLG)高、低剂量组(2.70g 生药 /kg、1.35g
生药 /kg),湛江产南板蓝根(ZJBLG)高、低剂量组(2.70g 生药
/kg、1.35g 生药 /kg),梅州产南板蓝根(MZBLG)高、低剂量组
(2.70g 生药 /kg、1.35g 生药 /kg),韶关产南板蓝根(SGBLG)
高、低剂量组(2.70g 生药 /kg、1.35g 生药 /kg),每组 8 只。
每天上午 9 时,各给药组按剂量灌胃给药,对照组同法给予
等体积蒸馏水,给药体积为 10mL/kg,每天 1 次,连续 7 天。
实验前 6h 禁食不禁水,末次给药 1h 后,除对照组大鼠外,
其余各组大鼠分别腹腔注射内毒素溶液 80μg/kg[4~5],之后每
隔 1h 测体温 1 次,连测 5 次,统计各组动物在注射内毒素溶
液后不同时间的体温变化。
1.4.2 不同产地南板蓝根对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 参
考文献[2~3]进行。取 SPF级 NIH小鼠 90 只,雌雄各半,于实
验条件下适应环境后,按体重分层随机分为 9 组,分别为对
照组, JMBLG 高、低剂量组 (3.90g 生药 /kg、1.95g 生药
/kg),ZJBLG高、低剂量组(3.90g 生药 /kg、1.95g 生药 /kg),
MZBLG高、低剂量组(3.90g 生药 /kg、1.95g 生药 /kg),SG-
BLG高、低剂量组(3.90g 生药 /kg、1.95g 生药 /kg),每组 10
只。每天上午 9时,各给药组按剂量灌胃给药,对照组同法给
予等体积蒸馏水,给药体积为 20mL/kg,每天 1 次,连续 7
天。实验前 6h禁食不禁水,末次给药 30min 后,每只小鼠均
右耳涂抹二甲苯 40μL,2h后脱颈椎处死小鼠,用 8mm 打孔
器打下小鼠左、右耳片,称重;以右耳减去左耳重量差作为炎
症肿胀度。
1.4.3 不同产地南板蓝根对大鼠棉球肉芽肿的影响 参考文
献[2~3]进行。取 SPF级 SD大鼠 72 只,雌雄各半,动物于实
验条件下适应环境后,按体重分层随机分为 9 组,组别与剂
量同实验 1.4.1,每组 8 只。分别将大鼠乙醚麻醉,铺无菌操
作巾,于固定架上固定大鼠后,盖无菌手术巾。在大鼠胸部
剑突上侧作 1cm 切口,用眼科镊将已干燥灭菌的棉球(重量为
20mg,高压灭菌),分别埋植于大鼠两侧腋窝皮下,缝合切口,
伤口处涂抹碘酒溶液。将大鼠送回饲养笼。手术当天,动物清
醒后开始给药,各给药组按剂量灌胃给药,对照组同法给予等
体积的蒸馏水,给药体积为 10mL/kg,每天 1 次,连续 7 天。
末次给药 30min后,脱颈椎处死所有大鼠,手术取出棉球。然
后置于 60℃电热恒温鼓风干燥箱中烤至恒重,取出,称量干
重,此重量减去原棉球的重量即为肉芽肿重量。
1.4.4 不同产地南板蓝根对环磷酰胺致小鼠免疫抑制的影响
参考文献[6~8]进行。取 SPF级 NIH小鼠 100 只,雌雄各半,动
物于实验条件下适应环境后,按体重分层随机分为 10 组,分
别为对照组、模型对照组,JMBLG高、低剂量组(3.90g 生药
/kg、1.95g 生药 /kg),ZJBLG 高、低剂量组(3.90g 生药 /kg、
1.95g生药 /kg),MZBLG高、低剂量组(3.90g生药 /kg、1.95g
生药 /kg),SGBLG高、低剂量组(3.90g 生药 /kg、1.95g 生药
/kg),每组 10只。各给药组按剂量灌胃给药,对照组、模型对
照组同法给予等体积蒸馏水,每天 1次,连续 9天。除对照组
外,其余各组在第 1、3、5 天腹腔注射环磷酰胺 100mg/kg。
末次给药前称量小鼠体重,末次给药 30min后,脱颈椎处死所
有小鼠,分离出胸腺、脾脏并称取重量,按照以下公式计算脏
器指数。脏器指数 =W脏器÷W动物自身×100%。
1.5 统计学方法 所有计量资料以(x±s)表示,多组间均数的
比较先采用单因素方差分析(One- Way ANOVA);方差齐时,
组间均数两两比较用 SNK法;方差不齐时,组间均数两两比
较用 Dunnett’s T3法。由 SPSS15.0软件完成。
2 实验结果
2.1 不同产地南板蓝根对内毒素致大鼠发热的影响 见表 1。
114· ·
新中医 2011 年 11 月 第 43 卷第 11 期
JOURNAL OF NEW CHINESE MEDICINE November 2011 Vol.43 No.11
在腹腔注射内毒素 1h 后,大鼠体温明显升高。在注射后第
1h,与对照组比较,各给药组对大鼠体温影响的差异无统计学
意义(P > 0.05)。以后的各时间监测点,大鼠体温逐渐降低。与
对照组相比,第 2h,ZJBLG高剂量组,SGBLG高、低剂量组
大鼠体温均显著降低(P < 0.01);第 3h,ZJBLG 高、低剂量
组,SGBLG高、低剂量组,JMBLG高、低剂量组大鼠体温
均明显降低(P < 0.05,P < 0.01);第 4h 和第 5h,JMBLG高、
低剂量组,ZJBLG高、低剂量组,SGBLG高、低剂量组大鼠
体温均显著降低(P < 0.01);MZBLG高、低剂量组大鼠在各时
间监测点体温数值与对照组比较,均无显著性意义(P > 0.05)。
表1 不同产地南板蓝根对内毒素致大鼠发热的影响(x±s) ℃
与对照组比较,①P < 0.05,②P < 0.01
组 别
对照组
JMBLG高剂量组
JMBLG低剂量组
ZJBLG高剂量组
ZJBLG低剂量组
MZBLG高剂量组
MZBLG低剂量组
SGBLG高剂量组
SGBLG低剂量组
剂量(g生药 /kg)
-
2.70
1 .35
2.70
1 .35
2.70
1 .35
2.70
1 .35
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
基础体温
37.07±0.19
37.08±0.22
37.06±0.15
37.07±0.21
37.07±0.16
37.07±0.16
37.07±0.29
37.06±0.21
37.06±0.20
注射后第 1h
41 .09±0.76
40.47±0.86
40.62±0.94
40.11±0.92
40.26±0.97
40.71±1 .08
40.77±1 .08
39.81±0.72
39.90±0.71
第 2h
40.96±0.70
40.09±0.87
40.25±0.89
39.56±0.78②
39.95±0.95
40.41±1 .04
40.60±1 .00
39.34±0.41②
39.46±0.07②
第 3h
40.72±0.71
39.65±0.79①
39.76±0.84①
38.90±0.67②
39.44±0.83②
40.12±0.97
40.43±0.94
38.58±0.44②
38.90±0.55②
第 4h
40.46±0.76
39.39±0.72②
39.44±0.77②
38.57±0.57②
39.11±0.76②
39.92±0.89
40.24±0.93
38.08±0.31②
38.51±0.54②
第 5h
40.21±0.58
38.83±0.61②
39.22±0.78②
38.26±0.55②
38.77±0.73②
39.66±0.86
40.14±0.90
37.59±0.19②
38.07±0.44②
2.2 不同产地南板蓝根对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 见表
2。与对照组比较,四个产地的南板蓝根高、低剂量组小鼠耳
肿胀度均明显减小(P < 0.01)。
表2 不同产地南板蓝根对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(x±s)
与对照组比较,①P < 0.01
2.3 不同产地南板蓝根对大鼠棉球肉芽肿的影响 见表 3。
与对照组比较,ZJBLG高、低剂量组和 SGBLG高、低剂量组
大鼠棉球肉芽肿干重均明显减轻(P < 0.01)。
2.4 不同产地南板蓝根对环磷酰胺致小鼠免疫抑制的影响 见
表 4。与对照组比较,模型对照组小鼠脾脏指数、胸腺指数均
明显降低(P < 0.01)。与模型对照组比较,JMBLG高、低剂量
组小鼠脾脏指数显著增加(P < 0.01);ZJBLG高、低剂量组小鼠
脾脏指数、胸腺指数明显增加(P < 0.05,P < 0.01);SGBLG高、
低剂量组小鼠脾脏指数、胸腺指数明显增加(P < 0.01)。
3 讨论
本研究采用内毒素致大鼠发热、二甲苯致小鼠耳肿胀、大
组 别
对照组
JMBLG高剂量组
JMBLG低剂量组
ZJBLG高剂量组
ZJBLG低剂量组
MZBLG高剂量组
MZBLG低剂量组
SGBLG高剂量组
SGBLG低剂量组
剂量(g生药 /kg)
-
3.90
1 .95
3.90
1 .95
3.90
1 .95
3.90
1 .95
n
10
10
10
10
10
10
10
10
10
肿胀度
13.84±1 .1 6
7.40±0.90①
8.97±0.98①
6.1 0±0.91①
7.64±0.90①
8.66±0.57①
10.05±1 .1 8①
5.24±0.62①
6.30±1 .1 1①
表3 不同产地南板蓝根对大鼠棉球肉芽肿的影响(x±s) g
与对照组比较,①P < 0.01
组 别
对照组
JMBLG高剂量组
JMBLG低剂量组
ZJBLG高剂量组
ZJBLG低剂量组
MZBLG高剂量组
MZBLG低剂量组
SGBLG高剂量组
SGBLG低剂量组
剂量(g生药 /kg)
-
2.70
1 .35
2.70
1 .35
2.70
1 .35
2.70
1 .35
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
干重
0.1 36±0.03
0.1 16±0.02
0.1 26±0.03
0.092±0.01①
0.1 01±0.02①
0.1 28±0.02
0.1 33±0.02
0.085±0.02①
0.091 ±0.02①
表4 不同产地南板蓝根对
环磷酰胺致小鼠免疫抑制的影响(x±s)
与对照组比较,①P < 0.01;与模型对照组比较,② P <
0.05,③P < 0.01
组 别
对照组
模型对照组
JMBLG高剂量组
JMBLG低剂量组
ZJBLG高剂量组
ZJBLG低剂量组
MZBLG高剂量组
MZBLG低剂量组
SGBLG高剂量组
SGBLG低剂量组
剂量(g生药 /kg)
-
-
3.90
1 .95
3.90
1 .95
3.90
1 .95
3.90
1 .95
n
10
10
10
10
10
10
10
10
10
10
脾脏指数
208.90±39.35
26.74±9.58①
60.46±6.13①③
50.55±5.21①③
67.69±8.61①③
57.29±11 .93①③
36.00±3.82①
29.61±6.38①
70.05±11 .64①③
64.28±7.66①③
胸腺指数
162.85±26.83
15.29±5.65①
21 .07±3.84①
18.08±4.46①
30.25±4.90①②
23.35±4.56①②
17.65±5.48①
16.68±4.26①
48.01±6.25①③
40.18±3.82①③
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新中医 2011 年 11 月 第 43 卷第 11 期
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鼠腋下植埋棉球致肉芽炎性增生、环磷酰胺致小鼠免疫抑制等
常用实验模型来评价南板蓝根的解热、抗炎、免疫调节作用。
实验结果表明,四地所产南板蓝根均能降低模型大鼠的体温,
其中以韶关和湛江所产南板蓝根在致热后 2h的解热效果明显(P
< 0.01),提示南板蓝根能拮抗外源性致热源如内毒素所引起的
大鼠体温的升高,证实了南板蓝根具有清热解毒的功效;四地
所产南板蓝根对二甲苯诱发的小鼠耳肿胀、棉球肉芽炎性增生
均具有较明显的抑制作用,提示南板蓝根对炎性反应的早晚期
均具有一定的抑制效果;韶关、湛江产南板蓝根均能提高环磷
酰胺致免疫低下小鼠的脾脏指数和胸腺指数(P < 0.05,P <
0.01),间接提示南板蓝根有提高机体免疫力的作用。
综上所述,江门、湛江、梅州、韶关四地所产南板蓝根具
有一定的解热、抗炎和免疫调节效应,但药理作用强度有所差
异。从本次实验结果来看,四地所产南板蓝根的综合效应强度
为韶关 > 湛江 > 江门 > 梅州,其解热、抗炎及免疫调节作用
是否与药材有效成分靛玉红含量有关,以及相关药效物质基础
尚有待进一步探讨。
[参考文献]
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疫功能的影响[J ].时珍国医国药,2010,21(7):1627-
1629.
(编辑:冯天保)
[收稿日期] 2011-03-14
[基金项目]广东省科技计划项目(编号:2008B080701031)
[作者简介]陈立(1983-),男,住院医师,主要从事危重症的中西医结合诊治工作。
[通讯作者]陈伯钧,E-mail:gzcbj@163.com。
通冠胶囊干预动脉粥样硬化血管内皮功能损伤的实验研究
陈立,黎丽娴,赵焕佳,陈伟明,吕文婧,刘淑玲,陈伯钧
广州中医药大学第二临床医学院,广东 广州 510120
[摘要]目的:观察通冠胶囊对动脉粥样硬化不同阶段血管内皮功能损害的干预情况。方法:健康雄性新西兰大耳白兔 36
只,随机分为正常对照组,高脂对照组,阿托伐他汀组,通冠胶囊小、中、大剂量组共 6组,每组 6只,通过免疫性内皮损伤合
并高脂饲料诱导法建立动脉粥样硬化兔实验动物模型,高脂对照组喂高脂饲料,阿托伐他汀组在高脂对照组基础上加喂阿托伐他
汀 5mg/ kg/ d,通冠胶囊小、中、大剂量组在高脂对照组基础上每天分别加喂通冠胶囊 3mg、9mg及 15mg,分别于实验开始 2、6
周末测定血中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL- C)、一氧化氮
(NO)、内皮素(ET) 及假血友病因子(vWF),实验结束后取髂外动脉行血管内皮病理学检测。结果:6周末通冠胶囊中剂量组
TC、小剂量组、高脂对照组 TC、LDL- C 均较 2周末显著升高(P < 0.05,P < 0.01),通冠胶囊大剂量组 TC 显著降低,同时伴
有 HDL- C 升高(P < 0.01)。6周末通冠胶囊大剂量组 HDL- C 水平明显高于阿托伐他汀组及高脂对照组(P < 0.05)。通冠胶囊小
剂量组、中剂量组、高脂对照组组内前后比较,vWF、ET 水平显著升高(P < 0.05),而 NO 显著降低(P < 0.05);通冠胶囊大剂
量组、阿托伐他汀组 NO 显著升高(P < 0.05)。6周末通冠胶囊大剂量组与阿托伐他汀组、高脂对照组比较,NO 水平明显升高
(P < 0.05)。组织病理学结果显示,大剂量通冠胶囊与阿托伐他汀均能有效抑制血管内膜动脉粥样斑块的形成。结论:通冠胶囊能
够显著提高动脉粥样硬化兔血管内皮因子 NO 水平,降低 vWF及 ET 水平,从而改善血管的舒缩、凝血及纤溶功能;并能提高血
中 HDL- C 水平及降低 TC 水平,因而起到抗动脉粥样硬化的作用。
[关键词]通冠胶囊;动脉粥样硬化;一氧化氮;内皮素;假血友病因子;动物实验;兔
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 0256-7415(2011) 11-0116-03
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