全 文 ：牛大力又叫山莲藕、大力薯，是豆科崖豆藤属
植物美丽崖豆藤（Millettia speciosa Champ．）的根［1］，
主要分布于广西、广东、海南、越南北部等地 ［2］。 其
性味甘、平，具有补虚润肺、强筋活络功效，临床上
主要用于治疗肺热咳嗽、风湿性关节炎、腰肌劳损、
胃溃疡、慢性肝炎、肺结核等疾病［3］。 早在20世纪70
年代，牛大力作为壮腰健肾丸、强力健身胶囊的原
料已用于中成药生产［4］。 目前，关于牛大力的化学
成分、生物活性分析及组织培养已有报道［5～8］。 由于
市场上销售的牛大力原料主要依靠采挖其野生资
源，导致该药用植物资源日趋枯竭。 针对牛大力原
材料不足问题，可发展牛大力人工栽培，采用组织
培养方法可有效解决其优质种苗繁殖问题。本研究
以牛大力幼嫩茎段为外植体进行组织培养，探讨其
再生体系，以期为牛大力的快速繁殖提供参考。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
收稿日期：2009－07－08
基金项目：广西农业科学院科技发展基金项目（201008）
作者简介：潘颖南（1966－），女，广西武鸣人，副研究员，主要从事植物组织和细胞培养等研究工作。
药用植物牛大力组织培养初探
潘颖南，张向军，蒙 平，庾韦花，陈少珍，唐 军，黄素梅，邹 瑜
（广西农业科学院生物技术研究所， 南宁 530007）
摘要：以牛大力幼嫩茎段为外植体，采用0．1％ HgCl2不同处理时间对外植体进行灭菌；以MS为基本培养基，探讨
不同浓度6－BA（2．0、2．5 mg/L）和NAA（0．2、1．0 mg/L）对无菌外植体愈伤组织和芽的诱导效果；以1/2MS为生根培养基，
分别附加不同浓度NAA（0～2．5 mg/L）和IBA（0～2．5 mg/L），探讨对生根培养的效果。结果表明，0．1％ HgCl2处理15 min，
外植体褐化率和污染率较低；MS培养基中添加不同浓度6－BA和NAA组合均能诱导牛大力茎段产生愈伤组织，但以添加1.0
mg/L NAA的愈伤组织诱导率最高；添加NAA和6－BA可诱导牛大力茎段上的腋芽萌动再生，但最高出芽率仅78．6％；再生
芽的适宜增殖培养基为MS＋2．0 mg/L 6－BA＋0．05 mg/L NAA，培养30 d，增殖倍数可达4～5倍；在培养基1/2MS＋NAA 2．5
mg/L＋IBA 2．5 mg/L中培养，其生根率可达66．7％；经过炼苗，移栽到菜园土和河沙（3∶1）的混合基质中，30 d后试管苗的
移栽成活率可达85％以上。
关键词：牛大力；茎段；愈伤组织；诱导；生根
中图分类号：Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1002－8161（2010）06－0523－03
广西农业科学 2010，41（6）：
Guangxi Agricultural Sciences
523-525
Tissue culture of medicinal plant Millettia speciosa Champ.
PAN Ying－nan，ZHANG Xiang－jun，MENG Ping，YU Wei－hua，CHEN Shao－zhen，
TANG Jun，HUANG Su－mei，ZOU Yu
(Biotechnology Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China)
Abstract: The young stems of Millettia speciosa Champ. were used as explants. After sterilization with 0.1% HgCl2
for 12, 15 and 18 min, the callus and buds of explants were induced in MS medium added with different concentrations of
6-BA（2.0, 2.5 mg/L）and NAA（0.2, 1.0 mg/L）. The 1/2MS medium added with NAA (0-2.5 mg/L) and IBA (0-2.5 mg/L)
was used to conduct root culture in induced plantlets. The results showed that the browning and infection rate of explants
were lower when sterilized for 15 min by 0.1%HgCl2. The callus of explants could be induced in medium added with
different combinations of 6-BA and NAA, but the induction rate of callus was the highest in medium added with 1.0 mg/L
NAA. The axillary buds in stem could be germinated in media added with 2.0 and 2.5 mg/L 6-BA, but the highest
germination rate only reached 78.6%. The best medium for multiplication of regenerated axillary buds was MS+2.0 mg/L 6-BA+
0.05 mg/L NAA, the multiplication coefficient was 4.0-5.0 after cultured for 30 days. It was found that the rooting rate of
multiplied buds was up to 66.7% in medium 1/2MS+NAA 2.5 mg/L+IBA 2.5 mg/L, and the survival rate of transplants
reached 85% on 30 days after transplanted to mixed matrix of vegatable soil and river sand（3∶1）.
Key words: Millettia speciosa Champ.; stem; callus; induction; rooting
523· ·
供试野生牛大力采自广西宁明县、 南宁市等
地，以其幼嫩茎段为外植体。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 外植体灭菌 将牛大力茎段置于含少量洗
衣粉自来水中浸泡15 min，经自来水冲洗后，在无
菌条件下以75％乙醇浸泡30 s， 再以0．1％ HgCl2溶
液分别浸泡12、15、18 min，经无菌水冲洗4次后，以
无菌滤纸吸干备用。
1． 2． 2 不同灭菌时间对外植体的影响 将经不同
灭菌时间处理的外植体剪成1 cm左右的带腋芽茎
段，接入MS＋2．0 mg ／ L 6－BA＋0．2 mg ／ L NAA培养基
中进行培养，25 d后统计各处理外植体的污染率和
褐化情况，获得的无菌材料用于后续试验。
1． 2． 3 不同激素组合对愈伤组织和芽诱导的影响 以
MS为基本培养基，分别添加不同浓度6－BA（2．0、2．5
mg ／ L）和NAA（0．2、1．0 mg ／ L），将获得的无菌外植
体接种于不同培养基培养30 d后，调查各处理对牛
大力茎段愈伤组织和芽的诱导效果。将获得的诱导
芽在MS＋2．0 mg ／ L 6－BA＋0．05 mg ／ L NAA增殖培养
基中进行增殖培养。
1． 2． 4 不同激素组合对生根诱导的效果 以1 ／2MS
为生根培养基，分别附加不同浓度NAA（0～2．5 mg/L）
和IBA（0～2．5 mg ／ L）， 进行生根培养。
培养条件：基本培养基中附加3％蔗糖，0．35％
琼脂，pH 5．8～6．0，培养温度25～28℃，光照10 h/d， 光
照强度1500～2000 lx。
2 结果与分析
2． 1 不同消毒时间对外植体的影响
从表1可知，经0．1％ HgCl2不同时间处理后，外
植体污染率逐渐降低，但仍保持在较高水平；当灭
菌12 min时， 外植体污染率高达60％； 灭菌18 min
时，灭菌效果最好，但外植体污染率仍高达25％。 说
明牛大力茎段灭菌比较困难，这可能与牛大力茎段
表面披有绒毛有关，此结果与时群等 ［7］和黄碧兰
等 ［8］的报道相似。 此外，随着灭菌时间的延长，外植
体的褐变数量不断增加，而外植体发生褐变将会影
响腋芽的诱导效果。 所以，为了尽量减少外植体的
褐化，0．1％ HgCl2灭菌时间宜采用15 min。
表 1 0．1％ HgCl2不同处理时间对牛大力外植体培养效果的
影响
Table 1 Effects of different treatment time of 0．1％ HgCl2 on
explants culture of Milletia speciosa Champ.
处理时间
（min）
Treatment
time
外植体数
(个)
Number of
explants
污染外植体
(个)
Number of
infected explants
污染率
(%)
Infecting
rate
无菌褐化外植体
(个)
Number of
browning explants
12 60 36 60 9
15 60 21 35 27
18 60 15 25 42
2． 2 不同激素对茎段愈伤组织和芽诱导的影响
从表2可知，含不同激素组合的培养基均可诱
导牛大力茎段产生愈伤组织，愈伤诱导率为30．0％～
58．3％， 其中以含1．0 mg ／ L NAA的培养基中的愈伤
生长量最大， 说明NAA诱导愈伤组织的作用较6－
BA明显。 但是，单独添加NAA不能诱导牛大力茎段
上的腋芽萌动生长， 须附加6－BA才能诱导其萌动
生长，说明6－BA是牛大力茎段芽诱导的必需激素。
外植体数（个）
Number of
explants
形成愈伤外植体数（个）
Number of
inducted explants
愈伤诱导率（%）
Induction rate of
callus
愈伤生长量
Callus size
出芽外植体数（个）
Number of explants
with bud
出芽率（%）
Budding rate
2.0 0.2 20 6 30.0 中 14 70.0
2.5 0.2 28 10 35.7 中 22 78.6
0 1.0 12 7 58.3 大 0 0
6-BA NAA
激素组合（mg/L）Hormone combination
表 2 不同激素组合对牛大力茎段愈伤组织和芽诱导的效果
Table 2 Effects of different hormone combinations on callus and bud induction of Milletia speciosa Champ． stem
2． 3 牛大力芽增殖培养
牛大力诱导芽在MS＋2．0 mg ／ L 6－BA＋0．05 mg ／
L NAA的增殖培养基中培养30 d左右，即可获得4～
5倍的增殖系数。通过多次的继代培养，就可获得大
量的牛大力继代苗（图1:A）。
2． 4 牛大力芽的生根诱导
将长约2 cm的无根芽剪下接种到生根培养基
中诱导生根，接种培养25 d左右，牛大力无根芽基
部皮层形成白色不定根1～3条，根长约1～3 cm（图1:
B）。 从表3看出，不添加任何生长调节剂的1 ／ 2MS培
养基不能诱导牛大力芽生根；分别添加生长调节剂
NAA 1．5～2．5 mg ／ L或IBA 1．5～2．5 mg ／ L时， 其生根
率均较低，为33．3％～60．0％；当NAA 2．5 mg ／ L和IBA
2．5 mg ／ L配合使用时，对其生根虽有促进作用， 但
促进效果不明显， 生根率仅为66．7％， 与单独添加
NAA 2．5 mg ／ L的生根率无显著差异。
广 西 农 业 科 学524· ·
表 3 不同激素组合对牛大力试管苗生根的影响
Table 3 Effect of hormone combinations on rooting of Milletia
speciosa Champ.
接种芽数（个）
Buds
生根数（条）
Rooting number
生根率（%）
Rooting rate
0 0 20 0 0
1.5 0 20 9 45.0
2.5 0 30 18 60.0
0 1.5 30 10 33.3
0 2.5 30 12 40.0
2.5 2.5 30 20 66.7
激素组合 (mg/L)
Hormone combination
NAA IBA
2． 5 移栽
移栽前，提前4～5 d打开试管苗瓶盖，让牛大力
试管苗在自然光照条件下炼苗，然后取出并洗净根
部的培养基，移栽到菜园土和河沙（3∶1）的混合基
质中并浇透水后，遮阴保湿。 10 d内需给叶面喷水，
以增加和保持空气湿度。移栽30 d，其成活率达85％
以上。
3 结论与讨论
HgCl2处理时间是影响牛大力茎段培养效果的
一个重要因素。 HgCl2处理时间越长，外植体灭菌效
果越好，但是处理时间延长会使外植体受毒害增加
从而发生褐化，使其腋芽很难诱导萌动。所以，为了
尽量减少外植体褐化，0.1% HgCl2浸泡处理时间宜
采用15 min。 本研究结果表明，6－BA是牛大力外植
体腋芽诱导的必需激素，单独添加NAA不能诱导牛
大力茎段上的腋芽萌动，但能诱导牛大力茎段形成
愈伤组织。
牛大力是一种木质藤本植物，存在生根较难的
问题，在本研究中，其最高生根率仅为66．7％，这与
黄碧兰等 ［8］的报道相似，因此，如何获得较高的生
根率还需做进一步研究。由于牛大力试管苗的叶片
大且薄，所以移栽后需要特别注意遮阴保湿。
参考文献：
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段组织培养技术研究［J］．安徽农业科学，2008，36（32）：
93－94．
（责任编辑 韦莉萍）
图 1 牛大力增殖苗(A)和生根苗(B)
Fig.1 Multiplication plantlet (A) and rooting plantlet (B) of Milletia speciosa Champ.
A B
潘颖南等：药用植物牛大力组织培养初探 525· ·