全 文 ：第 1 2卷 第 2期
9 915 年
兰 州 医 学 院 学 报
JO U R N A LO F LA N H ZO l l ME D IC A LCO L LE G E
V
.〕 1
.
1 2
,
N 0
.
2
1 9 9 5
蓬羲术水提物抗肿瘤作用
兰 州军 区 总 医院 药材 科 贯正平 谢景文
兰州医学院血液病研究所 魏虎来
摘要 蓬羲术水提物 (C盯 )抑制小 鼠移植肿瘤宫颈癌 U 14 生长 , 5一 2娘 · k g 一 ’ (相 当生药 ) iP
l o d
,抑制率为 n . 8~ 4 4 . 8 % 。 C u r 对体外培养的小 鼠白血病 P 38 细胞生长 、 集落形成和 M T T 甲
化合物生成有显著抑制作用 ,并和剂量呈正相 关 。 0 . 25 ~ 4 9 · L 一 `处理细胞 24 h , 细胞生长抑制率为
1
.
0 ~ 86
.
3 %
;
M T T 甲 化合物生式抑制百分率为 1 . 9一 74 . 6 % ;处理细胞 12 h , P 38 8 细胞软琼脂集
落形成抑制率为 3 . 6一“ . 9纬 。
关扭词 蓬羲术 ;抗肿瘤作用 ; U 1 4 ; P 3 8 8 细胞系
中药蓬羲术为姜科植物筏术的根茎 ,我国民间
用蓬筏术治疗肿瘤已有较久历史 。 临床上对宫颈癌
有较好疗效 “ 〕 。 为了解其直接细胞毒作用 , 本文以小
鼠白血病 P 38 为靶细胞 ,观察了蓬获术对体外培养
细胞增殖 、 集落形成和 M T T 甲 化合物生成的影
响 ,并研究了其对小鼠移植肿瘤宫颈癌 U 14 生长的
抑制作用 。
1 材料
1
.
1 动物
C 5 7B L / 6N 小鼠 . 1 8~ 22 9 ,雄雌兼用 ,购自甘肃
省肿瘤研究所实验动物室 。
1
.
2 瘤株
小鼠移植肿瘤宫颈癌 U 14 从甘肃省肿瘤研究所
引进 ,用 C 57 B L 6/ N 小鼠接种传代 。
L 3 细胞 系
小鼠白血病 P 3 8 细胞系从中国医学科学院药
物研究所引进 ,用含 20 %小牛血清 (杭州四季青生物
工程材料研究所产品 )的 R P M I 一 1 6 4。培养基 ( 5 19 -
m
a 公司产品 )常规培养 。 四 甲基偶氮哇兰 (M T T )为
{si g m
a 公司产品 。
1
.
4 蓬获术水溶 性浸出物的制备
将蓬获术〔兰州市药材站提供 , 经鉴定为姜科植
物获术的根茎 C u r e u m a z e d o a r ia (eB 啥 ) R o s c , e u r 〕生
药 2。。g 碾碎后加入 40 m l 去离子水 ,在 60 ℃条件下
周期震荡 Zh ,然后用尼龙网过滤 ,滤过液在室温下
4 0 0 o r / m i
n
( 6 0 0 0 义 g )离心 z h ,其上清液经 0 . 2 2产m
的微孔滤膜除菌后供小鼠腹腔注射用 。 体外实验用
含 2 0% 小牛血清的 R PM I一 1 6 4 0 培养液制成 0 . 2 5 、
l
、
2
、
4
、
2 6 9
·
L
一 ’的浓度直接使用 。
2 方法与结果
6
.
L
u n d b o y G
, e t a l
.
T i
s s u e s p e e i fi t y i n n e r v e r e g e n -
e r a t io n
. 反 a n d P la s t R e e o n s t r S u r g 1 9 8` ; 2 0 : z , , .
U l t r a s t r u e t u r e O b s e r v a t i o n o n R e g e n e r a t io n
o f N e r v e E n d i n g s i n E x P e r im e n t a l D i r e e t
N e u r o t i z a t i o n o f M u s e l e s
X i n g hC
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,召 t a l
(刀妙 a 汀m e n t of P a t h olO 刀 , aL n z h o u G e n e ar l H o sP i t a l , aL n z h o u oC m 二a n d l 〕 L A )
oS l
e u s m u s e le s o f 1 6 N e w z e a l a n d r a b b i t s w e r e i n n e r 、` a t e d w i t h n e r v e im p la n t a t io n
.
T h e d e g e n e r a t io n a n d
r e g e n e r a t i
o n o f
n e r v e e n d in g s in d e n e r v e d m u s e le s w e er o b s e r v e d b y e le e t r o n 一 m ie r o s e o p e . T h e n e w M E P s
w e r e s t u d ie d
.
R e g e n e r a t i o n o f n e r v e a x o n s a n d t h e e s t a b lis h m e n t o f n e r v e 一 m u s e le e o n n e e t io n w e r e d is -
e r
i b e d
.
A g o o d m u s e u la r a e t iv i t y o f th e s o l e u s w a s d e m o n s t r a t e d s p o n t a n e o u s l y a f t e r 2 4 w e e k s o f o p e r a t io n
.
K e y w o r d s
:
U l t r a s t r 、一e t u r e ; N e r v e im p l a n t a t io n ; N e r v e r e g e n e r a t io n ; A x o n ; M o t o r e n d 一 p la t e
一 6与 一
DOI : 10. 13885 /j . i ssn. 1000 -2812. 1995. 02. 004
. 2I C盯 对小 鼠移植种瘤宫颈癌 U1 4生长 的影响
参照文献仁 2〕 。 取小鼠 5 0只 ,左侧腋窝皮下接种 l
x l护 肿瘤细胞后 ,随机分成 5 组 , 分别 ip C ur o 、 5 、
1 0
、
2 0 9
·
k g 一 `和 C T X Z o m g · k g 一 ’ ,每天一次 ,连续
十天 ;停药第 2 天处死小鼠 ,解剖瘤块杯重 , 计算肿
瘤抑制百分率 。 结果 C u r 抑制小鼠移植肿瘤宫颈癌
I J 1 4 生长 (表 1 ) ,并和剂量正相关 , ’ 5 一 2 0 9 · k g ` ip
l od
,抑制率分别为 n s一 4 4 . 8 % 。
表 1 蓬较术水提物 中 对小鼠移植肿瘤
官颐癌 U 14 生长的影响
表 2 C u r 对小鼠白血病 P 3 8 细胞生长的影响
剂量 ( g · L 一 ’ ) 细她数 ( 10 4 /m l ) 抑制率 (% )
0
0
.
2 5
1
.
C O
2
. 刀 O
4
.
0 0
1 6
.
0 0
14
.
3 1士 1 . 7 4
14
.
16士 2 . 0 1
1 1
.
8 9士 1 , 3 9 梦
9
.
6 4士 1 . 4 2 `
8
.
1 3士 1 . 2 0 苍
]
.
9 6士 0 3 9 餐
1
.
0
1 6 9
3 2
.
6
4 3
.
2
8 6
.
3
剂量 小鼠数 体重改变
( g
·
k g 一 , · d 一 ’ ) (只 ) ( g )
瘤重 ( g )
( X 士 S )
抑制率
(% )
0 10 + 5
.
6 1
,
36士 0 . 4 7
5 10 + 5
,
3 1
.
2 0士 0 4 4 1 1 . 8
1 0 9 + 3
.
6 0
.
8 3士 0 . 36 份 3 9 . 0
2 0 9 + 1
.
2 0
.
7 5土 0 . 28 爹 4 4 . 7
T X 2 0 m g
.
k g 一 1 8 一 0 . 8 0 . 5 9士 0 . 30 件 5 6 · 5
0 1 1 十 5 . 1 1 . 5 2土 0 . 6 3
5 9 + 4
,
6 1
.
3 7 士 0 4 7 9 . 9
1 0 1 0 + 3
.
3 0
.
9 8士 0 . 3 4 3 5 . 5
2 0 9 十 1 . 9 0 8 7士 0 . 2 9 书 4 2 . 8
旦之匕匕丝二二一一干匕监典华掣匕
, 户< 0 . 0 5 , 与 c o n t r o l 组 比较
2
.
2 C
u r 对 P 3 8 8 细 胞生长的影响
将 P 38 细胞用 R P M I 一 1叔。 培养液配成 6 只
1少 / m l的细胞悬液 ,每孔 l m l 分装到 24 孔培养板中
(S 咭m 。 公司产品 ) ,同时加入 C u r 达设计的终浓度 ,
置 C O : 培养箱 3 7℃ 、 饱和湿度培养 6 、 1 2 、 2 4 、 魂s h , 侮
剂量组各取出 6 孔细胞 ,台盼蓝染色 , 显微镜下记拒
染活细胞数 ,取均值计算抑制百分率 。 结果 c 盯 显著
抑制` P 38 细胞生长 ,抑制率与浓度及处理时间正相
关 , 。. 25 一 1 . 69 · L 一 ` (相当生药 )处理细胞 2h4 ,细胞
生长抑制率为 1 . 0 ~ 86 . 3% (表 2 ) , 29 · L 一 1处理细
胞 6 、 1 2 、 2 4 、 4 8 h ,细胞生长抑制率分别为 7 , 4 、 1 9 . 9 、
3 8
.
9
、
5 9
.
1环 。
· 节了
2
.
3 C
u r e f 对 P38 8 细胞集落形成的影响
方法参照文献 , 〕 、 、取不同浓度 C u r 处理 1 2h 的
3P 8 细胞 ,经 H a吵影液洗涤 2 次后 ,用含 25 % 小牛
血清的 R PM I一 1 640 培养基制成每毫升含 1 2 0 0 个
细胞的悬液 ,取 8m l 置入试管 ,加入 防℃ 融化状态的
2% 琼脂 l m l ,迅速混 匀 , 按每皿 l m l 分装到直径
35 m m 玻璃培养皿中 ,置 C O : 培养箱培养 1d0 后取
出 ,倒置显微镜下计集落数 (大于 50 个细胞的细胞
团为 1 集落 ) , 每组 6 皿 ,取均值计算集落形成抑制
百分率 · 结果 C ur 晃著抑制 P 38 细胞软琼脂集落形
成 ,抑制作用随浓度增大而增强 (表 3) `
n = 6
,
X 士 S , , P < 0 . 0 5 ,与 e o n t r o l 组比较
表 3 C u r 对小欲白血病 3P 8 细胞集落形成的影响
剂量 ( g · 1一 ` ) 集落形成数 抑制率 ( % 少_ _ _
0 12 5
.
8士 1 3 . 3
0
.
2 5 1 2 1
。
3 士 1 2 . 5 3 . 6
1
.
0 0 1 0 1
.
4士 1-0 7 苍 1 9 . 4
2
.
0 0 8 9
.
8士 1 1 . 2 香 2 8 . 6
4
.
0 0 6 0
.
5士 1 0 . 4 份 5 1 . 9
1 6
.
0 0 4 1
.
6士 6 . 3 . 6 6 . 9
。 一 6 .贾土 s , , 尸 < 0 . 0 5 , 与 c o n t r o l 组比较
2
.
4 C
u r 对 P 3 8 8 细 胞 M T T 甲 化 合物 产生 的影
响
将 P 38 8 细胞在不同浓度 C盯 的 R P M I 一 1 6魂。
培养液 中培养 · 2h0 取出 , 每孔加入 g5 · L 一 ` M T ,
3 0川 ,继续置 c o : 培养箱培养 4 h 。将培养液及细胞残
渣全部吸入离心管 , Z0 0 0 r /m 贡n 离心 l o m i n ,去除上
清液 , 残渣用 1 . s m l D M S O 溶解其中 M T T 甲 化
合物 , Z0 0 0 r /m in 离心 s m in 后 ,取上清液于比色杯 ,
用 u v I K O N 一 93 。 紫 外可 见光 分光 光 度计 在
5 6 0n m 处测吸光度 ,取均值计算 M T T 甲 化合物
生成抑制百分率 。 结果 C u r 抑制 P 38 细胞 M T’ r 甲
化合物生成 。 抑制率随其浓度增高而增大 (表 4) ,
0
.
25 一 1 6 9 · L 一 ’处理细胞 2 h4 , 抑制血为 3 . 6一 7 4
6 %
。
表 4 lC l r 对小白鼠白血病 P 38 细胞
M T T 甲 化合物生成的影响 `
剂量 (g · L 一巧 吸光度 一 抑晌度丈叱 ) -
0 0
.
9 3 6 3士 0 . 0 7 4 3
0
,
2 5 0
.
9 1 8 7土 0 . 0 8 3 4 1 . 9
1
.
0 0 0
,
8 1 0 2士 0 . 0 8 7 1 1 3 . 5
2
.
0 0 0
.
5 1 7 2士 0 . 0 5 7 3 书 4 4 . 5
4
.
0 0 .{) 4 2 1 6士0 . 0 5 2 9 “ 5 5 . 0
16
.
0 0 0
.
2 3 7 4士 0 . 0 4 1 4 苍 74 . 6
n * s
,又士 S , , 尸 ( 0 . 0 5 , 与 。 o n t r o 〕组 比较
3 讨论
中.药蓬表术具有行气破血 ,消积止痛之功效 , 用
于治疗 痕痞块 , 阔血闭经 ;临床上对宫颈癌有较好
疗效 。 本文结果表 明 C u r 对小鼠移植肿瘤宫颈癌
I J1 4 的生长和体外培养的小鼠白血病 P 38 细胞生
长 、 集落形成和 M T T 甲 化合物生成均有显 著抑
制作用 ;初步表明 , C u : 的抗肿瘤作用是通过直接作 王, 似苏新医学院编 , 中药大辞曲 . 上海 : 上海人民出
用于肿瘤细胞所产生 。 版社 , 19 7 7 ; 24 50 ,
M T T 比色分析法是近年来用以检测细胞活性 2 . 贾正平 ,等 . 4一 〔4’ 一 (2 ” , 扩 , 6’ , 6’ 一 四 甲基呱咤氮
的新指标 。 它通过检测细胞内脱氢酶系的活性来反 氧自由基 )氨基〕一 f 一 去甲表鬼 臼毒抗肿瘤作
应细胞活性 。 本文中 C u r 对 P 38 8 细胞 M T T 甲 化 用 . 中国药理学通报 1 9 9 1 ; 7 : 3 04 .
合物的生成抑制率较对台盼蓝拒染试验低 ,可能与 3 . 贾正平 ,等 . 4一 〔4’ 一 (、 梦 , 2’ ,别 , 6’ 一 四甲基呱吮氮
部分细胞膜受损 , 而细胞 内脱氢酶系未完全失活有 氧 自由基 )氨基〕一 4尹一去甲表鬼 臼毒对 L 1 2 10 细
关 。 胞增殖 、 克隆形成和 D N A 合成的影响 . 中国药理
参考文献 学与毒理学杂志 1 9 91 ; 5 : 47 .
A n t i t u m o r A e t iv i t y o f C u r e 、; m a Z e d o a r i a ( B e r g ) R o s e
J i a Z h e月 gP i
n g
,
X i e J i n w e n
(价 n e ar l H `功 i at Z of aL n z h 口 u G 7m m a n d of 尸L A )
W e i H u l a i
( I n s t i t : ` t e of H
e m a t o l o g y
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L a n z h o u M ￡d i e a l C o l l e g e )
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e e t s o f C u r e u n一a z e d o a r ia ( eB
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t h e p r o li f e r a t io n
, e lo n a l f o r m a t io n a n d M T T f
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·
m a t io n o f P 3 8 8 c e ll s in v it r o w e r e s t u d ie d
.
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, , t s i n h i b i t二o n r a t e s a g a in s t U 1 4 w e r e 1 1
,
8 一 4 4 . 8%
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。、 d t h e p r o li f e r a t i o n o f P 3 8 8 e e ll s , a n d t h e i n h ib i t io n r a t e h a d a P o s i t iv e i n t e r r e la t io n s h ip w it h
t h e e o n e e n t r , t io n a x、 d e x 盖; o s u r e t im e . A t t h e e o n e e n t r a t i c ,n o f 0 . 2 5 一 1 6m g · m l 一 】 , i n h i b it i o n r a t e w a s 1 . 0 一
只6 . 3 ;石. A f t o r e x p o s u r *、 o f t h e e e l l s t o C u r Zm g · m l 一 ` f o r 6 , 1 2 , 2 4 , 4 8 h , t h e in h ib it io n r a t e s w e r e 7 . 4 , 1 9 . 9 ,
3 8
.
8
,
5 9
.
1%
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.
C 、i r a ls o m a r k e d l y z n h ib i t e d t h e M T T f o r m a z a n f o r m a t io n a n d e l o n a l fo r m a t i o n o f
K e y w o r d s : C u r e u m a z e d o a r ia (eB
r g ) R o s e ; a n t一t u m o r a e t iv i t y ; U 1 4 ; P 3 8 8 e e l l l in e
盐酸二氢埃托啡依赖十例
兰医二院精神科 韦好儒 陈林庆 闰立新 何桂莲
本文收集 1 9 9 2 . 2 ~ 1 9 9 4 . 1 0 月本科收治的 1 0
例盐酸二氢埃托啡依赖者的临床资料 ,性别 : 10 例均
为男性 。 职业 :干部 1 例 , 工人 夕例 ,个体户 6例 。 婚
姻状况 、未婚 4 例 , 已婚 5 例 ,离异 1 例 。 年龄 28 一 42
岁 ,平均 3 岁 ,开始使用盐酸二氢埃托啡的原因 ,海
洛因依赖者 9 例 ,吸食海咯因 6 年 1 例 , 4 年 1 例 , 3
年 l 例 , 1~ 2年 6例 ,平均吸食海洛因 19 /日 。 1例系
强痛定及杜冷丁成瘾 。 10 例均系脱瘾治疗后 ,不能忍
受全身酸痛不适 , 心急心烦 ,焦虑不安 、 失眠 ,其中 1
例原有腰痛病史 ,经他人介绍盐酸二氢埃托啡可以
解除疼痛而使用 。 1例系慢性胰腺炎反复发作 , 为了
止痛而反复交替肌注强痛定及杜冷丁 3 年 , 强痛定
每次用量 40 0m g 、 每日 2 次 ,先后共用去 10 支 X 1 0
合左右 ,杜冷丁每次用量为 10 m g ,每 日 2 次 ,共用
拍 支 只 10 合 , 入院前 9个月曾在外院用二氢埃托啡
脱瘾治疗 。
二氢埃托啡作用方式均为舌下含化或烫吸 、 未
发现有静脉注射者 。 使用时间 : 9 个月 2 例 , 6 个月 8
例 。 剂量 :初始量为 40 ~ 60 拜g /次 , 3~ 4 小时用 1 次 ,
7~ 10 天后 2一 3 小时 1 次 ,每 日用量 2 0 ~ 1 0 0 片
( 2 0拌g /片 ) 。
治疗情况 : 10 例二氢埃托啡依赖者均为强制断
药给予美散酮 7 日递减法治疗 ,并用氛氮平 75 ~
10 o m g / 日 ,速眠胺 3腼 g /晚 ,以改善其失眠及烦躁不
安 、 在院 10 ~ 15 天戒断症状消失出院 。
讨论 : 盐酸二氢埃托啡是一种强效麻醉性镇痛
剂 , 经动物试验高剂量时产生躯体依赖 , 10 例均系在
原依赖药物脱鹿治疗后而不能忍受其迁延戒断症状
而使用二氢埃托啡 , 因二氢埃托啡属吗啡受体激动
剂 、 戒断症状类似阿片依赖者戒断症状 ,对戒断症状
的治疗同对阿片依赖者治疗方法相同 . , 墓此笔者建
议对盐酸二氢埃托啡应严格管理 ,并对阿片依赖者
忌用此药 , 以免造成新的药物滥用及依赖 .