全 文 ：[药 理 ]
鱼腥草 、炮姜 、附子抗大鼠压力超负荷心室重构作用的比较研究
陈长勋 , 王 樱
(上海中医药大学药理学教研室 ,上海 201203)
收稿日期:2008-08-06
基金项目:国家自然科学基金课题(30572379)
作者简介:陈长勋(1948-),男 ,教授 ,博士生导师,研究方向:中药药理学。 Tel:(021)51322200E-mail:cxchen6@ 126.com
关键词:鱼腥草;炮姜;附子;心室重构;血管紧张素Ⅱ;醛固酮;血管内皮素
摘要:目的:比较寒性药鱼腥草和热性药炮姜 、附子对压力超负荷所致大鼠心室重构及神经内分泌因子的影响。方法:采
用大鼠腹主动脉缩窄法制备压力超负荷心室重构模型。一周后模型动物随机分为模型组 、阳性对照卡托普利组 、鱼腥草
组 、炮姜组和附子组。另设假手术对照组。灌胃给药干预 3周 ,测量血压 ,称体重 , 测定左心室 /体重及全心 /体重作心室
肥大的指标;放射免疫法测定心肌组织血管紧张素Ⅱ 、血管内皮素含量以及血浆醛固酮水平;病理切片观察心肌组织胶
原容积分数和血管周围胶原面积;测定心肌间质Ⅰ 、Ⅲ胶原含量;免疫组织化学方法测定蛋白激酶 C表达。结果:寒性药
鱼腥草能显著降低血压 、心肌质量指数 , 降低心肌 AngⅡ 、血管内皮素 、血浆醛固酮水平;明显减少心肌组织胶原容积分
数和血管周围胶原面积 ,减少心肌间质Ⅰ 、Ⅲ胶原含量 ,抑制心肌蛋白激酶 C表达。热性药炮姜无上述作用。附子除有
一定降低心肌血管紧张素Ⅱ含量外 ,也无上述作用。结论:寒性药鱼腥草能抑制神经内分泌系统过度激活 , 防治心室重
构;热性药炮姜 、附子无明显抗心室重构及抑制神经内分泌因子分泌激活的作用。
中图分类号:R285.6 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2009)01-0024-06
ComparativestudyofherbsofYuxingcao, PaojiangandFuzionventricularre-
modelinginducedbyhighpressureinrats
CHENChang-xun, WANGYing
(DepartmentofPharmacology, ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine, Shanghai201203 , China)
KEYWORDS:Herbahoutuyniae;Radixaconitilateralispraeparata;RhizomaZingiberisrecens(blast-fried);
ventricularremodeling;AngⅡ;ALD;ET
ABSTRACT:AIM:TocomparetheefectsofYuxingcao(Herbahoutuyniae), Paojiang(Radixaconitilateralis
praeparata)andFuzi(RhizomaZingiberisrecens(blast-fried))onventricularremodelinginducedbyhighpressure
inrats.METHODS:Ventricularremodelingmodelwasinducedbyconstrictionofabdominalaortainrats.After1
week, themodelratsweredividedrandomlyinto5groups, suchasmodelcontrol, captopril, Yuxingcao, Paojiang
andFuzi.Inaddition, asham-operatedgroupwasdesigned.Theratsweregivenperoralcaptopril, Yuxingcao,
PaojiangandFuzirespectivelyforconsecutive3weeks.Ratsinsham-operatedgroupandmodelcontrolgroupwere
treatedwithdistiledwater.Thebloodpressurewasmeasured.TheratioofLVW/BW, HW/BWwascalculatedas
anindexindicatingthegradeofventricularhypertrophy.ThecontentsofAngⅡ , ETinhearttissueandbloodlevel
ofaldosterone(ALD)weredeterminedbyradio-immunoassay.Themyocardiumcolagenvolumefraction(CVF),
perivascularcircumferentialarea(PVCA)andthecontentoftypeⅠ andⅢ colagenweredeterminedbyhistologi-
calassayusingthepicricacid/siriusredstain.TheexpressionofproteinkinaseC(PKC)wasdeterminedbyim-
munohistochemicalanalysis.RESULTS:YuxingcaocouldlowerthebloodpressureandtheratioofLVW/BW,
HW/BW;reducethelevelofAngⅡ , ETinmyocardiumandALDinbloodserum, decreasemyocardiumCVF,
PVCAandthecontentoftypeⅠ , Ⅲ colagen, andinhibittheexpressionofPKC.Paojiangdidnotshowobvious
efectsmentionedabove, neitherdidFuzi, exceptthatitdecreasedthelevelofAngⅡ inmyocardium.CONCLU-
SION:Yuxingcao, theherbwithcoolnature, canatenuatetheventricularremodeling, andinhibittheover-activi-
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tyofneuroendocrinefactorrelease.PaojiangandFuzi, theherbswithhotnature, failtoshowthat.
慢性心功能不全又称充血性心力衰竭(CHF),
是多种病因所致心脏泵血功能降低 ,不能排出足够
的血液以满足全身组织器官代谢需要的一种临床综
合症。已发现 ,导致 CHF发生发展的基本机制是心
室重构 [ 1] 。持久的交感神经兴奋增强 ,除通过影响
血流动力学或直接对心脏作用而诱发 、加重心室重
构外 ,还可引起肾素分泌过多 、全身及心脏局部组织
的肾素 -血管紧张素-醛固酮系统 (renin-angiotensin-
aldosteronesystem, RAAS)活化 ,并进一步使交感神
经兴奋性增强 ,形成恶性循环[ 2] 。心室重构是心力
衰竭和猝死等心血管事件的独立危险因素。因此 ,
尽早干预和逆转心室重构显得非常重要。
中药有寒凉 、温热不同药性。中药基础理论研
究工作者对中药寒凉 、温热不同药性与其药效学关
系的研究结果已初步揭示 ,寒凉药一般表现为对交
感神经系统呈抑制作用 ,而温热药则能使交感神经
兴奋性增强 [ 3] 。
我们曾就寒性药玄参与热性药附子对异丙肾上
腺素和 L-甲状腺素引起的拟交感神经兴奋性增强 ,
神经内分泌过度激活及心肌肥厚 、心室重构进行过
比较研究 ,发现寒性药玄参能通过抑制模型动物交
感神经系统活性 ,降低 AngⅡ水平而抑制心肌肥厚 。
而热性药附子抗心肌肥厚及抑制神经内分泌因子分
泌的作用不显著 [ 4] 。本文进一步比较观察寒性药
物鱼腥草与热性药附子 、炮姜对压力超负荷引起的
大鼠神经内分泌过度激活及心肌肥厚 、心室重构的
作用。
1 材料
1.1 动物 SD大鼠 , ♂性 ,体重 220 ～ 250 g,购于
斯莱克实验动物有限责任公司 , 合格证号 SCXK
(沪)2007-0005。饲养于上海中医药大学实验动物
中心清洁级动物实验室。
1.2 药品 鱼腥草(批号:070505,浙江产);附子
(批号:070405,江苏产);炮姜(批号:070508,四川
产)购自上海养和堂中药饮片有限公司 ,并经本校
生药教研室赵志礼教授鉴定各品种无误。上述药材
分别加水煎煮 2次 ,每次 30 min,合并两次煎液 ,浓
缩至所需浓度备用。因中药通常是多味药物组方合
用 ,本实验均单味给药 ,故各药分别采用药典记载成
人每日用量上限 ,按体表面积折算成大鼠等效剂量
的 10倍量给予。卡托普利(批号:060804),上海衡
山药业有限公司产品 。
1.3 试剂 血管紧张素 Ⅱ(AngⅡ)放免试剂盒 ,内
皮素(ET)放免试剂盒 ,解放军医院科技开发中心放
免所产品;醛固酮(ALD)放免试剂盒 ,北京北方生
物技术研究所产品;羟脯氨酸(Hyp)测试盒 ,考马斯
亮蓝蛋白测定试剂盒南京建成试剂公司产品;蛋白
激酶 C(PKC)免疫组化试剂盒 ,武汉博士德生物工
程有限公司产品。
1.4 主要仪器 RM6280型多道生理信号采集处
理系统:成都仪器厂;SN-682放射免疫 γ计数器:
中国科学院上海原子核研究所日环仪器厂;FJ-200
高速分散均质机:上海标本模型厂;754型紫外可见
分光光度计:上海第三分析仪器厂;系统显微镜:
BX51 /BX52, 日本 Olympus公司;图象分析系统:
Lamage-Proplus4.0 MediaCybernetics, L.PUSA。
2 方法
2.1 腹主动脉不完全结扎致大鼠心室重构模型的
制备 采用本室多次采用的方法 [ 5] ,选用 220 ～ 250
g♂性 SD大鼠 ,手术前 12 h禁食不禁水 , 3%戊巴
比妥钠按 30 mg/kgip麻醉 ,待角膜反射消失后固定
在手术台上 ,腹部正中剑突下 2 ～ 3 cm处打开腹腔 ,
在左右肾动脉之间分离腹主动脉 ,用银夹(内径为
0.6 mm)不完全结扎两肾动脉之间腹主动脉 ,使腹
主动脉外径缩窄为 0.6 mm,检查腹主动脉通畅后 ,
分层缝合腹壁 。假手术组动物开腹后仅分离腹主动
脉 ,但不结扎 ,其余步骤与造模动物相同 。手术后动
物以青霉素钠 4万单位 /只 im,连续 3 d以抗感染 。
手术 1周内出现部分动物死亡 ,死亡动物双肺
明显瘀血 ,部分还伴有胸腔积液 ,死亡与急性压力超
负荷和感染有关。造模后 1周 ,将存活的模型动物
随机分组:模型组 、卡托普利组 、鱼腥草组 、炮姜组 、
附子组。各组均以 20 mL/kg容量 ig给予受试药 ,
连续 3周;假手术组 、模型组 ig给予相同体积的饮
用水 。
2.2 大鼠血压测定 大鼠于末次给药后禁食不禁
水 12 h,称重 ,用戊巴比妥钠 30 mg/kg腹腔注射麻
醉后 ,分离右颈总动脉 ,聚乙烯管插入 ,通过压力换
能器连接 RM6280型多道生理信号采集处理系统 ,
记录收缩压 (SBP)、舒张压 (DBP)、平均动脉压
(MAP)。
2.3 大鼠心脏肥厚指数的测定 快速打开大鼠胸
腔取出心脏 ,用滤纸吸干表面水分 ,去除大血管 、心
房 、心外膜及脂肪组织 ,分离左 、右心室 ,电子天平准
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确称取左心室质量 (LVW)和全心质量(HW)。计
算全心质量 /体重 ,左心室质量 /体重 ,分别记为全心
质量指数(HWI),左心室质量指数(LVWI)。
2.4 神经内分泌因子的测定 取各鼠同一部位左
室心肌组织 ,用冷生理盐水制备 10%及 2%组织匀
浆液。取 2%组织匀浆液测定 AngI含量 ,取 10%
组织匀浆液测定 ET含量 。具体方法按试剂盒说明
书进行 。同时按考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒说明书
所述步骤测定匀浆液总蛋白含量 ,结果以每毫克蛋
白中的 AngI、ET含量表示 。
腹主动脉取血 ,低温离心机 3 500r/min离心 10
min,取上清液 ,用放射免疫法测定血清 ALD浓度 。
具体方法按试剂盒说明书进行 。
2.5 心肌羟脯氨酸含量的测定 取上述 2%心肌
组织匀浆液测定 Hyp含量 。具体方法按试剂盒说
明书进行。同时按考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒说明
书步骤测定匀浆液总蛋白含量 ,结果以每毫克蛋白
中的 Hyp含量表示 。
2.6 组织形态检查 取固定于 10%福尔马林溶液
中各鼠左心室同一部位心肌 ,石蜡包埋 ,切片 ,进行
天狼猩红-苦味酸染色。常规封片后 ,切片在 Olym-
pusBX51型显微镜下观察并摄片 ,用 Lamage-Pro
plus4.0图像分析系统 ,测量心肌组织胶原容积分
数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)。CVF=胶
原面积 /总面积 , PVCA=小动脉管腔周围胶原面积 /
动脉管腔面积 ,每一标本均随机取 3 ～ 5个视野测
量 ,计算其均值 。
在偏振光显微镜下取切片中血管以外的区域观
察胶原着色情况 , Ⅰ型胶原纤维显示很强的双折光
性 ,为黄色或红色的纤维 , Ⅲ型胶原纤维的折光性
弱 ,为绿色的纤维 ,用 Lamage-Proplus4.0图像分析
系统 ,测定心肌间质 Ⅰ 、Ⅲ胶原含量。每一标本均随
机取 3个视野测量 ,计算其均值。
2.7 免疫组化测定 PKC表达 按说明书步骤用免
疫组织化学方法测定 PKC表达 。切片在 Olympus
BX51型显微镜下观察并摄片 ,用 Lamage-Proplus
4.0图象分析系统分析抗原表达的面积和密度 ,每
张标本随机测量 5个视野。
2.8 统计学方法 实验数据以均数 ±标准差( x±
s)表示 ,采用单因素方差分析 ,两组间比较用 LSD
检验 ,方差不齐时用 Dunnet st检验。以 P<0.05、
P<0.01分别表示统计学意义显著和非常显著 。
3 实验结果
3.1 对大鼠血压的影响 与假手术组比较 ,模型组
SBP、DBP、MAP均非常显著性地升高(P<0.01);卡
托普利能非常显著性地降低 SBP、DBP、MAP(P<
0.01);鱼腥草可降低 SBP、MAP(P<0.05),显著性
降低 DBP(P<0.01);炮姜 、附子无降低 SBP、DBP、
MAP作用。结果见表 1。
表 1 鱼腥草 、炮姜 、附子对腹主动脉不完全结扎致心室重构大鼠 SBP、DBP、MAP的影响( x±s)
组别 剂量 n SBP/mmHg DBP/mmHg MAP/mmHg
假手术组 — 9 128.27±13.50＊＊ 118.34±12.03＊＊ 124.21±13.18＊＊
模型组 — 10 183.52±23.49 160.56±15.19 172.92±19.20
卡托普利组 40mg/kg 9 141.67±28.46＊＊ 127.29±22.39＊＊ 135.26±25.40＊＊
鱼腥草组 27g/kg 9 160.61±18.62＊ 140.95±12.33＊＊ 151.44±15.34＊
炮姜组 5.4g/kg 10 188.54±10.07 153.31±13.17 172.92±13.62
附子组 13.5g/kg 10 168.85±17.03 158.57±16.43 164.24±16.71
注:与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
3.2 对大鼠心脏质量指数的影响 与假手术组比
较 ,模型组 LVWI、HWI非常显著性地升高 (P<
0.01);给予卡托普利和鱼腥草干预后 , LVWI、HWI
显著性降低(P<0.01);而炮姜和附子对 LVWI、
HWI无明显降低作用。结果见表 2。
3.3 对心肌组织 AngⅡ、ET、Hyp含量的影响 与
假手术组比较 ,模型组心肌 AngⅡ 、ET含量明显升
高(P<0.01);与模型组比较 ,阳性对照药卡托普利
组 、鱼腥草组心肌 AngⅡ 、ET含量非常显著性地降
低(P<0.01);附子组 AngⅡ含量降低 ,炮姜无明显
降低心肌 AngⅡ作用;附子 、炮姜均无降低 ET含量
作用 。
表 2 鱼腥草 、炮姜 、附子对腹主动脉不完全结扎致
心室重构大鼠心脏肥厚指数的影响( x±s)
组别 剂量 n LVWI/(mg/g) HWI/(mg/g)
假手术组 — 9 2.18±0.10＊＊ 2.87±0.15＊＊
模型组 — 10 2.97±0.35 3.72±0.43
卡托普利组 40mg/kg 9 2.35±0.28＊＊ 3.00±0.32＊＊
鱼腥草组 27g/kg 10 2.57±0.25＊＊ 3.20±0.25＊＊
炮姜组 5.4g/kg 10 2.99±0.25 3.68±0.26
附子组 13.5g/kg 10 2.97±0.37 3.68±0.37
注:与模型组相比 ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
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与假手术组比较 ,模型组心肌组织 Hyp含量明
显升高(P<0.05或 P<0.01);与模型组比较 ,阳性
药卡托普利组 、鱼腥草组心肌组织 Hyp含量显著性
地降低(P<0.05),而炮姜和附子组无降低心肌组
织 Hyp含量作用 。结果见表 3。
表 3 鱼腥草 、炮姜 、附子对腹主动脉不完全结扎致心室重构大鼠心肌组织 AngⅡ 、ET、Hyp含量的影响( x±s)
组别 剂量 n AngⅡ含量 /(pg/mgprot) ET含量 /(pg/mgprot) Hyp含量 /(μg/mgprot)
假手术组 — 9 68.70±6.34＊＊ 12.01±5.24＊＊ 0.20±0.03＊＊
模型组 — 10 83.99±6.66 32.93±7.11 0.25±0.03
卡托普利组 40mg/kg 9 73.69±8.33＊＊ 14.61±4.76＊＊ 0.20±0.05＊
鱼腥草 27g/kg 10 69.48±7.24＊＊ 10.13±4.58＊＊ 0.22±0.01＊
炮姜组 5.4g/kg 10 79.10±6.28 31.59±7.74 0.24±0.03
附子组 13.5g/kg 10 70.01±6.82＊＊ 36.74±7.53 0.23±0.03
注:与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
3.4 对血清 ALD的影响 与假手术组比较 ,模型
组血清 ALD浓度明显升高(P<0.01);与模型组比
较 ,阳性对照药卡托普利组和鱼腥草组血清 ALD浓
度非常显著性地降低(P<0.01)。炮姜 、附子均无
显著降低血清 ALD浓度的作用。结果见表 4。
表 4 鱼腥草 、炮姜 、附子对腹主动脉不完全结扎
致心室重构大鼠血清 ALD含量的影响( x±s)
组别 剂量 n 血清ALD含量 /(ng/mL)
假手术组 — 9 0.51±0.06＊＊
模型组 — 10 0.94±0.27
卡托普利组 40mg/kg 9 0.59±0.09＊＊
鱼腥草组 27g/kg 10 0.55±0.11＊＊
炮姜组 5.4g/kg 10 0.76±0.14
附子组 13.5g/kg 10 0.74±0.13
注:与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
3.5 鱼腥草和附子对大鼠左心室心肌胶原含量的
影响
3.5.1 对心肌胶原容积分数(CVF)、心肌内血管周
围胶原面积(PVCA)的影响 组织形态学观察 ,在
苦味酸 -天狼星红染色下 ,胶原呈红色 ,分布于心肌
间隙及动脉周围。动脉周围胶原纤维有向细胞间质
呈放射状分布的趋势。假手术组心肌间隙及冠脉周
围有少量胶原纤维;模型组大鼠左心室肌间隙有大
量的胶原堆积 ,在心肌小动脉周围有大量的胶原增
生 ,并向血管周围的间质延伸;卡托普利组及鱼腥草
组可见有红色的胶原沉积于细胞间质及小动脉周
围 ,但较模型组轻;附子组在心肌间隙及冠脉周围仍
可见大量的胶原纤维。 (见图 1、2)
图 1 鱼腥草和附子对大鼠左心室血管周围胶原面积的影响 , 苦味酸-天狼猩红染色胶原图片(PVCA, ×400)
注:A.假手术组 , B.模型组 , C.卡托普利组 , D.鱼腥草组 , E.附子组
图 2 鱼腥草和附子对大鼠左心室心肌胶原容积分数的影响 , 苦味酸-天狼猩红染色胶原图片(CVF, ×400)
注:A.假手术组 , B.模型组 , C.卡托普利组 , D.鱼腥草组 , E.附子组
心肌胶原半定量分析 ,与假手术组比较 ,模型组 左心室心肌胶原含量(CVF、PVCA)明显增加 ,差异
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具有显著意义(P<0.01);与模型组比较 ,卡托普利
组和鱼腥草组心肌胶原含量明显减少 ,差异具有显
著意义(P<0.01),而附子组降低作用不明显(P>
0.05)。结果见表 5。
表 5 鱼腥草和附子对腹主动脉不完全结扎致
心室重构大鼠 CVF、PVCA的影响( x±s, n=6)
组别 剂量 CVF/% PVCA
假手术组 — 4.80±0.70＊＊ 2.145±0.436＊＊
模型组 — 8.20±0.60 5.407±1.078
卡托普利组 40mg/kg 5.90±0.40＊＊ 2.845±0.375＊＊
鱼腥草组 27 g/kg 5.50±0.30＊＊ 3.145±0.568＊＊
附子组 13.5g/kg 7.70±0.40 5.311±0.661
注:与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
3.5.2 对心肌间质Ⅰ 、Ⅲ型胶原含量的影响 在偏
振光显微镜下 , Ⅰ型胶原纤维显示很强的双折光性 ,
为黄色或红色的纤维 , Ⅲ型胶原纤维的折光性弱 ,为
绿色的纤维。假手术组心肌间隙及冠脉周围有少量
Ⅰ型和Ⅲ胶原纤维;模型组大鼠左心室肌间隙有大
量Ⅰ型和 Ⅲ胶原堆积 ,在心肌小动脉周围大量的胶
原向血管周围的间质延伸;卡托普利组及鱼腥草组
沉积于细胞间质及小动脉周围的 Ⅰ型和 Ⅲ胶原胶原
较模型组轻;附子组仍可见大量的 Ⅰ型和 Ⅲ胶原沉
积。 (见图 3、4)
在偏振光显微镜下取切片中血管以外的区域观
察胶原着色情况 ,用 Lamage-Proplus4.0图像分析
系统对心肌Ⅰ型 、Ⅲ型胶原进行半定量分析 ,与假手
术组比较 ,模型组左心室心肌 Ⅰ型 、Ⅲ型胶原百分比
例明显增高 ,差异具有显著意义(P<0.01),与模型
组比较 ,卡托普利组 、和鱼腥草组心肌 Ⅰ型 、Ⅲ型胶
原百分比例明显降低 , 差异具有显著意义 (P<
0.01、P<0.05)。结果见表 6。
图 3 鱼腥草和附子对大鼠左心室血管周围Ⅰ 、Ⅲ胶原面积的影响 ,苦味酸-天狼猩红染色胶原图片(×400)
注:A.假手术组 , B.模型组 , C.卡托普利组 , D.鱼腥草组 , E.附子组
图 4 鱼腥草和附子对大鼠左心室心肌间质Ⅰ 、Ⅲ胶原面积的影响 ,苦味酸-天狼猩红染色胶原图片(×400)
注:A.假手术组 , B.模型组 , C.卡托普利组 , D.鱼腥草组 , E.附子组
表 6 鱼腥草和附子对腹主动脉不完全结扎致心室
重构大鼠心肌Ⅰ 、Ⅲ型胶原含量的影响( x±s, n=6)
组别 剂量 Ⅰ型胶原 /% Ⅲ型胶原 /%
假手术组 — 0.314±0.034＊＊ 0.274±0.065＊＊
模型组 — 0.757±0.242 0.594±0.209
卡托普利组 40mg/kg 0.362±0.060＊＊ 0.382±0.051＊
鱼腥草组 27 g/kg 0.319±0.046＊＊ 0.375±0.038＊
附子组 13.5g/kg 0.542±0.024 0.546±0.073
注:与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
3.6 鱼腥草和附子对 PKC表达的影响 免疫组化
染色显示 , PKC蛋白表达于细胞浆内 ,胞浆内有棕
黄色颗粒为 PKC表达阳性细胞。 PKC蛋白表达在
假手术组心肌细胞内仅见少许棕色小颗粒表达 ,染
色较弱;模型组 PKC强阳性表达 ,在细胞胞浆内可
见大量棕色颗粒状物表达;鱼腥草组 PKC表达量较
模型组显著性减少;附子组细胞浆内仍可见大量棕
色颗粒 , PKC蛋白表达较强。(见图 5)
每张切片随机选择 5个视野 ,选用 areasum和
IODsum测量值的对数值反映 PKC在心肌中的表
达情况。结果发现腹主动脉不完全结扎大鼠模型组
PKC阳性细胞数较假手术组明显增多(P<0.01),
卡托普利组 、鱼腥草组心肌组织内 PKC阳性细胞数
较模型组明显减少(P<0.01),附子组心肌组织内
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PKC阳性细胞数无明显减少(P>0.05)。结果见表 7。
图 5 鱼腥草和附子对大鼠左心室 PKC表达的影响(×400)
注:A.假手术组 , B.模型组 , C.卡托普利组 , D.鱼腥草组 , E.附子组
表 7 鱼腥草和附子对腹主动脉不完全结扎致
心室重构大鼠心肌 PKC表达的影响( x±s, n=6)
组别 剂量 面积 /Area 累积光密度 /IOD
假手术组 — 5.01±0.04＊＊ 4.47±0.08＊＊
模型组 — 5.34±0.05 4.73±0.03
卡托普利组 40mg/kg 5.06±0.05＊＊ 4.52±0.06＊＊
鱼腥草组 27 g/kg 5.09±0.07＊＊ 4.56±0.03＊＊
附子组 13.5g/kg 5.23±0.12 4.73±0.13
注:与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
4 讨论
心室重构是一个非常复杂的过程 。在初始的心
肌损伤(心肌梗死 、炎症 、血流动力学负荷过重等)
以后 ,有各种不同的继发性因素直接或间接作用于
心肌而促进心室重构 。包括:神经内分泌激活 ,细胞
因子的活化 ,细胞内信息传导通路的改变 ,基因表达
的异常和多种基因之间的相互作用等 。在心室重构
的发病机制中神经内分泌因素较血流动力学等因素
可能更为重要 [ 1] 。神经内分泌细胞因子系统的长
期 、慢性激活促进心肌重构 ,加重心肌损伤和心功能
恶化。心功能恶化又进一步激活神经内分泌细胞因
子等 ,形成恶性循环。现已发现参与心室重构的神
经内分泌因子和自分泌 /旁分泌因子主要有:儿茶酚
胺(CA)、血管紧张素 Ⅱ (AngⅡ)、醛固酮 (ALD)、
血管内皮素 -1(ET-1)等。
本实验结果显示腹主动脉结扎大鼠引起模型动
物血压增高 , LVWI、HWI显著增加 ,心肌组织 Ang
Ⅱ 、ET含量 ,血清 ALD浓度明显增加 ,心肌组织
Hyp含量 、心肌胶原容积分数(CVF)、心肌组织血管
周围胶原面积 、心肌间质Ⅰ 、Ⅲ型胶原含量明显升高
等心室重构的特征性改变 。说明该模型动物已形成
心室重构及与此相关的肾素-血管紧张素 -醛固酮系
统以及血管内皮素分泌等神经内分泌系统的过度激
活 。
蛋白激酶 C(PKC)是体内广泛存在的一大类
苏 /丝氨酸激酶家族 。 PKC与调控细胞增殖 、分化
有关 [ 7] ,近年来研究发现 ,过度激活的 PKC可导致
心肌肥厚 。AngⅡ可与心肌细胞膜上的 AT1特异性
受体结合 , ET可与心肌细胞膜上的 ETA特异性受
体结合 ,通过与 G蛋白耦联 ,激活磷脂酶 C(PLC),
水解细胞膜中的 4, 5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2),生
成第二信使物质 ,即三磷酸肌醇 (IP3)和二酰甘油
(DG)。 IP3可诱导心肌细胞内 Ca2+贮存库释放
Ca2 +至胞浆 ,使心肌细胞浆内 Ca2+浓度升高 。DG
是 PKC的内源性激动剂 。细胞内 Ca2 +浓度升高和
PKC活化可激活细胞核内的早反应原癌基因如 c-
fos、c-myc、c-jun、Egr-1等 。这些早反应原癌基因的
编码蛋白质 ,可作为核内信使(第三信使)或转录调
节因子 ,调控次级反应基因 ,从而引起心肌蛋白质合
成加快 ,细胞体积增加 ,心肌间质细胞增殖 ,促进胶
原合成与分泌 ,导致心肌肥厚 [ 8] 。本研究显示 ,腹
主动脉不完全结扎模型组动物心肌 PKC表达增高。
附子 、炮姜为热性中药 ,临床常用附子 、干姜等
组方(如四逆汤)用以回阳救逆。资料显示 ,其确能
改善心衰患者血流动力学障碍 ,缓解患者的症状。
但近年国外大样本 、多中心 、随机双盲对照的临床试
验结果显示 ,心衰发展至血流动力学障碍阶段再用
改善血流动力学药物如强心苷 、β受体激动剂如多
巴酚丁胺等治疗 ,虽然能短期改善患者的症状 ,但无
法制止病程的进展 ,延长患者的寿命 ,尤其长期使用
β受体激动剂反而会缩短患者的寿命。 CHF的治疗
概念近年有了根本性的改变 ,已发现 ,更为有效的措
施是及早用药 ,制止心室重构的发生与发展。本实
验显示对压力超负荷引起的心室重构及与此相关的
肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统以及血管内皮素分泌
等神经内分泌系统的过度激活 、PKC表达增高 ,附
子 、炮姜并无明显作用。
鱼腥草性微寒 ,味辛 ,归肺经 。具清热解毒 ,消
痈排脓 ,利尿通淋之效。最新研究表明[ 6] , 鱼腥草
能预防血管血栓形成 ,促进血液循环 ,对动脉硬化 、
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第 31卷 第 1期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
January2009
Vol.31 No.1
高血压 、心肌梗死 、脑血栓 、脑溢血等病症有一定的
预防和改善作用 。本实验显示鱼腥草具有抑制心室
重构及与此相关的肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统以
及血管内皮素分泌等过度激活的作用 。鱼腥草同时
明显减少心肌 PKC表达 ,表明其可抑制 AngⅡ 、ET
等神经内分泌因子介导的心室重构信号传导通路 ,
对抗心室重构 ,防治心衰的发生与发展。
我们曾报道寒性复方加减玉女煎 、增液汤 ,以及
寒性药葶苈子 、玄参 [ 4, 5]具有明显抗实验性心室重
构 、抑制神经内分泌因子过度激活的作用 ,对比研究
则显示热性复方四逆汤无改善心室重构的作
用 [ 9, 10] 。本次比较研究结果表明寒性药鱼腥草有明
显抗压力超负荷引起的心室重构 、神经内分泌因子
过度激活的作用 。而热性药附子 、炮姜无上述作用 。
因此 ,我们推测:寒凉药性有利于抑制肾素-血管紧
张素 -醛固酮过度激活及心室重构的发生与发展 。
虽然这一推测已经得到一些试验结果的支持 ,要证
实这一推测还需进行更多寒热不同药性药物之间的
对比研究。
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比较研究 [ J] .中国实验方剂学杂志 , 2008, 14(5):58-62.
山东新药研发数量连续 5年居全国首位
据山东省经贸委负责人介绍 ,近 5年来 ,山东共获得新药批准证书 900多个 ,其中一类新药 23个 ,上报
新药占全国的 1/9,在新药研发数量领域连续 5年居全国首位。
在 25日举行的山东省医药产业工作会议上 ,山东省经贸委主任郭述禹介绍说 , “十五 ”末时 ,山东医药
仅排名全国第 4位 ,位居江苏 、浙江和广东之后 。经过 “十一五 ”以来的持续快速增长 ,到 2007年底 ,山东省
规模以上医药工业生产企业达到 543家 ,与 “十一五 ”末相比增加 118家;医药工业实现销售收入 985亿元 ,
增长 80%;实现利税 129亿元 ,增长 93%;实现利润 88亿元 ,增长 102%。从 2006年开始 ,山东医药工业销
售收入 、利税 、利润等各项主要经济指标位居全国第一位 。
经过近几年的产品结构优化调整 ,山东省医药行业在保持化学药品特别是原料优势的基础上 ,在中药现
代化 、医疗器械和生物制药发展方面取得一定突破 ,高新技术产品比重不断增加。到 2007年底 ,阿司匹林 ,
氨基比林 、安乃近 、咖啡因 、扑热息痛等化学药品 ,重组人粒细胞集落刺激因子和重组人白介素 -11等生物药
物 ,一次性注射器 、输液器等医疗器械 ,药用玻璃等包装材料 ,阿胶等中成药产品的产量和国内市场占有率均
居全国前茅 。
“十一五 ”以来 ,新华制药 、鲁抗医药等大型国有企业经济效益逐步改善 ,进入新一轮增长期。同时 ,齐
鲁制药 、鲁南制药 、威海威高等一批新兴企业脱颖而出 ,成为推动山东省医药经济持续快速增长的重要力量。
2007年 ,山东省有 11家医药企业销售收入或利税进入全国 50强。
(信息由新华社提供)
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