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蓬莪术醋制前后“行气破血”功效变化对比研究



全 文 :— 29 —现代中药研究与实践2015年第29卷第2期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.2
·药理药化·
基金项目: 国家自然科学基金青年基金(81403103);四川省科技创新苗子工程资助项目(2013306);四川省教育厅面上项目(2013SZB0781);四川省中医药
     管理局科技专项(2012-E-041)
作者简介 : 甘彦雄(1990-),男,硕士,从事新制剂、新剂型和中药炮制工艺与机理研究工作。E-mail :ganyanxiong@139.com
通讯作者 : 廖 婉(1983-),女,博士,讲师,从事新制剂、新剂型和中药炮制工艺与机理研究工作。E-mail :liaowan2011@126.com
蓬莪术醋制前后“行气破血”功效变化对比研究
甘彦雄,赵思蕾,罗妮妮,刘哿吚,傅 舒,廖 婉 * ,傅超美
( 成都中医药大学药学院,中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地,
四川 成都 611137)
摘 要:目的 探明醋制对蓬莪术“行气破血”功效的影响,为中医临床合理应用蓬莪术生品及醋制
品提供理论依据。方法 以小鼠肠推进法、胃排空法观测其对胃肠运动作用,以毛细玻璃管法测定全血凝
血时间,以鼠尾横切法测定小鼠尾出血时间,基于“气滞血瘀”模型和“寒凝血瘀”模型测定大鼠全血黏
度高、中、低切变速率和血浆黏度、血细胞压积、聚集指数等血液流变指标。结果 蓬莪术醋制前后对小
鼠胃肠推动功能均有一定作用,且生品略强;醋制后抗凝血功能增强,且能明显改善血液流变指标,其作
用对“气滞血瘀”模型大鼠强于“寒凝血瘀”模型大鼠。结论 蓬莪术生品行气作用略强,醋制品破血之
效更胜一筹,且更适宜用于“气滞血瘀”。
关键词:蓬莪术;醋制;行气破血;血液流变学;气滞血瘀;寒凝血瘀
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2015)02-29-04
doi: 10.13728/j. 1673-6427. 2015. 02. 009
Comparative Research on Effi cacy of Promoting the Flow of Qi and Eliminate Blood
Stasis of Curcuma Rhizoma before and after Processing with Vinegar
GAN Yan-xiong, ZHAO Si-lei, LUO Ni-ni, LIU Ge-yi, FU Shu, LIAO Wan*, FU Chao-mei
(Pharmacy College, Chengdu University of TCM, Chengdu 611137, China)
Abstract: Objective To explore the efficacy of promoting the flow of qi and eliminate blood stasis
of Curcuma Rhizoma before and after processing with vinegar, to provide theoretical basis of reasonable
application and to present the reasons for choosing raw products or vinegar products in the clinic practice.
Methods The gastrointestinal movement was determined by intestinal propulsion and gastric emptying; the
whole blood activated clotting time was determined by glass capillary; the bleeding time of mice was determined
by crosscutting rat tail; the hemodynamic indexes were determined based on the rat model of stagnation of
vital energy and blood stasis and the rat model of cold coagulation and blood stasis. Results Both the raw and
vinegar products of Curcuma Rhizoma have some efficacy of gastrointestinal promoting, especially the raw
product; compared with raw product, the anticoagulant function of vinegar products’ has been enhanced, and the
hemodynamic indexes were improved, especially to the rat model of stagnation of vital energy and blood stasis.
Conclusion Curcuma Rhizoma raw products are better to promoting the fl ow of qi, and the vinegar products are
better to eliminate blood stasis, especially to treat the stagnation of vital energy and blood stasis.
Key words: Curcuma phaeocaulis; vinegar processed ; promoting the flow of qi and eliminate blood
stasis;hemorheology; stagnation of vital energy and blood stasis; cold coagulation and blood stasis
莪术为姜科植物蓬莪术 (Curcuma phaeocaulis
Val.)、广西莪术 (Curcuma kwangsiensis S. G. Lee et C. F.
Liang) 和温郁金 (Curcuma wenyujin Y. H. Chen et C. Ling )
的干燥根茎,具有破血行气、消积止痛的功效 [1]。《本
草纲目》曰 : “蓬莪蒁入肝,通肝经聚血,破气中之
血”、“今人多以醋炒或煮熟入药,取其引入血分也”。
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《本草便读》云 :“嫌其峻厉,当以醋炒用之”。《药
物出产辨》记载“蓬莪术,产四川为正地道”。中医
理论认为 ,醋性味酸苦微温 ,入肝经血分 ,具有收敛、
散瘀止血等作用 , 故蓬莪术醋制后,既增强“破积消
坚,去积聚癖块”之效,又缓其峻猛药性。目前有研
究报道莪术不同部位 [2] 以及有效成分如莪术醇和莪
术二酮的活血化瘀功效 [3-4] ;也有研究报道其不同炮
制品的活血化瘀功效 [5] ;此外,有研究报道醋莪术炮
制前后微量元素的变化 [6],也有针对醋莪术血液流变
学的谱效相关性研究 [7-8]。然而对川产道地药材蓬莪
术醋制前后功效变化研究较少,并未见对其生品和醋
制品的“行气破血”功效进行对比的作用机制研究。
为完善目前蓬莪术醋制前后“行气破血”功效差
异研究的不足,本论文研究蓬莪术醋制前后对小鼠胃
肠推进功能的影响、对小鼠凝血及出血时间的影响、
对“寒凝血瘀”模型和“气滞血瘀”模型大鼠血液流
变的影响等内容,旨在探明蓬莪术醋制前后“行气破
血”功效变化的作用机制,探讨蓬莪术生品及醋制品
长于治疗的证型,为中医临床合理应用蓬莪术生品及
醋制品提供理论依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
MDK-3200AR 单转全自动血流变仪(重庆麦迪
克科技开发有限公司);MEK-6318K 血液全自动分析
仪(日本光电工业株式会社公司)。
1.2 实验动物
KM 小鼠,雌雄各半,体重 18 ~ 22 g,由四川
省医学科学院实验动物研究所提供,动物许可证号
SCXK(川)2008-15 ;Wistar 大鼠,雌雄各半,体重
175 ~ 225 g,由四川省医学科学院实验动物研究所提
供,动物许可证号 SCXK(川)2008-24。
1.3 试药
甲硫酸新斯的明注射液,上海信谊药业有限公
司,批号 101201 ;盐酸肾上腺素注射液,广州白云
山制药有限公司,批号 100503 ;银杏叶片,哈尔滨
泰华药业股份有限公司,批号 Z20106215 ;阿司匹
林,石家庄神威药业股份有限公司,批号 A100806 ;
复方丹参片,中山市恒生药业有限公司,生产批号
Z20103069;9°米醋,上海淘大食品有限公司,批号
20100315。莪术饮片生品,四川新荷花中药饮片厂,
批号:101012,经成都中医药大学生药学教研室卢
先明教授鉴定为姜科植物蓬莪术Curcuma phaeocaulis
Val. 的干燥根茎。
醋制品由上述生品以最佳炮制方法 [9-10] 自制:取
莪术饮片适量,加入30%米醋,拌匀焖润2 h,煮至醋
液收干,置于120 ℃中干燥30 min,取出稍冷即得。称
取蓬莪术生品及醋制品饮片各 100 g,分别加 15倍水,
浸泡 30 min,煎煮 2次,每次 0.5 h,趁热滤过,合并
煎液,50 ℃减压浓缩至2 g·ml-1,贮存于4 ℃冰箱备用。
2 方法与结果
2.1 蓬莪术醋制前后对小鼠胃肠推进功能的影响
2.1.1 对正常小鼠小肠运动的影响  取小鼠随机
均分为 8组,即空白对照组和阳性对照组(甲硫酸新
斯的明 0.11 mg·kg-1) ,蓬莪术生品及醋制品高、中、
低剂量组(30,20,10 g·kg-1)。给药组小鼠灌胃给
予相应量蓬莪术生品及醋制品水煎液,空白对照组和
阳性对照组灌胃给予等容积的生理盐水,给药量均
为 0.02 mL·g-1,每天 1 次,连续 7 d。末次给药前
禁食不禁水 12 h,阳性组的末次给药为 0.11 mg·kg-1
甲硫酸新斯的明。给药或给予生理盐水 30 min 后,
灌胃给予每只小鼠 0.2 ml 炭末混悬液 (10% 活性炭和
10%阿拉伯树胶 )。20 min 后处死小鼠,取出小肠铺
平,测量小肠全长与炭粉混悬液从幽门括约肌推至小
肠末端的距离,计算小肠的推进率。
2.1.2 对正常小鼠胃排空的影响  将小鼠按上述
方法分组并给药。末次给药前禁食不禁水 12 h,阳性
组的末次给药为 0.11 mg·kg-1 甲硫酸新斯的明。给
药或给生理盐水 30 min 后,每只小鼠分别给予 0.2 ml
的 0.1% 甲基橙溶液。20 min 后脱臼处死小鼠,取胃
并将其内容物充分洗于蒸馏水中,定容至 10 ml,以
2×103 r·min-1 离心 10 min。取上清液,在 420 nm
波长处测定吸光度,即为胃中甲基橙的光密度。取 0.2
ml 0.1% 甲基橙定容至 10 ml 蒸馏水中,摇匀后测定
吸光度,作为基数甲基橙吸光度。按“胃中甲基橙的
吸光度 / 基数甲基橙的吸光度×100%”,计算甲基橙
在胃内的残留率。
采用 SPSS 13.0 统计软件,数据以 X±S (平均值
±标准差)表示,组间比较采用 One-way ANOVA 检
验,P < 0.05 为有统计意义。结果见表 1。
表1 蓬莪术醋制前后对正常小鼠小肠运动和胃排空的影响(X±S, n=10)
Tab.1 The effect of Curcuma Rhizoma before and after processing with vinegar
on small intestine movement and gastric emptying of normal mice (X±S, n=10)
组别 小肠推进率(%) 胃残留率(%)
空白对照组 46.43±0.24 59.26±0.22
阳性对照组 95.42±0.252 72.38±0.25(2)
醋品高剂量组 89.53±0.32(2) 42.18±0.28(2)
醋品中剂量组 80.52±0.21(2) 48.53±0.27(2)
醋品低剂量组 72.34±0.34(1) 53.32±0.33(1)
生品高剂量组 92.32±0.46(2) 37.26±0.26(2)
生品中剂量组 83.52±0.26(2) 45.28±0.46(2)
生品低剂量组 75.42±0.34(1) 50.37±0.44(1)
注 :给药组与空白对照组比较,(1) P < 0.05,(2) P < 0.01。
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由表 1可知,蓬莪术醋制前后对正常小鼠小肠推
进和胃排空均有明显促进作用,蓬莪术生品与醋制品
作用无明显差异,但蓬莪术生品对小鼠胃肠运动推动
作用有强于其醋制品的趋势。
2.2 蓬莪术醋制前后对小鼠凝血及出血时间的影响
2.2.1 凝血时间考察  采用毛细玻璃管法测定全
血凝血时间 (coagulant time,CT)。将小鼠随机分为 9
组,即空白对照组(等容积生理盐水);中药阳性对
照组(银杏叶片 6 g·kg-1);西药阳性对照组(阿司
匹林 0.1 g·kg-1);蓬莪术生品及醋制品高、中、低
剂量组(30,20,10 g·kg-1)。分别按“2.1”中给药
方法连续给药 7 d 后,禁食禁水 12 h,给药 30 min 后
将内径 1 mm 玻璃毛细管插入小鼠内眦球后静脉丛取
血,自血液流入管内开始计时,血液注满毛细管后
取出,每隔 30 s 折断约 0.5 cm 含血柱的毛细管,并
缓慢向左右拉开,仔细观察折断血柱时有无凝血丝出
现,计算从采血到有凝血丝出现的时间 , 即为 CT,
将各组与空白组相比,计算各给药组 CT延长率。
2.2.2 出血时间考察  采用鼠尾横切法测定小鼠
尾出血时间 (bleeding time,BT)。动物分组及给药方
法同上。将小鼠置于固定器中,使其尾部垂直,于
尾尖处剪断鼠尾。每隔 30 s 用滤纸轻吸尾尖血液,
直至滤纸上无新鲜血迹,记录断尾至出血停止时间,
将各组与空白组相比,计算各给药组 BT 延长率。实
验数据处理方法同“2.1”。结果见表 2。
表 2 蓬莪术醋制前后对小鼠凝血时间及出血时间的影响(X±S , n=10)
Tab.2 The effect of Curcuma Rhizoma before and after processing with
vinegar on clotting time and bleeding time of normal mice (X±S, n=10)
组别 CT(s) CT延长率%) BT(s) BT 延长率(%)
空白对照组 139.3±8.9 — 205.1±11.3 —
阿司匹林组 485.7±8.7(2) 249.64 759.4±12.5(2) 270.25
银杏叶片组 433.8±11.2(2) 212.08 494.9±22.9(2) 141.29
生品高剂量组 360.9±14.4(2) 159.64 848.3±51.9(2) 313.45
生品中剂量组 250.3±13.5(2) 80.07 480.8±34.1(2) 134.03
生品低剂量组 196.6±13.1(2) 41.43 415.4±25.5(2) 102.53
醋品高剂量组 389.6±15.6(2) 180.28 1025.2±53.5(2)(3) 399.85
醋品中剂量组 315.0±10.7(2)(3) 126.61 715.5±17.9(2)(3) 248.85
醋品低剂量组 211.2±13.5(2) 51.94 412.2±28.6(2) 100.97
注:给药组与空白对照组比较,(1) P < 0.05,(2) P < 0.01 ;醋制品组与
生品组比较,(3) P < 0.05。
由表 2可知,蓬莪术生品和醋制品高、中、低剂
量组与空白组相比,凝血和出血时间均具有不同程度
的延长,且蓬莪术醋制品各剂量组的抗凝血作用分别
强于生品各剂量组,其高、中剂量组延长出血时间作
用分别强于生品的高、中剂量组。
2.3 蓬莪术醋制前后对大鼠血液流变学的影响
2.3.1 “气滞血瘀证”模型 将大鼠随机分为 9
组,即空白对照组(等容积生理盐水);模型对照组
(等容积生理盐水);中药阳性对照组(复方丹参片1.5
g·kg-1);蓬莪术生品及醋制品的高、中、低剂量组
(30,20,10 g·kg-1)。除空白对照组外,各实验组
动物每日 1次肌注氢化可的松 10 ml·kg-1 连续 7天,
同时造模期间灌胃给予相应药物,7.5 ml·kg-1,每
天 1次。第 8天给予除空白组外的各组大鼠皮下注射
0.1% 盐酸肾上腺素 0.1 ml,即得“气滞血瘀证”大
鼠模型 [11-12]。造模后禁食,次日灌胃给药后 2 h 自股
动脉取血,滴入含肝素钠抗凝试管,另取 20 μl 抗
凝全血备用以测定血细胞压积。
2.3.2 “寒凝血瘀证”模型 分 组及给药方法
同上。第 8 天给予除空白对照组外的各组大鼠均皮
下注射 0.1% 盐酸肾上腺素 0.1 ml, 再放入冰水中 5
min,上、下午各进行一次,即得“寒凝血瘀证”大
鼠模型 [13,14]。取血方式同上。以 MDK-3200AR 单
转全自动血流变仪和 MEK-6318K 血液全自动分析仪
测定血液流变学指标:全血黏度高切变速率 ( 高切 )、
中切变速率(中切)、低切变速率(低切),血浆黏度,
血细胞压积,聚集指数。实验数据处理方法同 2.1。
结果见表 3、表 4。
由表 3、表 4可知,蓬莪术醋制前后高剂量组对
“气滞血瘀”型和“寒凝血瘀”型两种“瘀证”大鼠
模型各血液流变指标均有明显的改善作用,但对两种
“瘀证”模型动物作用强度有所不同。对“气滞血瘀”
型大鼠,蓬莪术醋制前后高、中、低剂量组均有显著
改善作用,尤其在血浆黏度、血细胞聚集行为方面,
醋制品高剂量作用显著强于生品高剂量;但对“寒凝
血瘀”型大鼠,仅蓬莪术醋制前后高、中剂量组有显
著改善作用,且仅醋制品高剂量组降低血细胞压积作
用明显强于生品高剂量。
3  结论与讨论
中医理论认为,气行则血行,如若气虚或气滞,
则血行迟缓乃至形成瘀血 [15]。现代研究表明,某些
归脾经的中药,其“行气”功效常表现出胃肠推动作
用。本研究表明蓬莪术醋制前后均有一定的胃肠促进
作用,且生品表现得更强,证实了其生用“长于行气
消积”的作用。
小鼠凝血及出血实验表明蓬莪术醋制前后均具
有显著“破血”作用,但醋制后其凝血和出血时间
延长作用更强,说明醋制品“活血”功效强于生品,
但其抗凝血作用是否是由于其参与血凝级联反应中
内源性相关通路引起,还需进一步研究。蓬莪术对
CT、BT 的延长作用,提示我们在应用蓬莪术降黏抗
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表 3 蓬莪术醋制前后对“气滞血瘀”型大鼠血液流变指标的影响(X±S, n=10)
Tab.3 the effect of Curcuma Rhizoma before and after processing with vinegar on hemodynamic indexes of the rat model of stagnation of vital energy and
blood stasis (X±S, n=10)
组别 全血黏度(MPa
·s) 血浆黏度 (100.0 s-1) 红细胞聚集指数 血沉(mm·h-1) 血细胞压积(%)高切 (200.0 s-1) 中切 (30.0 s-1) 低切 (3.0 s-1)
空白组 4.21±0.08 7.85±0.06 12.53±0.09 1.36±0.05 9.21±0.08 1.36±0.06 38.9±0.17
模型对照组 6.13±0.15 9.71±0.11 18.23±0.13 1.69±0.08 10.79±0.07 7.48±0.06 58.41±0.21
阳性对照组 4.65±0.11(2) 6.58±0.10(2) 13.74±0.18(2) 1.42±0.12(2) 9.68±0.06(1) 3.74±0.07(2) 44.42±0.18(2)
醋品高剂量组 4.64±0.13(2)(3) 7.21±0.09(1) 14.46±0.11(1) 1.45±0.03(1)(3) 9.75±0.08(1)(3) 5.13±0.06(2)(3) 35.21±0.19(2)(3)
醋品中剂量组 5.09±0.15(1) 7.59±0.12(1) 15.41±0.11(1) 1.52±0.04(1) 10.01±0.06(1) 5.52±0.05(1) 38.35±0.24(1)(3)
醋品低剂量组 5.63±0.13 7.82±0.15 16.01±0.09 1.54±0.09 10.12±0.09(1) 6.20±0.09(1) 48.62±0.26(1)
生品高剂量组 5.18±0.09(1) 7.18±0.11(1) 15.16±0.12(1) 1.51±0.04(1) 10.20±0.11(1) 5.57±0.06(1) 44.80±0.21(2)
生品中剂量组 5.33±0.12 7.66±0.15(1) 15.82±0.13(1) 1.54±0.05(1) 10.23±0.09(1) 5.96±0.05(1) 46.58±0.19(1)
生品低剂量组 5.54±0.11 8.02±0.13 16.26±0.12 1.59±0.06 10.27±0.06 6.48±0.07(1) 50.35±0.28(1)
注 :给药组与模型对照组比较,(1) P < 0.05,(2) P < 0.01 ;醋制品组与生品组比较,(3) P < 0.05。
表 4 蓬莪术醋制前后对“寒凝血瘀”型大鼠血液流变指标的影响(X±S, n=10)
Tab.4 the effect of Curcuma Rhizoma before and after processing with vinegar on hemodynamic indexes of the rat model of cold coagulation and blood
stasis ( X±S, n=10)
组别 全血黏度(MPa
·s) 血浆黏度 (100.0 s-1) 红细胞聚集指数 血沉(mm·h-1) 血细胞压积(%)高切 (200.0 s-1) 中切 (30.0 s-1) 低切 (3.0 s-1)
空白组 4.15±0.06 7.58±0.06 11.87±0.09 1.29±0.08 8.86±0.03 2.11±0.06 36.7±0.15
模型对照组 7.05±0.11 10.15±0.09 18.69±0.12 1.82±0.07 10.81±0.04 8.28±0.06 68.23±0.24
阳性对照组 4.69±0.09(2) 7.11±0.10(2) 13.56±0.13(2) 1.35±0.08(2) 9.70±0.04(1) 4.65±0.03(2) 37.68±0.15(2)
醋品高剂量组 4.88±0.11(2) 8.19±0.09(2) 15.23±0.10(1) 1.56±0.03(1) 9.86±0.04(1) 6.17±0.05(2) 42.16±0.16(2)(3)
醋品中剂量组 5.77±0.10(1) 8.28±0.11(1) 15.75±0.08(1) 1.59±0.04(1) 9.98±0.05 6.76±0.04(1) 50.14±0.19(2)
醋品低剂量组 6.88±0.12 9.47±0.15 17.21±0.09 1.74±0.09 10.15±0.06 7.65±0.06(1) 59.88±0.20(1)
生品高剂量组 5.13±0.10(2) 7.98±0.10(2) 15.44±0.11(1) 1.59±0.06(1) 9.96±0.07(1) 6.52±0.05(2) 51.25±0.19(2)
生品中剂量组 5.79±0.12 8.58±0.11(1) 15.83±0.09(1) 1.61±0.05(1) 10.02±0.06 6.96±0.03(1) 56.18±0.18(1)
生品低剂量组 6.78±0.11 9.42±0.13 17.12±0.12 1.78±0.06 10.15±0.06 7.48±0.06 64.33±0.20
注:给药组与模型对照组比较,(1) P <0.05,(2) P < 0.01 ;醋制品组与生品组比较,(3) P < 0.05。
凝的同时,可能会引起“脾不统血、肝不藏血”症候
患者及月经者、孕妇等出血不止的不良反应。
蓬莪术以“行气破血,消积止痛”之功,临床上
常用于“寒凝血瘀”和“气滞血瘀”型症候。血液流
变学研究表明,蓬莪术对“气滞血瘀”型症候病况有
改善作用,且醋制品强于生品,对“寒凝血瘀”型证
候有一定的改善作用,但作用强度较小。证实了中医
理论中蓬莪术性辛、温,对于寒凝血瘀证能起到“辛
开温散”作用的观点,其主要功效为“行气破血”,
气滞则瘀生,气行而瘀散,因此更适用于治疗“气滞
血瘀”型症候。
参考文献
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收稿日期:2014-08-06