全 文 :不同植物激素对罗汉果快速繁殖的影响
张丽珍 1 ,杨冬业 2* ,刘贤贤 1 (1.桂林师范高等专科学校 ,广西桂林 541001;2.桂林医学院 ,广西桂林 541001)
摘要 [目的]获得高质量的罗汉果组培苗。 [方法 ]分别通过在培养基里加入不同的浓度的 6-BA和IBA来培养罗汉果组培苗。 [结
果]在培养基中加入 1mg/L的 6-BA利于罗汉果的快速繁殖 ,其芽的增殖系数达到 5.75;0.5mg/L的IBA最适于罗汉果根的分化。 [结
论]不同浓度、不同种类的植物激素对罗汉果的快速繁殖影响有差异。该试验得出了适合罗汉果组织培养的激素种类和浓度 ,这为获得
高质量的罗汉果组培苗奠定了基础
关键词 罗汉果;植物激素;快速繁殖
中图分类号 S567.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)33-18798-02
EfectofDiferentPlantHormonesontheRapidPropagationofMomordicagrosvenoriSwingle
ZHANGLi-zhenetal (GuilinNormalColege, Guilin, Guangxi541001)
Abstract[ Objective]Theresearchaimedtoobtainhigh-qualitytissuecultureseedlingsofMomordicagrosvenoriSwingle.[Method] Momordica
grosvenoriSwinglewasculturedinthemediumwith6-BAandIBAofdiferentconcentrationin.[ Result] Themediumwith1mg/L6-BAinwas
beneficialtotherapidpropagationofMomordicagrosvenoriSwinglewiththeproliferationcoeficientreaching5.75.IBAof0.5mg/Lwassuitable
forthediferentiationofMomordicagrosvenoriSwingleroot.[Conclusion]Effectofplanthormoneswithdiferentkindsanddiferentconcentrations
ontherapidpropagationofMomordicagrosvenoriSwinglevaried.Theoptimumplanthormoneswithproperconcentrationforthetissuecultureof
MomordicagrosvenoriSwingleweregainedinthisstudy, whichprovidedbasisforobtaininghigh-qualityMomordicagrosvenoriSwingleseedlings.
Keywords MomordicagrosvenoriSwingle;Planthormone;Rapidpropagation
作者简介 张丽珍(1979-),女 ,广西贵港人 ,硕士 ,讲师 ,从事生物学
教学与植物组织培养的研究。 *通讯作者 ,硕士 ,讲师 , E-
mail:grsxk@ 126.com。
收稿日期 2010-08-09
罗汉果(MomordicagrosvenoriSwingle),又名长寿果 ,是
葫芦科罗汉果属 ,多年生草质藤本作物 ,为我国特产 ,主要分
布在广西 、广东 、湖南 、江西及贵州等省区 ,其中广西永福县
是全国最大的罗汉果生产基地。其果实供药用 ,是 1种多用
途的药用和保健果品。据 《中药大辞典 》记载 ,罗汉果味极
甜 ,性凉 ,无毒 ,具有清肺止咳 、润肠通便 、清热解毒 、祛痰补
血 、止渴 、抑制哮喘及降压等功效 [ 1] 。 1977年罗汉果被《中国
药典 》收载作为中药使用 , 1987年被卫生部列为既是药品又
是食品的中药。罗汉果不仅是治病良药 ,而且是清凉解暑的
上等天然饮料果品。当前国际研究成果表明 ,长期食用高热
值蔗糖是糖尿病 、肥胖症等疾病的原因;罗汉果具有独特的
功效 ,其制品为纯天然的低热值非糖甜品 ,且不需添加任何
添加剂 ,适应当前国际食品发展的方向 ,具其在配制中成药
方面也有很大的发展空间。因此 ,开发罗汉果系列产品在国
内外市场都有着广阔的前景。
利用罗汉果的茎 、叶进行组织培养的有一些报导 [ 2-3] ,
但利用罗汉果腋芽为材料进行组织培养的研究尚未见报道。
笔者以罗汉果的腋芽为材料进行组织培养 ,以期获得高生活
力 、高产率和高品质的罗汉果组培苗 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。健壮无病带有腋芽的罗汉果茎段。
1.1.2 主要试剂。6-BA、IBA,由上海生工生物工程公司生产。
1.2 方法
1.2.1 材料预处理。将罗汉果茎段用自来水冲洗干净 ,截
成 1.5 cm左右的小段 ,每段带有 1 ~ 2个侧芽 ,用 75%的酒
精消毒 30 s,再使用 0.1%的升汞溶液进行灭菌 5 ~ 8 min,用
无菌水冲洗 3 ~ 5次 ,留着备用。
1.2.2 培养基的配制 。用 MS培养基为基本培养基 ,加入
3%蔗糖和 0.7%琼脂 ,调其 pH值为 5.8 ~ 6.0,在不同的培
养阶段再加入不同浓度 6-BA和 IBA;将培养基分装到 200ml
的培养瓶中 ,在 121 ℃、0.10 ~ 0.15 Mpa压力下灭菌 20 min。
1.2.3 罗汉果的接种和培养。将准备好的材料接种到诱导分
化培养基中 ,每瓶接种 3~ 5个 ,不要插入培养基太深;将接种
好的培养瓶放在光照 2 000 lx、温度 25 ℃的培养室中培养。
1.2.4 转移生根 。将培养好的植株选出好的壮苗截取 3.0
~ 4.0 cm,再接种到诱导长根的培养基中 ,将接种好的培养
瓶放在光照 2 000 lx、温度 25℃的培养室中培养。
1.2.5 移植。当植株根长到 1.0 ~ 2.0 cm时 ,打开瓶塞 ,练
苗 2 ~3 d,再移植到有中性土壤的花盆中 ,前 3 ~ 5 d进行遮
荫 , 20 ~ 25 d后 ,进行大田移栽。
2 结果与分析
2.1 不同浓度 6 -BA对外植体诱导的影响 细胞分裂素
6-BA主要诱导丛生芽的分化 ,使外植体繁殖系数增大 。不
表 1 不同浓度 6-BA浓度对罗汉果芽增殖效果的影响
Table1 Effectofdiferentconcentrationof6-BAontheproliferation
ofMomordicagrosvenoriSwingleshoot
6-BA浓度∥mg/L
Concentration
of6-BA
接种苗数∥株Amountof
inoculated
seedlings
增殖芽数∥株Amountof
proliferated
shoots
增殖系数
Proliferation
coeficient
0.5 20 97 4.85
1.0 20 115 5.75
1.5 20 85 4.25
2.0 20 63 3.15
2.5 20 51 2.55
同浓度的 6-BA对外植体丛生芽的诱导和分化程度有不同程
度的影响 ,其中 MS+1 mg/L6-BA基本培养基对罗汉果丛生
芽的诱导效果最佳 ,增殖系数高达 5.75。随着 6-BA浓度的
增加 ,丛生芽增殖系数变小 ,这是因为 6-BA浓度过高会抑制
丛生芽的诱导(表 1)。
责任编辑 刘群燕 责任校对 况玲玲安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(33):18798-18799
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.33.104
2.2 不同浓度生长激素对根诱导的影响 选取健壮的组培
苗(图 1)进行生根诱导 ,在加 0.2 mg/LIBA的培养基中 ,经
过 4周培养后根分化率仅为 55%;而在加入 0.5 mg/LIBA
的培养中 , 4周根的分化率可达 90%以上(表 2,图 2 ),且分
化出的根系更发达 ,平均每个苗可分化出 7.6条根 ,根的长
度达 1.5 ~ 3.0 cm,移栽成活率达到 90%以上;在加入
0.8 mg/L6-BA和 0.5 mg/LIBA的培养基中培养 4周后 ,根
的分化率只有 5%,根系比较发达 ,但根的数目少 ,根的长度
也只有 1.0 ~ 1.5cm,移栽成活率也不高。
表 2 不同浓度生长激素对根分化的影响
Table2 EfectofplanthormonewithdifferentconcentrationonthediferentiationofMomordicagrosvenoriSwingleroot
激素浓度
Concentrationoformones
1周后分化的块数
Diferentiation
numberinoneweek
2周后分化的块数
Diferentiation
numberintwoweeks
3周后分化的块数
Diferentiation
numkerin3weeks
4周后分化的块数
Differentiation
numkerin4weeks
0.8mg/LBA+0.2mg/LIBA 0 0 0 0
0.8mg/L6-BA+0.5mg/LIBA 0 1 3 5
0.2mg/LIBA 0 8 25 55
0.4mg/LIBA 3 28 50 70
0.5mg/LIBA 5 30 60 92
注:栽培块数:100。 Note:Cultivationnumber:100.
2.3 不同培养基质对植株生长的影响 肥沃的黑土壤种植
的植株成活率明显较高 ,可达 87%以上(表 3);一般的黑色
沙土就使得植株成活率较高 ,为 71%;而红黄色的沙土植株
成活率较小 ,仅为 26%。(表 3)
表 3 不同培养基质对罗汉果成活率的影响
Table3 EfectofdifferentculturemediumonthesurvivalrateofMomordicagrosvenoriSwingleseedlings
基质Medium 0d 3d 7d 10d 15d 21d 成活率∥%Survivalrate
肥沃黑土 Fertileblacksoil 31 31 30 28 27 27 87.1
一般黑沙土 Commonblacksandysoil 31 31 25 23 22 22 71.0
红黄色沙土 Reddishyellowsandysoil 31 29 25 15 11 8 25.8
3 结论与讨论
不同的激素对罗汉果的组织培养有着不同的影响 ,在试
验之前应先根据试验的目的设计好激素的组配。选择浓度
为 1 mg/L的 6-BA利于罗汉果的无性繁殖 ,分化率较高;加
入 IBA后则利于植株生根 ,其中以浓度为 0.5 mg/L的 IBA
较利于根系的生长 ,且能提高成活率。苗移栽成活率受到土
壤不同理化性质的影响 ,湿度适中的土壤更适合苗木的
生长。
参考文献
[ 1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(第三部上)[M].北京:化学工
业出版社 , 2005.
[ 2] 林荣 ,王秀琴 ,王润珍.罗汉果茎段离体培养研究[ J].广西植物, 1985, 5
(3):273-277.
[ 3] 黄春梅,曾黎辉,吴金寿 ,等.罗汉果叶片培养及其不定芽形成的细胞
学观察[ J] .吉林农业大学学报 , 2005, 27(6):639-642.
[ 4] 牛玉璐,曹永胜.绶草的组织培养与快速繁殖研究[ J].畜牧与饲料科学, 2009, 30(10):183.
(上接第 18794页)
3 结论与讨论
(1)在提取过程中发现 ,降香药材粒度对挥发油得率影
响较大 ,如果药材粒度过大 ,挥发油在提取过程中不易随水
蒸气挥发出来 ,提取得到的得率较低;粉碎过细粒度过小 ,降
香药材会糊化且产生的泡沫过多影响提取过程。在试验过
程中观察到降香挥发油在提取的前 4 h大部分已被提取出
来 ,在 4h后出油率慢慢减少 ,得率变化不大。
(2)有文献报道 [ 4] ,在提取前先进行浸泡对挥发油得率
影响不大 。故正交试验中合理设置药材粒度水平 ,代替药材
浸泡时间为考察因素 ,缩短了提取所用的时间。同时在因素
加水量水平设置上以及因素提取时间水平设置上 ,根据预试
验观察实际情况 ,都相对减少用量和时间 ,最后得到的提取
率也较高。此提取条件适合于工业生产上降低成本 ,节省能
源的要求。
(3)在试验过程中发现 ,降香品种丰富 ,产地各异 ,降香
的品质不同 ,其挥发油得率会有很大差距。今后可进一步研
究不同品种不同产地降香挥发油的含量差异 。
参考文献
[ 1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).[M] .北京:化学工业出版社, 2005:158.
[ 2] 朱亮 ,冷洪文 ,谭力伟 ,等.降香挥发油对血栓形成、血小板 cAMP和血
浆纤溶酶活性的影响[ J].中成药 , 1992, 14(4):30-31.
[ 3] 郭丽冰,黄丽容,赵丽华,等.降香行气止痛、活血止血有效部位的药理
筛选 [ J] .中药材, 2007, 30(6):696-698.
[ 4] 李奉勤,田志国,史冬霞 ,等.正交试验探讨降香挥发油的最佳提取条
件[ J].中国实验方剂学杂志 , 2005, 11(4):23-24.
1879938卷 33期 张丽珍等 不同植物激素对罗汉果快速繁殖的影响