全 文 ：表 3显示 ,糖尿病模型大鼠血清SOD活性降低。而血清 LPO
含量均增加。白羽连玉合剂治疗后 S0D活性明显提高 , LPO水平
显著降低 , 与模型组和阳性对照药组比较均有显著性意义(P<
0.05或 P<0.01),表明白羽连玉合剂具有改善糖尿病大鼠氧自
由基代谢紊乱的作用 。
4　讨论
糖尿病是一种常见病及多发病 , 是由于胰岛功能受损 、胰岛
素分泌不足或缺乏而引起的代谢紊乱的内分泌疾病。本实验采
用化学药物四氧嘧啶注射给药 , 选择性地破坏胰岛 β 细胞 , 引起
β 细胞坏死造成胰岛素分泌不足而导致实验性糖尿病 [ 1] 。实验
研究表明 , 白羽连玉合剂对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠的血糖升高
具有明显的降低作用 。白羽连玉合剂不但能够降低四氧嘧啶引
起的糖尿病高血糖 , 并且对糖尿病模型大鼠实验期间的血清 T-
Chol升高和 TG明显升高也有明显降低作用。
有研究表明 , 自由基在胰岛 β 细胞的杀伤中起重要作用 [ 2] 。
糖尿病动物模型及临床糖尿病患者 , 均存在着氧自由基代谢紊
乱 , SOD活性下降 , LPO含量增高。本研究结果显示。糖尿病大
鼠血液过氧化脂质含量明显高于正常组 , SOD活性明显低于正常
组。白羽连玉合剂能明显降低四氧嘧啶糖尿病大鼠血液中过高
的 LPO含量 , 提高 SOD活性 ,显示白羽连玉合剂具有明显的抗氧
化作用和清除氧自由基的能力 ,表明其降血糖作用可能与其抗氧
化损伤有密切关系。
白羽连玉合剂全方由三白草 、鬼箭羽 、黄连 、玉米须 、夏枯草
等药组成。现代药理研究表明 ,三白草具有抑制醛糖还原酶的作
用 , 并可升高超氧化物歧化酶活性 [ 3] 。鬼箭羽不但能够刺激胰岛
素分泌 ,而且还能增加外周组织对葡萄耱的利用 , 提高胰岛素与
受体的亲和力 [ 4] 。黄连所含小檗碱有显著的降糖作用 ,它能增加
胰岛素生物活性和胰岛素敏感性 作用 , 促进胰岛 β 细胞的修
复 [ 5] 。玉米须能够降低糖尿病小鼠血糖 , 促进肝糖元合成 , 并能
对抗肾上腺素引起的动物血糖升高 [ 6] 。方中诸药协同配合 ,治疗
实验性大鼠糖尿病收到较为满意的效果。
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收稿日期:2009-10-10;　修订日期:2010-01-26
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(No.0322024-5E)
作者简介:陈兆霓(1982-),男(羌族),广西南宁人 ,现为广西医科大学药
学院在读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事抗肝炎药研究工作.
＊通讯作者简介:黄仁彬(1955-), 男(汉族),广西灵山人 , 现任广西医科
大学药学院教授 ,博士研究生导师 ,硕士学位 ,主要从事抗肝炎药 、抗肿瘤
药研究工作.
六月青皂苷对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响
陈兆霓 ,张士军 ,唐爱存 ,李勇文 ,黄仁彬＊
(广西医科大学药学院 ,广西 南宁　530021)
摘要:目的 研究六月青皂苷(LYQS)对四氯化碳(carbontetrachloride, CCl4)所致大鼠肝纤维化的治疗作用 ,并探讨其作
用机制。方法 Wistar大鼠随机分成两组 , 模型组大鼠采用 50%CCl4花生油溶液灌胃造模 , 共 7周 , 空白对照组用生理盐
水代替。将病理检查确认肝纤维化形成的 Wistar大鼠 50只 , 随机分成 5组 ,分别给予相应药物进行干预 , 1次 /d, 连续 4
周。末次给药 24h后处死大鼠 , 采集血清及肝组织 ,检测大鼠血清中 ALT、AST, 肝组织中 Hyp、SOD、MDA和 GSH-Px的
水平。结果 各剂量的六月青皂苷及阳性药能显著降低大鼠血清中 CCl4所致异常升高的 ALT(P<0.01);高 、中剂量六
月青皂苷及阳性药可降低大鼠血清中 CCl4所致异常升高的 AST(P<0.01);同时 ,各剂量的六月青皂苷能显著提高肝组
织中异常降低的 SOD、GSH-Px水平(P<0.05或 P<0.01), 并显著降低异常升高的 Hyp、MDA含量(P<0.05或 P<
0.01)。随着药物浓度的增加 , 其作用逐渐增强 ,呈现明显的量效反应关系。结论 六月青皂苷对大鼠化学性肝损伤具有
一定程度的治疗作用 , 其机制可能与其清除自由基 , 抑制脂质过氧化有一定的关系。
关键词:六月青;　皂苷;　肝纤维化
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.08.028
中图分类号:R285.2;R575.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)08-1911-02
　　六月青是广西民间草药 , 系爵床科(Acanthaceae)植物肖鸡
笼(顶头马兰)Taraphochlamysafinis(Grif)Bremekhu[ Strobilan-
thesafinis(grif)Y.C.Tang]的干燥地上部分 [ 1] 。 《本草拾遗》
记载 , 该药能活血 ,凉血 , 疏肝泻湿 ,消肿止痛 ,主要用于急慢性肝
炎 , 黄疸等 [ 2] 。本课题组经过多年研究发现 , 以六月青为君药的
复方六月青对四氯化碳 、对乙酰氨基酚 、D-半乳糖胺等所致小
鼠急性化学性肝损伤均有明显的保护作用 [ 3];在体外对血清中
HBsAg和 HBeAg均有明显的抑制作用 [ 4] 。此外 , 研究者在对六
月青的初步研究中发现 , 六月青的石油醚部位和 60%乙醇部位
对小鼠的免疫功能有明显的增强作用 [ 5] 。本实验就该药对 CCl4
造成大鼠的肝纤维化的影响进行初步研究。
1　材料
1.1　动物 健康雄性 Wistar大鼠 90只 , SPF级 ,体质量 150 ～ 200
g,由广西医科大学实验动物中心提供。 实验动物生产许可证:
SCXKG桂 2003 -0003, 实验动物使用许可证:SYKG桂 2003 -
0005。常规鼠饲料喂养 ,自由饮水。
1.2　药物及试剂 六月青皂苷(LYQS):由本实验室自行提取完
成;花生油:市售;四氯化碳(分析纯):成都市科龙化工试剂厂 ,
·1911·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.8 时珍国医国药 2010年第 21卷第 8期
批号:20070910;秋水仙碱片:西双版纳药业有限责任公司 , 批号:
080706。AST、ALT、Hyp、SOD、MDA、GSH-Px试剂盒:南京建成
生物工程研究所产品 ,批号均为:081230。
2　方法
2.1　动物造模 Wistar大鼠随机分成两组:空白对照组及肝纤维
化模型组。肝纤维化模型组 75只 , 采用花生油配成体积分数为
50%的 CCl4溶液 , 按 CCl4 1 ml/kg体质量每周灌胃 2次 , 称质量
1次 /周 , 按实际体重调整给药剂量 [ 6] 。正常对照组 15只 , 采用
生理盐水灌胃 , 剂量同 50% CC14花生油溶液 , 2次 /周。分别于
造模后第 5周 、第 6周及第 7周抽取肝纤维化模型组大鼠 2只及
正常对照组大鼠 1只 , 进行病理学检查 , 监测肝纤维化形成的情
况。
2.2　动物分组及用药 将病理检查确认形成肝纤维化的 Wistar
大鼠 50只 ,随机分为 5组 , 加上空白对照组 10只 ,共计 6组 ,分
别为:空白对照组 ,给予生理盐水 10 ml/kg;模型对照组 , 给予生
理盐水 10 ml/kg;阳性组 , 给予秋水仙碱 0.2mg/kg;LYQS高 、中 、
低剂量组 , 分别给予 16.67, 8.33, 4.16 g生药 /kg。各组动物在同
样条件下饲养 , 均以 1次 /d,空腹灌胃 , 连续给药 4周。以上各组
除空白对照组外 , 其余各组均继续给予 50%CCl4花生油溶液 , 2
次 /周。每周称重 ,并相应调整 CCl4造模剂量及用药剂量。
2.3　样本制备 末次给药 24 h后 , 戊巴比妥钠麻醉 , 打开腹腔 ,
腹主动脉取血 , 分离血清于 -20℃保存 , 用于测定 ALT、AST;取
肝组织做相应浓度匀浆后于 -70℃冰箱保存 , 用于 SOD、MDA、
GSH-Px及考马斯亮蓝的测定;另取部分肝组织于 -70℃冰箱
保存 , 用于 Hyp的测定。
2.4　指标测定 血清中 ALT, AST和肝组织 Hyp, GSH-Px, SOD,
MDA的检测 , 严格按照试剂盒说明书进行操作。
2.5　统计学处理 应用 SPSS13.0软件进行统计分析。数据均
以 x±s表示 , 各组间比较采用单因素方差分析 , 经方差齐性检
验 , 方差齐者组间两两比较采用 LSD法 , 方差不齐者组间两两比
较采用 DunnettT3法。
3　结果
3.1　大鼠血清 ALT、AST的变化 模型组大鼠血清 ALT与 AST
的含量均显著升高 , 与空白对照组比较差异有统计学意义(P<
0.01), 说明造模成功;阳性组 , LYQS高 、中 、低剂量组血清 ALT
含量均低于模型组;阳性组 、LYQS高 、中剂量组血清 AST含量均
低于模型组 , 与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01或 P<
0.05);LYQS低剂量组血清 AST含量与模型组比较无统计学意
义。结果见表 1。
表 1　LYQS对肝纤维化大鼠血清中 ALT、AST的影响( x±s)
卡门氏单位
组别 ALT AST
空白对照 7.56±1.90 12.65±2.99
模型对照 32.13±3.98■■ 51.94±12.13■■
阳性 13.93±3.26＊＊ ■■ 27.47±7.06＊＊ ■■
LYQS高剂量 12.84±2.70＊＊ ■■ 20.35±4.90＊＊
LYQS中剂量 17.56±3.36＊＊ ■■ 30.91±5.15＊＊ ■■
LYQS低剂量 21.05±3.02＊＊ ■■ 39.83±11.99■■
　　与模型组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;与空白对照组比较 , ■P<
0.05, ■■P<0.01;n=10
3.2 　大鼠组织 Hyp, GSH-Px, SOD, MDA的变化 模型对照组
大鼠肝组织中 Hyp含量显著升高 , 与空白对照组比较差异有统
计学意义(P<0.01);阳性组与 LYQS高 、中 、低剂量组均可显著
降低肝纤维化大鼠组织中 Hyp含量 , 与模型对照组相比较差异
有统计学意义(P<0.01或 P<0.05)。 模型对照组大鼠肝组织
中 SOD及 GSH-Px活力显著降低(P<0.01), 而 MDA含量明显
升高(P<0.01);阳性组与 LYQS高 、中 、低剂量组均可显著升高
肝纤维化大鼠血清 SOD及 GSH-Px活力 (P<0.01或 P<
0.05);与模型对照组相比较 ,阳性组与 LYQS高 、中 、低剂量组均
可显著降低肝纤维化大鼠肝组织 MDA含量(P<0.01或 P<
0.05)。结果见表 2 ～ 3。
4　讨论
肝纤维化(HF)是指肝细胞发生坏死 、炎症刺激时 , 肝脏中胶
原蛋白等细胞外基质(ECM)的增生与降解失去平衡 , 进而导致
肝脏内纤维结缔组织过度增生与异常沉积的病理过程 ,轻者称为
纤维化 ,重者进而使肝小叶结构改建 、假小叶及结节形成 ,称为肝
硬化 [ 7] 。肝纤维化是慢性肝病最重要的病理特征及其慢性肝病
向肝硬化发展的必经之路。 研究发现 , 肝纤维化不同于肝硬化 ,
它是一种可逆性病变 [ 8, 9] 。
表 2　LYQS对肝纤维化大鼠组织中 Hyp、GSH-Px的影响( x±s)
组别 Hyp/μg· (mg湿重)-1 GSH-Px/U· mgprot-1
空白对照 0.26±0.10 788.40±113.19
模型对照 0.64±0.10■■ 514.62±100.12■■
阳性 0.49±0.11＊＊ ■■ 696.71±83.29＊＊ ■
LYQS高剂量 0.44±0.09＊＊ ■■ 706.10±106.67＊＊
LYQS中剂量 0.53±0.08＊ ■■ 646.03±92.38＊＊ ■■
LYQS低剂量 0.55±0.10＊ ■■ 613.90±89.01＊ ■■
　　与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01;与空白组比较 , ■P<
0.05, ■■P<0.01;n=10
表 3　LYQS对肝纤维化大鼠组织中 SOD、MDA的影响( x±s)
组别 SOD/U· mgprot-1 MDA/nmol· mgprot-1
空白对照 203.34±21.69 0.19±0.05
模型对照 155.33±20.68■■ 0.32±0.07■■
阳性 185.45±22.64＊＊ 0.16±0.06＊＊
LYQS高剂量 194.48±26.60＊＊ 0.17±0.05＊＊
LYQS中剂量 184.24±19.05＊＊ 0.22±0.04＊＊
LYQS低剂量 177.59±17.53＊ ■ 0.25±0.06＊＊■
　　与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01;与空白组比较 , ■P<
0.05, ■■P<0.01;n=10
本实验研究表明 , LYQS可有效地保护 CCl4所致的大鼠肝细
胞的损害 , 并对大鼠肝纤维化具有较好的逆转作用。 表现为
LYQS给药组可显著降低肝纤维化大鼠血清 ALT、AST活性;提高
SOD、GSH-Px活性 ,并降低Hyp、MDA含量。随着药物浓度的增
加 , 其作用逐渐增强 , 呈现量效反应关系 , 但是与空白对照组相
比 , 这些指标尚未达到正常水平 , 需进一步研究 , 更充分发挥
LYQS的功效。 LYQS可能通过清除氧自由基 , 抑制肝脏脂质过
氧化反应 ,从而稳定肝细胞膜 , 减轻细胞损伤发挥作用 ,达到对肝
纤维化的保护和逆转的效果。
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