全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(6)∶724 ～ 726
基金项目:四川省科技厅应用基础研究项目(2014JY0233) ;西南民族大学研究生学位点建设项目(2015XWD － S0703)
作者简介:张志锋(1973—) ，男，博士，副教授，从事青藏高原药用植物的品种整理及质量评价工作。Email:zhangzhf 99@ gmail． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:allenfire511@ 163． com
HPLC同时测定白花刺参中的两个新三萜皂苷
张志锋1，吕露阳1，刘 圆1，吴春蕾1，杨圣贤1，吴小艾2*
(1．西南民族大学青藏高原研究院 化学与环境保护学院，四川 成都 610041;2． 四川大学华西医院核医学科，四川 成都
610041)
摘要:目的 采用 HPLC法同时测定白花刺参中的两个新三萜皂苷。方法 色谱柱为 Agilent Eclipse XDB C18柱(150 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 －水，梯度洗脱，流速 1 mL·min －1，漂移管温度为 104 ℃，N2 流速为 2． 8 L·min
－1，进样量 10 μL。
结果 10 批白花刺参药材中刺参苷 J的含量为 0． 508% ～1． 308%，刺参苷 N 的含量为 0． 359% ～ 0． 838%。结论 所用方法
简便、重复性好，可为白花刺参药材质量控制提供参考。
关键词:白花刺参;高效液相色谱法;蒸发光散射检测器;藏药;三萜皂苷;刺参苷 J;刺参苷 N;含量
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)06 － 0724 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 06． 033
Simultaneous determination of two new triterpenoid saponins in Morina nepalensis by HPLC
ZHANG Zhi － feng1，L Lu － yang1，LIU Yuan1，WU Chun － lei1，YANG Sheng － xian1，WU Xiao － ai2*
(1． Institute of Qinghai － Tibetan Plateau，College of Chemistry and Environment Protection Engineering，Southwest University for Nation-
alities，Chengdu，Sichuan，610041 P． Ｒ． China;2． Department of Nuclear Medicina，West China Hosptital，Sichuan University，Chengdu，
Sichuan，610041 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To simultaneously determine two new triterpenoid saponins in Morina nepalensis var． alba Hand － Mazz by
HPLC．METHODS The chromatographic conditions were as follows:Eclipse XDB C18 column(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，acetoni-
trile and water as gradient mobile phases，flow rate of 1． 0 mL·min －1，atomization temperature at 104℃，flow rate of N2 2． 8 L·min
－1
and 10 μL sample injection． ＲESULTS The content of monepaloside J of ten batches of M． nepalensis samples was 0． 508% －
1. 308%，and the monepaloside N was 0． 359% － 0． 838% ． CONCLUSION The method is sample and repeatability，and can be
used to the quality control of M． nepalensis．
Key words:Morina nepalensis;HPLC;ELSD;Tibetan medicine;Triterpenoid saponins;Monepaloside J;Monepaloside N;Determination
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2015)06 － 0724 － 03
白花刺参为川续断科植物白花刺参 Morina
nepalensis D． Don var． alba (Hand． － Mazz．)Y． C．
Tang 的干燥全草，其藏药名为“将刺嘎保”，最早收
载于《四部医典》中，也收载于中华人民共和国卫生
部药品标准《藏药标准》中。其性味甘、涩、温，用于
治疗关节痛、小便失禁、腰痛、眩晕及口眼歪斜等症，
还可外用治疗疖疮、化脓性创伤、肿瘤等［1］。白花
刺参中含有咖啡酰基奎宁酸成分、三萜皂苷成分
等［2 － 3］。课题组前期从白花刺参中分离得到了 2 个
新的和 4 个已知的皂苷类化合物［4 － 6］。目前，有关
白花刺参药材含量测定方面的研究还未见报道，现
以课题组前期分离得到的刺参苷 J和新化合物刺参
苷 N为对照品，采用 HPLC － ELSD法测定白花刺参
中这两种成分的含量，可为白花刺参的质量控制提
供参考。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
2695 型高效液相色谱仪(美国 Waters) ;2000
ELSD检测器(美国 Alltech)。刺参苷 J、刺参苷 N对
照品(结构见图 1，由课题组前期从白花刺参中分离
得到，HPLC纯度分别为 98. 12%、99． 25%) ;百花刺
参药材为作者实地采集并经鉴定;乙腈为色谱纯;水
为重蒸水;其余试剂为分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 色谱条件与系统适应性试验 采用 Eclipse
XDB C18色谱柱(150 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，流动相
为乙腈(A)－水(B) ，梯度洗脱(0 ～ 5 min、25% A，
5 ～ 15 min、25% ～ 30% A，15 ～ 26 min、30% ～ 33%
A，26 ～35 min、33%A) ，流速1 mL·min －1，柱温30 ℃，
图 1 刺参苷 J(A)和刺参苷 N(B)的化学结构图
Figure 1 Structures of monepaloside J(A)and monepaloside N
(B)
漂移管温度为 104 ℃，N2 流速为 2． 8 L·min
－1，进样
量 10 μL，采集时间 35 min。在此色谱条件下，分别
进样混合对照品和供试品溶液，各目标峰均能达到
基线分离，理论板数以刺参苷 J峰计≥4 × 104，以刺
参皂苷 N的色谱峰计≥8 × 104，与相邻组分的分离
度均 ＞ 1． 5，峰形良好，刺参苷 J、刺参苷 N的保留时
间分别为 16． 79、22． 85 min(图 2)。
0 10 20 30 0 10 20 30
m
on
ep
al
os
id
e
N
m
on
ep
al
os
id
e
J
m
on
ep
al
os
id
e
J
m
on
ep
al
os
id
e
N
A B
t/min
图 2 混合对照品(A)和供试品(B)溶液的 HPLC图
Figure 2 HPLC chromatograms of mixed control solution(A)and
sample solution(B)
1． 2． 2 对照品溶液的制备 分别精密称取两种对
照品适量，置同一 25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释
定容，得含刺参苷 J 0． 285 mg·mL －1、刺参苷 N
0. 203 mg·mL －1的混合对照品溶液。
1． 2． 3 供试品溶液制备条件的筛选 考虑到刺参
苷 J、刺参 N的溶解性，分别考察了甲醇、95%乙醇、
70%乙醇作为提取溶剂。取白花刺参药材粉末(过
4 号筛)约 1． 0 g，共 3 份，精密称定，置具塞锥形瓶
中，分别加入甲醇、95%乙醇、70%乙醇各 25 mL，密
塞，称定重量，超声(45 kHz、300 W)处理 30 min，冷
却，再称定重量，分别用相应的试剂补足减失的重
量，摇匀，过滤，取续滤液分别进样测定。甲醇处理
后的样品中刺参苷 J 及刺参苷 N 的含量均较高，故
采用甲醇作为提取溶剂进行后续试验。取白花刺参
药材粉末 1． 0 g，共 2 份，精密称定，置具塞锥形瓶
中，加入甲醇 25 mL，密塞，称定重量，一份经超声
(45 kHz、300 W)提取 30 min，另一份经回流 30
min，分别冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的质
量，摇匀，过滤，取续滤液分别进样测定。两种提取
方法的提取率相差较小，超声方法操作简便，故采用
超声提取法。分别称取白花刺参药材粉末 1． 0 g，共
4 份，精密称定，分别精密加入甲醇 25 mL，密塞，称
定重量，分别超声(45 kHz、300 W)处理 20、30、40、
50 min 后，冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的质
量，摇匀，过滤，取续滤液分别进样。刺参苷 J 及刺
参苷 N经超声 40 min已基本提取完全，故选择超声
40 min。综上，取白花刺参粉末 1． 0 g，精密称定，置
具塞锥形瓶中，加入甲醇 25 mL，密塞，称定重量，超
声(45 kHz、300 W)处理 40 min，冷却，再称定重量，
用甲醇补足减失的质量，摇匀，过滤，取续滤液即为
供试品溶液。
表 1 供试品提取条件的考察(%)
Table 1 Ｒesults of extract conditions of the samples(%)
项目 提取条件 刺参苷 J 刺参苷 N
溶剂 甲醇 0． 901 0． 559
95%乙醇 0． 622 0． 362
70 %乙醇 0． 486 0． 214
方法 回流 0． 836 0． 563
超声 0． 824 0． 551
时间 20 min 0． 559 0． 362
30 min 0． 643 0． 429
40 min 0． 682 0． 483
50 min 0． 685 0． 486
1． 2． 4 线性关系的考察 分别精密吸取混合对照
品溶液各 5、8、10、12、15、18、20 μL，按“1． 2． 1”项色
谱条件进样测定，记录峰面积。以峰面积的自然对
数为纵坐标、进样量的自然对数为横坐标进行线性
回归，得刺参苷 J 和刺参苷 N 的回归方程分别为:
Y = 1． 9304X + 5． 0866(r = 0． 9996) ;Y = 1． 8182X +
4． 9436(r = 0． 9991) ，线性范围分别为 1． 43 ～ 5． 70、
1. 02 ～ 4． 06 μg。
1． 2． 5 精密度与稳定性试验 精密吸取同一混合
对照品溶液 10 μL，按“1． 2． 1”项色谱条件，重复进
样 5 次，计算得刺参苷 J、刺参苷 N峰面积的 ＲSD分
别为 0． 64%、0． 69%(n = 5) ，表明精密度良好。取
同一批次白花刺参药材粉末约 1． 0 g，共 5 份，分别
精密称定，按“1． 2． 3”项下方法制备供试品溶液，分
别进样测定，计算得刺参苷 J、刺参苷 N 含量的 ＲSD
分别为 1． 02%、1． 23 %(n = 5) ，表明重复性良好。
1． 2． 6 稳定性与加样回收率试验 精密吸取同一
批次供试品溶液，按“1． 2． 1”项色谱条件，分别于 0、
2、4、8、12、24 h 时进样，计算得刺参苷 J、刺参苷 N
峰面积的 ＲSD分别为 1． 48%、1． 14%(n = 6) ，表明
供试品溶液在 24 h 内稳定。取已知含量的白花刺
参药材粉末约 0． 5 g，精密称定 6 份，分别精密加入
一定量的刺参苷 J、刺参苷 N 对照品，按“1． 2． 3”项
527第 6 期 张志锋，等。HPLC同时测定白花刺参中的两个新三萜皂苷
华西药学杂志
W C J·P S 2015，30(6)∶726 ～ 729
下方法制备供试品溶液，分别进样测定，记录峰面
积，计算加样回收率。刺参苷 J、刺参苷 N的平均回
收率分别为 100． 61%、100． 86%，ＲSD 分别为
0. 95%、1． 32%(n = 6)。
1． 2． 7 样品的测定 分别精密称取不同产地的白
花刺参药材粉末(过 4 号筛)约 1． 0 g，按“1． 2． 3”项
下方法制备供试品溶液，分别进样测定，记录峰面
积，计算样品中刺参苷 J和刺参苷 N的含量(表 3)。
表 3 样品含量测定的结果(%)
Table 3 Determination results of the samples(%)
No． 采集地点 海拔 /km 刺参苷 J 刺参苷 N 总量
1 四川康定县 2． 9 1． 308 0． 838 2． 146
2 四川康定县 3． 3 1． 235 0． 810 2． 045
3 四川甘孜县 3． 4 0． 918 0． 501 1． 419
4 四川甘孜县 3． 3 0． 968 0． 495 1． 463
5 四川炉霍县 3． 2 0． 533 0． 368 0． 901
6 四川炉霍县 3． 3 0． 508 0． 359 0． 867
7 云南中甸县 3． 4 0． 669 0． 426 1． 095
8 云南德钦县 3． 2 0． 672 0． 411 1． 083
9 四川小金县 3． 5 1． 252 0． 785 2． 037
10 四川小金县 3． 2 1． 168 0． 692 1． 860
2 讨论
曾分别考察了乙腈 －水、甲醇 －水流动相系统
梯度洗脱，结果表明:乙腈 －水系统可使目标峰得到
较好的分离，且峰形较好，最终确定了文中的梯度洗
脱程序。文中首次采用 HPLC － ELSD 法同时测定
了不同产地白花刺参药材中刺参苷 J和刺参苷 N的
含量，所用方法简便、重复性好，可为白花刺参药材
质量标准的建立提供依据。两种三萜皂苷类成分的
含量因产地不同而具一定差异，但均以刺参苷 J 的
含量最高，刺参苷 N的含量较低。以两种刺参苷的
总量计算，各产地白花刺参药材中总刺参苷的含量
为 0． 867% ～ 2. 146%，其中，以康定产白花刺参的
含量最高，炉霍县产的含量最低。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会．卫生部药品标准·藏药
标准［S］．北京:人民卫生出版社，1995:56．
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Morina nepalensis var alba Hand － Mazz［J］． Nat Prod Ｒes，2013，
27(24) :2256 － 2262．
收稿日期:2014 － 09 － 11
作者简介:苟琰(1982—) ，女，从事药品检验及质量控制的工作。Email:763131478@ qq． com
镇咳宁胶囊的 TLC鉴别及甘草酸和盐酸麻黄碱的测定
苟 琰1，耿 昭2，刘繁红1
(1．四川省食品药品检验检测院，四川 成都 611731;2．成都中医药大学药学院，四川 成都 611137)
摘要:目的 完善镇咳宁胶囊的质量标准。方法 采用 TLC 法鉴别方中的甘草和桔梗;采用 HPLC 法测定甘草酸和盐酸麻
黄碱的含量。结果 采用薄层色谱法的专属性强，阴性对照无干扰;甘草酸铵和盐酸麻黄碱的线性范围分别为 0． 1739 ～
17. 386 μg(r = 0． 9999)、0． 1003 ～ 10． 0298 μg(r = 0． 9999) ;平均回收率分别为 99． 68%(ＲSD = 1． 29%，n = 6)、103． 53%
(ＲSD = 0． 82%，n = 6)。结论 所用方法简便、重复性好、结果准确，可作为该制剂的质量控制方法。
关键词:镇咳宁胶囊;质量标准;甘草;桔梗;甘草酸;盐酸麻黄碱;薄层色谱法;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2015)06 － 0726 － 04
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2015． 06． 034
TLC identification of Zhenkening capsules and determination of glycyrrhizic acid and
ephedrine hydrochloride
GOU Yan1，GENG Zhao2，LIU Fan － Hong1
(1． Sichuan Provincial Institute for Food and Drug Control，Chengdu，Sichuan，611731 P． Ｒ． China;2． Pharmacy of College，Chengdu
University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu，Sichuan，611137 P． Ｒ． China)