全 文 ：3 7 6
中 国 药 科 大 学 学 报
J o u r n a l o f C h in a P h a rm a e e u t iac l U n iv e r si ty 1 9 9 4 ; 2 5 ( 6 )
:
3 7 6一 3 7 7
· 短篇报道 ,
薄层色谱扫描法测定 7 种贯众中东北贯众素
及绵马酸 A B A 的含量
马国祥` 徐国钧 金蓉莺 徐路珊
(中国药科大学生药学研究室 , 南京 21 加 0 9)
贯众为常用中药 ,有驱虫 、 止血 、 清热解毒的功
效 , 全国各地所用贯众品种相当复杂 ,涉及到蔗类植
物 7 科 30 余种 。 东北贯众为主流品种之一 ,其来源
于鳞 毛蔽科植物粗茎 鳞毛旅 肠洲户南 哎沉议分厄期加
N ak ia 带叶柄基的根茎 . 文献报道 l[ 一 s] 其间苯三酚类
化合物具有驱虫 、 抗癌等功效 , 并具有一定的毒性 ,
其中东北贯众素 (四环间苯三酚类化合物 ) 比绵马酸
A BA (三环间苯三酚类化合物 )毒性较小 . 因而分别
测定这两个成分在贯众中的含量具有一定的意义 .
文献中只有东北贯众素含量测定的报道 .l[ “ ] ,我们采
用双波长薄层扫描法同时测定 7 种主流贯众品种中
这两个成分含量 , 为深入开展这类化合物的活性及
毒性研究提供参考 。
实验部分
L l 仅界与试药
岛津 cs 一 9 10 型 双波长薄层扫描仪 , 微量进样
器 ,硅胶 G (青岛海洋化工厂 ) , 固兰 B 盐 ( R du a A G
进 口分装 ) , 柠檬酸 ,磷酸氢二钠 , 正 己烷 , 抓仿及 甲
醇 (均为分析纯 ) .
样品均为作者所采 , 并经学名鉴定为紫其 。~ 卜
由 笋声月切 、 荚果蔗 扣油姚拟℃自 “ 几以初碑廊 、 狗脊 晰戈` 面斌自
笋产脚田 、 粗茎鳞毛蔗 汤洲户廊 。协凳方加改用叨 、 小贯众 口尹 -
蜘`曰砚 介浏祖如 、 乌 毛 蔗 搜晚俪” 冲 记护妇咙山 、 单 芽 狗 脊
w 比` 叶`的 洲诊抓洲由 , 样品经干燥 ,粉碎 ,过 40 目筛 ,置
干燥器中保存 ,备用 。 对照品东北贯众素及绵马酸
ABA 均为作者从东北贯众中分得 , 并经红外 、 核磁共
振及质谱等确定其化学结构 。
1
.
2 薄层 分析条件
薄层板的制备 :取硅胶 G 10 g ,加磷酸氢二钠 一柠
檬酸的缓 冲液 ( p H = 7 ) 一o m l ,维 生素 e l o o m g 及
0
.
5% C M c
一
N a 溶液 2 0 m 一, 调匀 ,铺在 2 0 e m x 2 0 e m
的薄层板上 , 凉干 ,于 50 ℃活化 Z h 。
展开剂 :正 己烷 一抓仿一甲醇 (3 O : 15 : l ) ;先将点
上样的板放在展开缸中饱和 Z h 后 , 展开 , 展距为 18
cm
,
0
.
3 %固兰 B 盐的 50 % 乙醉溶液为显色剂 ,多次
喷雾 ,凉干后 , 于 40 ℃条件下显色 ,保持 l h 使显色
完全 。 东北贯众素和绵马酸 A丑 A 分离良好 .
扫描条件 :取两个标准品 ,经点样 , 展开 , 显色后
扫描 , 根据测定结果 , 选择样品的测定波长为 495
n m
,参比波长为 650 n m ,采用双波长反射锯齿扫描
法 ,扫描速度为 20 ~ /m in
,
S x = 3
,狭缝 1 . 25 x 1 . 25
m m
,灵敏度 x l 。
L 3 提取 条件
根据文献 s[] ,取各样品 1 9 , 精密称定 ,置 20 ml
带塞磨 口三角烧瓶中 ,精确加入苯 20 ml , 振摇 , 放置
2 4 h 后 , 精密吸取 1 m l , 备用 。
1
.
4 显色艳定性试验
精密吸取东北贯众素 、 绵马酸 A B A 对照品液各
2 川 ,点样 , 展开 显色后 ,每隔 l h 扫描测定 , 结果表
明 ,各样品显色 s h 内保持稳定 。
1
.
5 标准 曲线的制备
精密称取东北贯众 素及绵 马酸 A B A 标准品
l
·
0 7 m s
、
l
·
0 6 m g
,分别以苯定容至 1 m l . 用微量进
样器取东北贯众素 2 , 3 , 4 , 5 , 6 以 和绵马酸 BA A
l
,
1
.
5
,
2
,
2
.
5
,
3 川 点样 . 展开显色后 ,扫描测定 , 以
点样量为 X (阳 ) , 测得积分值为 Y 。 得东北贯众素回
归方程为 Y = 5 5 . SX + 22 . 8 , , = 0 . 9 9 9 8 , 线性范围
2
·
1 4 ~ 6
·
4 2 林s ; 绵马酸 A B A 的回归 方程 为 y =
1 06
.
6X + 1 3
.
0
, r = 0
.
99 9 3
, 线性范围 1 . 0 6 ~ 3 . 1 8
以9 0
1
.
6 点样精密度试脸
精密吸取东北贯众样品液 3 川 , 共 7 份 , 点于同
一薄板上 , 展开 , 显色后扫描 , 测得东北贯众素的变
收稿日期 19 洲 一 0 3一 17 ’ 现在南京中医学院中医药研究所工作 , 2 1 0 0 2 9
6期 马国祥等 :薄层色谱扫描法测定 7种贯众中东北贯众素及绵马酸 A A B的含量 3 7 7
异系数为 1.9 %,绵马酸 A B A 的变异系数为 2 . 3% .
1
.
7 回 收率试脸
精密吸取绵马贯众样品液 2 川 ,共 5 份 ,分别点
样于同一块薄层板上 ,依次再点上东北贯众家及绵
马酸 A B A 各 2 日 , 同时以东北贯众素 、 绵马酸 A B A
及样品液作随行展开 ,测得积分值 ,计算回收率 。 结
果表明 : 东北贯众素和绵马酸 A BA 的加样回收率分
别为 9 9 . 8 % 、 10 2 . 1% ; 变异 系数分别为 3 . 3肠及
2
.
1%
。
1
.
8 样品 浏定
用微量注射器分别精密吸取各样品液 、 东北贯
众素及绵马酸 A B A 液 ,点样 ,测定各斑点积分值 , 以
外标两点法计算各样品中东北贯众家和绵马酸 A B A
的含量 . 绵马贯众样品侧定 6 次 ,其余各样品因未检
出这两个化合物 , 因而只测一次 。
定结果表明 ,绵马酸 A B A 在东北贯众的总间苯三酚
中占有很大的比例 , 由于东北贯众素和绵马酸 A B A
毒性相差较大 , 我们认为宜将这两个成分分别对其
抗肿瘤活性进行研究 .
3) 间苯三酚类化合物遇光 、 热等易氧化分解 , 铺
板时加入适量的维生素 C ,作为抗氧剂 ,可增加显色
斑点的稳定性 .
4) 展开前先将点样好的板饱和 Z h , 展开后斑点
集中 ,且分离效果较好 。 另外 , 显色完全与否对测定
结果影响较大 , 为此 , 我们采用多次显色法使显色
完全 。
参 考 文 献
结果与讨论
l ) 7 种主流贯众中只在东北贯众中检出东北贯
众素和绵马酸 A B A 的含量 ,其含量分别为 4 . 01 %和
1
.
7 8%
。 因此 ,除东北贯众外 ,其余贯众是否有驱虫
作用值得进一步研究 。
2) 文献 =.[ ’ ]报道东北贯众中的总间苯三酚类化
合物抗肿瘤活性的主要成分为东北贯众素 。 本文测
盛景芬 ,刘伯全 , 黄兰孙 . 东北贯众抗血吸虫有效成分
的分离鉴定 . 药学通报 , 1 98 1 , 1. ( 2 ) : 1 5
李德华 , 郊晓阁 , 薛惟建 . 贯众有效部分的抗肿瘤作用 .
中革药 , 1 9 8 6 . 1 7 ( 6 ) : 1 4
薛惟建 , 王士贤 . 李德华 . 贯众抗肿启有效成分对 R 一3 8
细胞超徽结构及细胞呼 吸的作用 . 中国 药理 学 通报 ,
19 8 7
, 3 ( 5 )
:
2 9 1
杜小英 , 杨晓东 . H P cL 法侧定贯众中东北贯众素的含
t
. 中革药 , 19 9 2 , : : ( 6 ) : 5 2 8
吕归宝 , 方 瑛 , 黄乔书 . 薄层光密度法侧定贯众中东
北贯众家的含 t . 药物分析杂志 , 19 8 , . ( l ) : 17