全 文 ：石。根据我国相关部门颁布的药品标准统计，用牛黄做原料
的国家标准药品共有 600 多个品种，市场需求量很大。但我
国天然牛黄产量低、资源匮乏，过去主要依赖进口。国家药
监局分别于 2000、2001、2002 年相继发文，禁止使用进口牛
源性材料制备中成药，如天然牛黄等等，加剧了天然牛黄的
供需矛盾。正因为天然牛黄稀缺昂贵，很多应该用天然牛黄
投料的中成药改用人工牛黄，或几种牛黄掺兑使用，使牛黄
应用产生混乱，急需对牛黄市场进行规范。
体外培育牛黄是模拟体内胆结石形成的原理和生物化
学过程，运用现代生物工程技术，在体外培育的牛胆红素钙
结石。指纹图谱研究结果表明体外培育牛黄与天然牛黄成
分相近，且质量标准更稳定［1］。已有药效学实验证实，体外
培育牛黄有镇痛、抗炎、抗肝纤维化、耐缺氧、清除自由基、保
护心脑细胞、诱导人肝母细胞瘤 HepG2 细胞凋亡等作
用［2-6］。本实验旨在将原牛黄降压丸中的人工牛黄替换为不
同含量的体外培育牛黄，观察和比较不同含量工程黄与人工
黄之牛黄降压丸对自发性高血压大鼠的降压作用，并探讨其
不同配比与疗效的关系。
结果表明，用体外培育牛黄部分替代人工牛黄之牛黄
降压丸具有明显降压作用，且其降低收缩压的起效时间及降
压幅度均与 ICCB含量有密切关系，含量高则起效时间早、持
续时间长、降压幅度明显。至于将工程牛黄完全替代人工牛
黄，其牛黄降压丸的降压活性是否更加显著，有待下一步
研究。
参考文献:
［1］ 丁 岗，盛龙生，李明慧，等.体外培育牛黄与天然牛黄指纹图
谱的比较研究［J］.中国天然药物，2004，5:309-312.
［2］ 张韶辉，张延琳，王文权，等.体外培育牛黄镇痛作用的电生理
机制［J］.中国药理学通报，2008，8:1073-1077.
［3］ 汪世元，陈孝平，蔡红娇，等.体外培育牛黄诱导人肝癌 HepG2
细胞凋亡的实验研究［J］. 华中科技大学学报(医学版)，
2005，6:754.
［4］ 梁志鹏，杨 镇，蔡红娇，等.体外培育牛黄制剂对实验性血吸
虫病家兔肝纤维化组织细胞外基质的影响［J］. 广东医学，
2005，8:1044-1045.
［5］ 蔡红娇，汪世元，刘烈刚，等.体外培育牛黄耐缺氧和清除自由
基作用的研究［J］.中药药理与临床，2003，6:20-22.
［6］ 杜佐华，蔡红娇，杨荣光，等.体外培育牛黄抗炎作用的实验研
究［J］.中药新药与临床药理，1996，1:450-453.
甘木通醇提物对家兔高脂血症及动脉粥样硬化的预防作用
胡宗礼， 黄晓萍， 陈珺霞
(韶关学院英东生物工程学院，广东 韶关 512005)
收稿日期:2009-12-05
作者简介:胡宗礼(1965 －)，男，副教授，研究方向:中药药理。Tel:(0751)8120123
关键词:甘木通提取物;高脂血症;动脉粥样硬化;家兔
摘要:目的:观察甘木通醇提物对家兔高脂血症及动脉粥样硬化的预防作用。方法:实验分正常对照组(普通饲料)、模
型对照组(高脂饲料)、甘木通低剂量组和高剂量组(添加有甘木通提取物的饲料 +高脂饲料喂养)。于第 4 周和第 8 周
末，测定血脂含量并计算动脉硬化指数(atherosclerosis index，AI)。取胸主动脉制成切片，光镜下观察。结果:①与正常
对照组比，模型对照组家兔血清 TC、TG、LDL-C水平显著升高(P < 0. 01)，HDL-C 水平变化不明显;与模型组比，甘木通
不同剂量组家兔血清 TC、TG、LDL-C水平明显降低(P < 0. 01)，而 HDL-C明显升高(P < 0. 01);②与正常对照组比，模型
对照组家兔 AI值显著增高(P < 0. 01)，主动脉壁可见明显的粥样硬化斑块，内皮下可见大量泡沫细胞和炎性细胞;与模
型对照组比，甘木通提取物预防组的 AI值显著降低(P < 0. 01)，主动脉壁虽然也能观察到动脉粥样硬化斑块及泡沫细
胞，但程度明显减轻。结论:甘木通醇提物能有效地防止家兔高脂血症及动脉粥样硬化的形成。
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2010)09-1599-03
甘木通(Clematis filamentosa Dunn)为毛莨科铁线莲属植
物，用于防治冠心病、高血压等疗效显著［1］。实验发现，甘木
通能显著改善正常家兔的血液流变学特性［2］，但对动物高脂
血症的作用尚未见有报道。本实验通过采用家兔实验性高
脂血症模型，观察甘木通乙醇提取物(extract of Clematis fila-
mentosa Dunn，ECFD)对家兔高脂血症的预防作用，为扩大甘
木通的临床应用范围提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 实验药材与试剂
甘木通药材(由广东雷霆国药有限公司提供，采收于
2008 年 11 月);胆固醇(北京鼎国生物技术有限责任公司，
批号:72710150);胆酸盐(上海国药集团化学试剂有限公司，
9951
2010 年 9 月
第 32 卷 第 9 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
September 2010
Vol. 32 No. 9
批号:20070828);TG、TC、HDL-C 和 LDL-C 检测试剂盒(湖
南永和阳光科技有限责任公司，批号:20090420);分析纯无
水乙醇(天津市永大化学试剂开发中心);猪油、蛋黄、普通
饲料等均为市售。
1. 2 实验动物
健康大白兔，购自广东省从化市太平信华动物养殖场，
体重 1. 5 ～ 2. 0 kg，♂♀兼用，实验动物生产许可证［SCXK
(粤)2009-0023］。
1. 3 主要仪器设备
OLYMPUS AU-640 型全自动生化分析仪(日本);TG16-
WS型台式高速离心机(湖南赛特湘仪离心机仪器有限公
司);FW177 型中草药粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公
司);RE-52B型旋转蒸发器(上海雅荣生化设备仪器有限公
司);TC-120 型智能程控生物组织全自动脱水机(湖北泰维
医疗科技有限责任公司);珊顿 325 型石蜡切片机(英国);
OLYMPUS-BX41 型正置系统金像显微镜(日本);HPIS-2000
型病理图像分析系统(西安华海医疗信息技术股份有限
公司)。
1. 4 受试药物及饲料的制备
1. 4. 1 受试药物的制备
甘木通药材经干燥、粉碎，过 60 目筛。以 70%乙醇为提
取溶剂，药材与溶剂比例为 1:20(W/V)，于 90 ℃条件下加
热回流提取 1 h，共提取 3 次，合并 3 次滤液，减压回收乙醇
后，进一步减压浓缩至棕褐色膏状(每 1 g 相当于原药材 5
g)，冷藏保存备用。
1. 4. 2 高脂饲料的制备
普通饲经料粉碎后，按每 100 g 高脂饲料含胆固醇 1. 0
g、蛋黄粉 5. 0 g、猪油 10. 0 g、胆酸盐 0. 5 g、普通饲料 83. 5 g
的比例配制，充分混合后，制备成颗粒状饲料。
1. 4. 3 含 ECFD饲料的制备
普通饲经料粉碎后，按每 100 g饲料含 ECFD 20 g、普通
饲料 80 g的比例配制，充分混合后制备成颗粒状饲料。
1. 5 实验方法
1. 5. 1 模型制备与实验分组
参照文献方法［3］，家兔用普通饲料喂养 2 周后，从耳动
脉取血测定血清 TC、TG、HDL-C和 LDL-C 含量，选择结果较
一致的家兔作为实验动物。32 只合格家兔随机分成正常对
照组、模型对照组、ECFD低剂量预防组和高剂量预防组，每
组 8 只，所有家兔均单笼饲养。正常对照组家兔给予普通饲
料喂养;模型对照组家兔每天先给予高脂饲料 50 g /kg;
ECFD组每天先给予高脂饲料 50 g /kg，然后给予含 ECFD饲
料 12. 5 g /kg(即 ECFD 2. 5 g /kg)和含 ECFD 饲料 25 g /kg
(即 ECFD 5. 0 g /kg)。各组饲料不足部分用普通饲料补充，
自由饮水，连续喂养 8 周，每 2 周称量一次家兔体重用于调
整饲料量。
1. 5. 2 血脂测定
分别于第 4 周、第 8 周末取血按照试剂盒说明测定各项
血脂指标，TG的测定采用酶比色法(GPO-POP 法)，TC 的测
定采用 COD-CE-PAP 法，HDL-C 与 LDL-C 的测定采用直
接法。
1. 5. 3 动脉硬化指数(arteriosclerotic index，AI)的计算［3］422
根据测定的血脂结果计算 AI值，AI = (TC － HDL-C)/
HDL-C
1. 6 统计学处理
所有数据以均数 ±标准差(x ± s)表示，组间比较采用 t
检验，以 P < 0. 05 具有显著性差异。
2 实验结果
2. 1 ECFD对家兔高脂血症的预防作用
各组家兔喂养 4 周或 8 周时，模型对照组家兔血清 TC、
TG、LDL-C水平与正常对照组比显著升高(P < 0. 01)，而
HDL-C水平仅呈升高趋势(P > 0. 05)。ECFD低剂量或高剂
量给药组家兔血清 TC、TG、LDL-C水平与模型对照组比有显
著降低(P < 0. 01)，血清 HDL-C水平与正常对照组或模型对
照组比均呈明显升高(P < 0. 05，P < 0. 01)。结果提示，
ECFD对家兔高脂血症的形成具有一定的预防作用(见
表 1、2)。
表 1 第 4 周时家兔的血脂水平(x ± s，n =8)
组 别 剂量 /(g /kg) TC /(mmol /L) TG /(mmol /L) HDL-C /(mmol /L) LDL-C /(mmol /L)
正常对照组 — 3. 24 ± 0. 13 0. 68 ± 0. 09 0. 79 ± 0. 17 1. 87 ± 0. 30
模型对照组 — 11. 36 ± 2. 71* 4. 18 ± 0. 45* 0. 91 ± 0. 24 6. 68 ± 0. 39*
ECFD组 2. 5 8. 52 ± 1. 66△△ 2. 93 ± 0. 83△△ 1. 22 ± 0. 21△ 5. 03 ± 0. 78△△
ECFD组 5. 0 6. 33 ± 1. 63△△ 2. 16 ± 0. 38△△ 1. 31 ± 0. 14△△ 4. 27 ± 0. 55△△
注:与正常对照组比较，* P < 0. 01;与模型对照组比较，△P < 0. 05，△△P < 0. 01。
表 2 第 8 周时家兔的血脂水平(x ± s，n =8)
组 别 剂量 /(g /kg) TC /(mmol /L) TG /(mmol /L) HDL-C /(mmol /L) LDL-C /(mmol /L)
正常对照组 — 3. 22 ± 0. 14 0. 71 ± 0. 11 0. 77 ± 0. 15 1. 77 ± 0. 24
模型对照组 — 34. 09 ± 3. 07* 12. 55 ± 1. 99* 1. 02 ± 0. 44 20. 03 ± 3. 25*
ECFD组 2. 5 15. 50 ± 1. 97△ 5. 77 ± 1. 48△ 1. 63 ± 0. 51△ 12. 10 ± 2. 35△
ECFD组 5. 0 11. 28 ± 1. 56△ 3. 16 ± 1. 33△ 1. 68 ± 0. 46△ 7. 94 ± 1. 64△
注:与正常对照组比较，* P < 0. 01;与模型对照组比较，△P < 0. 01。
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2. 2 ECFD对高脂血症家兔动脉粥样硬化的影响
模型对照组家兔不同时期的 AI 值与正常对照组比均显
著升高(P < 0. 01);ECFD预防组的 AI 值与同时期模型对照
组比较显著降低(P < 0. 01)，但仍高于正常对照组(P <
0. 01)，结果表明 ECFD 通过调节血脂能抑制动脉粥样硬化
的形成和促进动脉粥样硬化的消退(见表 3)。
表 3 甘木通提取物对高脂血症家兔不同时间 AI值的
影响(x ± s，n =8)
组 别 剂量 /(g /kg) 第 4 周 第 8 周
正常对照组 — 3. 11 ± 0. 15 3. 18 ± 0. 13
模型对照组 — 11. 48 ± 1. 48* 34. 42 ± 1. 76*
ECFD组 2. 5 5. 98 ± 0. 94△ 8. 51 ± 1. 24△
ECFD组 5. 0 3. 82 ± 0. 89 5. 71 ± 1. 01△
注:与正常对照组比，* P < 0. 01;与模型对照组比，△P < 0. 01。
3 讨论
引起高脂血症的原因有很多［4］，主要有三方面的原因:
①遗传因素，即原发性高脂血症，又称家族性高脂血症，其病
因尚未阐明;②患有易引起高脂血症的疾病，这种情况称为
继发性高脂血症，如高血糖症、糖尿病、肥胖、高尿酸血症、肝
脏疾病、肾脏疾病等;③饮食因素，饮食引起的高脂血症与过
高热量、高胆固醇、高饱和脂肪酸有关，常同时伴有纤维素、
植物蛋白不足。此外，年龄、性别、职业、吸烟、精神紧张都可
导致高脂血症。在众多因素中，饮食因素是最常见、最主要
的因素。在实验室中，建立高脂血症模型常用的动物有多
种，而家兔在调脂新药和动脉粥样硬化实验研究中是首选的
动物模型之一［5］。我们在预实验中发现，家兔用添加有胆固
醇、蛋黄粉、猪油等成分的高脂饲料喂养 4 周时，血清 TC、TG
和 LDL-C水平就有明显升高，但动脉硬化现象不很明显，因
此，本实验选用家兔作为实验动物，用高脂饲料喂养 8 周建
立实验性高脂血症动物模型。
脂质代谢异常是导致高血脂的直接原因，而高血脂又是
引发动脉粥样硬化的重要原因之一［6］。动脉粥样硬化的发
生、发展与脂质浸润、氧化应激、内膜损伤、炎性反应、血小板
活化、血栓形成、血管平滑肌细胞激活、选择性基质代谢及血
管重建等有密切关系［7-8］，但都不能独立阐明动脉粥样硬化
的形成机制可能是:高脂血症(尤其是 TC、LDL-C 升高)是动
脉粥样硬化的始动因素，而炎症、氧化应激、内皮损伤等参与
动脉粥样硬化的发病过程，并在动脉粥样硬化的形成中起关
键性作用。
研究表明，在引起动脉粥样硬化的危险因素中，只有血
浆 TC水平升高才能够在缺乏其他危险因素的情况下，独立
地诱发动脉粥样硬化［9］;而且大量的流行病学资料也证实，
动脉粥样硬化的严重程度与血浆 TC水平呈正相关［10］，HDL-
C浓度与动脉粥样硬化呈负相关［11］。动脉粥样硬化斑块不
仅含有脂质，还有大量的炎性细胞。本实验中，在动脉粥样
硬化斑块内也发现有大量的炎性细胞，而且动脉粥样硬化斑
块的严重程度与血清 TC、TG、LDL-C 水平一致，即模型对照
组血脂水平最高，动脉粥样硬化斑块最明显;ECFD预防组血
脂水平显著低于模型对照组，动脉粥样硬化斑块也明显较
小。结果表明，ECFD不仅能防止家兔实验性高脂血症的形
成，而且能抑制动脉粥样硬化的形成。
大量的研究表明［12］，黄酮类化合物具有降血脂、抗动脉
粥样硬化、抗心肌缺血、抗氧化等作用。结合本实验结果和
甘木通中含有黄酮类化合物，推测甘木通的黄酮类成分是其
调节血脂和抗动脉粥样硬化有效成分之一，但是还有许多问
题亟待解决:①发挥作用是否为黄酮类成分或者是黄酮类的
哪一种?②降血脂机制是抑制脂质吸收?还是抑制胆固醇
合成?或是促进胆固醇降解?③抗动脉粥样硬化的机制等
等，这些将有待于进一步研究。
参考文献:
［1］ 傅锐斌，邱 建，马 骏，等. 冠心康片治疗冠心病心绞痛临
床疗效研究［J］. 中药材，2005，28(11):1045-1046.
［2］ 黄晓萍，胡宗礼，陈珺霞. 甘木通提取液对家兔血液流变学
的影响［J］. 临床和实验医学杂志，2009，8(3):29-30.
［3］ 李仪奎主编. 中药药理实验方法学［M］. 第 2 版，上海:上海
科学技术出版社，2006，619-620.
［4］ 金志清，关会涛. 引发高血脂症的因素及防治［J］. 齐齐哈尔
医学院学报，2009，30(2):191-192.
［5］ 刘雪梅，吴符火.几类高脂血症动物模型的比较［J］.中西医结
合学报，2004，2(2):132-134.
［6］ Lusis A J. Atherosclerosis［J］. Nature，2000，407:233-241.
［7］ 李贵星，刘双凤.动脉粥样硬化发病机制的研究进展［J］.中国
实验诊断学，2007，11(9):1268-1271.
［8］ 张向明. 高脂血症与心脑血管疾病相关因素探讨［J］. 中国
误诊学杂志，2008，8(5):1038-1039.
［9］ Gouni-Berthold I，Sachinidis A. Possible non-classic intracellular
and molecular mechanism of LDL cholesterol action contributing to
the development and progression of atherosclerosis［J］. Curr Vasc
Pharmacol，2004，2(4):363-370.
［10］ Vindis C，Escargueil-Blanc I，Uchida K，et al. Lipid oxidation
products and oxidized low-density lipoproteins impair platelet-de-
rived growth factor receptor activity in smooth muscle cells:impli-
cation in atherosclerosis［J］. Redox Rep，2007，12:96-100.
［11］ Perez-Mendez O. Hight density lipoprotein(HDL). Atherapeutic
obiective in the atherosclerosis prevention? ［J］. Arch Cardiol
Mex，2004，74(1):53-58.
［12］ 郭雪微，卢 梃，王雪里红.天然黄酮类化合物在心脑血管疾
病中应用进展［J］.中国老年学杂志，2006，26(4):1001-1003.
1061
2010 年 9 月
第 32 卷 第 9 期
中 成 药
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September 2010
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