全 文 ：　作者简介:郭英(1979～ ),女 ,湖北省十堰市人 ,汉族 ,有机化学硕士研究生 ,主要从事天然药物的分离分析研究。
＊通讯作者:高云涛 ,男 ,教授。 Tel:13888610792 , E-mail:yun taogao@soh u.com
超声波法提取广枣多酚的研究
郭　英 , 贝玉祥 , 王雪梅 , 高云涛＊
(云南民族大学化学与生物技术学院 , 云南 昆明 650031)
　　摘　要:目的:研究用超声波技术从广枣中提取多酚的最
佳条件。方法:考察了超声波的提取时间 、乙醇浓度 、料液比 3
个单因素对多酚提取率的影响 , 并在单因素实验基础上进行
正交实验。结果:得到提取广枣多酚的最佳工艺条件为:60%
乙醇;料液比为 1:15;超声提取 60min , 多酚得率为 0.09%。
结论:将该方法与常规醇提法进行了比较 , 表明 2 种方法提取
率相当 ,但超声波提取法能够避免多酚在高温下的分解 , 并极
大地缩短了提取时间。
关键词:超声波;广枣;多酚
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2008)08-0036-02
广枣为蒙医习用药材 , 系漆树科南酸枣属植物南酸枣
[ Choero spondias-nxilla ris(Roxb.)Burtt et H ill] 的成熟干燥果
实 ,又名五眼果 、酸枣 、山枣子 、人面子 、货朗果 、鼻涕果 、野枣
子等。已被中华人民共和国药典收载[ 1] 。 蒙医认为 , 广枣具
有行气活血 、养心安神功能。用于治疗气滞血瘀 , 胸痹作痛 ,
心悸气短 ,心神不安等症[ 2] 。蒙药治心病药方中半数以上以
广枣为主药或配有广枣 , 疗效确切可靠。除具特殊的药用价
值外 , 在湖南民间还有着悠久的食用习俗 , 主要用于开胃消
食 ,醒酒等[ 3] 。
广枣中含有糖 、氨基酸 、有机酸 、鞣质 、氨基酸 、黄酮类及
酚性成分等。植物多酚(plant polyphenols)又叫植物单宁 , 是
天然植物中分离提纯的多种酚类化合物的复合体[ 4] , 目前将
广枣制成复方广枣胶囊 ,具有清心火 、清浊镇痛之功效。为此
广枣药用活性成分 , 特别是多酚提取新方法的研究具有很好
的现实意义。
广枣中活性成分的提取有水浸提法 、溶剂回流法 、超声波
提取法等 ,其中超声波提取法具有较大的开发前景 , 其主要是
利用了超声波的空化效应[ 5] ,使得植物的活性成分溶出 , 且体
系的温度不会大幅度升高 ,不会破坏其有效成分。因此 , 运用
超声波提取法可以达到省时 、高效 、节能的目的。
本研究利用超声波新技术提取多酚的方法 ,考察了超声
波的提取时间 、乙醇浓度 、料液比 , 3 个单因素对多酚提取率的
影响 ,并在单因素实验基础上进行正交实验得到广枣多酚提
取的最佳工艺条件。
1　实验材料与方法
1.1　实验材料与仪器设备
1.1.1　实验材料　广枣药材(产地:湖南 , 购于陕西省药材公
司 ,由陕西省药品检验所进行鉴定), 焦性没食子酸 ,酒石酸钾
钠 ,七水合硫酸亚铁 , 磷酸氢二钠 ,磷酸二氢钾 , 无水乙醇 , 石
油醚。所用试剂均为分析纯 , 实验用水为蒸馏水。
1.1.2　实验仪器与设备　AS3120A 超声波清洗器 , 9200 型
紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
1.2　实验方法
1.2.1　广枣多酚的提取　取干燥的广枣药材适量粉碎 ,准确
称取 40～ 60 目粉末 2.0g , 加入一定量的石油醚超声 30min ,
过滤 , 滤渣挥发干燥 , 去除残余石油醚后 , 加入一定浓度的乙
醇溶液超声提取一定时间 , 过滤 ,作为待测液。
1.2.2　广枣多酚的测定　取 1.2.1 中的待测液 5m L 于
10mL 比色管中 ,以酒石酸亚铁比色法[ 6] 测定多酚的含量。 本
文以 100mg/ L没食子酸为标准 , 测定波长 540nm , 回归方程:
A= 0.018c(r=0.9998)。以下式计算广枣多酚得率:
多酚得率(%)=(提取液中多酚质量/原料质量)×100%
1.2.3　实验因素的确定　影响超声提取的因素很多 , 如溶剂
种类 、超声时间 、溶剂用量 、溶剂浓度 、提取时间等 , 因此本实
验主要研究乙醇浓度(体积分数)、超声时间 、乙醇用量对多酚
得率的影响。笔者通过单因素实验筛选出多酚得率影响显著
的因素并确定出它们的最佳水平范围 , 再通过正交实验确定
了最佳的提取条件。
2　结果与讨论
2.1　影响提取率的因素
2.1.1　超声时间对多酚得率的影响　加入一定浓度的乙醇
溶液分别超声提取 30 、40 、50、60、70min , 其余按实验方法进
行 ,实验结果见图 1。
　
图 1　超声时间对多酚得率的影响
36 云 南 中 医 中 药 杂 志　　　　　　　　　　2008 年第 29 卷第 8 期DOI :10.16254/j.cnki.53-1120/r.2008.08.033
由图 1 可见:得率随超声时间的增大而增大 , 但超声时间超过
60min 后得率开始变化不大 ,因此超声时间控制在 50 ～ 60min
内较为合适。
2.1.2　醇浓度(V/ V)对多酚得率的影响　醇浓度(V/V)分
别为 30%、40%、50%、60%、70%, 分别超声提取 60min , 其余
按实验方法进行 , 实验结果:吸光度与乙醇浓度的关系图 , 见
图 2。可以看出 , 得率随乙醇浓度的增大而增大 , 在 60%时增
加的比较快 ,大于 70%后溶液出现悬浊物。故选用 60%乙醇
溶液比较适宜。
　
图 2　醇浓度对多酚得率的影响
2.1.3　溶剂用量(料液比)对多酚得率的影响　加入一定浓
度的乙醇溶液按料液比 1∶10、1∶15 、1∶20、1∶25 、1∶30 分
别超声提取60min , 其余按实验方法进行 , 实验结果:吸光度与
料液比的关系图 ,见图 3。可以看出 , 料液比在 1∶15 ～ 1∶25
时 ,多酚得率增加的速率较大 , 但大于 1∶30 时开始下降 , 因
此 ,料液比不宜过大 , 以 1∶15～ 1∶20 比较合适。
　
图 3　料液比对多酚得率的影响
2.2　正交实验　综合前面所做的单因素实验 , 准确称取
2.00g 广枣粉末 , 以不同的超声时间 、乙醇体积分数 、料液比作
为考察的 3 个因素 ,各取 2 个水平 , 选用 L4(32)正交表进行实
验 ,以多酚得率为指标 , 全面研究这几个因素对广枣多酚得率
的影响。因素水平和实验结果及极差分析分别见表 1 、表 2。
表 1　正交实验因素水平表
因素水平 超声时间 A(min) 乙醇体积分数 B(%) 料液比 C
1 50 50 1∶15
2 60 60 1∶20
表 2　L4(32)正交实验结果及极差分析
No 超声时间 A(min)乙醇浓度 B(%) 料液比 C 吸光度(%)
1 1 1 1 0.275
2 1 2 2 0.286
3 2 1 3 0.260
4 2 1 1 0.312
K 1/ 2 0.280 0.268 0.293
K 2/ 2 0.286 0.299 0.273
R/ 2 0.006 0.031 0.020
　　从极差分析结果可以看出 , 各因素对多酚得率影响的主
次顺序为:B>C>A , 即乙醇体积分数>料液比>超声时间。
最后确定的最佳提取条件为:A 2B2C1 , 即:乙醇体积分数为
60%、超声提取 60min 、料液比为 1∶15。
2.3　实验验证　选取正交设计分析的最佳提取工艺条件 , 重
复 3 次实验 ,检测其含量 , 得到多酚平均得率为 0.09%。
2.4　不同提取方法的比较　采用有机溶剂回流法与超声波
提取法进行比较。用 60%乙醇回流提取 2 h , 料液体比 1 ∶
15 ,提取温度 80 ℃, 多酚得率为 0.1%, 得率与本方法相近 , 但
是 ,超声波提取法操作简单 、快速 , 所需时间较短 , 而溶剂回流
法提取时间较长。
3　结论
在已有提取广枣的方法上采用超声波法提取广枣中的多
酚 ,其最佳提取工艺条件为:60%乙醇溶液 , 料液比为 1∶15 ,
超声提取 60min。在此条件下 , 多酚平均得率为 0.09%,几个
因素对多酚得率的主次顺序为乙醇体积分数>料液比>超声
时间。
溶剂回流法与超声波提取法提取广枣中多酚 , 2 种方法得
率相当 , 但是超声波提取法时间大大缩短 , 操作简单 , 较其它
方法具有明显的优势。
参考文献:
[ 1] 中华人民共和国卫生部.中华人民共和国药典[ M] .北京:人民卫
生出版社 , 1990:30.
[ 2] 中国医学百科全书编辑委员会.中国医学百科全书.蒙医学.
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国茶叶加工, 1995 , 4:28～ 30.
(收稿日期:2007-11-28。)
372008 年第 29 卷第 8 期　　　　　　　　　　云 南 中 医 中 药 杂志
Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
Vol.29.N o.8 (General No.182) August , 2008
Main Content
Study on the Clinical Effect of 44 Diabetic Nephropathy Patients with the Combination of Chinese and Western Medicine
　　 CHEN Zhong-wei , WANG Yue, BAO Li-zheng , et al.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the Extraction of Polyphenol from Choerospondias Fruit with Ultrasonometry
　　 GUO Ying , BEI Yu-xiang , WANG Xue-mei , et al.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Effect of Different Parts Extract of Rubia Yunnanensis(Franch)Diels on the Isolated Aortic Annulus of Rats　　 CAO Dong , SHAN Yun-qing , ZHANG Guo-wei , et al.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Analysis and Comparison of the Content of Trace Elements in the Seed and Sprout of Semen Cassia Torae
　　 ZHANG Ling , CAI Hong-xin , XIA Zuo-li⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the Clinical Effect of 44 Diabetic Nephropathy Patients with the Combination of Chinese and Western Medicine
CHEN Zhong-wei , WANG Yue , BAO Li-zheng , et al.(Juntan T raditional Chinese Medicine Hospital , Juntan , Jiangshu , 213200)
Abstract:Objective:T o observe the clinical effect of diabetic nephropathy (DN)patients treated with the combination of Bushenyiqi
pills and Enalapril.Methods:79 patients were randomly divided into a trea tment g roup and a control group.The two g roups w ere given the
same basic treatment of DN patients.The treatment group was added with the combina tion of Busheny iqi pills and Enalapril while the
control g roup was simply treated with Enalapril.Tw o months was a course of treatment.The symptom , sign , blood glucose, blood
pressure, UAER and urine protein of 24h of the two g roups we re observed befo re and after the treatment.Results:The compa rison of the
two groups showed significant diffe rence(P<0.05).The blood gluco se and blood pressure of the two g roups lowered obviously after the
treatment.The comparison of the tw o g roups after the treatment show ed no significant difference(P>0.05).The UAER and urine protein
of 24h of the two g roups decreased after the treatment.sig nificant difference(P <0.05).The comparison of the two g roups showed
sig nificant difference(P<0.05).The improvement of the UAERand urine protein of 24h of the treatment group was superior to tha t of the
control g roup.The total effective ra te of the treatment g roup was 88.3%while that of the control g roup was 69.7%, showing significant
difference(P<0.05).Conclusion:The clinical effect o f the combination of Bushenyiqi pills and Enalapril is better than that of Enalapril.
Key words:diabetic nephropathy;Bushenyiqi pill;renal
Study on the Extraction of Polyphenol from Choerospondias Fruit with Ultrasonometry
GUO Ying , BEI Yu-xiang , WANG Xue-mei , et al.(Scho ol of Chemistry and Biotechnology , Yunnan University fo r N ationalities , Kunming , Yunnan , 650031)
Abstract:Objective:T o study the best method to extract polyphenol from choerospondias fruit with ultrasonometry.Methods:The
effect of single facto r on the extract rate of polyphenol was observed from extract time, alcohol concentratio n , feed liquid ratio and an
orthogonal expe riment was conducted on the base of the single facto r experiment.Results:The best technology fo r the ext raction of the
poly phenol from choerospo ndias fruit was the alcohol concentra tion was 60% of alcoho l , the feed liquid ratio was 1:15 , the time w as 60min.
The y ield rate of the polyphenol was 0.09%.Conclusions:Compa red with the conventional method , the method had the same ex traction
rate, but the decomposition of the polyphenol under high temperature could be avoided w ith the ultrasonometry and the extraction time
greatly shor tened.
Key words:ultrasonometry;choerospondias f ruit;polyphenol
Effect of Different Parts Extract of Rubia Yunnanensis(Franch)Diels on the Isolated Aortic Annulus of Rats
CAO Dong , SHAN Yun-qing , ZHANG Guo-w ei , et al.
(Yunnan University of T raditional Chinese M edicine, Kunming , Yunnan , 650200)
Abstract:Objective:T o select different pa rts ex tract of Rubia yunnanensis(Franch)Diels to test the energetic intensity of the diastole
of isolated aortic annulus of rats , laying the foundation fo r the study on the effect of Rubia y unnanensis (F ranch)Diels on the anti-
myo cardial ischemia activity.Methods:Norepinephrine was used to induce the contraction of the isolated aor tic annulus of the rats.An
observation was made on the effect of 95% of ethanol ex tract of Rubia yunnanensis(F ranch)Diels on the isolated ao rtic annulus of the rats
with endothelium and decortication.Rubia petroleum ether , ethyl , n-butyl alcohol and water w ere used in four different parts of the rats to
select a main activity part.Results:95% of ethanol extract of Rubia y unnanensis (F ranch)Diels had a strong diastolic effect on the
endothelium rats with certain dose dependence.The concentration of the Rubia petroleum ether, ethyl , n-buty l alcohol and w ater affected
the ao rtic annulus diastole of the endothelium rats with ce rtain dose relativity.Among which , the diastole of the ethy l pa rt was stronger
than the othe r three pa rts.Conclusio n:The ethy l part of Rubia yunnanensis(F ranch)Diels has a stro nger diastole on blood vessel and can
be used to study the anti-myo cardial ischemia activity.
Key words:Rubia y unnanensis(F ranch)Diels;aor tic annulus;anti-myocardial ischemia
Analysis and Comparison of the Content of Trace Elements in the Seed and Sprout of Semen Cassia Torae
ZHANG Ling , CA I Hong-xin , XIA Zuo-li
(Institute o f Life Science, Taishan M edicical College, Tai an , Shandong , 271000)
Abstract:Objective:T o analyze and compa re the co ntent of trace elements in the seed and sprout of Semen cassia to rae.Methods:An
inductance coupled plasma emission spectrometer w as used to determine the co ntent of the trace elements in the seed and sprout of Semen
cassia to rae and the diffe rence of the tw o trace elements was analyses and compared.Results:Bo th the seed and sprout of Semen cassia torae
contained Mg , Fe, Zn , Mn , Cu , and so on , w hich are traditional Chinese herbal mate rials of g reat nutrition value.The content of M n , Cu ,
Zn in the sprout was highe r that that in the seed.Conclusion:Semen cassia torae sprout is mo re suitable to be used in health food than the
seed.
Key words:Semen cassia torae;Semen cassia to rae sprout;trace elements