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维吾尔药材胡荽子的体外抑菌作用研究



全 文 :·284· 中国现代药物应用2015年8月第9卷第15期 Chin J Mod Drug Appl, Aug 2015, Vol. 9, No. 15
生人参小于 7 年生 , 7 年生人参小于 14 年生。可以看出 , 人
参的药理活性在一定程度上随着生长年限的加大而增强 , 但
并不是呈现正比例的关系。人参的主要成分人参皂苷在前 4
年累积较快 , 6 年以后则累积率降低 , 因此 , 年限越久的人参
活性增长率反而降低。
综上所述 , 初步认定 , 我国采收生长 7 年的人参是基本
合理的。
参 考 文 献
[1] 彭明勇 , 李艳 . 人参不同生长年限的药理作用的比较 . 中外医
疗 , 2008, 27(28):72.
[2] 李熙英 , 金海强 , 贾斌 . 不同生长年限人参地土壤微生物多样
性研究初报 . 延边大学农学学报 , 2011, 33(2):133-136.
[3] 刘佳 . 吉林产区人参、西洋参化学和蛋白差异性对比研究 . 北
京中医药大学 , 2013.
[4] 李芸彤 , 赵雨 , 王思明 , 等 . 不同生长年限人参中 8 种酶活力
比较 . 中华中医药杂志 , 2012, 27(6):1567-1570.
[5] 陈雨 . 不同生长时期人参中主要活性成分的比较研究 . 长春中
医药大学 , 2013.
[收稿日期 :2015-04-28]
基金项目 :新疆医科大学科研创新基金项目(项目编号 :
XJC2013104)
作者单位 :830011 新疆医科大学附属肿瘤医院药学部 ( 张倩
孟新源 王晓梅 ) ;新疆维吾尔自治区食品药品检验所 ( 张明君
耿文宁 )
通讯作者 :张倩 王晓梅
维吾尔药材胡荽子的体外抑菌作用研究
张倩 孟新源 张明君 耿文宁 王晓梅
【摘要】 目的 考察维吾尔药材胡荽子不同提取物的体外抑菌效果。方法 分别制备胡荽子水提
取物和 95% 乙醇提取物 , 采用试管 2 倍稀释与琼脂平板法 , 对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念
珠菌进行体外抑菌作用的研究 , 测定其最低抑菌浓度与最低杀菌浓度。结果 胡荽子水提取物对大肠埃
希菌和白色念珠菌均无抑菌作用 , 仅对金黄色葡萄球菌有抑菌作用 ;胡荽子 95% 乙醇提取物对金黄色
葡萄球菌和大肠埃希菌有抑菌作用。结论 胡荽子 95% 乙醇提取物比水提取物抑菌作用强。
【关键词】 胡荽子 ;抑菌作用 ;金黄色葡萄球菌 ;白色念珠菌 ;大肠埃希菌
DOI :10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.195
胡荽 (Coriandrun sativum L) 是伞形科植物 , 又名芫荽 , 俗
称香菜等 , 是一种烹饪常用的调味蔬菜。其果实胡荽子也是
常用的香辛料 , 可药食两用。中医学中有驱风、透疹、健胃、
祛痰之效[1], 还能增进胃肠腺分泌 , 促进胆汁分泌、有镇咳、
平喘作用 , 其挥发油还对某些真菌有抑制作用[2]。胡荽子油
还可用于化脓性消炎 , 促进肉芽生成等外伤治疗[3], 但对其
在抑菌实验方面的报道却很少 , 为进一步开发和利用这一资
源 , 本实验对胡荽子的抑菌效果作了初步的研究为该药的开
发和临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 胡荽子 500 g, 购自新疆自治区维吾尔医院 , 药材
经新疆医科大学药学院鉴定。95% 乙醇、甲醇、水为纯化水 ,
其他试剂均为分析纯。菌株和培养基 :金黄色葡萄球菌、白
色念珠菌、大肠埃希菌 , 均购自新疆维吾尔自治区食品药品
检验所 ;肉汤培养基、琼脂培养基、改良马丁培养基、玫瑰
红纳琼脂培养基。主要仪器:旋转蒸发仪、电热恒温培养箱、
生化培养箱、生物安全柜等。
1. 2 方法
1. 2. 1 药液的制备 胡荽子 500 g 加 3 倍量的 95% 乙醇回
流提取在 65~75℃ 的条件下提取 3 次 (2 h、2 h、1 h), 合并回
收乙醇制得醇提浸膏。再将剩余药渣经水煎煮 , 合并浓缩后
制得醇后水提浸膏。分别将胡荽子醇提浸膏和醇后水提浸膏
再加入蒸馏水 20 ml 搅拌至浸膏溶解 , 滤膜过滤除菌 , 配成
0.75 g/ml 的胡荽子醇提物和醇后水提物药液备用。
1. 2. 2 菌液的制备 将冻存于 -80℃的实验用菌株取出 , 活
化后根据试验的需要配制成含菌数为 103~105 cfu/ml 的菌悬
液 , 备用。
1. 2. 3 液体培养基连续稀释法 分别取 10 支灭菌试管 , 取
胡荽子提取浓缩液 1 ml 采用试管 2 倍稀释法 , 以营养肉汤或
改良马丁液体培养基倍比稀释后 , 分别加入含菌数为 103~105
cfu/ml 的菌悬液 0.1 ml。另在营养肉汤或改良马丁液体培养
基接种相同菌种的菌悬液作为阳性对照 ;以 0.5 ml 营养肉汤
或改良马丁液体培养基与 0.5 ml 蒸馏水或 20% 甲醇溶液作
为稀释剂对照 , 以有药液不加试验菌液的为空白对照。
1. 2. 4 最低抑菌浓度的测定 将上述试管用橡皮塞封口 ,
放入 37℃恒温培养箱中培养 24 h。因药材提取液颜色较深
并且澄明度差 , 影响试验结果的观察 , 肉眼不易辨明其生长
情况 , 从各管取一环转接于营养琼脂平板或玫瑰红钠琼脂平
板上 , 观察有无菌落生长。以无菌落生长的药液浓度为该药
材的最低抑菌浓度 (MIC)。
1. 2. 5 最低杀菌浓度的测定 从每个试管中各取 0.1 ml 培
养液接种于营养琼脂平板或玫瑰红钠琼脂平板上 , 放人 37℃
恒温培养箱中培养 24 h, 观察各琼脂平板上菌落生长情况 ,
以平板上计数少于 5 个菌落的药液浓度作为该药材的最低杀
菌浓度 (MBC)。
2 结果
胡荽子不同提取物对各供试菌的影响 胡荽子 95% 乙
醇提取物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用 , 其
中对大肠埃希菌的 MIC 和 MBC 为 187.5 mg/ml ;对金黄色葡
萄球菌的 MIC 和 MBC 为 46.87 mg/ml ;对白色念珠菌的 MIC
375 mg/ml。胡荽子的醇后水提物对大肠埃希菌和白色念珠菌
·285·中国现代药物应用2015年8月第9卷第15期 Chin J Mod Drug Appl, Aug 2015, Vol. 9, No. 15
均无抑菌作用 , 而对金黄色葡萄球菌有抑菌作用 , 即 MIC 和 MBC 为 46.87 mg/ml。见表 1。
表 1 胡荽子不同提取物对受试菌的 MIC 和 MBC 测定结果
组别 稀释度 药液浓度 (g/ml)
大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 白色念珠菌
醇提物 醇后水提物 醇提物 醇后水提物 醇提物 醇后水提物
1 1:2 375.00 - + - - -ab +
2 1:4 187.50 -ab + - - + +
3 1:8 93.75 + + - - + +
4 1:16 46.87 + + -ab -ab + +
5 1:32 23.44 + + + + + +
6 1:64 11.72 + + + + + +
7 1:128 5.86 + + + + + +
8 阳性对照 + + + + + +
9 稀释剂对照 + + + + + +
10 空白对照 - - - - - -
注 :“ + ”表示有菌落生长 , “ -”表示无菌落生长 , “a”表示 MIC, “b”表示 MBC
3 小结
本试验结果表明 , 胡荽子 95% 乙醇提取物对金黄色葡
萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌等菌株均有抑制作用 , 并
且对金黄色葡萄球菌的抑制作用优于大肠埃希菌和白色念珠
菌。醇后水提物对金黄色葡萄球菌有抑制作用 , 对其他菌株
均无抑制作用。95%乙醇提物抑菌效果明显强于醇后水提物。
对其体外抑菌效果的研究 , 有利于促进该植物的合理开发 ,
但是对其抑菌成分、抑菌机理等方面还有待于进一步研究。
参 考 文 献
[1] 中国科学院中国植物志编委会 . 中国植物志 ( 第五十五卷第一
分册 ). 北京 : 科学出版社 , 1979:89-91.
[2] 刘勇民 . 维吾尔药志 ( 上册 ). 乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 ,
1999:215-217.
[3] 李良松 , 刘懿 , 杨丽萍 .香药本草 .北京 :中国医药科技出版社 ,
2000:23-29.
[收稿日期 :2015-01-26]
作者单位 :417000 湖南省娄底市食品药品检验检测所
追风透骨胶囊中马兜铃酸 A的限量检查
吕情花
【摘要】 目的 完善追风透骨胶囊中马兜铃酸 A 的限量检查。方法 用 Waters C18 (4.6 mm×250 mm,
5 μm) 色谱柱检测马兜铃酸 A, 流动相 :乙腈 -0.4% 冰醋酸 (30∶70), 流速 :1.00 ml/min, 检测波长∶393 nm。
结果 用本法测定 10 批不同批号的追风透骨胶囊 , 均能准确的判断为未检出马兜铃酸 A。结论 本法结
果准确 , 可完善追风透骨胶囊中马兜铃酸 A 的限量检查。
【关键词】 高效液相色谱法 ;追风透骨胶囊 ;马兜铃酸 A ;限量检查
DOI :10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.196
追风透骨胶囊为国家食品药品监督管理局标准收载的品
种[1]。由制川乌、细辛、地龙等二十四味中药组成 , 具有通
经络、祛风湿、镇痛祛寒等功效。用于风寒湿痹、四肢痹痛、
手足麻木等。标准中用高效液相色谱法 (HPLC 法 ) 测定马兜
铃酸 A 的限量 , 但在试验中发现 , 该试验条件下有其他物质
的干扰 , 影响结果的判断。追风透骨胶囊属国家基本药物 ,
国家食品药品监督管理总局每年都会对每一种基本药物进行
监督抽查检验 , 如果标准方法存在问题 , 那势必会造成错误
的结论。因此 , 本文改变了一些实验条件 , 排除其他物质的
干扰 , 更能准确的反映药品的质量。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试药 Waters e2695 HPLC 色谱仪 , METTLER
TOLEDO XS205 十万分之一天平 ;水为Ⅰ级纯化水 , 乙腈
为色谱纯 , 其他试剂均为分析纯。马兜铃酸 A 对照品购自
中国药品生物制品检定所 ( 批号 :110746-200806)10 批追
风透骨胶囊由湖南省回春堂药业有限公司提供 , 批号分别
为 20130514 ;20130305 ;20130308 ;20121213 ;20140521 ;
20141203 ;20131108 ;20130206 ;20140409 ;20140709。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 标准方法
1. 2. 1. 1 色谱条件及系统适用性试验 以碳十八烷基硅烷
键合硅胶为填料 , 以乙腈 -0.4% 冰醋酸 (35 :65) 为流动相 ,
流速 :1.00 ml/min, 检测波长 393 nm, 理论板数按马兜铃酸 A
峰计应 >5000, 分离度 >1.5。
1. 2. 1. 2 对照品溶液 精密称取经五氧化二磷减压干燥至
恒重的马兜铃酸 A 对照品约 9 mg, 加甲醇约 90 ml, 超声处理
5 min 使溶解 , 放冷 , 加甲醇稀释至 100.00 ml, 摇匀 , 再精密
量取 2 ml, 加甲醇稀释至 50.00 ml, 摇匀 , 即得。
1. 2. 1. 3 供试品溶液 精密取供试品细粉 10 g, 置 250 ml 圆
底烧瓶中 , 加甲醇约 80 ml 回流提取 1 h, 滤过 , 残渣加甲醇
20 ml 洗涤 , 滤过 , 合并滤液 , 水浴蒸干 , 残渣加 0.1 mol/L 氢