全 文 ：药 物 生 物 技 术
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灰树花胞内多糖抗辐射作用的初步研究
金国虔 ,叶波平 ,奚 涛
(中国药科大学 ,南京 , 21 “ x刃 )
摘 要 利用深层培养方法获得菌丝体 ,经热水提取后获得灰树花的菌丝体胞内多糖 。 以之为材料 ,研究
了其对 . 伍下辐照小鼠白细胞数目以及存活率的影响 ,发现灰树花胞内多精具有明显的促进辐照小鼠白细胞数
目恢复以及提高存活率和存活时间的作用 .此结果说明灰树花胞内多糖具有一定的抗辐射作用 。
关键词 灰树花多糖 ;抗辐射作用 ;存活率
中圈分类号 二侧拓 5 文献标识码 :A 文章编号 : 1X() 5 一 即 15( 么X) 3》01 一 侧洲O 一 03
灰树花 ( 。如如加爪么犯 ) , 又名栗子蘑 、莲花菌 、
贝叶多孔菌 ,属担子菌亚门层菌纲非褶菌目多孔菌
属担子菌 。 其子实体和菌丝体中富含多种氨基酸 、
维生素、 多糖以及多肤等营养成分 , 被称为“ 食用菌
中的珍品” 。 日本学者等川通过对灰树花发酵液成
分的研究发现 ,其中的灰树花多糖 (为含 件1 , 6 侧链
的件1 , 3 一葡聚糖 )是主要的活性成分 ,大量研究亦已
证明灰树花多糖具有抗肿瘤 、抗凝血 、降血糖 、血脂 、
降压 、抗 扭V病毒 、改善免疫系统功能以及抗肝炎等
作用 z[] ,现已开发成多种含有灰树花多糖的保健品 ,
然而 , 目前尚未见有灰树花多糖抗辐射作用的研究 ;
此外 ,近年来 , 随着森林资源的日夜贫乏 ,野生灰树
花子实体的产量急剧减少 , 已不能满足市场日夜增
长的需求 ,通过菌丝体发酵生产灰树花多糖的研究
引起众多研究人员的关注〔, 一 51 。
本研究旨在利用深层液体培养技术生产灰树
花菌丝体 ,通过热水浸提获得灰树花胞内多糖 , 并
通过其对。 伪 . 了辐照小鼠 30 d 存活率及白细胞数
目的影响初步研究其抗辐射的作用 。
1 材料与方法
1
.
1 材料来源
灰树花 ( icr fo la 丘犯ds 妞 )菌种由本实验室保存 。
1
.
2 灰树花培养及多特分离
灰树花液体深层培养条件参照孙克等 [’1 的方法 。
灰树花多糖提取参照汪维云等61[ 的方法 ,提取
的多糖经 5 ℃烘干后为褐色粉末 。
1
.
3 实验动物
健康昆明种小鼠来自南京医科大学动物房 ,雌
性 ,共 136 只 ,体重为 20 . 0 土 2 . o ga
1
.
4 样品剂黄选择
通过预实验 , 确定灰树花多糖的用量为 0 . 27
留掩体重 (中剂量 ) ;上下各设一个剂量组 , 分别为
0
.
81 以吨(高剂量 )和 0 . 13 留吨 (低剂量 ) 。 提取的
多糖按上述剂量以蒸馏水配制成所需浓度 ,对照组
为蒸馏水 ,连续经口灌胃印 d ,每天一次 。
1
.
5 辐照剂童选择
13 6 只小鼠取尾血统计每只小 鼠的白细胞总
数 , 以此为依据随机分成 4 组 (即 3 个剂量组和 1
个对照组 ) ,每组 34 只 ,连续经口灌胃印 d ,在灌胃
的 d 30 ,各组小鼠经。 份下射线一次性照射 S yG ,
照射后 d Z 、 7 每组各取 17 只小鼠尾血 ,分别测定
白细胞数 ;每组随机取 17 只小鼠用于观察平均存
活时间或 30 d存活率 。
1
.
6 实脸数据统计
使用 I饭 p or w 软件建立小鼠白细胞数据库 ,利
用 E P I软件进行数据统计和分析 , 白细胞计数及平
均存活时间使用方差分析方法 , 30 d存活率用卡方
检验 。
2 实验结果
2
.
1 灰树花多糖对辐照小氛体重的影响
分别测定了小鼠在灌胃前 、灌胃 d3 0 和 鹉7 的
收稿日期 : 2以犯 一以 一璐
作者简介 :金国虔 , 女 , l肠 8年 10 月生 ,安徽人 ,理学硕士 ,现于中国药科大学中药学院中药资源学教研室 ,从事中药资源研究与教学。
联系人 :奚涛 ,位5 一 3刀13 89 。
金国虔等 :灰树花胞内多糖抗辐射作用的初步研究
体重和增重情况 (表 1 ) ,结果表明 : 不同剂量组的
灰树花多糖可以明显增加辐照后小鼠的体重 ,其中
中 、高剂量组与对照组的相 比有明显差异 ( 尸 <
0
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0 1和 P < 0 . 05 ) 。
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2 灰树花多糖对辐照小鼠白细胞总数的影响 胞总数 ,与对照组相比差异显著 ( 尸 < 0 . 0 1 ) ,低剂
分别测定了小鼠辐照前 、 辐照后 d2 和 d7 尾血 量组和中剂量组与对照组相比则无明显差异 ) ( 尸
中白细胞总数 (表 2) 。 从表中可 以看出 : 辐照前 , > 0 . 05 ) ;辐照后 d7 天 , 不同剂量组的灰树花多糖
与对照组相比灰树花多糖的处理并不能明显促进 处理均可以明显增加小鼠白细胞总数 ,低 、 中 、高剂
小鼠白细胞总数的增加 ( 尸 > 0 . 05 ) ;辐照后 d2 ,高 量组与对照组相比差异显著 ( 尸 < 0 . 05 , 尸 < 0 . 01 ,
剂量组灰树花多糖的处理可以明显增加小鼠白细 尸 < 0 . 0 1 ) 。
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3 灰树花多糖对小鼠存活率的影响
分别观察了灰树花多糖对辐照小鼠存活时间
和存活率的影响 (表 3 ) , 发现不同剂量灰树花多糖
处理后 ,辐照小鼠存活率及存活时间均有所提高 ,
其中低剂量处理小鼠的存活率与对照组相比没有
明显差异 ( 尸 > 0 . 05 ) ; 中 、 高剂量组小鼠的存活时
间较对照组有显著差异 ( P < 0 . 05 ) 。
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3 讨论
近年来 ,随着放射性污染程度的不断提高以及
放射医学在肿瘤治疗中的应用及因此产生的副作
用等 ,人们开始寻找对正常细胞有特异保护作用的
抗辐射剂以提高放射治疗的效果 ,抗辐射药物开始
引起研究人员的普遍关注。
大多数研究表明 :具有抗辐射作用的天然活性物
质主要是多糖类物质 ,它们一般存在于植物 、真菌 、细
菌以及藻类中 ,现已发现的具有抗辐射效应的多糖类
物质有灵芝多糖以及螺旋藻多糖等 ,此外 ,少数贰类 、
香豆素类及生物碱类也有一定的抗辐射效果 ,这些物
质主要是通过激活细胞内的辐射损伤修复系统和免
疫系统来提高生物机体的辐射抗性 。 从已报道的情
况来看 :灰树花多糖具有明显的抗肿瘤活性 ,其主要
作用机制是通过对 卫吓七va[ ] 、 肠N `户〕以及 1 g0t 〕等细
胞因子的诱导来达到抑制肿瘤细胞增殖活性的 , 然
而 , 尚未见有灰树花多糖抗辐射的报道 。
本研究利用前面建立的灰树花深层液体培养
方法 , 获得了菌丝体胞内多糖 , 前期的研究工作已
表明 :灰树花液体深层发酵后的胞外外多糖和胞内
2
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4 2 药 物 生 物 技 术 第 10 卷第 1 期
内多糖均含有葡萄糖 、 木糖以及甘露糖 ,但两者的
结构与分子量存在着明显的差异 6[] 。 在对灰树花
多糖抗辐射作用的研究中 ,我们选择胞内多糖为材
料 ,主要是因为胞外多糖的分子量较小 ,且侧链不
明显 ,而具有明显的侧链及较大分子量是灰树花多
糖抗肿瘤活性的一个重要的特征 l0[] 。
目前 ,用于判断药物抗辐射效果的指标主要
有 :外周血白细胞和淋巴细胞数 、 脾淋巴细胞增殖 、
外周血淋巴细胞转化率 、骨髓有核细胞数 、淋巴细
胞 DN A 合成以及辐照小鼠的存活率和存活时间
等 。 研究 已发现 , 在肿瘤患者的放化疗治疗过程
中 , 由于患者的造血功能受到破坏 ,患者白细胞数
量急剧减少 ,从而导致患者免疫系统遭到损伤 , 产
生较为严重的副作用 。 我们在对灵芝多糖及灵芝
蛋白研究中的临床调查发现 l[] : 灵芝多糖及灵芝
蛋白可以明显促进患者放化疗治疗后患者外周血
中的白细胞数目的恢复 ,从而起到加速患者恢复的
功能 。 本研究以辐照小鼠血液中白细胞数目以及
小鼠的存活率和存活时间为指标 ,通过对小鼠采用
灰树花多糖连续经口灌胃印 d , 并在灌胃的 d 30
采用。 伪 .下射线一次性照射的方法 ,初步研究了灰
树花多糖的抗辐射效应 ,发现不同剂量的灰树花多
糖均可以明显促进白细胞数目的恢复 ,且呈现出一
定的剂量依赖效应 ;较高剂量的灰树花多糖可以明
显提高小鼠的存活率和存活时间 ,这与其它多糖类
物质抗辐射作用的研究报道是一致的 ;此外 ,辐照
处理后 ,患者体重一般出现明显的降低趋势 ,本研
究中虽未观察到辐照小鼠体重的降低 ,但不同剂量
的灰树花多糖处理后 , 小鼠的体重与对照组相比 ,
中、 高剂量组小鼠的增重较为明显 。 以上结果说明
灰树花多糖可以起到一定的抗辐射效果 。
参 考 文 献
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