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花叶九节木化学成分的研究



全 文 :第 10 期
收稿日期:2015-06-15
基金项目:广西中药质量标准研究重点实验室系统性研究项目(桂中重系 201308)
作者简介:陆国寿(1980-),男(壮族),广西象州人,副主任药师,主要从事天然产物化学研究,(电话)0771-5868986(电子信箱)
luguoshou@foxmail.com;通信作者,卢文杰,主任药师,(电子信箱)luwenjie0771@163.com。
第 55 卷第 8 期
2016 年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 55 No.7
Apr.,2016
2
1
1
Jan
10期
5
Vol. 5 No.10
M y
花叶九节木为茜草科(Rubiaceae)植物花叶九
节木[Psychotria siamica(Craib)Hutch.]的全株,别名
驳骨草、 小功劳、 百样化, 茶山虫 [1]; 壮文名为
Gomwnlaeq[2]。 主要分布于广西壮族自治区、云南省
等地。 其性苦、凉,具有清热解毒、祛风止痛的功效,
全株可用于肝炎、骨折、小儿疳积、肠炎、痢疾等病;
叶可消肿,常用于疔疮、烫伤治疗,对感冒、风湿骨
痛、跌打骨折等也有疗效[1-3]。
目前,国内外对花叶九节木的系统性化学成分
研究尚未见报道。 为了充分开发和利用花叶九节木
这一具有民族特色的药用植物资源,试验采用有机
溶剂提取、柱色谱及重结晶等化学分析方法,从花
叶九节木中提取并分离得到了 7个化学成分。 对各
个化学成分采用波谱学方法分别进行了鉴定,现将
结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
花叶九节木药材采于广西壮族自治区宜州市,
由广西中医药研究院饶伟源副主任药师鉴定为花
叶九节木。 供试仪器有 AEL-200 电子天平(湘仪天
平仪器设备有限公司)、ZDM-83-1 型电热熔点仪
(江苏科教玻璃仪器厂)、IR-470 红外光谱仪 (日本
岛津公司)、 质谱仪 (美国 Agilent Technologies 公
司)、500 MHz 核磁共振仪(瑞士布鲁克公司)、柱色
谱及薄层层析硅胶(青岛海洋化工厂);试剂有乙酸
乙酯、石油醚、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等,均为国产
分析纯。
1.2 方法
取花叶九节木粉碎后的粗粉 11.1 kg,95%乙醇
花叶九节木化学成分的研究
陆国寿 1,卢文杰 1,2,谭 晓 1,黄建猷1,黄周锋 1
(1.广西中医药研究院,南宁 530022;2.广西中药质量标准研究重点实验室,南宁 530022)
摘要:为研究花叶九节木[Psychotria siamica (Craib) Hutch.]中的化学成分,采用硅胶柱色谱、重结晶等
方法分离和纯化,并通过波谱学方法鉴定其化学成分的结构。 结果表明,从花叶九节木中分离得到 7 个
化合物,经波谱解析确定化合物分别为正三十五烷、正二十四烷酸、正二十六烷酸、β-谷甾醇、熊果酸、间
苯二酚、胡萝卜苷,这是首次从该植物中分离得到上述 7 种化合物。
关键词:花叶九节木[Psychotria siamica (Craib) Hutch.];分离;纯化;化学成分;结构
中图分类号:Q949.781.1+95 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2016)10-2589-02
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.10.034
Study on Chemical Constituents of Psychotria siamica
LU Guo-shou1, LU Wen-jie1,2, TAN Xiao1, HUANG Jian-you1, HUANG Zhou-feng1
(1. Guangxi Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences, Nanning 530022, China;
2. Guangxi Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Quality Standards, Nanning 530022, China)
Abstract: To study the chemical constituents of Psychotria siamica (Craib) Hutch.. The methods of silica column chromatog-
raphy and recrystallization were used to isolate and purify the chemical constituents of P. siamica. Seven compounds were iso-
lated and identified as n-pentatriacontane, n-tetracosanoic acid, n-hexacosanoic acid, β-sitosterol,ursolic acid,resorcinol,
daucosterol. The seven compounds were isolated from this plant for the first time.
Key words:Psychotria siamica (Craib) Hutch.; isolate; purify; chemical constituents; structure
湖 北 农 业 科 学 2016 年
回流提取 4 次,每次 1.5 h,合并提取液,回收乙醇,
得浸膏 1 595 g。 在浸膏中加硅胶适量,拌样,干燥,
依次使用石油醚(60~90 ℃)、乙酸乙酯回流提取,回
收溶剂后分别得到石油醚部位 38 g、 乙酸乙酯部位
443.5 g。乙酸乙酯部位加硅胶,拌样,干燥,依次使用
氯仿、氯仿-甲醇(95∶5)、乙酸乙酯回流提取,回收溶
剂后分别得到氯仿部位 38 g、氯仿-甲醇(95∶5)部位
7.6 g、乙酸乙酯部位 65.0 g。
取石油醚部位 38 g,进行硅胶柱色谱分离,用石
油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱 (100∶0→98∶2→
95∶5→90∶10→80∶20→70∶30),共收集到 148 个流分
(Fr1~148)。再经反复柱色谱分离及重结晶,从 Fr1得到
化合物 1,从 Fr38~39得到化合物 2,从 Fr41~52得到化合
物 3,从 Fr53~57得到化合物 4。
取氯仿部位 38 g, 进行硅胶柱色谱分离, 用氯
仿-甲醇混合溶剂梯度洗脱 (100∶0→95∶5→90∶10),
共收集 82个流分(X1~82)。 再经反复柱色谱分离及重
结晶,从流分 X2~3得到化合物 5,从流分 X20~23 得到
化合物 6,从流分 X35~36得到化合物 7。
2 结果与分析
分别对化合物 1~7进行分析,结果如下。
化合物 1:白色粉末状结晶(乙酸乙酯);m. p.:
74~75 ℃;EI-MS m / z:492[M]+;1H NMR(500 MHz,
CDCl3) δ1.25 (66 H.s,33×CH2),0.88 (6 H. t,J=6.8
Hz,2×CH3);13C NMR (125 MHz,CDCl3) δ 31.9 (2×
CH2),29.7 (27 ×CH2),29.3 (2 ×CH2),22.7 (2 ×CH2),
14.1(2×CH3)。以上数据与文献[4]一致,鉴定为正三
十五烷(n-Pentatriacontane)。
化合物 2:无色片状结晶(丙酮);m. p.:80~88℃;
EI-MS m / z:368[M]+;质谱谱图与正二十四烷酸的
标准谱图一致,且与其标准品的 TLC 对照,混合熔
点不下降,Rf值一致,故鉴定为正二十四烷酸(n-te-
tracosanoic acid)。
化合物 3:白色粉末状结晶(乙酸乙酯);m. p.:
57~59 ℃;EI-MS m / z:396 [M]+;1H NMR(500 MHz,
CDCl3)δ 2.35 (2H.t,J=7.5 Hz,H-2),1.69-1.57(2H.
m,H-3),1.28(44 H.s,22×CH2),0.88(3H.t,J=6.7 Hz,
-CH3);13C NMR (125 MHz,CDCl3)δ 180.2 (C-1),
34.0 (C-3),31.9 (C-4),29.7 (10×CH2),29.6 (4×
CH2),29.6(CH2),29.4(CH2),29.3(CH2),29.2(CH2),
29.0(CH2),24.6(CH2),22.7(C-25),14.1(C-2)。以上
数据与文献[5]一致,鉴定为正二十六烷酸(n-Hex-
acosanoic acid)。
化合物 4: 无色针状结晶 (乙酸乙酯);m. p.:
138~140 ℃;EI-MS m / z:414[M]+;质谱谱图与 β-谷
甾醇的标准谱图一致, 且与其标准品的 TLC 对照,
混合熔点不下降,Rf 值一致, 故鉴定为 β-谷甾醇
(β-Sitosterol)。
化合物 5:白色粉末状结晶(甲醇);m. p.:>250
℃;EI-MS m / z:456 [M]+;1H NMR (500 MHz,CDCl3)
δ 5.16(1 H. dd,J=10.4,6.9 Hz,H-12),3.29 (1H. dt,
J=3.2,1.6 Hz, H-3β),2.10 (1H. d,J=11.0 Hz,H-
18), 1.17 (3H. s,-CH3), 1.00 (3H. s, -CH3), 0.88
(3H. d,J=10.8 Hz,-CH3), 0.84 (3H. s,-CH3),0.78
(3H. d,J =6.5 Hz, -CH3),0.73 (3H. s, -CH3),0.69
(3H. s,-CH3);13C NMR (125 MHz,CDCl3) δ 180.6
(C-28),138.0 (C-13),125.4 (C-12),78.7 (C-3),
55.1 (C-5),52.7 (C-18),47.7 (C -17),47.4 (C -9),
41.9 (C-14),39.3 (C-8),39.0 (C -4),38.8 (C -19),
38.6(C-20),38.5(C-1),36.8 (C-22),36.7 (C-10),
32.9(C-7),30.6 (C-21),29.6 (C-30),27.9(C-23),
26.7(C-15),24.1(C-2),23.4(C-16),23.1(C-11),
21.0(C-27),18.2(C-6),16.9 (C-26),16.7(C-29),
15.5(C-24),15.3(C-25)。以上数据与文献[6]一致,
鉴定为熊果酸(Ursolic acid)。
化合物 6: 无色片状结晶 (甲醇);m. p.:109~
110 ℃;EI-MS m / z:110 [M]+;1H NMR (500 MHz,
CDCl3) δ 7.09(1 H. t,J=8.1 Hz,H-5),6.41 (2 H. dd,
J=8.1,2.3 Hz,H-4,6),6.36 (1 H. t,J=2.2 Hz,H-2),
4.83(2 H. s,2×-OH);13C NMR (125 MHz,MeOD) δ
159.5 (C-1,3),130.9 (C-5),107.7 (C-4,6),103.5
(C-2)。 以上数据与文献[7]一致,鉴定为间苯二酚
(Resorcinol)。
化合物 7:白色粉末状结晶(氯仿-甲醇);m. p.:
>250 ℃,EI-MS m / z:576[M+]。 13C NMR(125 MHz,
CDCl3) δ 140.9 (C-5),122.0(C-6),102.6 (C-1′ ),
78.7 (C-3),78.6 (C-3′ ),78.1 (C-5′ ),75.4 (C-2′ ),
71.7(C-4′),62.9(C-6′),56.9(C-14),56.3(C-17),
50.4 (C-9),46.1 (C-24),42.5 (C -13),40.0 (C -4),
39.4(C-12),37.5(C-1),37.0 (C-10),36.4(C-20),
34.2(C-22),32.2(C-8),32.1(C-7),30.3(C-2),29.5
(C-25),28.6(C-16),26.4(C-23),24.6(C-15),23.4
(C-28),21.3(C-11),20.0(C-26),19.5(C-19),19.2
(C-27),19.0(C-21),12.2(C-29),12.0(C-18)。以上
数据与文献 [8] 一致, 鉴定为胡萝卜苷(Daucos-
terol)。
3 小结
试验从花叶九节木中分离得到了 7 种化合物,
分别为正三十五烷、正二十四烷酸、正二十六烷酸、
(下转第 2631页)
2590
第 10 期
β-谷甾醇、熊果酸、间苯二酚、胡萝卜苷,均为首次
从该植物中分离得到。 有文献报道,花叶九节木全
株可用于治疗肝炎[1]。 林艳芹等[9]的研究表明,熊果
酸对 CCl4灌胃所致小鼠急性肝损伤具有改善作用;
谢艳茹等[10]研究认为,熊果酸能诱导人肝癌 SMMC-
7721 细胞凋亡,抑制其生长;孙瑞娜等[11]研究认为,
熊果酸可通过非竞争抑制作用抑制丙型肝炎病毒
复制酶 NS5B的活性。由此可见,熊果酸应为花叶九
节木治疗肝炎的活性成分之一。 试验结果在一定程
度上对花叶九节木的药理活性物质组成进行了揭
示,为花叶九节木的进一步开发利用提供了依据。
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(上接第 2590页)
3.2 蔬菜质量安全存在主要原因分析
1)农药经营市场较为混乱。 由于办理农药登记
证的成本较高,企业为节约生产成本,在市场上销
售的一些农药很多登记证已经过期,套用登记证的
现象也比较明显。 目前市场上销售的复配农药,有
的虽然标签上注明的农药有效成分符合国家的要
求, 但是含有一些在蔬菜上禁止使用的高毒农药,
即隐形添加成分,菜农在不知情的情况下使用这些
农药导致蔬菜中含有违禁药物。
2)菜农的种植方式不合理,用药知识不足。 蔬
菜种植基地中常年连作现象较为普遍, 农药大量、
单一、连续的使用使得病虫害产生抗药性,菜农只
有加大用药量才能控制病虫害的发生,导致蔬菜生
产中农药残留超标。 菜农的用药种类和用药量缺乏
有效的指导,要么根据自身的种植经验用药,要么
根据农药经销商的建议用药,随意性较大,缺乏政
府农技人员的技术指导。
3)菜农的质量安全意识不强,违法成本较低。
目前蔬菜生产很多还是家庭式、 小规模的散户种
植,农民的文化知识欠缺,缺乏对农药残留超标危
害性的认识,为了防治病虫害,增加用药量和用药
次数,违背农药安全间隔期提前采收,甚至使用禁
限用的高毒农药,而目前《农产品质量安全法》在处
罚散户时依据不明,菜农的违法成本较低,给蔬菜
质量安全带来了较大的隐患。
4)蔬菜安全生产监管困难,监管力量薄弱。 蔬
菜生产涉及千家万户,地大面广,而蔬菜安全生产
管理涉及多个部门,监管人员相对分散,监管效果
不佳。 此外,一般的蔬菜生产合作社或散户从成本
上考虑,都没有配备检测仪器,不具备检测条件,无
法制定产地准出和市场注入制度。
3.3 蔬菜质量安全管控技术措施的建议
1)蔬菜生产基地应加强合理使用农药的技术
指导,加强对蔬菜生产者和农技推广人员进行科学
选药和安全合理用药的相关培训。
2)农业行政主管部门应加强对农业投入品的
监管,从源头上控制风险因子污染的来源。
3)由于在小品种蔬菜上开发农药的利润较低,
农药企业在小品种蔬菜上登记的农药种类很少,因
此农业财政应给予支持,加快小品种蔬菜中登记农
药的种类,同时制定相关限量标准,指导蔬菜安全
生产。
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