免费文献传递   相关文献

黄瓜子生炮制品活血效果比较及活血部位的筛选



全 文 :246
第 1 3 卷 第 1 1 期
2011 年 11 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 11
Nov . ,2011
黄瓜子为葫芦科甜瓜属植物黄瓜 Cucumis
sativus L. 的干燥成熟种子。《中华本草》中记载
黄瓜子具有续筋接骨、祛风、消痰的功效。主治骨
折筋伤,风湿痹痛,老年痰喘 [1]。传统中医学理论
阐述了骨折治疗三期用药原则的早期以活血化
瘀治疗为主,那么黄瓜子能够续筋接骨,治疗骨
折筋伤与活血化瘀有什么关联呢?黄瓜子是否具
有活血的作用呢?本文对黄瓜子生品及其炮制
品的活血药理作用进行研究,并对黄瓜子的活血
活性部位进行筛选,进而为研究黄瓜子治疗骨折
的原理打下基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器
METTLER AE240 型十万分之一分析天平(瑞士
METTLER),FA1004B 型电子天平(上海精密科学仪
器有限公司),101 型电热鼓风干燥箱(北京市永光
明医疗仪器厂),HH-4 型恒温水浴锅(国华电器有
限公司),RE-52A 型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪
器厂),SHZ-D Ⅲ循环水式真空泵(上海予华仪器有
限公司)。
1.2 试药
黄瓜子购自安徽森森制药有限公司,经本校翟
延君教授鉴定为葫芦科甜瓜属黄瓜 Cucumis sativus
L. 的干燥成熟种子 ;所用试剂石油醚(60-90)、乙酸
乙酯、正丁醇、乙醇等试剂均为化学纯,水为娃哈哈
纯净水。
胶 原 蛋 白(Collagen TypeⅠ,sigma);盐 酸 肾
上腺素注射液购自上海禾丰制药有限公司,批号
960503 ;阿斯匹林肠溶片购自湖南新汇制药有限公
司,批号 H43021756。
黄瓜子生炮制品活血效果比较及活血部位的筛选
赵佳丽 1,张凡 1,降雪 1,李峰 1,贾天柱 1,2
(1.辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连 116600 ;2.辽宁省中药炮制工程技术研究中心,辽宁 大连 116600)
摘 要 :目的 :考察黄瓜子生品及炮制品的活血作用并对黄瓜子生品不同极性部位的活血作用进行考察,筛选
有效部位。方法 :采用胶原蛋白-肾上腺素诱导血栓法观察黄瓜子生品及炮制品对小鼠抗血栓作用的影响。采用
剪尾法、玻片法观察黄瓜子生品不同极性部位对小鼠出血时间和凝血时间的影响。结果 :黄瓜子生品和炮制品均有
抗血栓作用,黄瓜子生品、炮制品和乙酸乙酯层具有明显延长小鼠出血时间和凝血时间的作用。结论 :黄瓜子生品
和炮制品均有活血作用,黄瓜子乙酸乙酯层是黄瓜子活血的主要活性部位。
关键词 :黄瓜子 ;生品 ;炮制品 ;药理筛选
中图分类号 :R282 文献标识码 :A 文章编号 :1673-842X (2011) 11- 0246- 03
收稿日期 :2011-05-07
作者简介 :赵佳丽(1985-),女,辽宁沈阳人,硕士研究生,研究方向 :中药炮制及中药质量标准研究工作。
通讯作者 :贾天柱(1951-),男,教授,博士生导师,硕士,研究方向 :中药炮制原理研究工作。Email :jiatz@lnutcm.edu.cn。
Cucumber Seed and Processed Products Effect Comparison on
Activatimg Blood Circulation and Effective Parts Screening
ZHAO Jia-li1,ZHANG Fan1,JIANG Xue1,LI Feng1,JIA Tian-zhu1.2
(1. Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600,Liaoning,China ;2.Chinese
Materia Medica Processing Engineering Center of Liaoning Province,Dalian 116600,Liaoning,China)
Abstract :Objective :To investigate the raw and processed cucumber seeds effect on activatimg
blood circulation and the same effect of different polar fractions of cucumber seed,and the effective parts
screening. Methods :Using collagen - adrenaline induced thrombosis method to observe cucumber seed
raw products and processed products antithrombotic effects in mice. By cutting the tail and slide method
to observe different polar fractions of cucumber seed raw products influence on mice bleeding time and
clotting time. Results :The seed of cucumber raw products and processed products both have antithrombotic
effect,the seed of cucumber raw products,processed products and ethyl acetate layer have significantly
effect on prolonging mice bleeding time and clotting time. Conclusion :The seed of cucumber raw products
and processed products both have the character of activating blood circulation,the ethyl acetate layer of
cucumber seed is the main active site for that effect.
Key words :the seed of cucumber ;raw products ;processed products ;pharmacological screening
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2011.11.248.zhaojl.085
247
1 3 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
1.3 实验动物
雄性清洁级昆明种小白鼠,体重(20±2)g,由
大连医科大学实验动物中心提供。
2 实验方法
2.1 样品的制备
2.1.1 黄瓜子生品的制备
取黄瓜子,粉碎,过 40 目筛,加十倍量水煎煮
2h,抽滤,滤液备用,提取 2 次,合并滤液,浓缩成浓
度为 1.5g/mL 的水煎液备用。
2.1.2 黄瓜子制品的制备
以温度计测量锅底温度,待温度上升至 120℃,
取黄瓜子置铁锅中,保持 120℃条件下炒制 2min 至
深黄色,放凉,粉碎,过 40 目筛,加十倍量水煎煮 2h,
抽滤,滤液备用,提取 2 次,合并滤液,浓缩成浓度为
1.5g/mL 的水煎液备用。
2.1.3 黄瓜子不同极性部位的制备 [2]
取黄瓜子药材粗粉 100g,用 10 倍量 70% 乙醇回
流提取 3 次,过滤,合并滤液,水浴减压浓缩成浸膏,
膏重 1415g。将浸膏与等量的水混匀,置分液漏斗中
依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取 5 次至萃取
液无色,剩余的部分为水层,回收各萃取部位溶剂,
得浸膏,称重,结果见表 1。
表 1 黄瓜子不同极性部位的出膏率
项目 石油醚层萃取物
乙酸乙酯
层萃取物
正丁醇层
萃取物 水层
膏重量(g)
出膏率(%)
1.39
1.39
0.36
0.36
0.79
0.79
14.3
14.3
石油醚层萃取物乳浊液的制备 :称取石油醚萃取
物浸膏0.583mg 之后,按照黄瓜子生品水煎液的浓度
配比,加入PEG-400和生理盐水配成乳浊液,并将其
稀释至28mL,得黄瓜子石油醚萃取物乳浊液,备用。
乙酸乙酯层,正丁醇层和水层的制备 :取乙酸
乙酯层萃取物浸膏 0.1512g,正丁醇层萃取物浸膏
0.3318g,水层浸膏 6.006g,分别用生理盐水稀释至
28mL,备用。
2.2 胶原蛋白-肾上腺素诱导血栓法[3]
小鼠适应性喂养 48h 后,应用随机数字表进行
完全随机化分组,分为 4 组,每组 10 只。即黄瓜子生
品组,黄瓜子制品组,阿司匹林组,空白对照组(给同
体积生理盐水),各组均采用灌胃给药,连续给药 7
天,每天灌胃 1 次,末次给药 1h 后,各组动物分别尾
静脉注射胶原蛋白(225μg/ 只)与肾上腺素(9μ/
只)的混悬液 0.2mL,注射后观察 15min 内小鼠偏瘫
恢复数。偏瘫以小鼠翻正反射消失为标准 [4]。
2.3 剪尾法[5]
小鼠适应性喂养 48h 后,应用随机数字表进行
完全随机化分组,分为 8 组,每组 8 只。即黄瓜子生
品组,黄瓜子制品组,黄瓜子石油醚层,黄瓜子乙酸
乙酯层,黄瓜子正丁醇层,黄瓜子水层,阿司匹林组,
空白对照组(给同体积生理盐水),各组均采用灌胃
给药,连续给药 7 天,每天灌胃一次,末次给药 30min
后,将小鼠置于固定器中,使其尾部垂直,在小鼠尾
尖约 5mm 处剪断,自血液溢出开始记时,每隔 30s 用
滤纸吸去溢出血液,自计时开始至无血液溢出(自然
止血)为止的时间,即出血时间。
2.4 玻片法[5]
小鼠适应性喂养 48h 后,应用随机数字表进行
完全随机化分组,分为 8 组,每组 8 只,即黄瓜子生品
组,黄瓜子制品组,黄瓜子石油醚层,黄瓜子乙酸乙
酯层,黄瓜子正丁醇层,黄瓜子水层,阿司匹林组,空
白对照组(给同体积生理盐水),各组均采用灌胃给
药,连续给药 7 天,末次给药 30min 后,于小鼠眼底静
脉丛取血,弃去第一滴血后,于清洁载玻片两端各滴
一滴血,血滴大小尽量一致(直径约 5mm 左右)。开
始记时后,每隔 30s 用清洁 6 号针头自血滴边缘向里
轻轻挑动血液一次,从采血开始至挑起血丝为止的
时间,即凝血时间。
3 实验结果
胶原蛋白 - 肾上腺素诱导血栓法中,与空白对
照组比较黄瓜子生品组、制品组均有明显的抗血栓
作用。结果见表 2。
剪尾法中,与空白对照组比较黄瓜子生品组、
制品组、黄瓜子乙酸乙酯层能明显地延长小鼠出血
时间。结果见表 3。
玻片法中,与空白对照组比较黄瓜子生品组、
制品组、黄瓜子乙酸乙酯层能明显地延长小鼠凝血
时间。结果见表 4。
本实验数据处理采用 SPSS 15.0 统计软件,数据
资料以均数 ± 标准差(x—±s),统计方法采用方差齐
成组t 检验。
表 2 黄瓜子生品及炮制品对胶原蛋白 -
肾上腺素诱导血栓形成的影响
组别 n 剂量(mg/g)15min 内恢复数(只)恢复率(%)
对照组
阳性组(阿司匹林)
黄瓜子生品组
黄瓜子制品组
10
10
10
10
-
0.02
37.5
37.5
0
8
6
8
0
80△
60△
80△
注 :与空白对照组比较,△P<0.01。
表 3 黄瓜子生制品及不同极性部位对
小鼠出血时间的影响(n=8,x—±s)
组别 剂量(mg/g) 出血时间(min)
空白组
阳性组(阿司匹林)
黄瓜子生品组
黄瓜子制品组
黄瓜子石油醚层
黄瓜子乙酸乙酯层
黄瓜子正丁醇层
黄瓜子水层
-
0.02
37.5
37.5
37.5mg 生药 /g
37.5mg 生药 /g
37.5mg 生药 /g
37.5mg 生药 /g
9.75±1.26
20.43±1.67△
17.60±2.19△
20.90±1.40△
10.38±2.04
18.45±2.34△
10.66±2.04
11.14±1.71
注 :与空白对照组比较,△P<0.01。
表 4 黄瓜子生制品及不同极性部位对
小鼠凝血时间的影响(n=8,x—±s)
组别 剂量(mg/g) 出血时间(min)
空白组
阳性组(阿司匹林)
黄瓜子生品组
黄瓜子制品组
黄瓜子石油醚层
黄瓜子乙酸乙酯层
黄瓜子正丁醇层
黄瓜子水层
-
0.02
37.5
37.5
37.5mg 生药 /g
37.5mg 生药 /g
37.5mg 生药 /g
37.5mg 生药 /g
59.64±27.11△
137.69±21.96△
95.04±21.50△
141.60±13.72△
64.01±20.67
92.58±11.03△
69.10±11.17
73.06±8.28
注 :与空白对照组比较,△P<0.01。
248
第 1 3 卷 第 1 1 期
2011 年 11 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 11
Nov . ,2011
冠心舒通胶囊对动脉粥样硬化大鼠血脂代谢及血流变指标的影响
霍煜 1,姚天明 2,梁卓 1,李杰 1,游洋 2,韩雅玲 3
(1.解放军第四军医大学西京医院心内科,陕西 西安 710032 ;2.辽宁中医药大学附属医院,辽宁 沈阳 110032 ;
3.解放军沈阳军区总医院心内科,辽宁 沈阳 110016)
摘 要 :目的 :观察冠心舒通胶囊对高脂喂养诱导早期动脉粥样硬化大鼠模型血脂代谢及血液流变学指标的
影响,探讨冠心舒通胶囊抗动脉粥样硬化的作用以及可能的作用机制。方法 :32只Wistar大鼠随机平均分为4组,
正常对照组(NC),普通饲料喂养加冠心舒通胶囊喂养组(NG),高脂饲料喂养组(HG),高脂加冠心舒通胶囊喂养
组(GG),连续喂养6周,实验末测定大鼠血脂(TC,TG,LDL)水平和血液流变学各项指标。结果 :GG组与HG组
相比各项指标明显降低(P<0.05),而NG组与NC组相比未得出显著性差异(P>0.05)。结论 :冠心舒通胶囊可以降
低动脉粥样硬化大鼠的血脂,调节血液流变学指标,从而保护血管,起到抗动脉粥样硬化的作用。
关键词 :冠心舒通胶囊 ;脂代谢 ;血液流变学
中图分类号 :R543.5 文献标识码 :A 文章编号 :1673-842X (2011) 11- 0248- 03
收稿日期 :2011-05-10
作者简介 :霍煜(1984-),男,陕西清涧人,医师,2009 级硕士研究生,研究方向 :心血管内科疾病。
通讯作者 :韩雅玲(1953-),女,山东人,教授、主任医师,博士及博士后导师,博士,研究方向 :心血管内科疾病。
Effects of Guanxin Shutong Capsule on Lipid Metabolism and
Hemorrheology in Rat Model with Experimental Atherosclerosis
HUO Yu1,YAO Tian-ming2,LIANG Zhuo1,LI Jie1,YOU Yang2,HAN Ya-Ling3
(1.Cardiovascular Department,Xijing Hospital,The Fourth Military Medical University of Chinese
PLA,Xian 710032,Shaanxi,China ;2.Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional
Chinese Medicine,Shenyang 110032,Liaoning,China ;3.Department of Cardiology,General Hospital
of Shenyang Military Area Command of Chinese PLA,Shenyang 110016,Liaoning,China)
Abstract :Objective :To observe the effects of Guanxin Shutong capsule on lipid metabolism and
hemorrheology in rat model with experimental atherosclerosis and explore its possible mechanism. Method :
Guanxin Shutong thirty-two Wistar rats were randomly divided into normal control group(n=8),normal
fed plus capsule group(n=8),high fat fed group(n=8),high fat fed plus Guanxin Shutong capsule
4 讨 论
胶原蛋白、肾上腺素都是血小板聚集诱导剂,
当两者合用时有显著的协同作用。将两种诱导剂
混合后,小剂量给予小鼠静脉注射,可诱发小鼠
血栓性偏瘫和死亡 [6]。这个模型引起的血栓与血
小板的活化、黏附、释放及再聚集有密切关系。胶
原蛋白 - 肾上腺素诱导血栓法实验结果显示,黄
瓜子生品及炮制品对小鼠体内血栓形成均有较
强的抑制作用。结果提示,黄瓜子的抗血栓作用
可能与抑制血小板功能有一定关系。凝血过程有
两种途径 :内源性凝血途径和外源性凝血途径。
本实验通过对小鼠出血时间和凝血时间的考察,
启动了内源性凝血机制和外源性凝血机制。在
小鼠玻片法中,毛细玻管破坏了小鼠眼底静脉丛
血管壁,使其损伤,内皮下组织暴露,带负电荷的
内皮下胶原纤维与凝血因子接触启动凝血机制。
推断黄瓜子活血效果明显的生制品及乙酸乙酯
部位通过影响凝血系统、产生抗凝作用而抑制血
栓形成,达到活血的作用。
黄瓜子经炮制后其抗凝血作用明显增强,并且
通过对黄瓜子醇提物的不同极性部位的筛选,发
现乙酸乙酯层的抗凝血作用较好,提示乙酸乙酯层
可能为黄瓜子抗凝血作用的主要药效部位,通过统
计软件组间比较抗凝血作用较为显著的几组强弱
顺序为 :黄瓜子制品组 > 黄瓜子生品组 > 乙酸乙酯
层。◆
参考文献
[ 1 ] 国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草 [ M ] . 5
卷 . 上海 :上海科学技术出版社,1999 :522.
[ 2 ] 郭丽冰,黄丽容,赵丽华,等 . 降香行气止痛、活血止血有效部
位的药理筛选 [ J ] . 中药材,2007,30 ( 6 ) :696-698.
[ 3 ] 谭毓治,徐彭,张孝友,等 . 去头水蛭醇提物抗血栓作用的研究
[ J ] . 中国中药杂志,1999,24 ( 10 ) :622-623.
[ 4 ] Diminno G,Silver MJ. Mouse antithrombotic assay :asimple
method for the evalution of antlthrombotic activity by ethyl
aleohol[ J ] .J Pharmacot Exp Ther,1983,225 :57-60.
[ 5 ] 何红,车庆明,孙启时 . 地龙提取物的抗凝血作用 [ J ] . 中草药
2007,38 ( 5 ) :733-735.
[ 6 ] Gresele P,Corne C,Alberti P,et al.Picet amide protects mice
from death in a pulmonary embalism model by a mechanism
independent from thromboxane supperssion[ J ] .Thromb Haemost,
1990,64 :80.