全 文 ：［收稿日期］ 20131207(001)
［基金项目］ 国家“十一五”重大新药创新专项“综合性中药新药研究开发技术大平台”(2009ZX9301-005)
［第一作者］ 肖丽萍，硕士，从事疾病动物模型与中药复方药理毒理研究，Tel:13880568771，E-mail:737025602@ qq． com
［通讯作者］ * 谢晓芳，博士，从事中药药理研究，E-mail:55091620@ qq． com;
* 彭成，教授，博士生导师，研究员，从事中药药效与毒理研究，E-mail:pengchengchengdu@ 126． com
赶黄草抗非酒精性脂肪肝的实验研究
肖丽萍1，2，宋洋洋1，2，周彦希1，2，刘建林1，2，贺抒1，2，张大永3，谢晓芳1，2* ，彭成1，2*
(1. 成都中医药大学，成都 610075;
2. 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，成都 610075 ;
3. 四川古蔺肝苏药业有限公司，成都 610036)
［摘要］ 目的:研究赶黄草抗非酒精性脂肪肝的作用及可能的治疗机制。方法:将大鼠分为 6 个组，即正常对照组、模型
组、非诺贝特组(33 mg·kg －1)和赶黄草高、中、低(16. 7，8. 4，4. 2 g·kg －1)剂量组。除正常对照组外，各组在每日上午均用脂肪
乳灌胃制造脂肪肝模型，连续 9 周;造模第 3 周开始，每日下午各给药组分别预防灌胃给药。于第 9 周后，各组取血测定丙氨
酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度
脂蛋白(LDL-C) ，并剖剪肝脏，部分用于匀浆测定总胆固醇(TCHO) ，TG、游离脂肪酸(NEAF)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧
化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px) ，并将部分肝脏行病理组织学检查。结果:模型组血 ALT，TBIL，TG，LDL-C及肝组
织 TG，NEAF，MDA均显著升高，HDL明显降低，而 GSH-Px活性下降，较空白组有明显差异(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，病理学检
查可见多数大鼠肝脂肪变，提示模型成功。与模型组比较，赶黄草提取物 16. 7，8. 4，4. 2 g·kg －1均能使血清 ALT，TBIL，CHO，
TG不同程度下降，HDL-C有一定上升;肝组织中 TG，NEAF含量也明显下降，能明显升高 GSH-Px活力，均有显著性差异(P ＜
0. 05或 P ＜ 0. 01) ，使大鼠肝组织脂肪变程度减轻。结论:赶黄草具有治疗非酒精性脂肪肝作用，机制可能与调节脂质代谢、
抗氧化损伤有关。
［关键词］ 非酒精性脂肪肝;赶黄草;脂质
［中图分类号］ Ｒ285. 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2014)10-0125-05
［doi］ 10． 13422 / j． cnki． syfjx． 2014100125
［网络出版地址］ http:/ /www． cnki． net /kcms /doi /10． 13422 / j． cnki． syfjx． 000074． html
［网络出版时间］ 2014-03-07 10:31
Experiment Ｒesearch about Ｒesistant Effects of Penthorum chinese
on Nonalcoholic Fatty Liver
XIAO Li-ping1，2，SONG Yang-yang1，2，ZHOU Yan-xi1，2，LIU Jian-lin1，2，HE Shu1，2，
ZHANG Da-yong3，XIE Xiao-fang1，2* ，PENG Cheng1，2*
(1. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (TCM) ，Chengdu 610075，China;
2. State Key Laboratory of Systematic Ｒesearch and Exploitation of TCM，Chengdu 610075，China;
3. Sichuan Gulin Liver Sue Pharmaceutical Limited Company，Chengdu 610036，China)
［Abstract］ Objective:To study the resistant effects of Penthorum chinese extract on nonalcoholic fatty
liver and possible therapeutic mechanism． Method:The experimental rats were divided into 6 groups:the control
group，the model group，fenofibrate group (33 mg·kg －1) ，P． chinense high-dose，middle-dose and low-dose
group (16. 7，8. 4，4. 2 g·kg －1)． Except the control group，nonalcoholic fatty liver model was induced by fatty
emulsion intragastrically for 9 weeks，those groups were given relevant medicine intragastrically． At the end of 9
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weeks，alanine aminotransferase (ALT) ，aspartate aminotransferase (AST) ，total bilirubin (TBIL)，cholesterol
(CHO)，triacylglycerol (TG)，high density lipoprotein cholesterol (HDL-C)，low density lipoprotein cholesterol
(LDL-C)in blood were examined． Total choesterol (TC) ，TG， free fatty acid (NEAF) ，malondialdehyde
(MDA) ，total superoxide dismutase (T-SOD) ，glutathione peroxidase (GSH-Px) in hepatic tissue were
detected，and the hepatic tissue pathological changes were observed． Ｒesult:Compared with the control group，
all the indexs showed significant difference (P ＜ 0. 05 or P ＜ 0. 01) ，the content of ALT，TBIL，TG，LDL-C in
serum and TG，NEAF，MDA in hepatic tissue increased obviously，HDL-C decreased significantly，and the
activity of GSH-Px decreased apparently． And pathological examination indicated steatosis appeared． Compared
with model group，the content of ALT，TBIL，CHO，TG in the serum decreased in P． chinense groups (16. 7，
8. 4，4. 2 g·kg －1) ，and HDL-C improved a little，TG and NEAF in the hepatic tissue decreased obviously，the
activity of GSH-Px improved significantly (P ＜ 0. 05 or P ＜ 0. 01)． The pathological images of hepatic tissue and
classified graded method of steatosis improved． Conclusion:P． chinese can treat nonalcoholic fatty liver． Its
therapeutic mechanism is partly related to regulating lipid metabolism and anti-oxidative damage．
［Key words］ nonalcoholic fatty liver;Penthorum chinese;lipid
非酒精性脂肪肝(NAFLD)是指除外酒精和其
他明确的损肝因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性
脂肪变为主要特征的临床病理综合征［1］，是发达国
家第一大肝病［2］，在我国已成为仅次于病毒性肝炎
的第二大肝病［3］，如此高的患病率严重危害着人类
的健康，影响着患者的生活质量，故有效防治本病十
分迫切。赶黄草又名扯根菜，为虎耳草科植物扯根
菜的干燥地上部分，始载于《救荒本草》，是古蔺县
道地药材，主治黄疸、水肿等。随着现代人们肝病的
增多和地方资源产业的发展，目前市场上掀起了一
股用赶黄草防治脂肪肝的热潮。现代研究中偶有报
道赶黄草提取物可以治疗酒精性脂肪肝的实验研
究［4］，但基于赶黄草治疗非酒精性脂肪肝的实验研
究未见报道，因此本课题将采用脂肪乳灌胃制造脂
肪肝模型，探讨赶黄草对非酒精性脂肪肝的疗效及
其机制。
1 材料
1. 1 药物 赶黄草，由四川古蔺肝苏药业有限公司
提供，经成都中医药大学中药鉴定学李敏教授鉴定为
虎耳草科扯根菜属植物扯根菜 Penthorum chinense
Pursh，赶黄草提取物含生药 4 g·mL －1，使用前用蒸馏
水分别配成 1. 67，0. 84，0. 42 g·mL －1。非诺贝特胶
囊(法国利博福尼制药公司，批号 18389，使用前用
蒸馏水配成 3. 3 g·L －1) ，胆固醇、胆酸钠(成都鹏世
达实验用品有限公司，批号分别为 TM0304QA13，
20121213) ，蛋黄粉(浙江省长兴艾格生物制品有限
公司，批号 20120921) ，自制猪油。
1. 2 动物 SD大鼠，清洁级，体重 180 ～ 220 g，雌雄
各半，由成都中医药大学动物中心研究中心提供，动
物质量合格证号 SCXK(川)2008-11，检疫后备用。
1. 3 试剂与仪器 测血清指标的丙氨酸转氨酶
(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆固醇(CHO)、甘
油三酯(TG)试剂盒(批号分别为 120521，130471，
121001，120651，均购自中生北控生物科技股份有限
公司) ，TBIL试剂盒(四川迈克生物科技股份有限公
司，批号 0313011) ，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒(由浙江伊利
康生物技术有限公司提供，批号分别为 130302，
130101)。测肝组织 CHO，TG 试剂盒(长春汇力生
物技术有限公司，批号分别为 2013021，2013016) ，
游离脂肪酸(NEAF)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧
化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)检测试
剂盒(均由南京建成生物工程研究所提供，批号分
别为 20130517，20130311，20130424，20130516)。
AU5400 型全自动生化分析仪 (美国 Beckman
Coulter公司) ，TDZ5-WS型低速离心机(湖南湘仪实
验室仪器开发有限公司) ，多功能酶标仪(美国
Thermo公司，Varioskan Flash) ，UV1100 型紫外分光
光度仪(Techcomp公司)。
2 方法
2. 1 造模与给药 取合格健康清洁级大鼠 83 只，
待适应环境后将大鼠按体重随机分为正常对照组
(n = 12)、模型对照组(n = 25)、赶黄草高剂量组
(n = 12)、赶黄草中剂量组(n = 11)、赶黄草低剂量
组(n = 11)及非诺贝特组(n = 12)。造模方法根据
文献报道［5-6］及预试确定。自试验第 1 天开始，除正
常对照组外，其余各组均灌胃脂肪乳(胆固醇-猪油-
蛋黄粉-胆酸钠-水按 1∶ 5∶ 3∶ 0. 5∶ 0. 5 质量比配制) ，正
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常对照组灌胃蒸馏水，灌胃体积均为 10 mL·kg －1，每
日 1 次，连续 9 周;从第 3 周起开始预防给药，每日
上午灌脂肪乳，下午灌胃给药，其中赶黄草高、中、低
剂量组分别灌胃相应赶黄草提取物 16. 7，8. 4，
4. 2 g·kg －1，非 诺 贝 特 组 灌 胃 非 诺 贝 特 溶 液
33. 3 mg·kg －1，正常对照组和模型对照组灌胃蒸馏
水，给药体积均为 10 mL·kg －1，每日 1 次，至实验结
束。自试验第 5 周起，于每周给药末模型组取 4 只
动物进行血清 ALT，AST，TBIL，TC，TG，HDL-C，
LDL-C水平测定和肝组织病理学检查。当肝组织出
现明显脂肪变时终止试验，总时间不超过 9 周。
2. 2 指标测定 末次给药 24 h 后，各组大鼠随机
取 8 ～ 9 只大鼠股动脉取血，离心后取血清采用全自
动生化仪测定 ALT，AST，TBIL，CHO，TG，HDL-C，
LDL-C水平;同时每只大鼠取肝组织于 － 80 ℃冷冻
备用。测定前匀浆，取匀浆液测定肝组织 TC，TG，
NEAF，MDA含量和 T-SOD，GSH-Px 的活力;另外所
有大鼠均取一叶肝组织用 10%的福尔马林固定后，
行病理学检查。评分标准依病理损伤程度共分 4
级:(－)正常 评分为 0;(+)轻度损害 肝细胞内的
脂肪空泡较小，且散在，评分为 1;()中度损害 肝
细胞内的脂肪空泡变大，范围较宽，评分为 2; ()
重度损害 脂肪空泡融合为大空泡，将细胞核挤向胞
膜下，状似脂肪细胞，评分为 3。
2. 3 统计学方法 计量资料以 珋x ± s 表示，组间比
较采用单因素方差分析(One-way ANOVA) ;实验数
据均采用 SPSS 17. 0 统计软件进行分析处理，
P ＜ 0. 05差异有统计学意义。
3 结果
3. 1 对肝功能的影响 于第 9 周后结束试验，模型
组脂肪肝造模成功。与正常对照组比较，模型对照
组大鼠血清 ALT，TBIL 水平均明显升高，具有显著
差异(P ＜ 0. 01) ，AST 水平也上升，但无显著差异;
与模型对照组比较，赶黄草提取物高、中剂量 TBIL
和中、低剂量 ALT 均明显降低，非诺贝特也明显降
低此两项指标，均具有显著差异(P ＜ 0. 05 或 P ＜
0. 01)。见表 1。
3. 2 对血脂水平的影响 与正常对照组比较，模型
对照组大鼠血清中 CHO，TG，LDL-C 水平均明显升
高，而 HDL-C明显降低，具有显著差异(P ＜ 0. 05 或
P ＜ 0. 01) ;与模型对照组相较，赶黄草提取物各剂
量组和非诺贝特组均明显降低 TG 水平，非诺贝特
组和赶黄草中剂量组明显提高 HDL-C 水平，非诺贝
特组还升高了 CHO水平，与模型对照组比较均有显
著差异(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，见表 2。
表 1 赶黄草提取物对大鼠肝功能的影响(珋x ± s)
组别 n
剂量
/g·kg － 1
ALT
/U·L －1
AST
/U·L －1
TBIL
/μmol·L －1
正常对照 9 － 39. 4 ± 4. 2 227. 7 ± 23. 3 0. 38 ± 0. 15
模型对照 8 － 49. 3 ± 6. 42) 238. 5 ± 30. 0 0. 76 ± 0. 212)
非诺贝特 9 0. 033 40. 3 ± 6. 41) 233. 0 ± 41. 2 0. 43 ± 0. 284)
赶黄草 9 16. 7 45. 0 ± 4. 9 236. 1 ± 22. 9 0. 38 ± 0. 214)
8 8. 4 41. 1 ± 5. 33) 234. 5 ± 27. 5 0. 52 ± 0. 313)
8 4. 2 34. 8 ± 3. 54) 241. 8 ± 17. 6 0. 56 ± 0. 19
注:与正常对照组比较1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与模型对照组比较3)P ＜
0. 05，4)P ＜0. 01(表 2 ～ 6 同)。
表 2 赶黄草提取物对大鼠血脂水平的影响(珋x ± s) mmol·L －1
组别 n 剂量 / g·kg －1 CHO TG HDL-C LDL-C
正常对照 9 － 1. 62 ± 0. 25 1. 17 ± 0. 29 0. 83 ± 0. 12 0. 34 ± 0. 05
模型对照 8 － 1. 96 ± 0. 281) 1. 70 ± 0. 402) 0. 60 ± 0. 112) 0. 45 ± 0. 101)
非诺贝特 9 0. 033 2. 27 ± 0. 433) 1. 19 ± 0. 264) 0. 80 ± 0. 114) 0. 55 ± 0. 1
赶黄草 9 16. 7 2. 07 ± 0. 36 0. 84 ± 0. 284) 0. 64 ± 0. 11 0. 54 ± 0. 15
8 8. 4 1. 77 ± 0. 32 1. 16 ± 0. 364) 0. 72 ± 0. 073) 0. 40 ± 0. 06
8 4. 2 1. 87 ± 0. 16 1. 19 ± 0. 294) 0. 63 ± 0. 10 0. 45 ± 0. 13
3. 3 对肝组织中脂质的影响 与正常对照组比
较，模型对照组大鼠肝组织中 TG，NEAF 含量明
显升高，具有显著差异(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，
而 T-CHO 含量下降。与模型对照组比较，赶黄草
提取物各剂量组均明显降低肝组织中 TG，NEAF
含量，均有显著差异(P ＜ 0. 01) ;非诺贝特组也
明显降低了 TG 含量，与模型对照组比较有显著
差异(P ＜ 0. 05) ，但对 T-CHO 有升高趋势。见
表 3。
3. 4 对肝组织中 MDA，T-SOD，GSH-Px的影响 模
型对照组与正常对照组相较，大鼠肝组织中 MDA
含量明显升高，GSH-Px 活力明显下降，具有显著差
·721·
肖丽萍，等:赶黄草抗非酒精性脂肪肝的实验研究
异(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，此外 T-SOD 活力也有下
降趋势。赶黄草提取物各剂量组及非诺贝特组
GSH-Px活力均比模型对照组活力高，对 MDA 含量
和 T-SOD活力影响不大，见表 3。
表 3 赶黄草提取物对大鼠肝组织中脂质及MDA质量，T-SOD，GSH-Px活力的影响(珋x ± s)
组别 n
剂量
/ g·kg －1
T-CHO
/mmol·L －1
TG
/mmol·L －1
NEAF
/μmol·g － 1
MDA
/μmol·g － 1
T-SOD
/U·mg －1
GSH-Px
/U·mg －1
正常对照 9 － 0. 86 ± 0. 14 0. 73 ± 0. 13 243. 4 ± 32. 9 0. 75 ± 0. 13 89. 6 ± 13. 3 58. 4 ± 15. 9
模型对照 8 － 0. 77 ± 0. 11 1. 33 ± 0. 102) 399. 6 ± 37. 82) 1. 07 ± 0. 171) 75. 8 ± 4. 2 30. 3 ± 23. 92)
非诺贝特 9 0. 033 1. 23 ± 0. 29 1. 03 ± 0. 183) 387. 2 ± 30. 6 1. 05 ± 0. 10 68. 0 ± 7. 0 67. 6 ± 20. 84)
赶黄草 9 16. 7 0. 94 ± 0. 16 0. 77 ± 0. 254) 313. 0 ± 45. 94) 1. 06 ± 0. 32 86. 1 ± 7. 7 68. 9 ± 13. 54)
8 8. 4 0. 95 ± 0. 09 0. 87 ± 0. 154) 312. 6 ± 34. 04) 0. 96 ± 0. 15 75. 7 ± 7. 4 70. 4 ± 16. 84)
8 4. 2 1. 08 ± 0. 18 1. 11 ± 0. 104) 323. 1 ± 50. 24) 1. 22 ± 0. 18 79. 2 ± 6. 2 67. 2 ± 14. 44)
3. 5 对肝组织形态学的影响 剖检肉眼观察，正常
对照组大鼠肝脏组织外观红褐色，质软富弹性;模型
对照组大鼠肝脏质地较韧，色泽较晦暗，体积明显增
大，切面略带油腻感;赶黄草高、中、低剂量组和非诺
贝特组肝脏外观均较模型对照组好。
光镜下观察，正常对照组肝小叶轮廓清晰，肝
细胞排列呈放射状，肝细胞大小形态正常，肝索排
列整齐，核圆，位于细胞中央，胞质均匀，未见肝脂
肪变、水肿、坏死等亦异常病变。模型对照组大鼠
肝组织镜下出现不同肝细胞弥漫性水肿，胞浆内
出现大量大小不等脂肪空泡，细胞核被挤向周边，
部分大鼠可见散在坏死灶及炎性细胞浸润。赶黄
草高、中、低剂量组同模型对照组比较，肝小叶结
构清晰，胞浆脂滴明显减小，肝细胞排列整齐，肝
窦基本恢复正常，出现脂肪变、水肿的数量明显减
少，且脂肪变性程度转轻;非诺贝特组大鼠肝组织
病理组织学与正常对照组相似，未见异常病变。
病理图片见图 1。
3. 6 对肝组织脂肪变性的影响 对各组肝组织脂
肪变性进行分级评分统计，模型对照组评分明显升
高，与正常对照组比较有显著差异(P ＜ 0. 01)。与
模型对照组比较，各给药组大鼠肝脏脂肪变性评分
均明显降低，都有显著差异(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，
其中以非诺贝特效果最好，无脂肪变性。见表 4。
4 讨论
非酒精性脂肪肝的发病机制较为复杂，传统的
经典理论主要是 Jay 和 James 共同提出的“2 次打
击”学说，目前主要发病机制认为是以胰岛素抵抗
(IＲ)为主的“第 1 次打击”导致脂肪在肝细胞内蓄
积，氧化应激和脂质过氧化参与了“第 2 次打击”加
重肝损害。
胰岛素是体内调节物质代谢的最重要激素之
A. 正常对照组;B. 模型对照组;C. 非诺贝特 33 mg·kg －1组;
D. 赶黄草 16. 7 g·kg －1组;E. 赶黄草 8. 4 g·kg －1;
F. 赶黄草 4. 2 g·kg －1组
图 1 赶黄草提取物对非酒精性脂肪肝大鼠
肝组形态学的影响(HE染色，× 100)
表 4 赶黄草提取物对大鼠肝脏脂肪变性的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/ g·kg －1
n
脂肪变性分级动物数 /只
－ +  
病变评分
/分
正常对照 － 12 12 0 ± 0
模型对照 － 12 1 3 7 1 1. 67 ± 0. 782)
非诺贝特 0． 033 12 12 0 ± 04)
赶黄草 16． 7 12 6 5 1 0. 58 ± 0. 673)
8． 4 11 5 5 1 0. 64 ± 0. 673)
4． 2 11 8 2 1 0. 36 ± 0. 794)
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一，当机体发生胰岛素抵抗时，葡萄糖的利用受阻，
胰岛素抗脂解作用降低，脂肪分解加强，血液中游离
脂肪酸浓度升高［7］，肝脏摄取游离脂肪酸也会随之
增加并且大量转变成甘油三酯，当游离脂肪酸流入
肝脏、氧化超载以及甘油三酯无法运出会导致肝脏
内脂肪蓄积的效应［8］，游离脂肪酸还能作为一种原
料使极低密度脂蛋白、胆固醇在肝脏的合成增
加［9］。当发生胰岛素抵抗时，脂代谢紊乱在 NAFLD
发病中是最为关键的变化之一［10］，此时可导致血清
CHO，TG，HDL-C，LDL-C 明显异常，而肝脏中的
NEAF，T-CHO，TG 可直接反映肝脏脂肪蓄积的程
度。正常的肝脏线粒体中游离脂肪酸会发生 β 氧
化，但是在非酒精性脂肪肝发生时因过多的游离脂
肪酸参与 β氧化导致肝细胞不堪重负产生活性氧簇
(ＲOS) ，活性氧簇(ＲOS)会通过随后激活的炎症通
路及线粒体的损害诱导氧化应激反应［11］。ＲOS 包
括了自由基和过氧化氢［12］，ＲOS 可损伤 DNA、蛋白
等生物分子，引起脂质过氧化反应。MDA是自由基
的一种，其高低的水平能反应机体内脂质过氧化程
度，间接地反应出细胞受损的轻重，ALT，AST，TBIL
则直接反应了肝脏功能受损的情况。而抗氧化系统
的酶类如 SOD，GSH-Px 能有效清除自由基，防止脂
质过氧化，保护细胞免受损害，其活力的高低，间接
反映了机体清除自由基的能力［13-14］。
从本次实验结果可见，赶黄草提取物各剂量组
能明显改善非酒精性脂肪肝大鼠肝脏病理改变及肝
功能受损状况，减轻肝组织脂肪含量和脂肪变性，且
能明显减轻非酒精性脂肪肝大鼠血脂水平和增强肝
组织抗氧化能力。故赶黄草提取物具有抗脂肪肝作
用，机制与可能与调节脂质代谢及抗氧化损伤有关。
关于脂肪肝模型的制造，本实验是采用脂肪乳灌胃
的方式，根据大鼠体重来严格控制了灌胃体积，保证
了大鼠长期定量进食高脂饮食而形成脂肪肝，这是
本实验的第一个特点。第二个特点是在的造模过程
中予各组(正常组及模型组除外)预防给药，在脂肪
肝尚未形成前进行干预，更符合现代人因生活水平
提高及缺少运动而易患脂肪肝并提前进行防治的特
点。而有关赶黄草对非酒精性脂肪肝发生的重要环
节，即胰岛素抵抗是否有作用还待后期进一步
研究。
［参考文献］
［1］ 中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学
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［责任编辑 聂淑琴］
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肖丽萍，等:赶黄草抗非酒精性脂肪肝的实验研究