全 文 ： ·624· Chin JMAP, 2012 July, Vol.29 No.7 中国现代应用药学 2012年 7月第 29卷第 7期
峰为 Se-O-C特征吸收峰。由此可知：是由于多糖
分子中的-OH与 H2SeO3分子中的-OH脱去 1个水
分子后形成亚硒酸酯(C-O-SeO2)的结果。
3 讨论
3.1 硒化工艺中影响含硒量的因素
在考察温度对硒多糖含量的影响时发现，因
为温度的升高使分子的热运动增加，溶剂和玉米
须多糖粒子间的传递速度加快，使其充分反应。
但温度过高时，部分玉米须硒多糖会发生分解，
导致玉米须硒多糖的硒含量又缓慢下降，因此硒
化反应最佳温度是 70 ℃。
在对硝酸体积进行考察时发现，由于玉米须
多糖是中性多糖，易溶于较低浓度的硝酸溶液，
当硝酸浓度较低时多糖才能与亚硒酸钠反应较完
全；但当硝酸浓度过低时，发现硒与多糖反应不
够完全；当硝酸浓度增加时，由于硝酸的氧化性
会使多糖的某些化学键断裂而发生降解作用，降
解后的低聚寡糖在透析时被除去，硒含量较低。
因此，硒化反应最佳硝酸体积分数为 0.3%。
在对反应时间进行考察时发现，正交实验的
结果和单因素考察结果不一致，这是因为在单因
素考察时，先是由估计的方法初步固定 4 因素中
的 3个因素进行的，虽硒含量 12 h最高，但收率
最低。综合收率和硒含量两因素，按正交实验结
果，最终选定反应时间为 8 h。
3.2 硒多糖的含量测定
选用硒-硫氰酸钾-甲基紫法测玉米须硒多糖
的含量，因为该方法灵敏度、准确度高，操作简
便。适于玉米须硒多糖中硒含量的测定，该法在
0~1.8 µg·mL1范围内呈良好的线性关系：r=0.999 13。
其硒多糖的含量可达到 3.17 mg·g1。
3.3 玉米须硒多糖的水溶性
实验发现，玉米须多糖在水中的溶解度较小，
而硒化后的玉米须多糖在水中的溶解性可增加 4
倍以上，易被制备成水溶液，也有利于人体的吸
收，是一个具有一定研究价值的硒多糖。
REFERENCES
[1] FANG M. Bioactive components and their bioactivities studies
on corn silk [D]. Wuhan: Wuhan Polytechnic University,
2010.
[2] ZHAO L J, SONG X P, LI F Y. Research progress on
anti-oxidation of polysaccharide and its derivatives [J]. J
Shanghai Univ Engineering Sci(上海工程技术大学学报),
2008, 22(1): 44-46.
[3] SHENG X Q. Study on the relationship between selenium and
diabetes mellitus [D]. Wuhan: Huazhong University of Science
And Technology, 2004.
[4] WANG Y Y, WU H G, GAO D B. Research progress on
polysaccharide containing selenium [J]. Chem Bioeng(化学
与生物工程), 2008, 25(2): 7-9.
[5] PANG X F, YANG G N, ZHAO Q. Preparation of selenide
glycyrrhiza polysaccharides [J]. Chem Engineering(化学工
程), 2009, 9(37): 63-66.
收稿日期：2011-11-10




阳离子交换树脂提取拐枣七中总生物碱的工艺研究

韩燕霞，郭增军*，张卉，韩玲，许文明，李囡(西安交通大学医学院，西安 710061)

摘要：目的 研究用阳离子交换树脂提取拐枣七中总生物碱的工艺条件。方法 以总生物碱的吸附量、解吸率和其中盐
酸小檗碱的含量为考察指标，对 5 种不同型号的阳离子交换树脂进行评价，并考察最佳工艺参数。结果 最佳提取工艺
是：拐枣七药材粉碎成粗粉，加入 10倍量的 70%乙醇，浸泡 2 h，加热回流提取 3次，每次 1 h。C008型阳离子交换树
脂为最佳吸附树脂，其最大吸附量为 0.65 g·g1，4% 氨水乙醇为洗脱溶剂，洗脱率为 13.81%。结论 C008型阳离子交
换树脂可用于提取拐枣七中总生物碱，该方法简便可行。
关键词：拐枣七；总生物碱；阳离子交换树脂；工艺研究
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2012)07-0624-04

作者简介：韩燕霞，女，硕士生 Tel: 18709273726 E-mail: hanxia132546@163.com *通信作者：郭增军，男，博士，教授 Tel:
(029)82655133 E-mail: guozj@mail.xjtu.edu.cn
中国现代应用药学 2012年 7月第 29卷第 7期 Chin JMAP, 2012 July, Vol.29 No.7 ·625·
Study on Extraction Technology of Alkaloids from Hylomecon Japonica by Cation Exchange Resins

HAN Yanxia, GUO Zengjun*, ZHANG Hui, HAN Ling, XU Wenming, LI Nan(School of Medicine, Xi’an Jiaotong
University, Xi’an 710061, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To obtain the optimal conditions for separating the alkaloids from the extract of Hylomecon
japonica by selecting appropriate cation exchange resins. METHODS Five types of cation exchange resins were evaluated in
separating efficiency with measuring the adsorption ratio and eluting ratio of total alkaloids as indices, and the content of
berberine hydrochloride from Hylomecon japonica was determined as an index by HPLC to choose the optimal technological
parameters. RESULTS The optimal result of extraction was obtained as Hylomecon japonica shattered into thick powder,
extracted with ten times 70% alcohol at room temperature for 2 hours and refluxing and extracting for 1 h (totally extracting for 3
times). C008 cation exchange resin had the good ability of absorbing the total alkaloid from Hylomecon japonica, and each gram
of C008 cation exchange resin could absorb 0.65 g of the total alkaloids, and the desorption ratio was 13.81%. CONCLUSION
The C008 cation exchange resin can be used for extracting total alkaloids from Hylomecon japonica and the established
procedure is simple and feasible.
KEY WORDS: Hylomecon japonica; total Altaloids; cation exchange resin; technological study

拐枣七为罂粟科(Papaveraceae)荷青花属荷青
花 Hylomecon japonica (Thunb.) Prantl et Kundig的
多年生草本植物的地下部分[1]，别名为荷青花根、
刀豆三七、水菖三七、大叶老鼠七、乌筋七等[2]；
根内含有隐品碱，别隐品碱、原阿片碱、黄连碱、
盐酸小檗碱、血根碱、白屈菜红碱、白屈菜玉红
碱、白屈菜黄碱、白屈菜碱、人血草碱、四氢小
檗碱等[3]；味苦，平；以根入药，具有祛风湿，舒
筋活络，散瘀消肿、止血、止痛的功效；主治风
湿性关节炎、跌打损伤等，在临床上有一定的应
用价值[4]。拐枣七中所含的生物碱具有一定的活
性[5]，鉴于这些活性成分的药用价值，对拐枣七药
材进行了提取精制，在充分保留原药材中所含生
物碱成分的基础上，尽可能的除去其他非生物碱
成分。本课题以盐酸小檗碱为参考指标，考察醇
提后，阳离子交换树脂法富集纯化拐枣七中总生
物碱的工艺条件。
1 仪器与试药
Spectra Systrm P2000 高效液相色谱仪(美国
Thermo 公司)；色谱柱为 Kromsil C18键合硅胶柱
(150 mm×4.6 mm，5 μm)；KQ 3200B超声波清洗
器(昆山市超声仪器有限公司)；AE240型电子分析
天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；N-1100 型旋
转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)。
乙腈(色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公
司)；乙醇(分析纯，天津市富宇精细化工有限公
司)；磷酸(分析纯，天津市化学试剂六厂)；水为
超纯水；001×7、C004、C008、LS-12、LSD001
型阳离子交换树脂(西安蓝晓科技有限公司)均为
市售；对照品：盐酸小檗碱(中国药品生物制品检
定所，批号：0713-0609，供含量测定用)；拐枣七
药材采自太白山，经西安交通大学药学系生药教
研室郭增军教授鉴定为罂粟科荷青花属荷青花
Hylomecon japonica (Thunb.) Prantl et Kundig的地
下部分。
2 方法和结果
2.1 盐酸小檗碱的含量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱 Kromsil C18柱(150 mm×
4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈-1％的磷酸溶液
(25∶75)；流速 0.8 mL·min1；检测波长 265 nm；
柱温 25 ℃。
2.1.2 盐酸小檗碱的含量测定 以盐酸小檗碱为
对照品，采用 HPLC 测定拐枣七中盐酸小檗碱的
含量。
2.2 拐枣七醇提的正交试验
根据预试验结果，固定提取溶剂为 10倍量，
以乙醇浓度、浸泡时间、提取时间、提取次数为
考察因素，设计 4因素 3水平[6]的正交设计方案，
考察拐枣七提取工艺条件。根据表 1 的因素水平
对该药材进行提取，并按“2.1”项下方法分别测
定拐枣七提取物中盐酸小檗碱的含量，结果见表 2。
2.3 正交试验结果分析
正交试验结果的分析见表 2。由结果得知最佳
工艺为 A3B2C3D3，即 50%乙醇，浸泡 2 h，提取 3
次，每次 3 h，溶剂用量为 10 倍量。与其它因素
相比，提取时间因素的影响不大，所以综合考虑
各因素，选择的最佳工艺为 70%乙醇、浸泡 2 h、
提取 3次、每次 1 h、溶剂用量为 10倍量。
·626· Chin JMAP, 2012 July, Vol.29 No.7 中国现代应用药学 2012年 7月第 29卷第 7期
2.4 上样液的制备
根据“2.3”项下的最佳提取工艺制备提取液，
滤过，滤液减压回收至干浸膏，加入 10倍量的 2%
盐酸溶液使干浸膏溶解，酸水液离心，取上清液
作为上样液。
表 1 因素水平表
Tab 1 Level of factors
因素
水平
乙醇浓度
A/%
浸泡时间
B/h
提取时间
C/h
提取次数
D/次
1 95 0 1 1
2 70 1 2 2
3 50 2 3 3
表 2 正交试验设计及结果
Tab 2 Orthogonal experiment design and results
试验号 A /% B/h C/h D/次 盐酸小檗碱含量/mg·g1
1 1 1 1 1 0.001 2
2 1 2 2 2 0.001 9
3 1 3 3 3 0.002 1
4 2 1 2 3 0.004 5
5 2 2 3 1 0.004 3
6 2 3 1 2 0.003 1
7 3 1 3 2 0.006 4
8 3 2 1 3 0.006 5
9 3 3 2 1 0.004 8
Ⅰ 0.005 2 0.012 1 0.010 8 0.010 3
Ⅱ 0.011 9 0.012 7 0.011 2 0.011 4
Ⅲ 0.017 7 0.010 0 0.012 8 0.013 1
R 0.012 5 0.002 7 0.002 0 0.002 8
2.5 树脂动态吸附量的测定
取已经处理好的不同型号的阳离子交换树脂
各 10 mL，装入层析柱中，以 1 BV·h1的流速上
样，至流出液碘化铋钾反应呈阳性，停止上样。
再用去离子水洗去多糖，至 Molish 反应呈阴性，
停止洗脱。采用烘干法测定 10 mL湿树脂的干重，
即可得到每克干树脂的最大吸附量。结果见表 3。
由结果可知：C008型阳离子交换树脂吸附性能最
佳，故选择该型号树脂做进一步考察。
2.6 解吸附剂的选择
将动态吸附后的C008型阳离子交换树脂进行
动态洗脱，测定动态洗脱量以选择洗脱溶剂。本
文比较了不同比例的乙醇-氨水解吸体系，考察氨
水浓度为 2%，4%，6%，8%，10%，流速为 1.5 BV·h1
时洗脱剂的洗脱率，结果洗脱率分别为 11.34%，
13.81%，11.74%，15.69%，12.05%。由结果可知，
8%氨水乙醇的洗脱率最高，但和 4%的氨水乙醇的
洗脱率接近，所以综合考虑试剂消耗等因素，选
择 4%氨水乙醇作为洗脱溶剂。
表 3 1 g干树脂的最大吸附量
Tab 3 The maximum adsorption capacity of 1 g dry resin
树脂型号 10 mL树脂 的干重/g
10 mL树脂的
最大吸附量/g
1 g干树脂最大
吸附量/g
001×7 5.45 2.58 0.47
C004 6.38 3.46 0.54
C008 6.67 4.33 0.65
LS-12 10.00 1.89 0.19
LSD001 7.89 1.58 0.20
2.7 不同型号树脂吸附量中盐酸小檗碱的含量
取“2.5”项下已经吸附好的 5 种阳离子交换
树脂，按“2.6”项下所选择的洗脱剂进行洗脱，
洗脱液减压回收得浸膏。按“2.1”项下进行盐酸
小檗碱含量的测定，测定结果见表 4。结果表明：
C008 型阳离子交换树脂中吸附的盐酸小檗碱的含
量最高，进一步证明了 C008型阳离子交换树脂为
最佳树脂。
表 4 1 g不同型号干树脂吸附盐酸小檗碱的含量
Tab 4 The berberine hydrochloride adsorption in 1 g
different types dry resin
树脂型号 进样浓度/
g.mL-1
进样体积/
µL
盐酸小檗
碱的含量/
mg·g1
1 g树脂吸附
的盐酸小檗碱
含量/mg·g1
001×7 0.133 3 10 0.032 13 0.015 10
C004 0.028 9 10 0.052 84 0.028 53
C008 0.025 1 10 0.077 63 0.050 45
LS-12 0.045 7 10 双峰 
LSD001 0.152 3 10 无 
2.8 盐酸小檗碱含量测定的方法学考察
方法学考察结果为：盐酸小檗碱的线性回归
方程为 Y=660 986X572.24，r=0.999 6，线性范围
为 10~50 μg·mL1；精密度试验 RSD=1.70%(n=6)；
重现性试验 RSD=1.41%(n=6)；稳定性试验
RSD=1.17%(n=6)；加样回收率试验得平均回收率
为 123.74%，RSD=2.27%(n=6)。方法学考察结果
显示，建立的 RP-HPLC测定盐酸小檗碱含量的方
法准确、灵敏、可靠。
2.9 提取纯化工艺的重复性试验
精密称取拐枣七药材粗粉 100 g，按“2.4”项
下方法制备上样液。取 C008型阳离子交换树脂装
入层析柱中，以 1 BV·h1的流速上样，至流出液
碘化铋钾反应呈阳性，停止上样。再用去离子水
洗去多糖，至 Molish 反应呈阴性，停止洗脱。用
4%氨水乙醇的洗脱剂洗脱，至碘化铋钾反应呈阳
性时开始收集流出液，碘化铋钾反应呈阴性时停
止收集，回收溶剂，干燥后得总生物碱浸膏为
4.17 g，得率为 4.17%，按“2.1”项测定总生物碱
中国现代应用药学 2012年 7月第 29卷第 7期 Chin JMAP, 2012 July, Vol.29 No.7 ·627·
中盐酸小檗碱的含量为 0.084%。
3 结论
通过对 5 种阳离子交换树脂吸附率、解吸附
率的比较，确定了吸附拐枣七中总生物碱较好的
树脂为 C008型阳离子交换树脂，并以盐酸小檗碱
的含量为参考指标，进一步确定了最合适的树脂
为 C008型阳离子交换树脂。
目前没有对拐枣七药材中生物碱成分的研究
报道。本实验采用盐酸小檗碱为参考指标，但是
通过实验，表明了盐酸小檗碱在拐枣七总生物碱
中的含量很低，仅占到总量 0.084%，其它生物碱
含量有待于进一步研究。
近年来，国内研究者已广泛将阳离子交换树
脂用于生物碱的提取，取得了显著的效果[7-10]，本
实验采用阳离子交换树脂提取拐枣七中的总生物
碱，工艺较简单，成本低，将为拐枣七药材的进
一步开发研究提供了依据。
REFERENCES
[1] Chinese Academy of Sciences, Flora of China Editorial
Committee. Flora of China(中国植物志) [M]. Vol 32. Beijing:
Science and Technology Press, 1999: 72-73
[2] Northwest Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences.
Qinling Flora(秦岭植物志 ) [M]. Beijing: Science and
Technology Press, 1974: 361-362
[3] State Administration of Traditional Chinese Medicine. Chinese
Herbal Medicine(中华本草) [M]. Shanghai: Shanghai Science
and Technology Press, 1998: 2269-2270
[4] GUO Z J, WANG J X, SU Y F, et al. Shanxi Qiyao(陕西七药)
[M]. Shanxi: Shaanxi Science and Technology Press, 2003:
189
[5] ZHONG M. Separation, purifieation and bioaetivities of
principal alkaloids from macleaya cordata(Willd) R.BR. [C].
Changsha: Central South University, 2011
[6] YUAN J L, PU Y Q, ZHANG T, et al . Technology study on
extraction and purification of alkaloid from Stemona japonica
[J]. J Chin Med Mater(中药材), 2011, 34(1): 126-129
[7] HUO W Z, LI Y X, JIANG H Y, et al. Process optimization on
puritication of alkaloids by cation exchange resin from
Chuanping Chinese medicine compound [J]. Tradit Chin Drug
Res Clin Pharmacol(中药新药与临床药理), 2005, 16(6):
446-449.
[8] CHI Y M. Purification of total alkaloids from in carvillea
sinensis with ion-exchange resin [J]. Nat Prod Res Dev(天然
产物的研究与开发), 2005, 17(5): 617-621.
[9] WANG G L, FANG J Q, ZHAO X M, et al. Study on
extraction and purification of the total alkaloids from
Scutellaria barbata D.Don [J]. Chin J Mod Appl Pharm(中国
现代应用药学), 2011, 28(5): 399-403.
[10] LI Y P, YANG G D, HE L C, et al. Study on the extraction of
the total alkaloids from Caulopyhllum robustum [J]. J Chin
Med Mater (中药材), 2007, 30(2): 220-223.
收稿日期：2011-11-20





本刊有关斜体的使用说明

撰写规范是给论文增光添色的一部分，也有利于普通读者阅读。因此，本刊在此给出斜体的使用说明，供广大
读者参考。斜体可适用于下述情况：
(1)数学变量符号，如 a，b，c，x，y，z等；变动附标如n ia 中的 i与 n。
(2)坐标图中的原点 O及 x，y，z轴。
(3)函数符号 f，g，D，N，F，E等。
(4)物理量符号，如 p，P，V，T，，I，R，S等。
(5)化合物英文名称、缩写符号或少数中文名称前表示位置、异构方式、结合方式等意义的词汇。如 n-(正)，i-(异)，
cis-(顺式)，trans-(反式)，o-(邻)，m-(间)，p-(对)，sec-(仲)，tert-或 t-(叔)，sym-(对称，均)，unsym-(不对称，偏)，
d-(右旋)，dl-(外消旋)，l-(左旋)、(E)-苯甲醛肟中的 E、(Z)-2-甲基-2-丁烯酸中的 Z、(R)-甘油醛中的 R、(S)-甘油-1-
甲醚中的 S等。
(6)化合物名称中表示与特定原子相连的符号。如 N-(与氮原子连接，大斜)，O-(与氧原子连接，大斜)，S-(与硫
原子连接，大斜)等。
(7)化学命名中表示基团位置的-，-，-，-，稠环化合物中母体各边编号用 a，b，c等表示。
(8)配合物配体中的 键以及配体名称前所冠的词头 -， -均为斜体。
(9)生物分类学中表示属名和种名的拉丁文字母。这在动物学、植物学、微生物学、中草药和病名中较为常见。