全 文 ：第 52 卷 第 3 期
2013 年 5 月
中山大学学报 (自然科学版)
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
Vol. 52 No. 3
May 2013
环草石斛化学成分研究
*
李春燕，陆 羽，陈 烨，郑嘉雯，王 军
(中山大学药学院，广东 广州 510006)
摘 要:环草石斛是中医临床上广泛应用的石斛药材。为了进一步研究环草石斛的药效成分，采用硅胶、LH －
20 凝胶及 C － 18 反相硅胶等柱色谱技术对其甲醇提取液进行了系统分离，结果得到 7 个化合物，分别是:石斛
宁 (1) ，2，4，7 －三羟基 － 9，10 －二氢菲 (2) ，2，5 －二羟基 － 4 －甲氧基菲 (3) ，loddigesiinols C (4) ，杓唇
石斛酚 (5) ，石斛酚 (6) ，3，4，5 －三羟基 － 3 －甲氧基联苄 (7)。这些化合物的结构由质谱、核磁共振波
谱数据确定，其中化合物 2、7 首次在环草石斛中分离得到。
关键词:环草石斛;分离;结构测定;药效成分
中图分类号:O625 文献标志码:A 文章编号:0529 － 6579 (2013)03 － 0073 － 04
Chemical Components of Dendrobium loddigesii
LI Chunyan，LU Yu，CHEN Ye，ZHENG Jiawen，WANG Jun
(School of Pharmaceutical Science，Sun Yat-sen University，Guangzhou 510006，China)
Abstract:Dendrobium loddigesii is used in clinical applications widely． In order to further investigate
its effective constituent，seven compounds including shihunine (1) ，9，10-dihydrophenanthrene-2，4，
7-triol (2) ，moscatin (3) ，loddigesiinols C (4) ，moscatilin (5) ，gigantol (6)and tristin (7)were i-
solated by silica gel，Sephadex LH －20 and ODS － 18 column chromatography from the methanol extract
of Dendrobium loddigesii． Their structures were analyzed by MS and NMR spectroscopy． The compounds
2 and 7 were obtained from Dendrobium loddigesii for the first time．
Key words:Dendrobium loddigesii;isolation;structure identification;effective constituents
兰科石斛属 Dendrobium SW． 植物全世界约有
1 100 种，我国境内有 76 种，其中有近 40 种被作
为药用［1］，用于治疗胃阴不足，病后虚热不退，
目暗不明等症［2］。在治疗糖尿病及老年性疾病的
方剂中，石斛常是主要成分［3 － 5］。由于石斛的药效
及广泛用途，成为药用植物的研究热点，得到国内
外学者的关注［6］。
环草石斛也叫小环钗石斛、美花石斛、粉花石
斛，主要分布于贵州、广西、云南和广东等省，被
2000 版中国药典收载。因金钗石斛，铁皮石斛等
价格昂贵，中医临床所使用的石斛多是环草石斛或
黄草石斛。关于环草石斛的化学成分研究较少，李
满飞等［7］从环草石斛的 HCl (φ = 1%)浸提液中
分离到了有抑制大鼠肾脏微粒体活性的石斛宁生物
碱;秦海林等［8］部分归属了环草石斛特征性标准
提取物 (SCE)乙醚萃取部位的1H NMR 指纹图
谱;Ito等［9］研究了环草石斛 φ = 80%醇提液的化
学组成，找到了具清除自由基活性及 NO生成抑制
活性的新结构芪类。
我们在研究中药药效成分的工作中发现，约有
50%的环草石斛醇取物分配在大极性的正丁醇萃取
部位，而已报道的关于环草石斛化学成分的研究大
都集中在石油醚、乙酸乙酯等中小极性萃取部位。
为了阐明环草石斛的药效物质基础，本研究对环草
石斛甲醇提取液进行了系统的化学成分研究，利用
现代色谱技术和波谱技术分离鉴定了 7 个化合物，
* 收稿日期:2013 － 01 － 09
基金项目:广东省部产学研资助项目 (2010B090400533)
作者简介:李春燕 (1987 年生) ，女，硕士;通讯作者:王军;E-mail:wjun@ mail. sysu. edu. cn
中山大学学报 (自然科学版) 第 52 卷
分别是:石斛宁 (1) ，2，4，7 －三羟基 － 9，10
－ 二氢菲 (2) ，moscatin (3) ，loddigesiinols C
(4) ，杓唇石斛酚 (5) ，石斛酚 (6) ，tristin (7) ，
其结构见图 1。其中化合物 2 和 7 为首次在环草石
斛中分离得到，对环草石斛的药效成分进行了初步
探讨。
图 1 分自环草石斛的化合物分子结构
Fig. 1 Structures of compounds from Dendrobium loddigesii
1 材料与方法
1. 1 实验试剂与仪器
实验试剂:石油醚、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲
烷、丙酮等为分析纯试剂，氘代试剂为美国 CIL产
品;TLC硅胶 (GF254)和柱层析硅胶 (200 ～ 300
目)均为青岛海洋化工有限公司产品，Sephadex
LH －20 凝胶为美国 GE Healthcare 产品，反相硅胶
ODS － A 为日本 Daiso 公司产品。环草石斛 (茎)
D． loddigesii Rolfe 于 2011 年 9 月购自广州采芝林
药店，该药材产自云南，广州市药材公司中药饮片
厂监制，由中山大学药学院蒋林研究员鉴定。
实验仪器:日本岛津 LC － 20AT 中压液相制备
色谱，Bruker AvanceШ 400 MHz 核磁共振谱仪，
LCQ DECA XP 型液相色谱 － 质谱联用仪，美国
Perkin Eimer TM公司 Perkin Eimer 341 型比旋光测
定仪。
1. 2 提取与分离
环草石斛 (茎)4 kg，甲醇冷浸 (35 L × 2) ，
减压浓缩提取液得浸膏 100 g。将浸膏悬浮于水中，
依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇萃取 (3
L × 3) ，减压浓缩萃取液，分别得石油醚萃取浸膏
13 g，氯仿萃取浸膏 25 g，乙酸乙酯萃取浸膏 10
g，正丁醇萃取浸膏 47 g，水溶层浸膏 16 g。
氯仿萃取浸膏经 Sephadex LH － 20 凝胶柱层
析，甲醇洗脱，脱去叶绿素后，用硅胶 (200 ～
300 目)柱色谱分离，以石油醚 －乙酸乙酯 (体积
比为 100 ∶ 0、90 ∶ 1 、80 ∶ 20 、70 ∶ 30 、50 ∶ 50、
40∶ 60、10∶ 90 和 0∶ 100)混合溶剂梯度洗脱，得到
8 个馏分 (Fr． L1 ～ 8)。Fr． L5 ～ 6 合并 (6 g) ，
经中压液相色谱系统分离，固定相为 ODS 反相键
合硅胶，水 －甲醇混合溶剂梯度洗脱，分段收集，
在 V (水) ∶ V (甲醇) = 50 ∶ 50 段得化合物 5，
V (水)∶ V (甲醇) = 45∶ 55 段分别得化合物 6、化
合物 4，V (水) ∶ V (甲醇) = 40∶ 60 段得化合物
3，各馏份分别进一步经 Sephadex LH － 20 凝胶柱
色谱纯化，甲醇洗脱，得到相应的纯化合物。Fr．
L 7 与乙酸乙酯萃取部位合并，用硅胶 (200 ～ 300
目)柱色谱分离，以石油醚 －乙酸乙酯 (体积比
为 100∶ 0、90∶ 1 、80∶ 20，70∶ 30 、50∶ 50、30∶ 70、
20∶ 80 和 0∶ 100)混合溶剂梯度洗脱，得到 8 个馏
分 (Fr． Y1 ～ 8)。Fr． Y6 ～ 7 合并 (3 g ) ，经中压
液相色谱系统纯化，固定相为 ODS 反相键合硅胶，
以水 －甲醇混合溶剂梯度洗脱，收集 V (水) ∶
V (甲醇)= 70∶ 30 段馏份，得化合物 2，继续收集
V (水) ∶ V (甲醇) = 60 ∶ 40 段馏份得化合物 7，
各段馏份分别再经 Sephadex LH － 20 凝胶柱色谱多
次纯化，甲醇洗脱，得相应的纯化合物。正丁醇萃
取浸膏，经 Sephadex LH －20 凝胶柱色谱除糖，甲
醇洗脱，再经正相硅胶柱色谱分离，V (二氯甲
烷) ∶ V (甲醇) = 25∶ 1 混合溶剂等度洗脱，得到
化合物 1。
2 结构鉴定
化合物 1，淡黄色油状液体，易溶于乙酸乙
酯、甲醇等。ESI － MS m / z:204. 3 ［M + H］，分
子式 C12 H13 NO2，不饱和度为 7。
1H NMR (400
MHz，CDCl3) δ:7. 87 (1H，d，7. 2 Hz) ，7. 71
(1H，t，7. 2 Hz) ，7. 57 (1H，t，7. 2 Hz) ，7. 47
(1H，d，7. 2 Hz) ，3. 39 (1H，m) ，3. 07 (1H，
m) ，2. 46 (1H，m) ，2. 38 (1H，m) ，2. 14 (2H，
m) ，2. 13 (3H，s) ，与文献 ［10］对照，鉴定化
合物 1 为石斛宁。
化合物 2，白色片状结晶，易溶于丙酮。ESI
－ MS m / z:227. 3 ［M － H］，分子式 C14H12 O3，不
饱和度为 9。1H NMR (400 MHz，aceton － d6) δ:
8. 25 (1H，d，8 Hz) ，6. 74 (1H，dd，1. 2，8 Hz) ，
47
第 3 期 李春燕等:环草石斛化学成分研究
6. 73 (1H，d，1. 2 Hz) ，6. 44 (1H，d，1. 2 Hz) ，
6. 34 (1H，d，1. 2 Hz) ，2. 63 (4H，s) ，与文献
［11］对照，鉴定化合物 2 为 2，4，7 －三羟基 － 9，
10 －二氢菲。
化合物 3，白色粉末状结晶，易溶于丙酮。
ESI-MS m / z:239. 2 ［M － H］，分子式 C15 H12 O3，
不饱和度为 10。1H NMR (400 MHz，aceton-d6) δ:
7. 63 (1H，d，8. 8 Hz) ，7. 50 (1H，d，8. 8 Hz) ，
7. 44 (1H，t，8. 8 Hz) ，7. 40 (1H，dd，8. 8，1. 6
Hz) ，7. 14 (1H，dd，8. 8，1. 6 Hz) ，7. 10 (1H，d，
1. 6 Hz) ，7. 02 (1H，d，1. 6 Hz) ，4. 15 (3H，s)。
与文献 ［12］对照，鉴定化合物 3 为 moscatin。
化合物 4，无定形白色固体，易溶于氯仿、丙
酮、甲醇等。ESI-MS m / z:333. 1 ［M － H］，分子
式 C18H22 O6，不饱和度为 8。 ［α］
27
D － 0. 6° (c =
1. 0，MeOH)。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ:6. 78
(1H，d，7. 8 Hz) ，6. 59 (1H，dd，7. 8，1. 5 Hz) ，
6. 49 (1H，d，1. 5 Hz) ，6. 41 (2H， s) ，4. 17
(1H，t，6. 6 Hz) ，3. 82 (6H，s) ，3. 76 (3H，s) ，
3. 20 (3H，s) ，3. 02 (1H，dd，6. 9，13. 3 Hz) ，
2. 76 (1H，dd，6，13. 6 Hz)。与文献 ［9］对照，
鉴定化合物 4 为 loddigesiinols C。
化合物 5，白色针状结晶，易溶于氯仿、丙酮、
甲醇等。ESI-MS m / z:305. 1 ［M + H］，分子式
C17H20O5，不 饱 和 度 为 8。
1H NMR (400 MHz，
CDCl3)δ:6. 81 (1H，d，8 Hz) ，6. 66 (1H，dd，
1. 6，8 Hz) ，6. 59 (1H，dd，1. 6 Hz) ，6. 34 (2H，
s) ，3. 82 (6H，s) ，3. 81 (3H，s) ，2. 79 (4H，s)。
与文献 ［8］对照，鉴定化合物 5 为杓唇石斛酚。
化合物 6，淡黄色油状物，易溶于氯仿、丙
酮、甲醇等。ESI-MS m / z:273. 2 ［M － H］，分子
式 C16 H18 O4，不饱和度为 8。
1H NMR (400 MHz，
CDCl3)δ:6. 81 (1H，d，8 Hz) ，6. 65 (1H，dd，
8，1. 6 Hz) ，6. 60 (1H，d，1. 6 Hz) ，6. 29 (1H，
d，1. 6 Hz) ，6. 23 (2H，d，1. 6 Hz) ，3. 82 (3H，
s) ，3. 72 (3H，s) ，2. 78 (4H，s)。与文献 ［8］
对照，鉴定化合物 6 为 gigantol。
化合物 7，无色针状结晶，易溶于丙酮。ESI-
MS m/z:259. 2 ［M － H］，分子式 C15 H16 O4，不饱
和度为 8。1H NMR (400 MHz，aceton-d6)δ:6. 79
(1H，d，1. 6 Hz) ，6. 70 (1H，d，8 Hz) ，6. 61
(1H，dd，1. 6，8 Hz) ，6. 21 (2H，d，1. 6 Hz) ，
6. 19 (1H，d，1. 6 Hz) ，3. 79 (3H， s) ，2. 75
(4H，m)。与文献［13］对照，鉴定化合物 7为 tristin。
3 结果与讨论
研究对环草石斛的甲醇提取物进行了较系统的
分离，单离到 6 个多酚和 1 个生物碱 (化合物结构
式见图 1) ，化合物 1，2，3，4，5，6，7 (w /%)
分 别 为 0. 062， 0. 010， 0. 001， 0. 001， 0. 025，
0. 001，0. 003，其中化合物 2 和 7 为首次在环草石
斛中发现的芪类化合物。
本研究从环草石斛的正丁醇萃取部位单离到大
量的石斛宁生物碱，从 4 kg药材中分到 2. 5 g多纯
品 (纯度为 99%) ;进一步用1H NMR 技术研究环
草石斛正丁醇萃取物，结果显示，低场 δ 8. 5 ～ 7. 5
有强的石斛宁及类似结构化合物的共振信号 (见
图 2) ，可推出石斛宁或类似结构的生物碱为环草
石斛的主要化学成分，故环草石斛属含生物碱较多
的优质石斛药材［14］;环草石斛中等极性部位的化
学成份主要是联苄、9，10 －二氢菲、菲等多酚类
物质，5 在其中含量最多，其次是化合物 2。
图 2 环草石斛正丁醇萃取部位1H NMR谱
(400 MHz，Methanol-d4)
Fig. 2 1H NMR spectrum of the extract from
Dendrobium loddigesii with n-BuOH
石斛宁目前只在兰科植物中发现，对兰科植物
的化学分类学有重要意义［15］。已有研究报道石斛
宁能抑制大鼠肾脏微粒体 Na-K-ATP 酶［8］，这一药
理活性与石斛在中医临床上滋阴清热的功效是相吻
合的，因此石斛宁可被认为是石斛滋阴清热的药效
成分之一。芪类化合物具有广泛的抗血小板聚集、
抗炎、抗肿瘤、抗畸变、抗氧化、细胞凋亡等活
性［16 － 18］，这些结构多样性的芪类化合物，与中医
认为石斛具有抗衰老功效相吻合。
57
中山大学学报 (自然科学版) 第 52 卷
4 结 论
本研究得出环草石斛中生物碱和芪类化合物的
含量非常丰富，且有较多的结构多样性。深入研究
环草石斛的活性成分，可为阐明其成份 －药效的关
系提供科学依据，也可为石斛所制成的中成药质量
控制提供依据。
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