全 文 ：2X ( )8年 1 1 月 第 10 卷 第 1 1 期 中国现代中药 Md oern Ch in e s e M e d ie ine N v o .2X ( )8 V ol .10 N o .11
超滤法纯化葫芦巴中
葫芦巴皂昔的工艺研究
李季文 ’ , 景明
(甘肃中医学院 ,甘肃 兰州 7 30 0 0 0
【摘要」目的 : 探讨采用超滤法分离技术纯化葫芦巴中葫芦巴总皂昔的工艺 。 方法 : 以浸膏得率和薯裁皂昔元的含量
为评价指标进行正交实验设计 , 对操作压力 、 滤膜的分子截流值 、 药液浓度 、 药液温度 4 个因素进行优选。 结果 : 选择的
最佳工艺为 A 3B Z C 3D , , 即操作压力为 2吨 · m 一 , , 膜孔径 (以截流分子量计 ) 10 姗 , 药液浓度为生药量 1 . 0g’ mL 一 ’ , 药液温
度为 25 ℃时纯化效果最好。 结论 : 所选择的膜分离技术纯化葫芦巴中葫芦巴总皂昔的工艺操作简单可靠 , 纯化效率高。
〔关键词 〕葫芦巴皂昔 ; 超滤法 ; 正交设计
胡芦巴为豆科植物胡芦巴 irT gon el a fo en u m 一gar e -
cu m L 的干燥成熟种子 。 具有温肾 、 祛寒 、 止痛作
用 , 主要用于肾脏虚冷 , 小腹冷痛 , 小肠病气 , 寒
湿脚气等疾病〔’ 〕 。 膜分离技术对葫芦巴中葫芦巴总
皂昔的分离纯化还未见报道 。 因此本文选用中空纤
维聚矾膜 ( SP ) , 对分离纯化葫芦巴总皂昔的操作参
数进行正交设计 , 优选最佳膜分离工艺 。
1 仪器与试药
A ig le in fl o 型高效液相色谱仪 (安捷伦 ) ; KT -
350 W 超声波清洗器 (江苏昆山超声技术有限责任公
司 ) ; B S l lo 电子 天平 (北京塞多利斯仪器有限公
司 ) ; TP 10 一 2 0 型中空纤维膜分离装置 、 10 00 中空
纤维聚讽膜 (南京凯米科技膜技术有限公司 ) ; 薯祯
皂昔元对照品由中国药品生物制品检定所提供 (批号
1 1064 8一 0 7 0 8 ) ; 葫芦巴药材 (购于黄河药市由甘肃
中医学院药学院院长李成义教授鉴定 ) 甲醇为色谱
纯 , 其他试剂均为分析纯 。
2 方法与结果
2
.
1 超滤前药液的制备
称取葫芦巴药材粉末 (过三号筛 ) 3 份 , 重量为
2X()
,
5 0 0
,
1 0 0 0 9
, 分别加 7 0% 的 乙醇回流提取 3
次 , 每次 8 倍量 , 回流 hl , 合并提取液 , 滤过 , 减
压回收乙醇至无醇味 , 分别加水稀释至 1 00 m L ,
高速离心过滤 8 0X() r · m in 一 ’离心 10 m in , 滤液作为超
滤前药液 , 备用 。
2
.
2 超滤液中薯预皂昔元的含量测定
2
·
2
·
l 色谱条件 色谱柱 z o RB AX SB 一 e l : ( 2 5 o m m x
4
.
6 m m
,
5林m ) ; 流动相 甲醇一水 ( 8 4 : 16 ) ; 检测波
长 ZO3 n m ; 流量 1 . o m L · m i n 一 ’ ; 柱温 2 5℃ 。 理论板
数以薯技皂昔元计算应不低于 4 0 0 。
2
.
2
.
2 对照 品溶液的制备 精密称取薯菠皂昔元对
照品适量 , 加甲醇制成每 l m L 含 0 . 5 4 6 m g 的溶液 ,
即得 。
2
.
2
.
3 供试品溶液的制备 分别精密量取超滤液
or m L
, 水浴蒸干 , 残渣分别加 3 m ol · L 一 ’ 盐酸溶液
Z o m L ( 一。 , 5 , s m L ) 溶解 [ , ] , 依次转移至锥形瓶
中 , 水浴中加热水解 30 m in 。 取出 , 放冷 , 加人三氯
甲烷 30 m L , 加热回流 巧 m in , 用三氯甲烷 30 m L , 同
法处理 1 次 , 滤过 , 再用三氯甲烷 30 m L 洗涤容器及
残渣 , 合并三氯甲烷液 , 回收三氯甲烷至 干 , 残渣
加甲醇溶解并转移至 25 m L 容量瓶中 , 加甲醇至刻
度 , 摇匀 , 即得 。
2
.
2
.
4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品
溶液各 20 林L , 注人液相色谱仪 , 测定 , 即得 。
2
.
3 超滤液干浸膏的测定
分别精密量取超滤液 10 m L , 置蒸发皿中 , 水浴
蒸干 , 105 ℃ 干燥 3 h , 取出 , 置 干燥器 中 , 放置
3 0m i n
, 称定重量 , 计算 , 即得 。
2
.
4 膜分离操作参数的选择
葫芦 巴药材提取液的膜分离以操作压力 ( A ) 、
膜孔径 (以截流分子量计 ) ( B ) 、 药液浓度 ( C ) 、 药
液温度 ( D )为考察因素进行 肠 ( 3 4 ) 正交试验 , 以浸
膏收率及薯茨皂昔元含量为判别指标 , 考察最佳分
离工艺条件 。 因素水平表见表 1 , 正交试验结果见
表 2 , 方差分析见表 3 一 4 。
[通讯作者 ] ` 李季文 , E一 m ia l : lj w y x5 2 15 2 1@ 16 3 . C o m
DOI : 10. 13313 /j . i ssn. 1673 -4890. 2008. 11. 006
2(X) 8年 1 1 月 第 1 0卷 第 11 期 中国现代中药 M o de rn Ch i ne s e M e die i en N o v . 2 (X) V 8o l. 1 N 0o . 1 1
表 1 正交实验影响因素与水平
因素
水平 操作压力
吨一L( A . m一 2
膜孔径
( B
, 分子量 )
药液浓度
( C
,
g
·
m L
一 ’
药液温度
( D
, ℃ )
气口曰0l,山4,`气曰0.
:
nU
` .1八U一、J
2
.
0
2 (D阅
1(洲洲刃
5 (XX)
,月,`内、é
表 2 正交试验及结果
因素 评价指标
试验号 浸膏收率
/ %
薯莎皂普
元量 /mg
4371556689.59867410l
l
l
2
2
2
3
3
3
3 6
.
82
3 6
.
7 2
3 9
.
52
2
.
80
2 3 8
.
4 8
2 3 7
.
84
25 4
.
9 2
17
.
0 8
l
2
3
l
2
3
l
2
3
34
.
5 4
39
. 闷4
39
.
0 8
4
.
9 0
2 2 2
.
6 6
2 5 5 4 5
2 5 3
.
1 3
3 2
.
7 9
2
2 9
.
8 8
3 6
.
7 4
46
.
4
14
.
5 6
19 3
.
5 3
2 3 7
.
9 7
2 9 9
.
7 4
10 6
.
2 1
l
2
3
3
l
2
2
3
l
3 7
.
5 0
3 9
,
12
3 6
. 月4
2
.
6 8
2 4 2
.
89
2 5 2 3 3
2 3 6
.
0 2
16
.
3 1
8
.
56
13
.
0 2
15
.
24
10
.
4 6
15
.
6 8
10
.
5 8
15
.
5 2
10
.
7 4
13
.
2 6
对表 2 的直观分析 , 以浸膏收率为考察指标时 ,
影响因素的主次关系为 C > B > D > ;A 以薯菠皂昔元
量为考察指标时 , 影响因素主次关系为 C > B > A > D 。
对表 3 的方差分析 , 以浸膏收率为考察指标时 , C 因
素具有显著性影响 ; 表 4 的方差分析 , 以薯菠皂昔元
量为考察指标时 , C 因素具有显著性影响 。 因此 , 为
提高膜的工作效率 , 并考虑到薯菠皂昔元透过量这一
指标的重要性 , 选择的最佳工艺为 A 3 B Z C3 D: , 即操
作压力为 Zk g · m 一 ’ , 膜孔径 (以截流分子量计 ) or 侧洲〕 ,
药液浓度为生药量 1 . 0 9 · m L 一 ’ , 药液温度为 25 ℃ 。
3 讨论
采用超滤法纯化工艺明显优于大孔树脂纯化的
工艺 , 工艺简单 , 收率高 , 降低成本 , 提高经济效
益 〔’ 4 〕 。 中空纤维膜的膜壁容易勃附大量物质 , 超滤
前药液一定要过滤 , 否则容易造成膜组件堵塞 , 有
效膜面积减少 , 透过率降低 。 实验过程中 , 药液浓
度要适当 , 浓度过高容易形成次级膜 , 使膜透过率
和膜通量降低 ; 但浓度过低 , 会延 长超滤时间 , 影
响工作效率 。 同时 , 在分离过程中药液的温度不能
太高 , 温度太高使得药液中的一些物质吸附 、 沉积 、
凝胶化于膜表面影响膜的通量 。 吐口
l,ù,
,ú内jl
l
勺`内,
4气ù67RC,
吩吮蚝R筑悦札浸膏收率薯祯皂昔
表 3 浸膏收率方差分析表
误差来源 55 V F P
A 1
.
6 8 2 1
.
3 9 < 0
.
0 5
B 4
.
9 2 2 4
.
09
C 4 6
.
1 5 2 3 8
. 以〕
D (误差 ) 1 . 2 1 2 l . 0()
注 : F。 。 ( 2 , 2 ) 二 19 . 0 ; F o o , ( 2 , 2 ) 二 9 9 . 0
表 4 薯孩皂昔元含量方差分析表
误差来源
A
B
C
D ( 误差 )
6 2
.
4 9
2 2 3
.
2 2
8 9 6
.
7 8
4 4
.
70
< 0
.
0 5
注 : F。 。 ( 2 , 2 ) = 19 . X() ; F。 。 1 ( 2 , 2 ) 二 99 .
参考文献
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4093一o4142,`2`,一
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e h e m i e a l 2 5℃ . C o n e lus i o n : T h e te e h n o l o群 15 s i m p l e a n d er l i a b l e a n d h a v e h i g h e r p u ir if e a t io n e if e ie n e y ·
「K e y W o r d s 」T ir g o n e ll a fo e n u m 一盯a e e u m s a p o n i n ; U l t r iaf l tr a t i o n ; O rt h o g o n a l d e s i g n
30