全 文 ：天然产物研究与开发 Na tP rod ResD ev 2007, 19:1-3
文章编号:1001-6880(2007)01-0001-03
收稿日期:2006-06-23 接受日期:2006-12-19
基金项目:江苏省自然科学基金项目(BK2005045);淮海工学院生
物技术开放课题
*通讯作者 Tel:86-013776597891;E-m ail:zh anyc88@ sina. com
罗氏海盘车中两个新的脑苷类化合物
———罗氏脑苷 B和罗氏脑苷 C
詹永成 1* ,裴月湖 2 ,许兴友 1 ,孙吉佑 1
1淮海工学院海洋生物技术实验室 ,连云港 222005;2沈阳药科大学中药学院 , 沈阳 110016
摘 要:采用硅胶柱色谱 、凝胶柱色谱 、制备 HPLC等手段 , 从海洋生物罗氏海盘车(Asterias rollestoni Be l.l )中分
离得到两个化合物 ,利用理化和波谱分析方法鉴定为 2 -(2′R-羟基-十五碳酰胺)-3-羟基 -( 2S, 3R ) -二十二
烷 1-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(1)和 2-{2′-羟基 -(2′R , 14′Z)-二十三碳烯酰胺}-3-羟基-(2S , 3R , 6E)-十五碳烯 1-
O-β-D-葡萄吡喃糖苷(2), 它们都是未见报道的新化合物 ,分别命名为罗氏脑苷 B和罗氏脑苷 C。
关键词:罗氏海盘车;罗氏脑苷 B;罗氏脑苷 C
中图分类号:R284.2 文献标识码:A
Rollcerebroside B and Rollcerebroside C:New Cerebrosides from
M arine Anmi alAsterias rollestoni Be l.l
ZHAN Yong-cheng1* , PE I Yue-hu2 , XU X ing-you1 , SUN Jie-you1
1Laboratory of Marine B iotechnology, Hua iha i Institute of Technology, L ianyungang 222005 , China;
2 School of Traditiona lCh ineseMa teriaM edica, Shenyang Pharm aceuticalUn iversity, Shenyang 110016 , China
Abstract:Tw o new com poundsw e re iso la ted by ch rom a tog raphy from Asterias rolleston i Be l.l and iden tified by spec tro-
scop ic analysis and chem ical reac tions a s 1-O-β-D-g lucopy rano sy l-( 2S , 3R )-2-( 2′R-hydroxypentadecanoy lam ino )-
docosane-1, 3-dio l( ro llcerebro side B, 1 ) and 1-O-β-D-g lucopyranosy l-( 2S , 3R , 6E )-2-[ 2′-hyd roxy-( 2′R , 14′Z )-
tricosenoy lam ino] -6-pentadecene-1, 3-dio l( ro llce rebro side C, 2 ).
K ey words:Asterias rollestoni;ro llcereb roside B;ro llcerebro side C
罗氏海盘车 (Asterias rolleston i Be l.l )为海星纲
棘皮动物 ,近年来 ,国内外学者对数十种棘皮动物的
化学成分和药理活性进行了研究 ,但对罗氏海盘车
国内外研究较少 ,药理研究显示 ,该动物提取物有抗
胃溃疡 、补肾壮阳等功效;报导了罗氏海盘车中的微
量元素 、氨基酸 、总皂苷 [ 1]和腺苷等含氮物质 [ 2] ;我
们对罗氏海盘车进行了系统的化学成分研究 ,从中
分离得到了三萜皂苷[ 3] 、脑苷[ 4] 和甾醇类化合
物 [ 5] 。本文报道从罗氏海盘车中分离得到的两个
新的脑苷类化合物 2-(2′R-羟基-十五碳酰胺 )-3-羟
基-(2S , 3R)二十二烷 1-O-β-D-葡萄吡喃糖苷 (1),
和 2-{2′-羟基(2′R , 14′Z )二十三碳烯酰胺}-3-羟基-
(2S , 3R , 6E) -十五碳烯 1-O-β-D-葡萄吡喃糖苷 (2)
(图 1)。
图 1 罗氏脑苷 B(1)和罗氏脑苷 C(2)的结构
F ig. 1 Rollce rebroside B (1) and ro llcerebro side C (2) i-
so la ted from Asterias rollestoni Be l.l
1 实验部分
Yanaco m icro-ho t-stage熔点测定仪 ,熔点未校
正;Sh imadzu GCM S-QP 5050SA型 (EI-MS), MAT-
95型(HRFAB-MS)和 LC-MSD-Trap-SL (Ag ilent)型
质谱仪(ESI-MS);B ruker AX-300核磁共振波谱仪 ,
TMS为内标;Sh imadzu LC-8A高效液相仪 (制备型
DOI牶牨牥牣牨牰牫牫牫牤j牣牨牥牥牨牠牰牳牳牥牣牪牥牥牱牣牥牨牣牥牥牨
20 mm ×250 mm , 15 μm );Sephedex LH-20(瑞士
Pharmacia公司出品 );硅胶 (青岛海洋化工厂出
品 )。高效液相用试剂为色谱纯 ,其它试剂为分析
纯 。所用药材购自江苏连云港 ,由淮海工学院海洋
学院吴国友高级教师鉴定为罗氏海盘车 Asterias
rollestoni Be l.l 。
2 提取分离及化学反应
罗氏海盘车干品用 70%乙醇提取 ,提取液减压
回收 ,浸膏加适量水混悬 ,依次用石油醚 、乙酸乙酯
及正丁醇萃取。石油醚部分经硅胶柱色谱分离 ,得
白色粉末 ,再经制备高效液相分离 、Sephedex LH-20
纯化得化合物 1和 2。
甲醇解反应 [ 6] :取样品约 15 mg,加 0. 9 mo l /L
盐酸(在 82%甲醇中)1. 5 mL,水浴回流反应 11 h ,
反应液用石油醚萃取 ,石油醚层经硅胶柱色谱纯化
(石油醚-乙酸乙酯 =9∶1),得类白色固体 FAM (脂
肪酸甲酯);石油醚萃取后的水液加氨水碱化 (pH =
9 ～ 10), 用乙醚萃取 ,萃取液挥干 ,得 LCB (长链
碱 );水液自然放置 ,得葡萄糖甲苷结晶。
DMDS衍生物制备[ 7] :取样品约 2 mg溶于二硫
化碳 (0. 5mL),加 DMDS 0. 5mL,碘 2mg,置于封管
中 70℃反应 40 h后 ,加入 5%硫代硫酸钠约 2 mL
终止反应 ,反应液加石油醚萃取 ,萃取液挥干 ,即得 。
3 结构鉴定
化合物 1 白色无定型粉末。 ES I-MS给出准
分子离子峰 782 [M +N a] +, 794 [M +C l] -, HR-
FAB-MS (positive ) 显 示 [ M +N a ] +峰 m /z
783.3851,对应分子式为 C43H85NO9。 1H NMR信号
δ8.37(d, 1H , J =7.8 Hz), 13 C NMR信号 δ175.7
(CONH)显示存在一个酰胺键;1H NMR信号 δ4.89
(d, 1H , J =7.5 Hz)和 13 C NMR信号 δ105.7, 75.2,
78.6, 71.5, 78.5, 62.7提示化合物 1中存在一个葡
萄糖。 1H NMR信号 δ0.84( t, 6H , J =6 Hz, 2个甲
基 )及 1.23(s, nH ,长链 CH2)显示有长脂肪链存在 ,
推定该化合物为一个脑苷类化合物 [ 8] 。化合物 1甲
醇解得到长链脂肪酸甲酯 (FAM-1)、长链碱 (LCB-
1)、β-D-葡萄糖甲苷 。 FAM-1经 GC-MS检测为一单
峰 ,分子量 (m /z):272,确定分子式为 C16H32O 3 ,提
示脂肪酸部分具有 15个碳。 LCB-1部分有 22(43
- 15 - 6=22)个碳 。脑苷类化合物的绝对构型可
由碳 、氢谱数据并结合生源关系推出 , 13C NMR信号
δ70.1 (C-1), 54.6 (C-2), 72.5 (C-3), 175.7 (C-
1′), 72.5 (C-2′)与构型为 (2S , 3R , 2′R)脑苷的数
据[ 9]基本一致。综上所述 ,化合物 1结构推定为 2 -
(2′R-羟基-十五碳酰胺 )-3-羟基-(2S , 3R )-二十二
烷 1-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。该化合物为未见文献报
道的新化合物 ,命名为罗氏脑苷 B。
化合物 2 白色无定型粉末。 ESI-MS给出准分
子离子峰 768[M-1] -, 792[M +N a] + , HRFAB-MS
(positive)显示 [M +N a] +峰 m /z 793.3502 ,对应
的分子式为 C44H83NO 9。 1H NMR信号 δ8.40(d,
1H , J =8. 7Hz), 13 C NMR信号 δ175. 6 (CONH)显
示存在一个酰胺键;1H NMR信号 δ4.91(d, 1H , J =
7.5 Hz), 13 C NMR信号 δ105.7, 75.1, 78.6, 71.5,
78.5, 62.7信号显示化合物 2存在一个葡萄糖;1H
NMR信号 δ5.94(m , 2H ), 5.46(m , 2H)及 13C NMR
信号 δ130、130.5、129.8表明该化合物含有两个双
键;1H NMR信号 δ0.85( t, 6H , J =6Hz, 2个甲基)及
1. 24(s, nH ,长链 CH2)显示有长脂肪链存在 ,推定该
化合物为一个含两个双键的脑苷类化合物。化合物
2甲醇解得到长链脂肪酸甲酯 (FAM-2)、长链碱
(LCB-2)、β-D-葡萄糖甲苷。 FAM-2经 GC-MS检测为
一单峰 ,分子量 (m /z)为 382,确定分子式为 C24H46
O3 ,提示脂肪酸部分具有 23个碳 ,且含有一个双键。
FAM-2 1H NMR信号 δ5.35 (brs, 2H), 4.20(m , 1H),
3.87(s, 3H), 1.25(s, nH), 0.84(t, 3H , J =8.6H z)显
示为含 1个双键 、1个羟基的脂肪酸甲酯。为确定双
键位置 ,我们进行了二甲基二硫化物 (DMDS)反应 ,
生成二甲基二硫化物衍生物 ,测定衍生物质谱 ,通过
特征碎片峰判断双键的位置 。 FAM-2的二甲基二
硫化物(DMDS)衍生物的质谱 m /z 173(C10H21 S),
确定双键位于 C-14′, C-15′位。烯氢信号 δ5.35
(brs, 2H)显宽单峰 ,及双键邻位 CH2碳化学位移为
δ27.5、27.2,故该双键为 Z 型 [ 10] 。由上可知 LCB-7
部分含有 15个碳 (44 - 6 - 23 =15),且有一个双
键 , LCB-2的二甲基二硫化物 (DMDS)衍生物的质
谱给出 m /z 173(C10H21 S),确定双键位于 C-6, C-7
位。双键邻位 CH 2碳化学位移为 δ32. 9、32. 7,故
该双键为 E型。绝对构型与化合物 1相同 。综上
所述 ,化合物 2结构推断为 2-[ 2′-羟基-(2′R , 14′Z )-
二十三碳烯酰胺 ] -3-羟基-(2S , 3R , 6E) -十五碳烯
1-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。该化合物为未见文献报道
的新化合物 ,命名为罗氏脑苷 C。
2 天然产物研究与开发 Vol. 19
4 理化及波谱数据
罗氏脑苷 B(1) 白色无定型粉末 (氯仿-甲
醇 ),磷钼酸显墨绿色 , mp. 109 ～ 111 ℃, [ α] 25D -12. 5
(c 0.008, C5H5N)。 1H NMR(C5D5N)δ:8.37(d,
1H , J =7.8 Hz, N-H), 4.69 (2H , H-1), 4.79 (1H ,
H-2), 4.74 (1H , H-3), 4.56 (1H , H-2′), 4.89(d,
1H , J = 7.5 Hz, H-1″), 4.01(H-2″), 4.21(H-3″),
4.20(H-4″), 3.89 (H-5″), 4.48 (H-6″), 4.35(H-
6″), 1.23 (s, nH , 长链 CH2 ), 0.84 (6H , CH3-20,
CH 3-15′)。 13 C NMR(C5D5N)δ:70.1(C-1), 54.6
(C-2), 72.5(C-3), 32.9(C-4), 22 ～ 32(C-5 ～ C-
21), 14.3(C-22), 175.7(C-1′), 72.5(C-2′), 35.6
(C-3′), 14.3(C-15′), 105.7 (C-1″), 78.6 (C-3″),
78.5 (C-5″), 75.2 (C-2″), 71.5 (C-4″), 62.7 (C-
6″)。HRFAB-MS m /z:783.3851 [M +Na] +。 ES I-
MSm /z:782 [M +N a] +, 794 [M +C l] -。 FAM-1MS
m /z:272 , 243, 213, 127 , 111, 97, 83, 65, 57。
罗氏脑苷 C (2) 白色无定型粉末 (氯仿-甲
醇 ),磷钼酸显墨绿色 , mp.110 ～ 112 ℃, [ α] 25D -10(c
0.01, C5H 5N)。 1H NMR(C5D5N)δ:8.40(d, 1H , J =
8.7H z, N-H), 5.94(m , 2H , H-7, H-8), 5.46(m , 2H ,
H-14′, H-15′), 4.69(2H , H-1), 4.76(H-2), 4.72(H-
3), 4.55(H-2′), 4.91(d, 1H , J =7.5Hz, H-1″), 4.03
(H-2″), 4.23(H-3″), 4.21(H-4″), 3.90(H-5″), 4.49
(H-6″), 4.34(H-6″), 1.24(s, nH , 长链 CH2 ), 0.85
(6H , CH3-15, CH3-23′)。13C NMR(C5D5N)δ:70.2(C-
1), 54.6(C-2), 72.5(C-3), 32.9(C-4), 32.9(C-6),
129.8(C-7), 130.5(C-8), 32.7(C-9), 22 ～ 32, 14.3
(C-15), 175.6(C-1′), 72.5(C-2′), 35.7(C-3′), 27.5
((C-13′), 130.0 (C-14′), 130.0 (C-15′), 27.5 (C-
16′), 14.3(C-23′), 105.7 (C-1″), 78.6 (C-3″), 78.5
(C-5″) , 75.1 (C-2″), 71.5 (C-4″), 62.7 (C-6″)。
HRFAB-MSm /z:793.3502 [M +Na] +。 ES I-MSm /z:
768[M-1] -, 792[M +Na] +。 FAM-2M Sm /z:382, 323,
297, 272, 227, 127, 111, 97, 83, 69。
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