全 文 ：令 食品基料 唯` : 素
花生壳中黄酮类提取工艺条件的研究
西北轻工业学院食品 系 (陕西咸阳 71 20 81 ) 董文宾 徐 颖 孙 健 张建华
摘 要
本文主要采用 乙醇回流浸提法 , 从花生壳中提取
黄酮类化合物 , 以芦丁为标准物 ,采用硼酸 一 柠檬酸比
色法 , 在紫外区对黄酮含量进行测定 。 通过正交试验
确定了最佳提取工艺 。 该方法与索氏提取法 、 溶剂分
批提取法等进行 了比较 , 以采用 乙 醇回流浸提法较
好 。
关键词 花生壳 黄酮类 提取
Ab s tr ac t 布 5 p a ep r 15 sut dy in g t h e met ho d Of ext ar e ti嗯
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K e卿 o r ds p e a n u t hu l l fl vaon o ids
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e x t ar ct fo n
理样品所得结果无明显差异 , 而且超声波前处理方法
操作简便快速 , 精密度高 , 重现性好 , 是快速测定糖精
钠的理想方法 。
4
.
3 超声波抽提样品中糖精钠的时间确定
如何确定样品中的糖精钠完全被抽提出来了呢 ?
我们做了不等时间超声处理样品的实验 , 具体结果见
表 4 。 结果表明 ,样品超声波处理 15而n ,能得出比较理
想的实验结果 , 另外回收率的结果从另一方面也证实
了这一点 。
表 4 不同时间处理样品所得结果 只八只
簇 超声处理 1仓 1五n 超声处理 15而 n 超声处理 2伍苗 n1 2 3 平均值 l 2 3
含量 2 . 37 2 2 _ 3 9 1 2 . 456 2 . 658 2 . 7 35 2 . 7 35 2 . 7 37
1 1
4
.
4 对于样品的前处理 , 曾做过超声处理后不用乙
醚提取这一步 ,样品经过滤后直接进 r理 LC 进行色谱
分离 ,结果杂质峰较多 ,虽不影响检测结果 ,但可能会
影响到色谱柱的寿命 。如果样品 比较简单 ,可考虑在样
品前处理时不用乙醚提取这一步 , 以提高检测的效率 。
5
. 小 结
用超声波方法对样品进行前处理 , 既简化实验过
程又缩短实验时间 。 样品经超声波处理后 , 如过滤困
难 ,可先离心后再过滤 。此方法重现性好 ,准确度高 ,操
作快速 、简便 ,不失为测定蜜饯中糖精钠的理想方法 。
参考文献 (略 ) 回
黄酮类化合物 (lF a vo on id s )是植物经光合作用产生
的一大类化合物 , 其结构母核是以 C 6 一 C 3 一 C 6 为骨架
的 2 一 苯基色原酮 l[] 。 它的存在形式有两种 ,一种是游
离的昔元 , 另一种是与糖等结合的昔 。 黄酮类化合物
在植物界分布很广泛 , 如银杏叶 、 山植 、 沙棘 、 蔷薇果 、
构祀 、杜仲 、茶叶等 。 已知的此类化合物约有 2 (X刃 多种
。 〕 ,有黄酮类和异黄酮类 ,还包括 (异 )黄烷酮 、 黄酮醇 、
黄烷酮醇 、 双黄酮及其衍生物 。 黄酮作为一种功能成
分 ,其作用主要有 : ( l) 抗肿瘤 ; ( 2) 延缓衰老 ; ( 3) 增强
心血管功能 ; ( 4) 治疗慢性前列腺炎 ; ( 5) 增强免疫力 。
近年来 , 在国外对黄酮类化合物的研究开发虽然十分
活跃 , 但在国内保健食品生产中开发较多的只有银杏
黄酮 、 山植黄酮 、茶叶黄酮等 。 为了进一步提高黄酮的
质量 ,降低产品的成本 , 就有必要寻求更多种原料 。 经
过调查研究 , 查阅国内外有关资料 , 本课题选中了廉
价 、易得的花生壳作为提取黄酮类化合物的原料 , 同时
也为这种农产品废弃物的利用寻找有效的途径 3IJ 。
1
. 主要实验材料与仪器设备
1
.
1 主要实验材料
1
.
1
.
1 原料 花生壳 (购于周至终南镇 )
1
.
1
.
2 试剂 芦丁 (生化试剂 ) 、 硼酸 、 柠檬酸 、 95 %
乙醇 、无水乙醇 、丙酮 (以上试剂均为分析纯 )
1
.
2 主要仪器设备
UV 一 26 5 1、 V紫外可见分光光度计 ( 日本岛津 ) 、 酒
精计 、 电热恒温水浴锅 、 光学读数分析天平 、 开启式电
炉 、 D FW 一 90 型电动植物粉碎机 、 电热烘箱 、 M DF 一
U 54 10 型 医用低温保存箱 、 LGJ O . 5冷冻干燥机
2
. 实验方法
2
.
1 原料的预处理
茶生壳经清洗后 , 在 50 ℃ 一 60 ℃的温度下烘 2 -
h3
,然后在常温下 自然干燥 , 保存于干燥的环境中。 用
电动植物粉碎机将花生壳粉碎 ,过 20 目筛 ,备用 。
2
.
2 提取方法
本实验是以乙醇作为溶剂 ,于一定的温度下 ,经一
定的时间来提取黄酮 。 主要方法有三种 : 乙醇回流浸
提法 、 索氏提取法 、溶剂分批提取法 。
2
.
3 样品制备流程
花生壳一粉碎一称量一 。 流浸提一趁热呱滤渣滤一滤
液减压蒸馏一浓缩粗提液一测量其体积一待测液
硬廷旧纷年第 1期
唯` 二素
2
.
4 测定方法4 t ]
本实验采用硼酸 一 柠檬酸比色法 , 以芦丁 为标准
物 ,在紫外区对黄酮含量进行测定 。
3
. 结果与讨论
3
.
1 正交试验确定最佳工艺
3
.
1
.
1 试验方案设计
选择乙醇浓度 、提取时间 、 提取温度和 乙醇用量四
个因素作为正交试验的考察因素 ,提取量 (gfn / g )作为
试验指标 ,进行正交试验比! 。试验因素与水平见表 l 。
表 1 试验因素与水平表
令 食品基料
石石函三石石石石石石石石石函` 石石石石石提取法的效果相近 ,但后者的操作较为繁琐 ,所以实际
中以使用乙醇回流浸提法更好 。
3
.
3 测定方法的回收率试验
试验结果见表o4
表 4 回收率试验结果
编号 花生壳黄酮的量 加入芦丁的量 实测值 回收率
(m g ) (啤 ) (哗 ) (% )
l 0
.
7875 0
.
3 125 1
.
0850 98
.
64
2 0
.
7875 0
.
5950 1
.
3650 98
.
73
3 0
.
7 87 5 0
.
897 5 1
.
707 5 10 1
.
34
4 0
.
7 875 1
.
2m 5 2
.加 50 lX() . 75
%森月之 乙醉浓度 提取时间 提取温度 料液比( % ) (h ) (℃ )
l 70 2 80 1
:
20
2 75 3 85 1
:
30
3 80 4 90 1
:
40
3
.
1
.
2 试验结果分析
正交试验结果分析见表 2。 由表 2可知 , 四种因素最
佳组合为 A , B 3C 3 D 3 , 即用 7 0% 乙醇 、料液 比 1 : 40在
9 0℃温度下浸提h4 。
表2 正交试验设计及结果表 L。 ( 3 礴 )
森毅 A B C D 提取量(gm电 )
l l( 70 {) l l ( 2 ) 1 (80 ) 1 ( l
:
20 ) 3
.的78
2 l( 70 {名 2 ( 3 ) 2 (85 ) 2 ( 1 : 3 0 ) 3
.
45 印
3 l( 70 }4 3 ( 4 ) 3 (90 ) 3 ( l
:
40 ) 3
.
69 63
4 2 ( 7 5 } l ( 2 ) 2 (85 ) 3 ( l
:
40 ) 3
.
2330
5 2 ( 75 ) 2 ( 3 ) 3 ( 90 ) 1 ( 1
: 2 0 ) 3
、
09 14
6 2 ( 7 5 ) 3 ( 4 ) l ( 80 ) 2 ( l
: 3 0 ) 3
.
3584
7 3 ( 80 ) l ( 2 ) 3 ( 90 ) 2 ( l
:
30 ) 3
.
07 16
8 3 ( 80 } 2 ( 3 ) 1 (80 ) 3 ( l
: 4 0 ) 3
.
15 10
9 3 ( 8 0 ) 3 ( 4 ) 2 ( 85 》 l ( l : 20 ) 2 . 9 198
K
z 10
.
1以 9 . 3 12 4 9 . 5 17 r2 9 . 0 l 9()
K 2 9
.
68 2 9
.
6984 9
.
60 8
一
8 9
.
8 8印
K
3
9
.
142 9
.
97 45 9
.
859
,
3 10
.
0 803
3
.
2 不同提取方法的比较
试验结果见表 3 。
表 3 不同提取方法的比较
提取方法
提取量 (m g龟)
提取率 (% )
乙醇回流浸提法 1索氏提取法
3
.
69 63
97 7 2
1
.
845 0
4 8
.
88
溶剂分批提取法
3
.
7 576
99
.
5 4
由表 3可 以看出 ,索氏提取法的效果最差 , 主要原
因为 : 原料花生壳中含游离的黄酮昔元相对较少 ,而
黄酮昔的含量相对较多 。前者难溶于水 ,后者易溶于水
6l[
。 在索氏提取法中是把提取烧瓶中的乙醇首先蒸发
到上面的抽提器中 ,经冷凝管冷凝成液体 ,再流到抽提
管中来与滤纸柱中的花生壳接触进行浸提 , 即相当于
用纯度较高 (约 9 0% )的乙醇在浸提 。 如前所述 , 纯度高
的乙醇虽然能提取较多的黄酮昔元 ,但黄酮昔元的相
对含量较少 ,而此时对黄酮昔的提取并不充分 ,所以索
氏提取法的提取率不高 。 乙醇回流浸提法与溶剂分批
由表 4可知 , 本试 验所用测定方法 的回收率在
98
.
64 % 一 10 1
.
34 % 之间 , 完全符合要求 , 说明用该法
测定黄酮含量具有较高的准确度 。
3
.
4 提取物的干燥及纯度测定
将每次试验所得到的黄酮粗提液进一步减压浓缩
(使残留的水分尽可能的少 , 以便于干燥操作 ) , 在 -
30℃下 ,预冻 s h 后 ,冷冻升华干燥 h4 ,得到黄酮粉末 ,
称取该粉末 13 . 7gnr ,用 50 % 乙醇定容至 5叼 ,混匀 ,移取上述溶液 4 m l ,加人硼酸 一 柠檬酸显色液5而 ,用丙酮
定容至 2 5lnI ,混匀 ,测定黄酮含量 。
通过计算得出样品中黄酮含量为 14 . 14 % ,表明样
品中黄酮含量较低 ,分析原因主要在于本文试验中只
进行了黄酮提取方法的研究 ,并没有涉及到将产品进
一步分离 、 纯化 ,同时也可能与干燥操作有一定的关系。
4
. 结 论
4
`
1 通过正交试验确定了提取黄酮的最佳工艺 , 即用
70% 乙醇 、 料液比 1 : 4 0在 90 ℃ 温度下浸提h4 。并与索
氏提取法 、溶剂分批提取法进行了比较 ,发现采用乙醇
回流浸提法较为合理 。
4
.
2 试验所采用的测定方法为硼酸 一柠檬酸比色法 ,
回收率在 98 . 64 % 一 101 . 34 %之间 ,稳定性好 、准确度高 。
4
.
3 通过将样品粗提液减压浓缩 、冷冻干燥 ,得到了
土黄色 的黄酮 粉末 。 经测 定 , 样 品 中黄酮含 量为
14
.
14 %
,表明样品中黄酮含量较低 ,这主要在于本论
文只进行了黄酮提取方法的研究 ,有关产品进一步分
离 、纯化等方面的研究 ,有待于 以后继续进行 。
参考文献
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