全 文 ：大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜作用机理的研究
刘艳华 (湖南环境生物职业技术学院，湖南衡阳 421005)
摘要 ［目的］探讨大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜的作用机理。［方法］采用冷浸法制备大头艾纳香甲醇提取物，采用叶片喷雾法研究大头
艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内蛋白质含量及3种保护酶活性的影响。［结果］与对照相比，大头艾纳香甲醇提取物显著降低了萝卜蚜体内
的 CAT活性，显著提高了 SOD活性，但对蛋白质含量和 POD活性无影响。［结论］为新型植物性杀虫剂的研究提供了理论依据。
关键词 大头艾纳香;萝卜蚜;有效成分;作用机理
中图分类号 S436． 3 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)16 －08876 －01
Function Mechanism of Methanol Extract of Blumea megacephala against Lipaphis erysimi Kaltenbach
LIU Yan-hua (Institute of Hunan Environmental Biological Technology，Hengyang，Hunan 421005)
Abstract ［Objective］The aim was to discuss the function mechanism of the methanol extract of Blumea megacephala Chang et Tseng against
Lipaphis erysimi Kaltenbach． ［Method］The methanol extract of B． megacephala was prepared by using cold soak method． Effects of the meth-
anol extract of B． megacephala on the content of protein and the activities of three kinds of protective enzymes of L． erysimi was studied by u-
sing blade spray method． ［Result］The methanol extract of B． megacephala significantly decreased the activity of CAT and increased the activ-
ity of SOD，while it had no significant effects on the content of protein and the activity of POD． ［Conclusion］The result provides theoretical
basis for the study on new botanical insecticide．
Key words Blumea megacephala Chang et Tseng;Lipaphis erysimi Kaltenbach;Active ingredients;Function mechanism
作者简介 刘艳华(1970 －) ，女，湖南衡阳人，讲师，硕士，从事天然产
物及植物源农药的开发和教学工作，E-mail:lyanhua_68@
163． com。
收稿日期 2012-02-27
大头艾纳香(Blumea megacephala Chang et Tseng)为菊科
艾纳香属多年生攀援灌木，广泛分布于福建、台湾、江西、湖南、
广东、广西、四川、贵州、云南等省区。萝卜蚜(Lipaphis erysimi
Kaltenbach)是重要的蔬菜害虫，危害严重。而大头艾纳香甲醇
提取物对萝卜蚜有很好的防治作用［1 －2］，将之开发为一种新型
的植物性杀虫剂，对于充分利用该植物资源具有重要意义。为
此，作者研究了大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜作用的机理，
旨在为新型植物性杀虫剂的研究提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 供试植物。大头艾纳香:采自广西东北部的桂林市
市区、临桂县。
1． 1． 2 供试昆虫。萝卜蚜:从广西师范大学生物园和桂林
市高兴开发区采集大小一致的萝卜蚜供试。
1． 2 方法
1． 2． 1 植物材料的提取。采用冷浸法。将采集的大头艾纳
香材料洗净泥土和杂质，放在室内通风处晾干，再在 60 ℃恒
温鼓风干燥箱中烘干至发脆，用植物粉碎机粉碎，过 40 目
筛。称取粉碎的植物干粉 100 g，放入 1 000 ml三角瓶中，加
入 5倍量甲醇溶剂，在室温下浸提(其间每隔 12 h 振荡一
次)48 h后抽滤，重复 2次，将 2次滤液合并。用旋转蒸发仪
在水浴中减压浓缩，蒸干溶剂，得植物提取物。
1． 2． 2 试验方法。采用叶片喷雾法。取室内盆栽小白菜叶
上大小一致的蚜虫，用小型喷雾器将药液喷到带虫叶片上，
以整张叶片喷湿至滴水为止。药液为大头艾纳香甲醇粗提
物加水及表面活性剂，有效成分含量为 10 mg /ml;对照用水
加表面活性剂代替。将处理过的试虫用毛笔接在培养皿(直
径 9 cm，内垫滤纸，加少量水保湿)中的新鲜萝卜叶上，每皿
接 50头虫，用滤纸盖住封口，然后将培养皿放入温度(25 ±
1)℃、相对湿度 75% ～85%、每日光照 12 h的光照培养箱中
培养，每隔 0． 5 h观察试虫的中毒症状。出现中毒症状时取
试虫制备样品，进行蛋白质含量和酶活性的测定。
1． 2． 3 测定项目与方法。取处理过蚜虫 300 头并准确称
重，加 5 ml 0． 9%氯化钠冰浴匀浆放置 30 min，10 000 r /min
冷冻离心 20 min，取上清液备用。
1． 2． 3． 1 蛋白质含量测定。参照 Bradford法［1］测定试虫体
内蛋白质含量。
1． 2． 3． 2 过氧化氢酶(CAT)活性测定。按照 CAT 试剂盒
(江苏南京建成生物工程研究所第一分所)的说明书操作。
CAT分解 H2O2 的反应可通过加入钼酸铵而迅速终止，剩余
的 H2O2 与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物，在 405 nm
处测定其生成量，即可计算 CAT活性。
1． 2． 3． 3 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定。参照赫再彬等
的方法［2］。以抑制光还原 NBT50%为 1个酶活性单位，酶活
性以 U/mg蛋白质计。
1． 2． 3． 4 过氧化物酶(POD)活性测定。参照张志良的方法［3］。
以1 min内OD变化0．01为1个 POD 活力单位，计算酶活性。
2 结果与分析
2． 1 中毒症状 大头艾纳香甲醇提取物喷雾处理引起萝卜
蚜的中毒症状:中毒后萝卜蚜不停地爬动，约 0． 5 h后静止不
动，然后随着中毒时间的延长体色渐渐变暗，最后死亡。
2． 2 大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内蛋白质含量的影
响 蛋白质标准曲线及标准曲线方程见图 1。结果显示，10
mg /ml大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内蛋白质含量影
响不大。处理 3 h后，处理组萝卜蚜蛋白质含量与对照组相
比有一定的降低但不显著(表 1) ，说明大头艾纳香甲醇提取
物对萝卜蚜体内蛋白质含量无影响。
(下转第 8946页)
责任编辑 乔利利 责任校对 卢瑶安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(16):8876，8946
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.16.090
角接触前可用滤纸从玻璃微电极尖端吸少量液体［7］。
2． 3 吹向触角的湿润空气的流速对 EAD信号有明显的影
响 如果流速过大，则较难观测到正常的 EAD信号，一般要
求空气流速为 20 ～50 cm/s。
2． 4 隔绝污染源 在操作过程中需要尽量避免同时进行
多组分试验时各组分交叉污染的可能。进行操作前，镊子、
微电极、滤纸片等都要进行灭菌消毒，切勿直接用手触摸，以
减少污染的可能。
3 展望
近年来，随着电生理技术的不断发展，EAG 的应用范围
也扩展到细胞和分子水平上探讨昆虫嗅觉感受机理，对嗅觉
化学感受行为的产生有更多了解。目前，触角电位技术已成
为昆虫神经生物学研究的重要方法。EAG技术仍在不断完
善中，研究触角对化学物质的反应，仍以 EAG 或 GC － EAD
为主，并以 GC － SCR技术作为补充。GC － EAD测定数据目
前尚处于直观定性阶段，在论文中一般显示图谱即可，不涉
及数据统计分析的问题。在 EAG 测定的过程中，由于刺激
气流控制系统的限制，到达感受器的气味分子的浓度无法确
定，大大影响了试验结果的精度。
另外，电生理试验还无法模拟昆虫在自然条件下对气味
的反应强度。利用触角电位技术所得的结果与行为试验结
果并非完全一致。如果有些昆虫对化合物的刺激在行为测
定方面没有表现出明显的效应，但却能激发昆虫较强的 EAG
反应;相反，那些激发昆虫强烈的 EAG 反应的信号物质，在
行为上却表现出驱避效应［9］。
综上所述，触角电生理变化并不能表示为单纯的行为反
应。目前，EAG只是反映触角对挥发性化合物的生理反应
值，还需进一步的行为试验(如嗅觉仪、风洞等)才能确定该
物质的行为活性。EAG 技术的进一步改善，应使仪器更自动
化，尽量避免由于环境因素造成的误差，同时还要体现在为
产品创造应用价值，如为探索害虫控制的新途径提供科学指
导等方面。
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
1607 －1619．
(上接第 8876页)
图 1 蛋白质标准曲线
2． 3 大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内过氧化氢酶的影
响 用 10 mg /ml大头艾纳香甲醇提取物处理萝卜蚜 3 h后，
萝卜蚜体内的过氧化氢酶活性降低(表 1)，表明大头艾纳香甲
醇提取物对萝卜蚜体内过氧化氢酶的活性有影响。
2． 4 大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内超氧化物歧化酶
的影响 用 10 mg /ml大头艾纳香甲醇提取物处理萝卜蚜 3
h后，萝卜蚜体内的超氧化物歧化酶活性显著升高(表 1) ，表
明大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内的超氧化物歧化酶
有显著影响。
2． 5 大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内过氧化物酶的影
响 用 10 mg /ml 大头艾纳香甲醇提取物处理萝卜蚜 3 h
后，萝卜蚜体内的过氧化物酶活性有所升高，但不显著(表
1) ，表明大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内过氧化物酶活
性无影响。
表 1 大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内蛋白质含量及酶活性的影响
组别
蛋白质含量
mg /g
CAT活力
U/mgprot
SOD比活力
U/mg
POD活力
△A /(min·mgprot)
CK 30． 830 ±0． 883 a 1． 938 ±0． 230 a 5． 359 ±0． 041 b 0． 233 ±0． 042 a
处理组 26． 218 ±1． 669 a 0． 516 ±0． 120 b 5． 970 ±0． 085 a 0． 263 ±0． 041 a
注:数据均为平均值 ± SE(n = 3) ，同列数据后不同小写字母表示在
0． 05水平差异显著(t检验)。
3 结论
大头艾纳香甲醇提取物(10 mg /ml)对萝卜蚜进行处理
后，萝卜蚜体内蛋白质含量无明显变化;CAT活性显著降低，
SOD活性显著升高;POD活性有一定升高但不显著，说明大
头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内蛋白质含量和 POD活性
无影响。
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6498 安徽农业科学 2012年