全 文 ：动物医学进展 ,2007 ,28(4):25-29
Progress in Veterinary Medicine
蒙古虫实化学成分预试验*
赵宝玉1 ,王建军1 ,达能太2 ,张战峰1 ,马冬青1
(1. 西北农林科技大学动物科技学院 ,陕西杨陵 712100;2.内蒙古阿拉善左旗兽医工作站 ,内蒙古阿拉善 750300)
　　摘　要:采用植物化学成分系统预试和专项预试相结合的方法 ,对采自内蒙古阿拉善盟左旗草场的蒙古
虫实地上部分全草进行了化学成分预试验。结果表明 ,蒙古虫实中含有生物碱 、糖 、甙类 、氨基酸及多肽 、皂
甙 、鞣质 、有机酸 、黄酮 、挥发油 、蒽醌;可能含有甾体和三萜类物质 、强心甙 、香豆素或萜类内脂 、酚类物质;不
含氰甙和脂肪族硝基化合物。
　　关键词:蒙古虫实;化学成分;预试验
中图分类号:S859. 87 文献标识码:A 文章编号:1007-5038(2007)04-0025-05
　　蒙古虫实(Corispermum mongol icum), 又名绵
蓬或红蓬草 ,俗称长羊蒿 ,为藜科虫实属植物 。植株
高 10 cm ～ 35 cm ,茎直立 ,圆柱形 ,直径约 2. 5 mm ,
被毛;分枝多集中于基部 ,最下部分枝较长 ,平卧或
上升 ,上部分枝较短 ,斜展。叶条形或倒披针形 ,长
1. 5 cm ～ 2. 5 cm ,宽 0. 2 cm ～ 0. 5 cm 。先端急尖具
小尖头 ,基部渐狭 ,有一叶脉。穗状花絮顶生和侧
升 ,细长 、稀疏 ,圆柱形长约 1. 5 cm ～ 3 cm 。苞片条
状披针形 ,长 15 mm ～ 20 mm ,宽约 2 mm ,先端渐
尖 ,基部较狭。被毛的脉膜质缘较窄 ,全部覆盖果
实。花被片呈矩圆形或宽椭圆形 ,顶端具有不规则
的细齿。雄蕊 1 ～ 5 ,超过花被片。果实较小 ,广椭
圆形 ,长 1. 5 mm ～ 3 mm ,宽 1 mm ～ 1. 5 mm ,顶端
近圆形 ,基部锲形 ,背部强烈凸起 ,腹面凹入 ,果核与
果同形 ,灰绿色具光泽 ,有时具泡状突起 ,无毛;果喙
极短 ,喙尖为喙长的 1 /2;翅极窄 ,几近无翅 , 浅黄
绿 ,全喙 ,花果期 7个月～ 9个月[ 1] 。
据资料记载 ,本属有 60多种 ,全部分布于北半球
温带地区 ,除少数种类出于北美外 ,绝大多数种类分
布于欧亚大陆 ,且以亚洲最多。我国有虫实属植物 26
种7变种 ,主要分布于东北 、华北 、西北和青藏高原地
区 ,安徽 ,河南 ,湖北亦有少数种类。属内各种全是沙
生植物 ,生长于河谷沙滩 ,沙质草原和荒地 ,固定或半
固定沙丘或者在流动沙丘的背风坡处[ 2] 。
在内蒙古 ,蒙古虫实主要分布在内蒙古阿拉善
左旗的宗别立 、吉兰太 、通古淖尔 、豪斯布尔都 、超格
图呼热 、查干布拉格 、哈什哈 、腾格里等沙漠湖盆地
的草场上 ,可食牧草缺乏时 ,牲畜被迫采食后可引起
中毒[ 3] 。蒙古虫实作为内蒙古阿拉善盟草场有毒植
物之一 ,主要危害羊和骆驼等反刍动物 ,能引起羊和
骆驼等反刍动物的急性中毒 ,表现为发病快 、病程
短 、死亡率高 , 对当地的畜牧业生产造成严重威
胁[ 4-5] 。目前 ,国内外均未见有关蒙古虫实化学成分
方面的文献报道 。当地畜牧兽医工作者曾采取一系
列预防和治疗方法 ,但是没有从根本上解决动物蒙
古虫实中毒问题 。因此 ,有关蒙古虫实的化学成分 、
对不同动物的毒性作用以及特效防治措施等亟待研
究。本试验采用植物化学成分系统预试和专项预试
方法 ,对蒙古虫实的化学成分进行了初步研究 ,目的
为蒙古虫实的有毒成分研究提供理论依据。
1　材料与方法
1. 1　材料
蒙古虫实植物样品于 2004 年 7 月采集于内蒙
古阿拉善盟阿左旗草场 ,晾干 ,粉碎后带回西北农林
科技大学 ,置阴凉处保存备用 。蒙古虫实的种属由
西北农林科技大学西北植物研究所植物分类研究室
鉴定 。
1. 2　方法
1. 2. 1　化学成分系统预试　采用《天然产物化学》
和《中药化学》介绍的方法进行[ 6-7] 。化学成分系统
预试验中预试液的经典制备方法是用极性由小到大
的各种溶剂对原料粉末顺次抽提 ,分别将与溶剂极
性相似的成分溶出 ,从而获得一系列提取溶液 ,供各
类成分检测。在本试验中 ,采用水 、乙醇 、石油醚对
样品分别进行提取 ,再辅以酸碱处理法 ,初步将各类
成分分离 ,减少彼此之间的相互影响 ,最后制成相应
* 收稿日期:2007-01-24
作者简介:赵宝玉(1964 -), 男 ,陕西宝鸡人 ,副教授 , 博士 ,主要从事植物毒素化学和动物有毒植物中毒病研究。
DOI牶牨牥牣牨牰牬牫牱牤j牣cnki牣牨牥牥牱牠牭牥牫牳牣牪牥牥牱牣牥牬牣牥牥牳
的供试液(图 1)。
图 1　蒙古虫实化学成分系统预试验
Fig. 1　T he preliminary systematic test of Corispermum mongolicum
26 动物医学进展　2007 年　第 28 卷　第 1 期(总第 160期)
1. 2. 2　化学成分专项预试
1. 2. 2. 1　氰甙专项检查　采用《兽医毒物检验实习
指导》介绍的方法进行[ 8] 。取蒙古虫实干草粉 5 g 置
于锥形瓶中 ,加 5%硫酸溶液 10 mL ,充分混合。在
锥形瓶口放一条浸过苦味酸溶液的试纸条 ,立即塞
紧瓶塞 ,在沸水浴中加热 10 min ,观察试纸条颜色变
化。若试纸条变成红色或砖红色 ,表明样品中含有
氰甙 ,否则不含氰甙 。
1. 2. 2. 2　脂肪族硝基化合物专项检查　采用格林
氏法 ,准确称取蒙古虫实干草粉 20 mg 放入 20 mL
试管中 ,加入 1 mol /L 盐酸 1 mL ,室温振摇 2 h ,加
入 200 g /L 氢氧化钾 1 mL 静置 2 h ,然后依次加入
2 mol /L冰醋酸和格林氏试剂各 1 mL ,观察结果。
若颜色变成粉红色 ,表示含有脂肪族硝基化合物 ,否
则 ,不含脂肪族硝基化合物。本试验选用富含脂肪
族硝基化合物的阳性植物小冠花 (Coroni l la varia
L. )作对照。
1. 2. 2. 3　皂甙类化合物专项预试　化学成分系统
预试验结果显示蒙古虫实中皂甙类化合物反应明
显 ,故采用泡沫试验 , 溶血试验以及 Liebermann-
Burchard , Salkow ski等经典显色反应和薄层色谱对
皂甙类化合物进行专项预试验[ 9] 。总皂甙的提取方
法是取蒙古虫实干草粉 ,蒸馏水煎煮 3次 ,每次 1 h ,
纱布过滤。所得滤液静置 2 d ,待分层后将上层液倒
出 ,用正丁醇萃取 ,直至萃取液接近无色 ,正丁醇萃
取液减压浓缩得皂甙粗提物。
2　结果
2. 1　化学成分系统预试验结果
由表 1可见蒙古虫实中含有生物碱 ,糖 、甙类 、
氨基酸及多肽 、皂甙 、鞣质 、有机酸 、黄酮 、挥发油 、蒽
醌;可能含有甾体和三萜类物质 、强心甙 、香豆素或
萜类内脂 、酚类物质 。
表 1　蒙古虫实化学成分系统预试验结果
Tab le 1　T he preliminary system at ic test resul ts of Corispermum mongolicum
编号
Number
预试液号
T es t solu tion
试验名称或条件
Tes t name or tes t condit ion
反应现象
Reaction phenomena
结果
Resul t s
1 A
α奈酚试验(M olisch反应)
Molisch react ion
界面有深紫色环
Intense violet color cycle in interface
糖及甙类++
Sacch aride and glycoside ++
2 A
菲林氏反应
Fehlings reaction
少量棕红色沉淀
Brow nish red color s ediment
还原糖+
Reducing sugar +
3 A
水解后 Fehling 反应
Feh lings react ion af ter hydroly se
产生 2倍量沉淀
Produ cte two times sediments
多糖及甙类++
Polysacch aride and glycoside ++
4 A
双缩脲(Biu ret)反应
Biuret reaction
深棕色
Deep brow n
多肽或蛋白质 +
Polypeptide and protein +
5 A
茚三酮(Nihydrin)反应
Nih ydrin react ion
蓝紫色
Am ethys t
氨基酸多肽或蛋白质++
Amino acids , polypep tide or protein ++
6 A
泡沫试验
Foam test
多量泡沫产生
Produ cte a great foam
皂甙++
Saponin ++
7 A
醋酐-浓硫酸反应
Lieb ermann-Burchard reaction
紫红色 ,上层变蓝
Am aranth , upper layer to ch ange b lue
皂甙++
Saponin ++
8 E
三氯化铁反应
Ferric chloride reaction
深棕色
Deep brow n
酚类±
Phenols ±
9 A. D. E
蛋白沉淀反应
Protein precipitation reaction
立即变浑浊
To change turbid imm ediately
鞣质++
T annin ++
10 D. E
pH 检查
pH detection
pH 5～ 6
pH 5～ 6
有机酸++
Organic acid ++
11 B . E
醋酐-浓硫酸反应
Lieb ermann-Burchard reaction
未出现颜色变化
No color change
甾体和三萜类±
Steroid and t rit erpenes ±
12 B
滴供试液于滤纸上
Drop tes t solu tion to f ilt er paper
无油污
No oil fou ling
挥发油或油脂++
Essent ial oi l and fat s ++
13 C
硅钨酸反应
Si licotungs tic acid react ion
灰白色沉淀
Off-w hite sedimen ts
生物碱++
Alkaloid ++
14 C
苦味酸反应
T rini t rophen ol reaction
黄绿色沉淀
Flavo-green sediments
生物碱++
Alkaloid ++
15 C
碘化铋钾反应
Potas sium H eptaiodobismuthate react ion
橘红色沉淀
J acinth sedim ents
生物碱++
Alkaloid ++
16 D
盐酸-镁粉反应
HCl-Mg react ion
橘红色
Jacin th
黄酮+
Flavon e +
27赵宝玉等:蒙古虫实化学成分预试验
(续表)
编号
Number
预试液号
T es t solu tion
试验名称或条件
Tes t name or tes t condit ion
反应现象
React ion phenomen on
结果
Resul t s
17 D
盐酸-锌粉反应
HCl-Zn react ion 橘黄色Saf f ron yellow 黄酮++Flavon e +
18 D
碱液反应
Lixivium react ion
红色
Red
羟基蒽醌++
Hydroxyanthraquinone ++
19 F
碱性苦味酸反应
Alkalinou s t rini t roph enol reaction
橙红色
Salm on pink
强心甙 ±
C ardiotonic glycoside ±
20 F
碱性 3 , 5-二硝基苯甲酸反应
Alk alin ou s 3 ,5 - dini t rob enzoic acid reaction
深紫红色
Mu lberry
强心甙±
C ardiotonic glycoside ±
21 F
开环与闭环试验
Open cycle and ring closure reaction
阳性
Positi ve
香豆素或萜类内脂±
Tonka bean cam phor o r terpene ±
22 F
荧光反应
Flourescence reaction
阴性
Negait ive
香豆素 -
Tonk a bean camphor -
注:①++、+表示检测结果呈阳性;②-表示检测结果呈阴性;③±表示结果可疑。
Note:①++, +means posit ive resul ts;②-mean s n egative resu lt;③mean s d ou bt ful resul ts .
2. 2　化学成分专项预试验结果
2. 2. 1　氰甙检查结果　采用苦味酸试纸条法检测
发现蒙古虫实中不含氰甙 。
2. 2. 2　脂肪族硝基化合物检查结果　加入格林氏
试剂后 ,放有小冠花的试管溶液变成红色 ,表明含有
脂肪簇硝基化合物;而放有蒙古虫实的试管没有变
色 ,表明蒙古虫实不含脂肪族硝基化合物。
2. 2. 3　皂甙类化合物专项预试验结果　由表 2可
见 ,皂甙粗提物经过泡沫试验 、溶血试验 、Lieber-
mann-Burchard试验 、Salkow ski试验以及薄层色谱
检查 ,证明蒙古虫实中含有皂甙类化合物。
表 2　蒙古虫实皂甙类化合物专项预试验结果
Table 2　The special p relimin ary tes t result s of saponins form Cor ispermum mongol icum
方法
Meth od s
试验现象
Reaction phenomena
判定结果
Assessment
泡沫试验
Foam test
持续性泡沫 ,量大 , 10 min后无明显减少
Du rat ive foam , a great , no manifest decrease af ter 10 minute
皂甙++
Saponin++
溶血试验
H em oly sis tes t
严重溶血
Severi ty haemoly sis
皂甙++
Saponin ++
醋酐-浓硫酸试验
Liebermann-Bu rchard react ion
出现紫色 ,且溶液上层变为污绿色
Product pu rp le , the u pper layer of solu tion change green
皂甙++
Saponin++
薄层色谱
Thin-l ayer
ch romatography
硅胶 GF254 ,氯仿:丙酮(2∶8)展开 , 50 mL /L 硫酸乙醇显色 ,呈现紫红色斑点
Gel si lica GF254 , developed w ith chloroform :acetone(2∶ 8), chromogenic
w ith 50 m L /L
su lphu ric acid-ethanol , p resent amaranth spots
皂甙++
Saponin++
注:++表示检测结果呈阳性。
Note:++means posi tive resul t.
3　讨论
每种植物中往往含有多种化学成分。在研究其
化学成分时 ,首先要大致知道其中含有哪些类型的
化学成分 ,才便于根据各类化合物性质选择合理的
研究方法 ,这就需要有一些比较简单的对各类化学
成分的定性预试验方法。一般来说 ,植物化学成分
的预试验可归纳为两类:一类是系统预试法 ,即在未
知情况下对植物中可能含有的各类成分进行比较全
面系统的定性检查;另一类是专项预试法 ,即为寻找
某种成分而进行的有针对性的检查 。通常由于研究
者研究目的的不同 ,有些选用系统预试法 ,有些选用
专项预试法 ,两种方法各有其优缺点。若把两种方
法结合应用 ,可以互相验证 ,对于判断某种或某类化
合物的存在 ,提高预试验结果的准确性将具有十分
重要的作用。
本试验采用植物化学成分传统预试和专项预试
相结合的方法 ,对采自内蒙古阿拉善盟左旗草场的
蒙古虫实地上部分全草进行了化学成分进行研究 ,
通过两种方法的互相验证 ,认为蒙古虫实含有生物
碱 ,糖 、甙类 、氨基酸及多肽 、皂甙 、鞣质 、有机酸 、黄
酮 、挥发油 、蒽醌;可能含有甾体和三萜类物质 、强心
甙 、香豆素或萜类内脂 、酚类物质;不含氰甙和脂肪
族硝基化合物。初步搞清了蒙古虫实所含化学成分
的种类。
28 动物医学进展　2007 年　第 28 卷　第 1 期(总第 160期)
动物医学进展 ,2007 ,28(4):29-33
Progress in Veterinary Medicine
伪狂犬病病毒冀 A 株 TK 基因的克隆及序列分析
王　琳 ,杨润德 ,陈丽君 ,孙向华 ,苏晓健 ,程　龙
(河北农业大学动物科技学院 ,河北保定 071001)
　　摘　要:为了分析比较伪狂犬病病毒(PRV)冀 A 株 TK基因与 GenBank 中收录的国内外其他 PRV 毒
株 TK 基因核苷酸及氨基酸序列的同源性 ,以伪狂犬病病毒冀 A 株的基因组为模板 ,PCR扩增了其胸腺激
酶(TK)基因 ,并对其进行了克隆和测序。结果表明 , TK 基因的开放阅读框(ORF)和所比较的各株的核苷
酸和氨基酸同源性都在 99%以上 。核苷酸序列中发现在起始密码子的上游有 3段 GC 框样的序列 ,在终止
密码子中发现多聚腺苷加尾信号 AA TAAA ;在氨基酸序列中发现有疱疹病毒 TK基因的保守序列 R*Y*
DG **G *GK *T-和-FDRHP*A ***C*P*AR-。
　　关键词:伪狂犬病病毒冀 A 毒株;TK基因;聚合酶链反应;核苷酸序列;氨基酸序列
中图分类号:S852. 659. 1 文献标识码:A 文章编号:1007-5038(2007)04-0029-05
　　伪狂犬病病毒(Pseudorabies vi rus ,PRV)可引
起多种家畜及野生动物的伪狂犬病 ,对猪的危害最
为严重[ 1] 。 PRV 基因组为长 150 kb 的线性双链
DNA 分子 ,可编码 70 种 ～ 100 种蛋白质[ 2] 。病毒
基因组是由长独特区 U L 、短独特区 US 以及 US 两
侧的末端重复序列 TR和内部重复序列 IR所组成 。
　　　收稿日期:2007-01-15　　　作者简介:王　琳(1982 -), 男 ,河北唐山人 , 硕士 ,从事畜禽病毒病防控研究。
根据蒙古虫实预试验结果 ,再结合牲畜中毒的临床
表现 ,可以推测蒙古虫实所含的皂甙类成分可能是
引起草原牲畜蒙古虫实中毒的有毒成分 ,排除了氰
甙和脂肪族硝基化合物引起牲畜中毒的可能性 ,为
蒙古虫实的毒理学 、毒物学以及防治技术研究奠定
了试验基础。
参考文献:
[ 1] 　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M ] .北京:科
学出版社 , 1998.
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业科学 , 1996 , 13(6):49-52.
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[ 8] 　赵宝玉 ,李绍君.兽医毒物检验实习指导[ M] . 西北农业大学
动医系 , 1997:113-116.
[ 9] 　斐月湖.天然药物化学试验[ M ] .北京:人民卫生出版社 , 2004.
Preliminary Test of Corispermum mongolicum
ZHAO Bao-yu1 ,WANG Jian-jun1 , DA Neng-tai2 , ZHANG Zhan-feng1 ,MA Dong-qing1
(1. Col lege o f Anima l Science and Veter inary Med icine , Northwest A &F Universi ty , Yang l ing , Shaan xi , 712100 , China;
2. A lasan Lef t B anner Veter inary S tat ion o f Inner Mongo lia , Bayanhaote , Inner Mongo lia , 750300 , China)
Abstract:The chemical constituents in enti re plants of Corispermum mongol icum collected in Alasan Lef t
Banner grassland we re systema tically pre-tested by tradi tional and special preliminary test methods. The
results showed that the tested samples contained alkaloids , saccharides , gly co sides , amino acids and poly-
peptides , saponins , tannins , org anic acids , f lav ones , volati le oiles and anthraquinones;the te sted samples
po ssibly contained steroids and tri terpene s , cardiac gly co sides , couma rins or terpene lactones , phenolic
compounds ;The re are no cyanophoric g ly co side and fat ty series nit ro compounds in tested samples.
Key words:Corispermum mongol icum ;chemical composi tion;prelim inary sy stematic test