全 文 ：［基金项目］哈尔滨青年科技创新人才基金项目(编号:2009RFQXN099) ［作者简介］白靖文，男，博士研究生，讲师，E-mail:neaubjw@ 163．
com ［通讯作者］叶非，男，博士，教授，电话:0451-55190417，E-mail:yefei@ neau． edu． cn
正交试验优选东北延胡索超声辅助提取工艺
白靖文，叶非，贾旭 (东北农业大学理学院，黑龙江 哈尔滨 150030)
［摘要］ 目的:优选东北延胡索的最佳超声辅助提取工艺。方法:通过正交提取试验，以延胡索乙素含量为指标，考察了溶剂
体积分数、超声提取时间、料液比、超声功率等因素对延胡索乙素提取效果的影响。结果:延胡索的最佳提取工艺为乙醇体积
分数 100%、超声提取时间 25 min、超声功率选择 400 W、料液比为 1∶ 10。结论:优选的超声提取工艺稳定、可行、无干扰，提取
效果好。
［关键词］ 东北延胡索;超声提取;正交试验
［中图分类号］R931 ［文献标识码］A ［文章编号］1001-5213(2011)10-0819-03
Study on optimum ultrasound-assisted extraction process of Corydalis ambigua by orthogonal
design
BAI Jing-wen，YE Fei，JIA Xu (College of Science of Northeast Agriculture University，Harbin Heilongjiang 150030，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To determine the optimal ultrasonic extraction process of Corydalis ambigua． METHODS Orthogonal
test was used for studying the effects of solvent concentration，ultrasonic extraction time，ratio of material and solvent and ultrasonic
power on extraction result according to content of Tetrahydropalmatine． RESULTS The optimal extraction process was as follow:
100% alcohol acted as solvent，ultrasonic extraction time was 25 min，ultrasonic power was 400 W and the ratio of material and solvent
was 1∶ 10． CONCLUSION The optimal extraction process was stable，feasible and non-interfering． The method could get the best ex-
traction result．
KEY WORDS:Rhizoma Corydalis ambigua;ultrasound-assisted extraction;orthogonal test
东北延胡索(Corydalis ambigua Cham． et Sch．)
又名土元胡，为罂粟科多年生草本植物东北延胡索
的茎，主产于我国东北地区及俄罗斯、日本。延胡索
含有多种生物碱，其主要有效成分是延胡索乙素。
具有活血、散淤、理气、镇痛作用，特别是对妇女淤血
气滞、月经不调有良好效果，并且具有抗溃疡、抑制
胃酸分泌、解痉、抗心律失常、镇静催眠等作用。常
见提取方法有热回流［1］、超临界［2］、微波法［3］等。
本实验以延胡索乙素提取浓度为考察指标，以紫外
分光光度法进行测定，对延胡索乙素的不同提取工
艺进行试验，采用正交试验优选超声辅助提取延胡
索乙素的最佳工艺条件。
1 材料
JY92—2D超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物
科技股份有限公司) ;721—2000 紫外可见分光光度
计(山东高密彩虹分析仪器有限公司) ;东北延胡索
(哈尔滨市药材公司，经东北农业大学孙艳梅副教
授鉴定为罂粟科多年生草本植物东北延胡索的干燥
块茎) ;溴麝香草酚兰缓冲液(pH 7． 6) ;延胡索乙素
(中国药品生物制品检定所，批号 110726-200409) ;
其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 延胡索乙素含量测定
2． 1． 1 对照品溶液制备 准确称取0． 01 g延胡索
乙素对照品，用无水乙醇定容至 25 mL量瓶中，摇匀
即得对照品贮备液。
2． 1． 2 供试品溶液制备 将东北延胡索粉碎过
400 目筛，准确称取 2 g 延胡索粉于小烧杯中，乙
醇浸泡 24 h，超声提取，抽滤，滤液在水浴中蒸
干，往残渣中加入 5 mL 的无水乙醇摇匀即为供
试品溶液。
2． 1． 3 标准曲线的制备 准确量取对照品溶液
0． 00，0． 01，0． 015，0． 02，0． 025，0． 03，0． 035，0． 04，
0． 045，0． 05 mL。分别注入 50 mL 量瓶中，挥干无
水乙醇，向 50 mL量瓶中依次加入 10 mL 缓冲溶液
与 10 mL氯仿，密封振荡 10 min后静置 2 h，待氯仿
层与水层完全分层后，吸取氯仿层注入 1 cm的比色
皿，在延胡索乙素的最大波长(420 nm)下，以第 1
瓶的氯仿层做空白，分别测定吸光度，以测定得到的
吸光度为纵坐标(A) ，以延胡索乙素的浓度(C)为
·918·中国医院药学杂志 2011 年第 31 卷第 10 期 Chin Hosp Pharm J，2011 May，Vol 31，No． 10
横坐标得回归方程:A = 0． 300 7 C + 0． 003 1，r =
0． 999 9。延胡索乙素在0． 4 ～ 2． 0 mg·L-1范围内线
性关系良好。
2． 1． 4 空白干扰试验 以 10 mL 纯化水 + 10 mL
氯仿做空白，测定 pH 7． 6 的溴麝香草酚兰缓冲溶液
10 mL + 氯仿 10 mL 的吸光度，结果吸光度为
－ 0． 001，表明为阴性，无干扰。
2． 1． 5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液
0． 10 mL，加入 50 mL 量瓶中，依“2． 1． 3”项下方法
测定吸光度，平行操作 6 次，结果吸光度的 RSD 为
0． 61%。
2． 1． 6 稳定性试验 准确吸取对照品溶液
0． 02 mL，按“2． 1． 3”项下测定方法处理，分别在 0，
0． 5，1，1． 5，2，2． 5，3 h测定吸光度，其吸光度的 RSD
为1． 03%。
2． 1． 7 加样回收率试验 取已知含量的样品 6
份，分别加入延胡索乙素对照品溶液，按“2． 1． 3”项
下方法处理，测定吸光度，计算延胡索乙素含量，回
收率为别为99． 00%，98． 14%，100． 1%，97． 28%，
99． 15%，98． 18%，平均回收率为98． 64%(n = 6) ，
RSD为1． 00%。
2． 2 正交试验优选延胡索乙素超声辅助提取工艺
2． 2． 1 正交试验设计［2］ 根据预试结果，选定乙
醇体积分数、提取时间、超声功率、料液比 4 个影响
因素，每个因素选取 3 个较优水平进行 L9(3
4)正交
试验，正交试验设计见表 1。
表 1 正交试验因素水平表
Tab 1 Table of factors and levels for orthogonal design
水平
因素
乙醇体积
分数(A)/%
超声时间(B)
/min
超声功率(C)
/W
料液比(D)
/ g·mL-1
1 100 25 500 1∶ 8
2 90 30 300 1∶ 10
3 85 35 400 1∶ 12
2． 2． 2 含量测定 取 1 ～ 9 号供试品溶液依次按
“2． 1． 3”项下方法进行延胡索乙素含量测定。
2． 2． 3 结果分析 由表 2 直观分析可知 RA ＞ RD
＞ RB ＞ RC，各因素影响大小顺序是 A ＞ D ＞ B ＞ C，即
乙醇体积分数 ＞料液比 ＞提取时间 ＞超声功率，由
表 3 方差分析结果可知:相对于误差来源的 C 因
素、A因素、D 因素对延胡索乙素提取影响显著，B
因素的影响不显著。综合表 2 和表 3 的分析结果可
知延胡索乙素最佳提取工艺为 A1B1 C3D2即乙醇体
积分数为 100%，超声提取时间为 25 min，超声功率
选择为 400 W，料液比为 1∶ 10。
2． 3 验证试验 按上述优化的超声提取条件，进
行 9 次延胡索乙素的超声提取验证试验，提取结果为
0． 936，0． 941，0． 928，0． 919，0． 929，0． 921，0． 909，
0． 937，0． 928 mg·L-1，得到优化条件下的延胡索乙素
的平均质量浓度为0． 927 5 mg·L-1，RSD为1． 08%，差
异无显著性，说明该工艺有很好的重复性。
表 2 L9(3
4)正交试验结果
Tab 2 Results of L9(3
4)orthogonal test
试验
序号
因素
A /% B /min C /W D /g·mL-1
质量浓度
/mg·L-1
1 1 1 3 2 0． 924
2 1 2 1 1 0． 723
3 1 3 2 3 0． 616
4 2 1 2 1 0． 815
5 2 2 3 3 0． 557
6 2 3 1 2 0． 777
7 3 1 1 3 0． 534
8 3 2 2 2 0． 543
9 3 3 3 1 0． 586
K1 0． 748 0． 758 0． 678 0． 708
K2 0． 716 0． 608 0． 651 0． 748
K3 0． 554 0． 653 0． 689 0． 562
R 0． 194 0． 150 0． 038 0． 186
表 3 方差分析表
Tab 3 Variance analysis
因素 SS f S F P
A 0． 065 2 0． 032 28． 70 ＜ 0． 05
B 0． 036 2 0． 018 15． 78 ＞ 0． 05
C 0． 002 2 0． 001 1
D 0． 057 2 0． 029 25． 45 ＜ 0． 05
注:F1-0． 05(2，2)= 19． 00;F1-0． 01(2，2)= 99． 00
3 讨论
煎煮、渗漉、索氏法、回流法、大孔吸附树脂法和
超临界萃取法都可以对延胡索乙素进行提取，由于
索氏法和回流法提取时间长，耗费溶剂量大，而超临
界萃取法主要用于低极性的小分子化合物的萃取，
对于极性大的化合物如生物碱不适合直接萃取;而
大孔吸附树脂法比较烦琐，从节约时间、成本和可行
性角度出发，通过预试验比较了煎煮、渗漉、回流、超
声辅助提取延胡索乙素的提取效果，结果显示超声
提取效果最好。在超声辅助提取过程中，超声场声
能量与物质间产生超声空化作用，伴随超声空化产
生的机械效应引起液流的宏观湍动、固体粒子的高
速碰撞和固体内微孔介质的微扰动，都使得涡流扩
散加强，大大加快内扩散速度［4］。因而与常规提取
相比，超声提取具有缩短生产周期、降低生产成本、
提高提取效率、避免高温破坏活性成分等特点，具有
很好的应用前景。
参考文献:
［1］ 周瑞，陆兔林． 延胡索的提取工艺优选［J］． 时珍国医国药，
2003，14(11) :662-663．
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［3］ 朱根华，王光发，梁新丽，等．微波辅助提取与常规提取延胡索
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［4］ 刘小平．中药分离工程［M］． 北京:化学工业出版社，2005:60-
61．
［收稿日期］2010-01-11
［基金项目］广西科学基金资助项目(编号:桂科自 0899012) ［作者简介］李江，男，硕士，副主任药师，电话:0773-2882506，E-mail:lijiangflash
@ 163． com
三叶青藤醇提物的镇痛抗炎作用
李江，邓航，付翔，黄桂红，罗昱澜 (桂林医学院附属医院药剂科，广西 桂林 541001)
［摘要］ 目的:研究三叶青藤醇提物的镇痛及抗炎作用。方法:采用小鼠热水缩尾法和醋酸扭体法观察镇痛作用;采用二甲
苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导大鼠足肿胀的试验模型观察抗炎作用;并测定角叉菜胶诱导大鼠足肿胀炎性渗出液中前列腺
素 E2(PGE2)的含量。结果:三叶青藤醇提物能明显提高小鼠的痛阈值，但未能减少小鼠的扭体次数。同时，三叶青藤醇提物
能显著减轻小鼠耳肿胀和大鼠足爪肿胀反应，能明显减少大鼠角叉菜胶性炎症渗出液中 PGE2含量。结论:三叶青藤醇提物没
有明确的镇痛作用，但有显著的抗炎作用，其机制可能与抑制 PGE2的合成有关。
［关键词］ 三叶青藤醇提物;镇痛;抗炎;PGE2
［中图分类号］R96 ［文献标识码］A ［文章编号］1001-5213(2011)10-0821-04
Study on the analgesic and anti-inflammatory effects of the ethanol extracts of Illigera rho-
dantha Hance
LI Jiang，DENG Hang，FU Xiang，HUANG Gui-hong，LUO Yu-lan (Department of Pharmacy，The Affiliated Hospital of Gui-
lin Medical College，Guangxi Guilin 541001，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the analgesic and anti-inflammatory effects of the ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance．
METHODS The analgesic effect of the drug was studied with the tail-immersion test and the writhing test in mice，the anti-inflamma-
tory effect of the drug was studied with the swelling of auricle induced by xylene in mice and the edema of paw induced by carrageenin
in rats，and the amounts of prostaglandin E2(PGE2)in the carrageenin-induced inflammatory diffusate were examined． RESULTS
The ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance． could increase the pain threshold of mice significantly，but could not decrease the
number of writhing induced by acetic acid． And the swelling of auricle induced by xylene in mice，the edema of paw induced by carrag-
eenin in rats could be inhibited significantly by the ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance．，the amounts of PGE2 in the carrag-
eenin induced inflammatory diffusate were reduced significantly． CONCLUSION The ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance．
have no definite analgesic effects，but have significant anti-inflammatory effects which may correlate with its inhibitory effects on biosyn-
thesis of PGE2 ．
KEY WORDS:the ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance;analgesia;anti-inflammation;PGE2
三叶青藤为青藤科植物红花青藤 Illigera rho-
dantha Hance．的干燥地上部分，为壮医常用药材，
在广西有较长的使用历史。三叶青藤性味微甘、辛、
涩、温，功能祛风散淤、消肿止痛，壮族民间用于风湿
性关节炎、跌打肿痛、小儿麻痹后遗症等的治疗。本
实验对其在镇痛抗炎方面的药理作用进行了初步的
研究，以期为进一步筛选其镇痛抗炎作用的活性部
位及活性成分，为三叶青藤的临床开发应用及质量
控制提供科学依据。
1 材料
1． 1 药物 三叶青藤，购自广西玉林市药材市场，
经桂林医学院药学系天然药物化学教研室唐爱莲副
教授鉴定为青藤科植物红花青藤 Illigera rhodantha
Hance．的干燥茎。药材粉碎后过 10 ～ 20 目筛，采
用 10 倍量 95%乙醇加热回流提取，每次1． 5 h，共 3
次，过滤后合并滤液，减压回收乙醇，继续减压浓缩
至稠膏状，在 50 ℃真空干燥，干燥物得率为2． 64%，
临用时用聚山梨酯 80 研磨溶解后再加水稀释成所
需浓度的药液;吲哚美辛肠溶片，广东华南药业集团
有限公司，批号 081108，用 1%羧甲基纤维素钠配成
混悬液;盐酸曲马多缓释片，深圳南方盈倍制药有
限公司，批号 20090701，用 1%羧甲基纤维素钠配
·128·中国医院药学杂志 2011 年第 31 卷第 10 期 Chin Hosp Pharm J，2011 May，Vol 31，No． 10