全 文 : 天然产物研究与开发
NATU RAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT 2003 Vo1.15 No.2
收稿日期:2002-10-16 修回日期:2002-11-29
*云南省科委应用基础研究基金资助项目(No.98C067M);
A basic applied research funded by Technological Commit tee of
Yunnan(No.98C 067M)。
通讯联系人(Corresponding author)
滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾水提取液对
鼠血栓形成及微循环的影响*
何洪静1 李惠兰1 张荣平2 胡建林2
(1.昆明医学院药理教研室;2.昆明医学院药学系 昆明 650031)
摘 要 目的:观察云南产甘西鼠尾属药物滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾的水提取物对鼠血栓形成
及微循环的影响。方法:用电刺激法造成大鼠颈动脉血栓形成 , 观察血流阻塞时间(OT 值);小鼠尾静脉
注射血栓形成诱导剂 ,观察滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对抗肺血栓形成的作用;采用活体微循环观
察方法 ,研究滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对去甲肾上腺素和高分子右旋糖苷所致小鼠 、大鼠肠系膜
微循环障碍的影响。结果:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾 2 、4 g/ kg 时 ,能明显延长闭塞性血栓形成时
间(OT 值)(P<0.01)。 20 、40 g/ kg 时 , 能有效抑制胶原和肾上腺素复合液所致小鼠肺血栓形成(P <
0.01 , P <0.05)。能显著改善微动脉 、微静脉痉挛和血液流态 , 增加毛细血管开放数 ,加快血流速度(P
<0.01 , P <0.05)。结论:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾均能防止血栓形成 、改善微循环障碍。
关键词 滇丹参;甘西鼠尾;褐毛甘西鼠尾;血栓形成;微循环
缺血性心脏病(ischemic heart disease , IHD)主
要是冠心病。它是一种常见病和多发病 。活血化瘀
是中医的重要治则 。丹参(S lavia Miltiorrhiza
B unge , S .Mil .)是常用的活血化瘀药 ,古有“一味
丹参 ,功同四物”之说 ,目前主要用于治疗心脑血管
疾病。实验研究证实丹参增加微循环血流 ,改善微
循 环[ 1~ 2] ;使血液流变性异常得到不同程度的改
善[ 3 ~ 5] ;抑制凝血 ,激活纤维蛋白原溶解系统;抑制
血小板功能 、凝血功能及体外血栓形成[ 6] 。与丹参
同科同属不同种的植物滇丹参(S .Y unnanensis C.
H.Wright , S .Y un.)、甘西鼠尾(S .Przewalskii
maxim , S .Prz .)、褐毛甘西鼠尾(S .Przewalskii
maxim var mandarinorum stib , S .Prz .m .)等在民
间也广泛应用[ 7] 。从滇丹参根中分离到的水溶性
成分有:迷 迭香酸(rosmarinicacid)、紫草酸 B
(Lithospermic acid B)、滇紫草酸(Yunnaneic acid)A-
H(30 ~ 37),以及 rabdosin(38)[ 8~ 9] 。据报道 ,甘西
鼠尾含原儿茶醛(约占 0.065%[ 10])、原儿茶酸(约
占 0.340%[ 10])、丹酚酸 A 、丹酚酸 C 、迷迭香酸 、紫
草酸 、紫草酸 B 、和 przew alskinic A 等水溶性成
分[ 11] 。从褐毛甘西鼠尾中分离纯化得到:紫草酸 、
紫草酸 B 、紫草酸 B 二甲酯 、紫草酸 B单甲酯 、迷迭
香酸 、迷迭香酸甲酯 、丹参素 、原儿茶醛(约占
0.035%[ 11])、原儿茶酸以及咖啡酸等[ 12] 。为了更
好地开发利用云南地方中药资源 ,本实验对云南产
甘西鼠尾属药物滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾水
溶性提取液与丹参注射液进行以下的比较研究:滇
丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大鼠颈动脉血栓形
成的影响;对小鼠肺血栓形成所致呼吸衰竭的影响;
对抗去甲肾上腺素所致小鼠肠系膜微循环障碍;对
抗高分子右旋糖苷所致大鼠肠系膜微循环障碍 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品与试剂
丹参注射液:(生药含量 1.5 g/ml),上海第九制
药厂生产 ,批号:000604;滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘
西鼠尾的水溶性提取液(生药含量2.0 g/ml)。由昆
明医学院药学系植化教研室提供 。
重酒石酸去甲肾上腺素注射液:上海禾丰制药
有限公司生产 , 批号:990701;高分子右旋糖酐
(HMWD)(分子量 50万:上海生物工程有限公司 ,
批号:200021;胶原蛋白:上海生物工程有限公司 ,批
号:200021;盐酸肾上腺素:上海禾丰制药有限公司 ,
批号:990401。
1.1.2 仪器
Elect ronic Stimulator , Tokyo 161 , Japan;Direc-
tion Volume Meter , JAPAN;体现显微镜(带照相设
144
DOI :10.16333/j.1001-6880.2003.02.017
备),国营济南八一光学仪器厂;冷光源 ,上海勤奋仪
器厂;751冷光单孔手术灯 ,上海医疗器械五厂;大
白鼠灌流槽 ,自制:H.H.S21.4电热恒温水浴锅 ,上
海医疗器械三厂 。
1.1.3 实验动物
Sprague-Daw ley(SD)大鼠 ,体重 200 ~ 250 g ,雌
雄各半 ,由昆明医学院天然药物药理重点实验室动
物中心提供 ,合格证:滇动物证 9805。
ICR小鼠 6 ~ 8周龄 ,体重 20 ~ 30 g ,雌雄各半 ,
由昆明医学院天药物药理重点实验室动物中心提
供 ,滇动物证 9806。
1.2 方法
1.2.1 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠对大鼠颈动
脉血栓形成的影响
正常 SD大鼠 130只 ,体重 200 ~ 250 g ,雌雄各
半 ,随机分为 13 组 ,生理盐水组和给药组 ,每组 10
只 ,每种药高 、中 、低剂量分别为 4 g/kg 、2 g/kg 、1
g/kg 。大鼠 iP25%乌拉坦(1 g/kg 体重),麻醉后按
改良 Hladovec法[ 13~ 14]制备脉血小板依赖性血栓形
成模型 。分离右侧颈总动脉 , 测量最大血流量
(FPK ,ml/min)。1.5 mA直流电刺激 420秒 。刺激
完毕 ,用超声探测仪连续测量颈动脉的 FPK 值 ,至
FPK值变为零 ,记录电刺激开始至 FPK 变为零的
时间即为闭塞性血栓形成的时间(occlusive throm-
bus fo rmation time ,OT)。以 OT 的长短作为判断药
物疗效的指标。
1.2.2 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对小鼠肺
血栓形成的影响
正常健康 ICR小鼠 96只 ,雌雄各半 ,体重 20 ~
25 g ,随机为 8 组 ,每组 12只 ,生理盐水组 、丹参注
射液 40 g/kg 组 、滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾
40 g/kg 组和 20 g/kg组 。
小鼠禁食过夜 ,腹腔注射不同剂量的药物或生
理盐水 , 30 min 后尾静脉注入血栓形成诱导剂(胶
原蛋白 240 μg/只 、肾上腺素 8 μg/只),注入 1 ~ 15
min后可见小鼠瘫软或死亡 。观察注入诱导剂后动
物的死亡数 ,药物作用以其降低动物死亡率的百分
率表示。
1.2.3 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对去甲肾
上腺素所致小鼠肠系膜微循环障碍的影响
将210只健康 ICR小鼠 ,体重 25 ~ 30 g ,雌雄
各半 ,随机分成 21组 ,每组 10只 ,生理盐水组和给
药组 。给药组:每种药按比例稀释 ,分成 0.125 mg/
ml 、0.25 mg/ml 、0.5 mg/ml 、1 mg/mln 、2 mg/ml五
个浓度组。将去甲肾上腺素用生理盐水稀释成 50
μg/100 ml。
小鼠 im25%乌拉坦(1 g/kg)麻醉 ,背位固定 ,
右侧腹部剪毛 ,剪开约 1.5 cm 的切口 ,拉出一段肠
袢(回盲部),平铺于灌流槽的圆柱形顶部 ,大头针固
定 ,匀速滴 37℃林格氏液(恒温 37℃, 60 滴/min),
保持肠系膜微循环的生理状态。体视显微镜放大
100倍 ,固定视野 ,观察微血管 ,首先记录生理状态
下微动脉管径(微静脉管长给药前后无变化),然后
滴药物或生理盐水于小鼠肠系膜上 , 5 min 后滴 50
μg/100 ml去甲肾上腺素液 100 μl相同部位 ,观察
并记录 1 、3 、5 、10 、20 min的微动脉管径(用目镜测
微尺法[ 15]测量)。
1.2.4 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对高分子
右旋糖酐所致大鼠肠系膜微循环障碍的影响
正常 SD大鼠 128只 ,体重 200 ~ 250 g ,雌雄各
半 ,随机分为 16 组 ,每组 8只 ,生理盐水组和给药
组 ,每种药高 、中 、低剂量分别为 4 g/kg 、2 g/kg 、1
g/kg 。高分子右旋糖酐(polymer dex tran)用生理盐
水配制成10%溶液。大鼠 im25%乌拉坦(1 g/kg 体
重)麻醉 ,背位固定 ,剪去右腹部的毛 ,作一长约 2
cm 的切口 ,剪开腹膜 ,用尖端套有橡皮管的小镊子
轻轻提出一段小肠 ,肉眼观察肠系膜的血管分布情
况 ,选有细小血管走行 , 脂肪少的部位作为观察区
域 。把小肠轻放于灌流槽观测孔上 ,将肠系膜均匀
铺平(避免重叠和牵拉), 匀速滴林格氏液(恒温
37℃,60滴/min)保持肠系膜微循环的生理状态 ,稳
定 10 min ,观察注射药物和右旋糖酐前肠系膜三级
毛细血管的血流状态(体视镜放大 100倍),微动脉 、
微静脉管径 ,三级毛细血管的血流速度和毛细血管
开放数 。
尾静脉注射药物或生理盐水 , 5 min 后尾静脉
注射 10%分子量 50 万的高分子右旋糖酐液 4 ml/
kg ,观察注射后 1 、5 、10 、20 、30 、60 min的上述各指
标的变化 ,同时摄取相应时间点的图像作资料保存。
微动脉及微静脉管径的测定:采用显微镜目镜
测微尺法 。用标准测微尺校正目镜测微尺后 ,用于
管长测量(目镜测微尺 1格=9.16μm)。
毛细血管开放数测定:用毛细血管网交点计
数[ 15]法 ,计算观察区域内 1 mm2 中毛细血管交点
数目(血管围该面积区域的边界)。
三级毛细血管的血流速度测定:用秒表法[ 16] 。
1452003 Vo1.15 No.2 何洪静等:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾水提取液对鼠血栓形成及微循环的影响*
选一段直血管 ,用秒表记录血流中某个特征性物体
(红细胞 、白细胞或血浆柱)流过该段血管的时间 ,再
求速度(正常流态下无法用秒表法测定流速 ,则将流
速计为 100 μm/ s)。
血流状态的测定:采用血液流态的加权积分
法[ 15] :线流 、线粒流(1 、2 态)0 分;粒线流(3 态)为
0.2分;粒流为(4态)为 0.8分;粒缓流(5态)为 1.6
分;粒摆流(6态)为 4.0分;全停滞为(7态)6.0分。
1.2.5 统计学处理
统计分析采用 SPSS fo r Window s 10.0 统计软
件包进行 。所有数据用 X ±SD 表示 ,组间比较采
用单因素方差分析 ,均数间两两比较 S-N-K 法 ,
ED50采用寇氏法计算 ,死亡百分率的差异性比较用
X2检验 ,以 P <0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大鼠颈动
脉血栓形成的影响
用药组 4 g/kg 、2 g/kg 时血栓形成时间(OT
值)均明显长于生理盐水组(P <0.01),说明滇丹
参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾高 、中剂量能明显抑制
血栓形成 。甘西鼠尾和褐毛甘西鼠尾组呈现一定量
效关系 。三种云南产丹参作用与丹参注射液相似 ,
见表 1。
表1 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大白鼠颈动脉血
栓形成(OT 值)的影响( x±s , n=10)
Table 1 The occlusive thrombus formation time(OT)affected
by the four drugs in rats cervical ar tery( x ±s , n=
10)
组别
Groups
剂量
Dose(g/ kg)
OT 值
OT(min)
N S 等量 15.04±1.48
丹参(S.Mil.) 1 15.49±2.52
2 21.62±2.96**
4 21.75±3.10**
滇丹参(S.Yun.) 1 15.55±1.93
2 19.68±3.29**
4 20.71±3.07**
甘西鼠尾(S.Prz.) 1 15.96±2.55
2 20.34±4.47**
4 24.56±4.66*8
褐毛甘西鼠尾(S.Prz.m.) 1 14.33±1.99
2 20.15±3.14**
4 23.16±4.65**
S.Mil.:injection of Slavia mi ltiorrhiza bunge;S.Prz.m .:aqueous ex-
t ract ions of S.Przewalskii maxim ver mandarinorum St ib S.Yun.:aque-
ous extractions of S.Yunnanensis C .H.Wright;S.prz.:aqueous ext rac-
t ions of S.Przewalskii maxim;
*P<0.05 , **P<0.01 , compared wi th NS group.
2.2 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对胶原蛋白
和肾上腺素复合液所致小鼠肺血栓形成的影响
用药组 40 g/kg 和 20 g/kg 的死亡抑制率与生
理盐水组比较有显著差异性(P <0.01 , P <0.05),
说明滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾和丹参均能有
效抑制胶原和肾上腺素复合液所致小鼠肺血栓形
成 。除甘西鼠尾外 ,其余各药高低剂量间呈现一定
量效关系 ,结果见表 2。
表 2 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对胶原和肾上腺素
复合液所致小鼠肺血栓形成的影响(n=12)
Table 2 The thrombus formation affected by the four drugs
and mix ture of collagen and adrenaline(n=12)
组别
Groups
剂量
Dose(g/ kg)
死亡数/样本总数
Death/ sam ples
抑制率
Rate of
inhibition(%)
N S 等量 12/ 14 -
丹参(S.Mil.) 40 3/ 12 70.8**
滇丹参(S.Yun.) 20 6/ 12 41.7*
40 3/ 12 70.8**
甘西鼠尾(S.Prz.) 20 6/ 12 41.7*
40 6/ 12 41.7*
褐毛甘西鼠尾(S.Prz.m.) 20 6/ 12 41.7*
40 3/ 12 70.8**
S.Mil.:inject ion of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ex-
t ractions of S.Przew alskii maxim ver mandarinorum S tib S.Yun.:aque-
ous ext ractions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.prz.:aqueous ex trac-
tions of S.Przew alskii maxim;
*P <0.05 , **P <0.01 , compared w ith NS group.
2.3 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对小白鼠肠
系膜微动脉管径的影响
小白鼠肠系膜滴去甲肾上腺素 1 min 、3 min 、5
min 、10 min 、20 min ,微动脉管径变化百分率及各种
药物的 ED50值 ,见表 3。以给去甲肾上腺素后 1 min
微动脉管径变化百分率 ,用寇氏法计算各种药物的
ED50值 。从结果看 ,对抗去甲肾上肾素所致的肠系
膜微循环障碍丹参注射液效果最好 ,褐毛甘西鼠尾
稍差。
2.4 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大鼠肠系
膜微静脉 、微动脉管径的影响 ΔX =X - X min
注射高分子右旋糖酐后 5 、10 、20 、30 、60 min ,
滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾 4 g/kg 、2 g/kg 、1
g/kg组微静脉管径缩小值与生理盐水对照组比较
均有显著差异性(P <0.01 , P <0.05);20 、30 、60
min时微动脉管径缩小值与对照组比较均有显著差
异性(P <0.01),说明滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西
鼠尾均能显著改善微血管痉挛状态。丹参注射液效
果优于三种云南产丹参 ,结果见表 4 、5。
146 天然产物研究与开发 2003 Vo1.15 No.2
表 3 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对小白鼠肠系膜微动脉管径的影响(n=10)
Table 3 The diameter of mice s mesentery microartery affected by the four drugs(n=10)
组别
Groups
剂量
Dose
(mg/ml)
微动脉管径变化率 Variat ion of the diameter of microartery(%)
1 min 3 min 5 min 10 min 20 min
ED 50值
ED50(mg/ml)
丹参 0.125 17.38 62.54 64.72 79., 24 97.54 0.465
(S.Mil.) 0.25 26.00 71.86 71.28 77.67 98.95
0.50 56.46 89.04 91.20 95.37 99.46
1.00 69.07 99.83 96.82 96.38 99.50
2.00 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
滇丹参 0.125 0.00 34.03 65.10 67.15 96.16 0.490
(S.Yun.) 0.25 0.00 54.33 80.71 83.54 99.58
0.50 65.03 69.53 89.92 85.08 99.76
1.00 89.37 89., 38 98.65 99.82 99.20
2.00 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
甘西鼠尾 0.125 2.79 51.31 67.68 72.35 87.51 0.572
(S.Prz.) 0.25 13.73 60.90 73.24 77.73 94.01
0.50 36.91 80.00 81.11 82.28 96.03
1.00 78.54 93.30 90.99 90.07 97.71
2.00 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
褐毛甘西鼠尾 0.125 3.19 42.64 58.73 71.54 93.95 0.646
(S.Prz.m.) 0.25 0.00 46.08 70.78 74.73 95.66
0.50 28.89 60.96 76.86 77.92 96.55
1.00 82.36 84.40 88.34 90.47 98.67
2.00 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
S.Mil.:injection of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim var mandarinorum S tib S.Yun.:aqueous ex trac-
t ions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.Prz.:aqueous ext ractions of S.Przew alskii maxim;
表 4 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大白鼠肠系膜微静脉管径的影响(Δ x±s , μm , n=8)
Table 4 The four drugs mitigate the contraction of rats mesentery microvein induced by polymer dextran(Δ x±s , μm , n=8)
组别
Goups
剂量
Dose
(g/ kg)
注射右旋糖酐后微静脉管径的变化
Cont raction of microvein af ter polymer dext ran applied(μm)
1 min 5 min 10 min 20 min 30 min 60 min
NS 0.23±0.65 1.32±0.75 2.29±1.06 3.09±1.16 4.17±1.43 4.69±1.21
丹参 1 0.28±0.54 1.08±0.69 1.31±0.75** 2.12±0.98* 1 , 60±0.92** 2.29±0.69**
(S.Mil.) 2 0.05±0.16 0.34±0.47** 0.80±0.58** 1.31±0.66** 1.43±0.57** 1.37±0.65**
4 0.23±0.42 0.23±0.42** 0.23±0.47** 0.34±0.47** 0.80±0.72** 0.68±0.77**
滇丹参 1 0.46±0.49 1.09±0.59 1.60±0.77* 1.94±0.58** 2.57±1.00** 3.03±1.25**
(S.Yun.) 2 0.23±0.65 0.91±0.69 1.37±0.73** 1.78±0.75** 2.23±0.62** 2.57±0.97**
4 0.11±0.32 0.51±0.57* 1.03±0.47** 1.37±0.81** 1.94±0.59** 2.11±1.22**
甘西鼠尾 1 0.34±0.63 0.80±0.58 1.26±0.72** 1.60±0.65** 1.94±0.87** 2.40±0.94**
(S.Prz.) 2 0.50±0.16 0.34±0.47** 1.37±0.49** 1.89±0.62** 2.12±0.54** 2.40±0.58**
4 0.34±0.47 0.57±0.68* 0.92±0.42** 1.66±0.48** 2.17±0.47** 2.17±0.80**
褐毛甘西鼠尾 1 0.23±0.64 1.08±0.77 1.43±0.67** 1.31±1.02** 2.11±0.94** 2.46±0.91**
(S.Prz.m.) 2 0.11±0.32 0.92±0.69 1.37±0.49** 2.06±0.35** 2.35±0.38** 2.92±1.22**
4 0.68±0.81 0.69±0.65* 1.24±0.75** 1.15±0.69** 1.60±0.91** 1.66±1.09**
S.Mil.:injection of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim ver mandarinorum S tib S.Yun.:aqueous ex trac-
t ions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.prz.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim;
*P<0.05 , **P<0.01 , compared wi th NS group.
2.5 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大鼠肠系
膜微循环血流速度的影响
注射右旋糖酐后 5 、10 、20 、30 、60 min ,滇丹参 、
甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾 4 g/kg 、2 g/kg 、1 g/kg 组
血流速度与对照组比较均有显著差异性(P <0.01 ,
P <0.05),说明滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾
高 、中 、低剂量均能增快血流速度 。丹参注射液效果
优于甘西鼠尾 ,结果见表 6。
2.6 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对肠系膜微
循环毛细血管开放数的影响
注射右旋糖酐后 10 、20 、30 、60滇丹参 、甘西鼠
尾 、褐毛甘西鼠尾和丹参 4 g/kg 、2 g/kg 、1 g/kg 组
1472003 Vo1.15 No.2 何洪静等:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾水提取液对鼠血栓形成及微循环的影响*
毛细血管开放数与对照组比较有显著差异性(P <
0.01 ,P <0.05),说明滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西
鼠尾和丹参高 、中 、低剂量能显著增加毛细血管开放
数 ,褐毛甘西鼠尾疗效优于丹参注射液 ,结果见表
7。
表 5 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大白鼠肠系膜微动脉管径的影响(Δ x±s , μm , n=8)
Table 5 The four drugs mitigate the contraction of of rats mesentery microartery induced by polymer dextran(Δ x±s ,μm , n=8)
组别
Goups
剂量
Dose
(g/ kg)
注射右旋糖酐后微动脉管径的变化
Cont ract ion of microartery af ter polymer dext ran applied(μm)
1 min 5 min 10 min 20 min 30 min 60 min
NS 0.91±1.67 1.94±1.31 2.75±1.17 3.61±1.10 5.09±1.63 5.09±1.74
丹参 1 1.26±0.72 2.06±1.44 2.23±1.74 2.86±2.21 2.57±2.00** 2.86±2.14**
(S.Mil.) 2 0.34±0.47 0.74±0.69* 1.77±1.30 2.40±1.31* 2.52±1.17*8 2.46±1.56*8
4 0.86±0.76 0.97±1.10* 0.69±0.81** 1.03±0.91** 1.43±1.02** 1.55±1.22**
滇丹参 1 1.20±0.73 1.32±0.86 1.66±1.09* 2.17±0.94* 2.80±0.99** 3.32±1.29*
(S.Yun.) 2 0.23±0.65 1.03±0.53 1.83±0.88 2.12±0.91* 2.17±0.47** 2.52±0.81**
4 0.34±0.97 0.69±0.95*8 1.32±1.08** 1.66±1.24** 2.12±1.52** 2.29±1.75**
甘西鼠尾 1 0.90±0.74 1.77±0.75 2.52±0.69 2.80±1.05 2.86±1.12** 3.09±1.22**
(S.Prz.) 2 0.19±0.36 0.69±0.55** 1.44±0.53* 2.30±0.86* 2.59±1.08** 2.42±1.24**
4 0.17±0.48 0.74±0.73* 1.32±0.51** 1.77±0.71** 2.35±0.75** 2.06±0.93**
褐毛甘西鼠尾 1 1.26±1.22 1.55±1.17 2.17±0.97 1.83±1.01** 2.57±1.09** 3.23±0.96**
(S.Prz.m.) 2 0.11±0.32* 0.74±0.69* 1.60±0.65* 2.40±0.87* 2.40±0.94** 2.46±1.73**
4 0.97±1.10 1.08±0.77 1.26±0.72** 1.37±0.64** 1.83±1.06** 2.11±0.88**
S.Mil.:injection of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim ver mandarinorum S tib S.Yun.:aqueous ex trac-
t ions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.prz.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim;
*P<0.05 , **P<0.01 , compared wi th NS group.
表 6 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大白鼠肠系膜微循环血流速度的影响(Δ x±s , μm , n=8)
Table 6 The four drugs improve the blood flow volevity of mesentery microcirculation after polymer dextran applied
(Δ x ±s , μm , n=8)
组别
Goups
剂量
Dose
(g/ kg)
注射右旋糖酐后微循环流速的变化
Volecity of microcirculat ion af ter polymer dext ran applied(μm/ s)
1 min 5 min 10 min 20 min 30 min 60 min
NS 88.78±17.72 54.62±7.11 39.50±8.22 32.02±7.57 13.67±10.32 20.67±22.54
丹参 1 73.95±16.31 65.97±12.77 68.08±16.05** 61.56±8.95** 65.38±13.25** 64.05±18.46**
(S.Mil.) 2 100.16±2.82 85.24±15.24** 77.11±20.40** 69.17±21.52** 66.14±26.02** 49.21±23.77**
4 92.78±12.17 90.67±11.63** 97.76±5.95** 89.97±14.36** 83.45±19.50** 80.89±22.79**
滇丹参 1 87.14±16.58 80.31±18.08** 7.667±14.16** 56.38±14.53** 49.29±11.67*8 58.86±20.99**
(S.Yun.) 2 100.86±2.43 89.56±17.06** 80.84±15.57** 67.08±18.53** 49.96±21.31** 43.09±21.51*
4 99.28±2.02 100.47±1.19** 93.20±7.92** 88.92±7.02** 75.92±15.37** 60.10±20.67**
甘西鼠尾 1 81.43±24.56 83., 06±17.16** 76.56±13.96** 72.97±20.60** 64.43±19.88** 55.15±15.20**
(S.Prz.) 2 100.00±0.00 96.72±6.30** 84.24±11.15** 63.87±14.27** 56.61±20.98** 46.53±17.61*
4 99.49±4.85 91.70±11.87** 78.06±18.93** 68.96±14.24** 59.95±15.24** 67.07±19.51**
褐毛甘西鼠尾 1 86.92±28.13 77.77±12.61** 76.53±10.07** 74.76±17.15** 58.95±15.40** 47.95±12.94**
(S.Prz.m.) 2 100.02±0.06 93.91±10.21** 72.78±15.99** 50.38±6.72* 41.49±7.49** 36.29±16.68
4 95.82±7.38 93.77±14.48** 85.58±8.20** 85.69±15.39** 73.41±11.25** 74.84±19.90**
S.Mil.:injection of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim ver mandarinorum S tib S.Yun.:aqueous ex trac-
t ions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.prz.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim;
*P<0.05 , **P<0.01 , compared wi th NS group.
2.7 滇丹参 、甘西鼠尾 、尾 甘西鼠尾对大鼠肠系膜
毛细血管内血液流态的影响
注射右旋糖酐后 5 、10 、20 、30 、60 min ,滇丹参 、
甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾和丹参 4 g/kg 、2 g/kg 、1
g/kg 组流态积分值与对照组比较 ,均有显著差异性
(P<0.01)。说明滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠和
丹参均能明显改善血液流态。5 min时滇丹参 、甘
西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾 1 g/kg 组效果优于丹参注射
液组(P<0.01 , P <0.05)。褐毛甘西鼠尾 ,丹参注
射液组有一定量效关系 ,见表 8。
148 天然产物研究与开发 2003 Vo1.15 No.2
表 7 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大白鼠肠系膜微循环毛细血管开放数的影响(Δ x±s , number/ mm2 , n=8)
Table 7 The four drugs increase the open capillary number of rats mesentery microvein after polymer dextran applied(Δ x±s ,
nuber/ mm2 , n=8)
组别
Goups
剂量
Dose
(g/ kg)
注射右旋糖酐后毛细血管开放数
The open capillary number af ter polymer dext ran applied(number/mm2)
1 min 5 min 10 min 20 min 30 min 60 min
NS 8.00±1.60 7.37±1.06 6.50±0.92 5.87±0.99 3.87±2.53 3.87±2.10
丹参 1 6.12±1.64 5.37±1.06** 5.62±0.74 5.12±0.99 5.87±0.64** 5.87±0.64*
(S.Mil.) 2 7.62±1.06 7.12±1.35 6.75±1.28 6.25±1.58 6.12±1.45** 6.12±1.88*
4 7.50±2.14 7.50±1.77 8.00±1.85** 7.62±1.84* 7.62±1.76** 7.62±1.84**
滇丹参 1 7.00±1.07 6.50±1.19 6.37±1.18 5.50±1.07 5.25±1.28 5.12±0.83
(S.Yun.) 2 8.62±0.91 8.12±1.12 7.62±1.06 7.25±0.88* 6.75±0.70** 5.62±2.44
4 8.47±1.06 8.37±1.06 8.00±1.07** 7.50±0.92* 6.62±1.40** 5.87±2.10
甘西鼠尾 1 7.50±1.92 7.75±1.67 7.25±1.58o 6.62±1.50o 7.00±1.60** 6.62±1.60**
(S.Prz.) 2 7.87±1.64 7.50±1.51 6.75±1.03 6.25±1.16 6.62±1.60** 6.50±2.14**
4 7.87±1.80 7.75±1.58 7.25±1.75 6.87±1.80 6.37±1.30** 6.50±1.60**
褐毛甘西鼠尾 1 6.87±2.16 7.25±1.75 6.87±1.55 7.37±1.30* 6.62±1.60** 6.12±2.10*
(S.Prz.m.) 2 8.00±1.07 7.62±1.30 7.25±1.16 6.62±1.40 6.37±1.06** 5.37±2.38
4 7.12±1.64 7.50±1.41 7.50±1.14 7.00±1.60 6.62±1.68** 6.25±1.75*
S.Mil.:injection of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim ver mandarinorum S tib S.Yun.:aqueous ex trac-
t ions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.prz.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim;
*P<0.05 , **P<0.01 , compared wi th NS group.
表 8 滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对大白鼠肠系膜毛细血管内血液流态的影响(Δ x±s , n=8)
Table 8 The state of blood flow of mesentery capillary affected by the four drug s in rats(Δ x±s , n=8)
组别
Goups
剂量
Dose
(g/ kg)
注射右旋糖酐后流态的加权积分值
T he w eighted score of state of blood flow af ter polymer dextran applied
1 min 5 min 10 min 20 min 30 min 60 min
NS 0.05±0.09 0.20±0.00 0.57±0.31 0.90±0.28 3.10±2.19 2.85±1.95
丹参 1 0.12±0.10 0.17±0.07 0.17±0.07** 0.20±0.00** 0.20±0.00** 0.30±0.32**
(S.Mil.) 2 0.00±0.00 0.02±0.07** 0.10±0.28** 0.25±0.55** 0.10±0.10** 0.20±0.26**
4 0.00±0.00 0.00±0.00** 0.00±0.00** 0.02±0.07** 0.05±0.09** 0.05±0.09**
滇丹参 1 0.50±0.09 0.05±0.09** 0.10±0.10** 0.17±0.07** 0.42±0.31** 0.37±0.36**
(S.Yun.) 2 0.00±0.00 0.02±0.07** 0.02±0.07** 0.15±0.27** 0.42±0.53** 1.05±2.02**
4 0.00±0.00 0.00±0.00** 0.00±0.00** 0.00±0.00** 0.02±0.07** 0.22±0.25**
甘西鼠尾 1 0.07±0.10 0.05±0.09** 0.05±0.09** 0.12±0.10** 0.17±0.07** 0.32±0.30**
(S.Prz.) 2 0.00±0.00 0.00±0.00** 0.00±0.00** 0.12±0.10** 0.30±0.32** 0.57±0.52**
4 0.00±0.00 0.00±0.00** 0.05±0.09** 0.15±0.27** 0.22±0.25** 0.17±0.27**
褐毛甘西鼠尾 1 0.22±0.56* 0.10±0.10** 0.05±0.09** 0.07±0.10** 0.17±0.07** 0.37±0.49**
(S.Prz.m.) 2 0.00±0.00 0.00±0.00** 0.05±0.09** 0.17±0.07** 0.42±0.30** 0.22±1.95**
4 0.00±0.00 0.02±0.07** 0.00±0.00** 0.02±0.07** 0.07±0.10** 0.15±0.27**
S.Mil.:injection of S lavia milt iorrhiza bunge;S.Prz.m.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim ver mandarinorum S tib S.Yun.:aqueous ex trac-
t ions of S.Yunnanensis C.H.Wright;S.prz.:aqueous ext ract ions of S.Przew alskii maxim;
*P<0.05 , **P<0.01 , compared wi th NS group.
3 讨论
正常情况下 ,血小板具有粘附 、聚集 、分泌(释
放)反应和凝聚等功能。而完整的血管内皮具有抗
血栓形成的特性 ,既充当血小板和内皮下结构之间
的机械屏障 ,又能合成 PGI2 ,抑制血小板聚集 ,故血
小板不会在微血管壁上发生粘附(adhesion)和聚集
(agg regation)。病理情况下 , 微血管内皮细胞(en-
dothelial ,EC)被损伤 ,血小板容易在损伤局部发生
粘聚 。血小板的粘附反应是血栓形成的始动环节。
内皮细胞损伤在血栓形成中则起着重要作用。另
外 ,在病理情况下 ,血液中可能出现诱聚剂 ,促使血
小板聚集 。本实验研究结果证明:滇丹参 、甘西鼠
尾 、褐毛甘西鼠尾 , 能延长闭塞性血栓形成时间
(OT),能有效抑制胶原蛋白和肾上腺素组成的血栓
诱导剂所致呼吸衰竭死亡率 。滇丹参 、甘西鼠尾 、褐
1492003 Vo1.15 No.2 何洪静等:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾水提取液对鼠血栓形成及微循环的影响*
毛甘西鼠尾抗血栓形成作用与丹参相似 ,甘西鼠尾
和褐毛甘西鼠尾呈一定量效关系。文献报道 ,丹参
素可能通过抑制血栓素 A2(TXA2)合成酶 ,发挥抑
制血小板聚集的作用[ 17] ;总丹酚酸(Total salvianoil-
ic acid ,SA)具有升高缺血后的 PG I2/TXA2 比值 ,抑
制栓子形成[ 13]的作用;乙酰丹酚酸(acetylsalvianolic
acid A ,ASAA)对血栓素合成酶的抑制作用是其抗
血小板功能的重要机理之一[ 18] ;丹参素抑制细胞因
子活化内皮细胞 ,从而减少白细胞的粘附 ,发挥抗血
栓形成作用[ 19] 。综合血栓形成机制及文献研究报
道 ,我们可以推测滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾
抗血栓形成可能是通过①抑制血栓素 A2(TXA2)合
成酶;②抑制细胞因子活化内皮细胞 ,保护血管内
皮;③引起血小板内 cAMP 升高或磷酸肌醇降低 ,
抑制 Ca2+浓度增加 ,从而抑制血小板释放 ADP;④
抑制血液中诱聚剂的产生等环节发挥作用的 。微循
环障碍的研究主要集中在微循环灌流障碍上 。血液
流变性异常 ,如血液粘度 、血浆粘度 、红细胞聚集性 、
变形性和临界毛细血管半径 、血小板聚集状态 、白细
胞数及其功能状态异常皆可妨碍微循环灌注 。而血
栓形成则可直接影响微循环的灌注流量 。
另外的实验研究证明 ,滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛
甘西鼠尾均能显著降低高 、中 、低切变率下全血粘
度;能有效抑制纤维蛋白原形成 ,降低血浆粘度;能
减少红细胞数从而抑制红细胞聚集。研究已证明 ,
滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾和丹参体内 、体外
均能显著抑制 ADP 、PAF(血小板激活因子)、AA 诱
导的兔血小板聚集。王玲等[ 20]发现 ,丹参可同时作
用于红细胞与内皮细胞 ,从而使红细胞与内皮细胞
粘附的数目减少 ,强度减弱 ,这可能是丹参改善微循
环的又一重要机制。
从上述结果和文献报道 ,我们可以推测 ,滇丹
参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾是通过以上机制发挥改
善微循环的作用的。我们的实验表明 ,滇丹参 、甘西
鼠尾 、褐毛甘西鼠尾 、丹参均能显著改善微血管痉挛
状态 ,加快血流速度 ,增加毛细血管开放数 ,改善毛
细血管内血液流态 ,从而对抗去甲肾上腺素及高分
子右旋糖酐所致鼠肠系膜微循环障碍。
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150 天然产物研究与开发 2003 Vo1.15 No.2
RESEARCHOF S.YUNNANENSIS C.H.WRIGHT ,
S.PRZEWALSKII MAXIM , S .PRZEWALSKII MAXIM
VAR MANDARINORUM STIB IN THE EFFECTSOF
THROMBOSIS AND MICROCIRCULATION
HE Hong-jing1 ,LI Hui-lan1 ,ZHANG Rong-ping2 ,HU Jian-lin2
(1.Department of pharmacology of Kunming Medical College;
2.Faculty of pharmacy of Kunming Medical College , Kunming 650031 , China)
Abstract Objective:To have a contrast study on the ef fects of thrombosis and microcirculation between the four
drugs(aqueous ex tractions of S .Y unnanensis C.H .Wright , S .Przewalski i maxim , and S .Przewalsk ii max-
im var mandarinorum S tib and injection of Slav ia m il tiorrhiza bunge).Methods:Employed w ith elect rostimu-
lation , the occlusive thrombus formation time w as observed.The preventive ef fects of the four drugs against
plumo thrombosis induced by vein-injecting collagen and epinephrine w ere studied.The effects of four drug s on
disturbance of microcirculation induced by noradrenaline (NA)and polymer dex tran were studied w ith the
method of observing microcirculution in living rats and mice.Results:With 4 , 2 g/kg dose , the four drugs can
prominently elongate the occlusive thrombus formation time(OT)(P <0.01).While with 20 ,40 g/kg dose , they
can ef fectively inhibit the pulmo thrombosis caused by the mixture of collagen and epinephrine(P <0.01 , P <
0.05)in mice.They can evidently improve the state of microarteries and microveins and change the blood f low
regime , increase the open capillary nuber , and quicken the veloci ty of blood f low(P <0.01 , P <0.05).Conclu-
sion:The four drugs can significant ly prevent thrombosis and disturbance of microcirculation.
Key words S .Y unnanensis C.H .Wright ;S .Przewalski i maxim ;S .Przewalskii maxim var mandarino-
rum st ib;thrombosis;microcirculation
《药用薯蓣栽培》征订启事
《药用薯蓣栽培》是中国科学院成都生物研究所周瑾高级实验师和李伯刚研究员编著 ,四川科
学技术出版社 2003年元月出版。
为适应我国甾体激素药业的发展 、农业产业结构的调整和退耕还林 ,促进农村经济发展和农民
增收的需要 ,作者根据 20多年从事药用薯蓣植物的引种栽培研究成果和经验 ,经系统概括和总结
编撰而成 ,该书共七章。重点介绍了甾体激素药源薯蓣植物引种栽培中的有性繁殖 、无性栽培管
理 、采挖 、加工 、储运等系列技术以及生物学特性 、经济性状 ,并结合国内外有关薯蓣的用途 、资源和
栽培研究概况 、市场信息 ,分析和展望了栽培薯蓣的前景 ,并附彩色图片 37幅 ,对促进我国药用薯
蓣的规模化和规范化栽培有所帮助 。
本书具有较强的科学性和可操作性 ,既然适宜于从事药用植物栽培的农 、林科技人员和有关农
林院校师生参考 ,又适宜于从事药用植物栽培的农户和经营者阅读。
本书售价 30.00元/本 ,邮费 3.00元 ,合计 33.00元。欲购者请来电 、来函联系 。汇款请汇寄:
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1512003 Vo1.15 No.2 何洪静等:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾水提取液对鼠血栓形成及微循环的影响*