全 文 ：胶束电动毛细管电泳色谱法测定苏合香和
枫香脂中总桂皮酸的含量
李 　蓓 　车镇涛■ 　郭济贤
(上海医科大学药学院生药学教研室　上海　200032;■香港科技大学化学系)
　　苏合香(Sty rax)为金缕梅科枫香树属植物苏合香
树(Liquidambar orientalis M ill.)树干渗出的香树
脂 ,经加工精制而成 。枫香脂(Resina Liquidambaris)
为同属植物枫香树(L .formosana Hance)的干燥树
脂。《中华人民共和国药典》(1995版)一部对此二种
生药均有收载[ 1] 。《中国药典》规定了苏合香中总香
脂酸含量以桂皮酸计不得少于 28.5%,而对枫香脂
的质量标准尚未作规定。枫香脂中也含有桂皮
酸[ 2] ,我们认为 ,可参考苏合香的有关规定 ,将桂皮
酸的含量作为枫香脂质量评价的指标之一。
《中国药典》(1995版)一部中规定的苏合香中桂
皮酸的含量测定采用酸碱滴定法 ,该法较繁琐 ,且专
属性不高。此外 ,尚有电位滴定法 、紫外分光光度
法 、气相色谱法 、裂解色谱法及高效液相色谱法[ 2] 。
我们利用毛细管电泳色谱法(capillary electropho re-
sis ,CE)测定了苏合香和枫香脂中总桂皮酸的含量。
材料和方法
仪器与药品 　Beckman P/ACE system5500 毛
细管电泳仪;Beckman P/ACE Diode Array Detector;
System Gold数据处理软件系统;无涂层熔融石英毛
细管 ,75 μm(ID)×57 cm ,有效长度为柱长减去 7.6
cm 。
对照品桂皮酸(Aldrich Chemical Company , Inc.
99+%),用 0.1 mol/L mol/ L NaOH 配成 0.5 mg/
ml。内标物水杨酸(AR ,Fisher Science)用 0.1 mol/
L NaOH 配成 0.5 mg/ml。SDS(Bio-Rad Laborato-
ries)用去离子水(Milli-Q)配成 0.2 mol/ L 溶液备
用。硼酸钠及磷酸二氢钠用去离子水配成 0.1 mol/
L 溶液备用 。
生药样品:苏合香(英国进口 ,购自上海市药材
公司);枫香脂(分别购自上海市医药公司 、成都市同
仁堂及福建省武平县外经委)。
色谱分离条件 　缓冲溶液为 20 mmol/L
Na2B4O7-4mmol/L NaH2PO4 -60mmol/L SDS ,用
6 mol/ L NaOH调节 pH 值至 11.2。进样方式:重力
进样 。进样时间:2 s。运行电压:20 kV ,正极到负
极。分离时间:22 min。温度:21 ℃。检测波长:210
nm 。
每次使用毛细管前 ,依次用去离子水 、0.5 mol/
L NaOH 溶液 ,去离子水各冲洗 3 min。每次进样前
用缓冲溶液冲洗 3 min。每测定两次样品更换一次
缓冲溶液 ,并依次用去离子水 、0.5 mol/L NaOH 溶
液 ,去离子水各冲洗 2 min。每天使用完毕先用去离
子水和 0.5 mol/L NaOH 溶液各冲洗 3 min ,再用去
离子水和空气各冲洗 1 min 。缓冲溶液和所有冲洗
用溶液均先用 0.45μm 滤膜过滤后使用。
样品制备　精密称取生药粉末(40 目)0.1 g ,加
0.5 mol/L 醇制 KOH 溶液 5 ml ,电热套加热回流 1
h ,减压浓缩回收乙醇至干。分次加入热水共 8 ml ,
转移至离心管中 ,超声处理 20 min。加入 MgSO4
(1.5 ※50)4 ml ,静置 10 min ,离心 20 min(3 000
r/min),倾出上清液 。残渣加水 5 ml ,超声波处理 15
min ,离心 15 min(3 000 r/min),倾出上清液 。残渣
再同法处理一次 。合并上清液 ,加入 1 mol/L HCl 2
ml。用乙醚萃取 ,每次 20 ml ,共 3 次 ,合并醚液 ,减
压浓缩至干。残渣加入 0.1 mol/L NaOH 溶解至 10
ml。取此液 2.5 ml(苏合香取 0.5 ml),加入内标溶
液0.5 m l ,用 0.1 mol/L NaOH 溶液定容至 5 ml。
用 0.45 μm 滤膜过滤后使用 。
标准曲线　精密量取桂皮酸溶液(0.5 mg/ml ,
0.1 mol/L NaOH)0.2 、0.4 、0.6 、0.8 、1.0 ml ,置5 ml
容量瓶中 ,分别加入 0.5 ml内标溶液(水杨酸 0.5
mg/ml ,0.1 mol/ L NaOH)用 0.1 mol/L NaOH 溶液
定容(n=3)。测得峰面积值 ,由对照品与内标面积
比值(Y),对照品浓度(X mg/ml)计算线性方程及
相关系数 。结果如下:
Y =7.356 1X +4.2 ×10-3 , r =0.999 9
　　对照品桂皮酸及内标物水杨酸的平均出峰时间
分别为 13.70和 19.73 min , RSD分别为 1.773%和
2.715%(图 1 a)。
380 　上海医科大学学报J Shanghai Med Univ 1999 Sep., 26(5)
桂皮酸和水杨酸天间及天内测定的 RSD<3%
(n=3)。
样品分析　上述条件用于分离苏合香及 4种不
同产地的枫香脂样品 ,得到较好的结果(图 1 b 、c)。
图 1　对照品和内标物(a)、苏合香(b)和枫香脂(福建甲)(c)
的毛细管电泳色谱
Fig 1　CE chromatogram of chemical reference substance and internal
standard(a), Styrax(b), Resina Liquidambaris(Fujian A)(c)
用上法测定上述样品中的总桂皮酸的含量 ,平
行 3份 ,3次测得面积与内标面积比的平均值代入线
性方程 ,计算样品中的桂皮酸浓度 ,再推算出原生药
中总桂皮酸的百分含量(表 1)。
表 1　苏合香和枫香脂生药中总桂皮酸的含量
Tab 1　Content of total cinnamic acids in Styrax and
Resina Liquidambaris
Drug S ource
Content of total
cinnamic acids(%)
RSD
(%)
Styrax Shanghai 8.485 6 0.634 2
Resina Liquidambaris Shanghai 1.528 3 0.750 6
Resina Liquidambaris Chengdu 0.824 2 2.452 1
Resina Liquidambaris Fujian(A) 1.442 8 0.588 4
Resina Liquidambaris Fujian(B) 0.726 8 1.990 5
　　回收实验　精密量取桂酸苄酯乙醇液(0.8 mg/
ml)0.8 m l及桂皮酸乙醇液(0.5 mg/ml)0.8 ml ,加
入精密称定的四川产枫香脂 0.1 g 中 ,同样品制备操
作(n =3),测定桂皮酸含量 ,计算回收率(表 2)。
表 2　总桂皮酸的回收率测定
Tab 2　Recovery of total cinnamic acids
Sample
Amount in
sample(mg)
Amount added
(mg)
Total amount
determined(mg)
Amount
found(mg)
Recovery
(%)
1 0.824 2 0.809 9 1.632 9 0.808 7 99.85
2 0.824 2 0.809 9 1.634 3 0.810 1 100.0　
3 0.824 2 0.809 9 1.627 4 0.803 2 99.17
Average 99.68
RSD(%) 　0.45
　　结果与讨论
实验结果表明 ,枫香脂与苏合香的总桂皮酸含
量相差很大。枫香脂中的总桂皮酸含量较低 ,这可
能是因为苏合香精制过 ,而枫香脂未精制过。4种枫
香脂样品之间的总桂皮酸含量差别也较大 ,其中上
海的样品中总桂皮酸含量最高 , 依次为福建样品
(甲),四川样品及福建样品(乙)。这一顺序与 4种
样品的肉眼观察的纯度顺序基本一致 ,这一现象说
明以总桂皮酸含量作为枫香脂质量评价的指标可能
是合理的 。
我们使用的胶束电动毛细管电泳色谱 ,是一种
胶束增溶和电动迁移的新型液体色谱。在缓冲液中
加入表面活性剂 ,如 SDS ,当表面活性剂浓度超过临
界胶束浓度时 ,便形成荷电胶束。离子化胶束在电
场作用下泳动 ,溶质在胶束和水相间分配。因为不
同溶质在两相间的分配系数不同 ,溶液的电渗流和
胶束的电泳速度差异使它们得到分离。这一方法已
成功地应用于多种植物成分的分析[ 3] 。
在寻找适宜分离条件的过程中发现 ,毛细管的
内径对分离效果影响很大 ,起初使用内径 50 μm 的
毛细管 ,发现桂皮酸旁边有两个峰 ,不能完全达到基
线分离 ,且峰较宽。后换用内径 75 μm 的毛细管 ,各
峰完全达到基线分离且峰宽减小 。我们还观察了
pH值 ,缓冲液浓度及 SDS 浓度对分离效果的影响 ,
结果显示 pH 值对分离效果影响最大 ,增加 pH 值 ,
可明显提高分离效果 ,但延长出峰时间并增加峰宽。
增加缓冲液浓度或 SDS 浓度 ,也可在一定程度上提
高分离效率 ,但明显延长出峰时间及增加峰宽。另
外 ,制备样品所用溶剂对分析也有很大影响 ,若用甲
醇溶解样品 ,分离效果和重现性均很差 ,换用 0.1
mol/L NaOH 后 ,得到明显改善。
我们借 CE测定苏合香与枫香脂中桂皮酸的含
量取得成功 ,系用该法对香树脂类生药进行含量测
定的首次报道。本法可供《中国药典》在制订这两种
生药质量评价标准时参考 。
关键词　苏合香;　枫香脂;　毛细管电泳色谱法
中国图书资料分类法分类号　R989.4
参　考　文　献
1　中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典 1995
年版一部.广州:广东科技出版社 , 1995 ,140:173
2　李蓓 ,郭济贤.枫香树属二种香树脂类生药—苏合香与枫香脂的
研究概况.天然产物研究与开发 , 1995 , 7(3):53
3　魏伟 ,王义明 ,罗国安.中药成分的高效毛细管电泳分析.药学学
报 , 1997 , 32(6):476
(1998-10-05收稿)(张世功 编辑)
381　李　蓓 ,等.胶束电动毛细管电泳色谱法测定苏合香和枫香脂中总桂皮酸的含量