全 文 ：蝶 兰 的 快 速 繁 殖
福 建省 农业朴学院 花卉 室 傅莲芳
摘 要
为建立蝶兰组织培养无性繁殖系 , 取花梗节作外植体 , 在加有 昌毫克 / 升 B A 、 。 . 5毫克 / 升
N A A 和 0 . 5毫克 / 升 2 , 4 一 D的 1 / 2浓度M s 培养基上 , 附加。 . 1毫克 / 升叶酸 、 。 . 1 毫 克 / 升 核 黄
素 、 。 . 1毫克 / 升生物素 ( H ) , 诱导出苗 。 幼苗在加有 2 毫克 / 升 P A 、 。 . 25 毫克 / 升N A A 和 。 . 1
毫克 / 升 2 , 4 一 D 的 12/ 浓度M S培养基上 培养产生原球茎 , 经过继代培养原球茎快速增殖并长戍植
株 。原球茎起源于皮层内部 。试验结果表明 ,一个花梗节培养 1 年 ,可获得 5 0 个以上的原球茎和苗 。
蝶兰属 p h a l a e n o p s 宜s是气生兰类 , 多产
于热带亚洲 , 约 4 0种 。 蝶兰 ( 外 a e n op s i :
。 p . p h a la ) 花丽叶大 , 一枝花序可有150 朵
花 , 每花直径约6 . 7厘米 , 花期多集中在 2一
5 月间 t ’ 1 , 为全世界爱兰家或室内盆 栽 观
赏植物者所喜爱 , 尤以 日 、 香港 、 西德 、 荷
兰等国家与地区对花茎 ( 作切花用 ) 的需求
量大 , 每株价值 1 0 元 t “ ; , 试管商品苗在国
际市场上每株约值 1美元 。
用花梗节作外植体进行蝶兰灼试管无性
繁殖 , 在我国尚未见到报导 。 仅 台湾省进行
了一定的研究 [ “ ; , 但在大量繁殖 , 进 行 商
品化生产方面尚未实现 。 我们用花梗节作材
料 , 研究其在离体条件下快速繁殖的方法 ,
以便能够提供大量商品苗 , 增加经济效益 。
` 材料与方法
_
’ 职P h al a m a bl ils 具有花芽的花梗节 ( 长
于行距 , 以保持咖啡园通风透光状况良好 ;
实 .行宽行密植 , 留有适 当的操作空间 , 以便
于田间施肥 、 喷药 、 病虫害防治和采果等项
作业 。 -
总之 , 小扭种咖啡无荫蔽密植栽培 , 必
须根据它的绝理月件琴求与有关制约因子合
理控制其种植密摩袄以 r充分发挥其 丰 产 潜
力 , 使之立于不败之地二
2 。一 40 厘米 ) , 从顶端切下长 15 厘 米 的 切
段 。 将切下的花梗节放在 95 % 的酒精中浸泡
几秒钟 , 随后用 0 . 1%升汞溶液加数滴 吐 温
8 0 ( T w e e n s o ) 浸泡 1 0分钟 , 用无菌水漂洗
3 次 , 所有操作均在超净工作台上进行 。 将
经灭菌的花梗切成长 l 厘米的带有 节 的 切
断 。
选用 l / 2浓度大量元 素 M u r a s h i g e [ ` ,
和 S k o o g ( 1 9 6 2 ) 基本培养基 , 附加 0 . 3%的
活性炭 、 核黄素 、 叶酸 、 生物素和 不 同 浓
度 、 不 同配比 的 B A 、 N A A 、 2 , 4 一 D , 配 制
成各种诱导和增殖培养基 工” 1 。
试验结果
一 、 诱导出苗
花梗节 ( 外植体 ) 在加有不同浓度的生
长素和细胞分裂素的培养基上 , 表现出不同
的分化率 ( 表 1 ) 。
参考文献
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表 1 花便节在不同培养基上诱导出苗 产生的原球茎数和苗数 ( 表 2 ) 。
外植体 出苗外总数 植体数
表 2 在不同培养基上每个幼苗所增殖
的原球茎数和幼苗数
卫 A Z毫克 /升 十 N A A 0 . 5毫克 /升
,
2
,
4
一
D o
.
5毫克 /升
B A Z毫克 /升 + N A A o . 5毫克 /升
丑A Z毫克 /升 + 2 , 4一 D o . 5毫克 /升
N A A 0
.
5毫克 /升 , 2 , 4 一 D O 。 5毫克 /升
K T S毫克 /升 + N A A 0 . 5毫克 /升
十
2
,
4
一
D o
.
5毫克 /升
培 养 基
1 5
1 5
一个月后增殖的原述里 )王旦崖兰一~一原球茎数 { 苗 数
B A Z
+
N A A O
。
2 5
+
2
,
4
一
D 0
.
1
B A Z
+
N A A O
。
5
+
2
,
4
一
D O
。
1
B A Z
+
N A A O
。
5
+
2
,
4
一
D O
。
5
B A Z
+
N A A O
。
5
+
2
,
4
一
D l
表内培养基均为 1 / ZM S 培养基 。 在以下各表中
“ 毫克 / 升 ” 及此说明省略 。
试验发现 , 以花梗节为外植体 , 在附加
配比适 当的 B A 、 N A A和 2 , 4一 D 的浓度 减 半
的M s培养基上 , 诱 导出苗的效果最好 。 去
掉适量的 2 , 4 一 D 或 N A A的成分 , 出 苗 率 明
显降低 。 在去掉 B A 或改用 K T成分的培 养基
上 , 诱 导效果也不佳 。
二 、 增殖试验
将带有幼苗的外植体 , 分别转移至加有
不同细胞分裂素和不同生长素的浓度减半的
M S培养基上增殖 , 1月后统计每个幼 苗 上
根据表 2 , 在 B A 、 N A A浓度和配 比一
定的情况下 , 2 , 4 一 D的 `浓度以 。 . 1毫克 /升 为
宜 , 在一个月内能分别以 l , 2 和 l , 3 的
速度进行增殖 , 且增殖的幼苗形态正常 , 而
2 , 4
一
D的浓度大于 0 . 5毫克 / 升时 , 分 化 效
果不佳 。
增殖的原球茎和苗通过继代培养 , 能在
增殖的同时长成植株 , 故在一个试管里同时
有新增殖的原球茎和逐渐成长的苗 , 也有生
长完整的植株 。 不同龄的外植体在相同培养
基的作用下反应不同 , 同一外植体在不同的
培养基作用下反应也不同 ( 表 3 ) 。
表 3 不同培养基对同一外植体及相同培养基对不同龄的外植体产生的效应
坛 养 基 }_ 原 球 茎
一分 A +Z N A A O。 2 5 十 2 , 之一 D O . 工’ 分生原球茎
B
AZ
+
N A A o
.
5
+
2
, ` 一
0D
.
1 一原球茎形成小苗
B A Z
、
N A A O
。
5
+
2
,
4
一
D O
.
5 不分生
B A +2 N A A 0
.
5
、
2 月 一 D l . 不分生
高 0 . 5厘米的小苗
分化小苗和幼根
分生原球茎和小苗
不分生 , 苗粗壮
苗梢有生长 , 不分生
高 1厘米的 ,」、苗
出根并形成完整植株
植株生长浓绿并分化小苗
生根力很强 , 茎有生 一长
生根力很强 , 茎有生长
3
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2 5
试验表明 , 幼龄外镇体 ( 原球一摹 )在含
有一定浓度的细胞分裂素的条件下 , 生长素
低的可以不断地分生原球茎 , 生长素稍有增
加时能促进原球茎形成小苗 ; 小苗经过继代
培养 , 一部分继续分化 , 另一部分 形 成 植
株 ; 已长成的苗在低生长素的作用下 , 分化
能力减低 , 植株生长能力增强 ; 生 长 素 过
高 , 会抑制幼小外植体 ( 原球茎 ) 的分生 ,
对 I 厘米高的苗有促进生根的能力 。
试验还表明 , 试管苗继代培养时 , 必须
根据苗的大小归类转移 , 以便于同步培养 。
三 、 幼苗移栽及管理
当劫苗长到 3 ~ 5 厘米高 , 并长有数条
白色粗仕幼根时 , 将三角瓶塞打开 , 数日后
用长镊子或接种棒先端弯曲的金属丝把幼苗
轻轻取出放入盛有微温清水的面盆中洗去培
养基 , 置报纸上 , 待叶片上的水滴干后进行
移栽 。 可用 30 X 20 X S 厘米的疏孔塑料框移
栽试管苗。 每框移 1忍一 2 。株 , 框内用蔽根作
填充材料 , 并加少量的青苔和珍珠 岩 ( 表
4 )
。 塑料框植苗温度以 20 一 30 ℃为宜 。 移
栽成活率可达 80 % 以上 。
裹 4 试管苗在不同介质上移栽成活率
养 , 不断增生并长成植株 。 整个繁 殖 过 程
中 , 未见有愈伤组织出现 。 对试管苗植物性
状的调查表明 , 由原球茎繁殖成的植株无变
异 。
介 质 移栽株数
八U两U八Unénùǎ日日甘1人月.丈, .二苔根青旅
旅根 + 珍珠岩
旅根 + 青苔 + 珍珠岩
成活率 (%)
O
1 2
1 8
8 7
, 旅根 、 青苔和珍珠岩的比例是 90 , 5 , 5
根据表 4 , 试管苗移栽的介质 , 全部为
青苔时锡过湿 , 通气条件差 , 幼苗 不 能 成
活 ; 全部为蔗根的虽通气性好 , 但 保 湿 性
差 , 成活率不高 ; 藏根加珍珠岩效果也不理
想 ; 以荻根加青苔加珍珠岩的成活率最高 ,
达 8 7% 。
四 、 幼苗发牛途径
根据观察 , 蝶兰的分生细胞开始出现于
皮层 , 并形成原球茎 。 原球茎通过 继 代 培
讨 论
在蝶兰的试管繁植过程中 , 先用花梗节
诱导出苗 , 然后将诱导出的幼苗转移到继代
培养基上进行增殖培养 , 产生原球茎和苗 。
这两个步骤是不同的 。 虽然两种培养基含有
的激素种类相同 , 但浓度不同 , 故不可颠倒
使用。 这说明外植体年龄不同 , 它们所需要
的激素的浓度及配 比也不同 。 同时 , 蝶兰试
管无性繁殖中所需的 3 种激素缺一不可 。
研究结果表明 , 采用一个花梗节 1 年内
可生长出 5 0 个以上的原球茎和试管苗 , 同时
在全年的任何时期都可提供商品苗 。
用花梗节繁殖蝶兰不损伤母株 , 且消毒
容易 。 试管繁殖过程中 , 未见有愈伤组织出
现 , 繁殖出的植株无变异 。
在继代繁殖过程中 , 一个试管里的苗苗
龄差异很大 , 这是因为相同培养基对不 同龄
的外植体产生不同的效应 。 因此 , 试管苗在
继代培养过程中 , 必须根据苗的大小分类转
移 , 以便于同步培养 。
本试验表现出一定经济效益和 社 会 效
益 。 通过核算 , 每株试管苗的成本最多不超
过 0 . 3元 , 而 1 株试管商品苗国际市场 价 格
为 1美元 , 移栽后每盆 10 0元 。 在具备 一 定
的温室条件和适宜于蝶兰生长的地区 , 大量
生产蝶兰出口创汇 , 经济效益明显 。 同时 ,
试管繁殖也将是 良种繁殖的重要手段 。
参考文献
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-
笔花豆炭疽病的病原菌鉴定
及流行规律研究 一
华南热带作物科 学研 究院植保所 冯淑芬 李凤峨
华南热带作物科学研究院 热作所 何朝族
广 东 省 畜 枚 局 林坚毅
摘 要
笔花豆炭疽病是我国热带豆科牧草中较常见的病害 。 本文报道其病原菌的菌种类型 , 生理特
性 、 不同地区菌侏的致病性 、 笔花豆主要推广栽培种的抗病性以及病害发生 、 分布与流行因素的
诏查研究结果 。
笔花豆 ( 柱花草 , s t y l o s a n t h e s s p p . ) B a l d i a n 1 9 7 5年报 道 在 南 美 洲 , x r w i n 和
具有产量高 、 耐酸性和瘦膺土壤等 优 良 性 C a m er o n 1 9 7 8年报道在澳 大 利 亚 北 部 ,
状 , 是热带地区豆科牧草 中重要的栽培种 , L e n en 和 S o n o d a 1 9 7 9年报道在美国佛 罗 里
也是改 良热带高酸低肥草地的优 良草种 , 具 达州 , M ar 时 et 报道在非洲 , vi in jsa n u n 报
、 有很大的发展潜力。 但国内推广种植以来 , 道在泰国等地发现此病不同程度地发生和危
由于受到笔花豆炭疽病的危害 , 产量受到严 害 。 我国 19 6 0年引种笔花豆 ` , 开始仅发现极
重影响 。 到目前为止 , 还未见我国对笔花豆 轻微感病 , 后随着种植面积的不断扩大 , 病
炭疽病研究的报道 。 情逐渐加重 。 1 9 7 9年 , 海南澄迈县 种 植 的
笔花豆原产于热带美洲 。 1 93 7年 , A on n 30 。多亩巴西首着 (笔花豆属的一个栽培种 ) ,
首次报道巴西发生笔花豆炭疽病 , 但 30 多年 由于炭疽病危害而没有收到种子 。 1 9 8 5年 ,
来未 引起过严重危害 。 随着笔花豆种植面积 海南昌江县种畜场所种的格拉姆笔花豆全部
的扩大 , 该病为害逐渐广泛而严 重 起 来 。 发生炭疽病 , 使全场几百亩种子田的全部种
1 9 8 7年参加广东省调查的有省畜枚局林树斌 、 刘俊芬 , 1 9 8 8年参加广东省调查的有郑赛清 、 陈三友 , 参
加海南省调查的有华南热带作物科学研究院热作所郑扬。 调查过程中得到揭西 、 惠来 、 东 莞 、 五 华 、 河
源 、 臼沙 、 三亚 、 东方 、 乐东 、 昌江等市 、 县畜牧局和种畜场领导和 同志们的大力支持 。 本文承华南热带
作物科学研究院植保所所长、 研究员张开明 , 热作所副研究员蒋候明审阅 。 在此一并致谢 。
t h I n t e r
n o d a l S e e t i o n s o f F l o 宙 e r s t a lk J 。
J a p a n
。
S
o e 。 H
o r r . S e i
.
5 4 ( 3 ) 1 9 8 5 : 3 7 9~
多另7 。
〔 4 〕 M认 r a s h ig o t . C l o n a z 甩 u l t t i p l i e a r i -
o n o f g e r b r a t h r o n g h t i s s n e C u l t n r e
。
H o r r
。
S e i
。
1 9 7 4 ( 9 ) : 17 5~ 1 8 0
。
〔 5 〕 傅莲芳: 网球花鳞茎的培养 , 《 植物生
理通讯 》 , 1习8 6 ( 2 ) : 3 3