全 文 :第 43 卷第 1 期
2015 年 1 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 43 No. 1
Jan. 2015
刺头复叶耳蕨的紫外 -可见吸收光谱特征研究*
李辉敏
(九江学院基础医学院,江西 九江 332000)
摘 要:目的:以刺头复叶耳蕨不同萃取部位谱线组的特征为依据,较全面地反映刺头复叶耳蕨的内在品质。方法:采用
紫外扫描的方式,分别对刺头复叶耳蕨石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇、水萃取部位进行扫描,得到紫外特征曲线。结
果:刺头复叶耳蕨 4 种萃取液均在 200 ~ 600 nm波长范围内有特征吸收,本测定方法的稳定性、重复性良好,4 种萃取液在 3 h内
稳定性良好,可用于测定刺头复叶耳蕨不同萃取液在紫外 -可见光区的吸收特征。结论:刺头复叶耳蕨不同极性溶剂萃取部位的
紫外扫描谱线可表达其特征,为采用紫外 -可见分光光度法鉴别刺头复叶耳蕨提供基础。
关键词:刺头复叶耳蕨;紫外 -可见吸收光谱;鉴别
中图分类号:TQ914. 1 文献标志码:B 文章编号:1001 - 9677(2015)01 - 0099 - 03
* 基金项目:江西省教育厅资助项目 (No. GJJ12737) ;江西省卫生厅资助项目 (No. 2012A014)。
作者简介:李辉敏 (1974 -) ,副教授,主要从事中药药效物质基础与作用机制研究。
Ultraviolet - visible Absorption Spectrum Characteristics
of Arachniodes Exilis Ching*
LI Hui -min
(College of Basic Medical,Jiujiang University,Jiangxi Jiujiang 332000,China)
Abstract:To reflect intrinsic quality of Arachniodes exilis ching on the ultraviolet - visible absorption spectrum
characteristics of its different extract parts. By UV scanning method, the ultraviolet - visible absorption spectrum
characteristics of four different extracts including petroleum ether (60 ~ 90 ℃) ,ethyl acetate,anhydrous alumina and
distilled water were determined. The four different extracts all had distinct characteristic absorption in the wavelength
range of 200 ~ 600 nm,the measurement method had good reproducibility,and the four kinds of extracts had good stability
within 3 h. The different extract parts of Arachniodes exilis ching was characterized by the ultraviolet - visible absorption
spectrum,which can be used in the identification for quality control.
Key words:Arachniodes exilis ching;ultraviolet - visible absorption spectrum;identification
刺头复叶耳蕨 (Arachniodes exilis Ching)为鳞毛蕨科复叶
耳蕨属植物,广泛分布于世界热带和亚热带湿润区域,以亚洲
东部和东南部种类最为丰富,我国主要分布于长江流域以南地
区及山东、河南等省,具有清热利湿,抗菌消炎,镇静作用,
民间用于治疗急性黄疸型肝炎、关节炎、腰腿疼、痢疾、烫火
伤等[1]。紫外吸收光谱法鉴别中草药具有取样量小、特征性
强、操作简便、结果准确等特点,在中草药的鉴别研究中得到
越来越多的应用。常用方法包括单一紫外光谱测定法及紫外光
谱组法[2]。本研究中采用 80%乙醇提取刺头复叶耳蕨,减压浓
缩至浸膏后,采用系统溶剂对药材进行萃取,分别得到石油醚
(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇、水萃取部位,采用紫外
扫描的方式,以谱线组的特征为依据,较全面地反映刺头复叶
耳蕨的内在品质。
1 材料与仪器
1. 1 材 料
药材:采自江西省星子县,由九江学院基础医学院高春华
教授 鉴 定 为 鳞 毛 蕨 科 (Dryopteridaceae) 复 叶 耳 蕨 属
(Arachniodes)刺头复叶耳蕨 (Arachniodes exilis Ching)。
石油醚 (60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇:均为分析纯
(AR),天津科密欧化学试剂有限公司。
1. 2 仪 器
紫外可见分光光度计(TU - 1901 型) ,北京普析通用仪器
有限公司;中草药粉碎机(FCI30 /B 型),上海中药机械厂;电
子天平(BT224S 型) ,德国赛多利斯;旋转蒸发仪(RE -
52AA),上海亚荣生化仪器厂;超声波清洗仪(PRF - Q1012) ,
无锡帕尔弗工业设备科技有限公司;循环水式真空泵(SHZ - D
(III) ) ,巩义市英峪予华仪器厂;超纯水机 (KL - UP - IV - 20
型),成都唐氏康宁科技发展有限公司。
2 方 法
参照《中国药典》2010 年版一部附录 VA所载紫外 -可见
分光光度法并参考文献[3],测定刺头复叶耳蕨不同萃取部位
的紫外特征曲线。
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2. 1 样品溶液的制备
取刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分粉碎过 60 目筛,得
供试粉末,60 ℃干燥。取药材干燥粉末 5 g,经 80%乙醇超声
提取,减压浓缩至浸膏,分别取 100 mL 石油醚(60 ~ 90 ℃)、
乙酸乙酯、无水乙醇、水进行萃取,得到石油醚(60 ~ 90 ℃)、
乙酸乙酯、无水乙醇、水萃取部位。
2. 2 紫外 -可见吸收光谱范围的考察
取同一批样品的 4 种萃取液,在同一台紫外 -可见分光光
度计上,分别以溶剂(石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙
醇、水)为空白对照,在 200 ~ 800 nm 范围进行波长扫描,得
到相应吸收光谱特征曲线。
2. 3 稳定性考察
取同一批样品溶液的 4 种萃取液,在同一台紫外 -可见分
光光度计上,分别以溶剂(石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无
水乙醇、水)为空白对照,在 10 min、0. 5 h、1 h、2 h、3 h测
定紫外吸收光谱特征曲线,分别考察各萃取液的稳定性。
2. 4 重复性考察
取同一批样品按 2. 1样品溶液的制备方法制得石油醚、乙酸
乙酯、无水乙醇、水萃取液各 5份,在同一台紫外 -可见分光光
度计上,分别以溶剂(石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙
醇、水)为空白对照,测定紫外吸收光谱特征曲线,分别将同
一类萃取液的 5份光谱数据进行比较,考察测定方法的重复性。
2. 5 样品测定
分别将制备好的刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分各萃取
液在同一台紫外 - 可见分光光度计上,分别以溶剂 (石油醚
(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇、水)为空白对照,测定
紫外吸收光谱特征曲线,进行比较。
3 结 果
3. 1 紫外 -可见吸收光谱范围
从同一批样品的 4 种萃取液所得到相应吸收光谱特征曲线
中可见刺头复叶耳蕨地上部分乙酸乙酯萃取液的吸收特征集中
在 200 ~ 600 nm,其他萃取液的吸收特征集中在 200 ~ 400 nm,
故选择样品测定扫描范围为 200 ~ 600 nm。
3. 2 稳定性
结果表明各萃取液在不同时间点所得光谱曲线谱形相近,
相应峰与谷的位置相同;石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无
水乙醇、水萃取液所得光谱曲线中主要峰、谷处吸光度的 RSD
分别为 1. 86%、2. 31%,1. 87%、0. 76%,1. 56%、1. 25%,
0. 89、1. 03%。说明用紫外 -可见分光光度法测定本样品光谱
特征曲线的方法稳定性良好,4 种萃取液在 3 h内稳定性良好。
3. 3 重复性
结果表明同一类萃取液的 5 份光谱特征曲线谱形相近,相
应峰与谷的位置相同;石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水
乙醇、水萃取液各自所得 5 份光谱曲线中主要峰、谷处吸光度
的 RSD 分别为 1. 05%、0. 65%,1. 57%、1. 67%,1. 02%、
1. 15%,1. 08%、1. 63%。说明用紫外 -可见分光光度法测定
本样品光谱特征曲线的方法重复性良好。
3. 4 刺头复叶耳蕨不同提取部位的测定
3. 4. 1 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分石油醚 (60 ~ 90 ℃)
萃取液吸收光谱特征曲线及光谱数据比较
由图 1 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的石油醚
(60 ~ 90 ℃)萃取液在 200 ~ 300 nm 波长范围内均有吸收,但
二者的吸收光谱特征差异较大,地上部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃
取液的吸收峰在(203 ± 2)nm,(255 ± 2)nm,谷在(250 ± 2)nm。
地下部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液的吸收峰在(225 ± 2)nm及
(280 ± 2)nm,谷在(216 ± 2)nm及(251 ± 2)nm。同等稀释倍
数条件下地上部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液的吸收强度大于
地下部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液。
图 1 刺头复叶耳蕨地上与地下部分石油醚萃取液比较
Fig. 1 UV scanning lines of the petroleum ether extracts
of aerial aerial parts and roots
3. 4. 2 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分乙酸乙酯萃取液吸
收光谱特征曲线及光谱数据比较
由图 2 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的乙酸乙
酯萃取液在 200 ~ 300 nm波长范围内的吸收光谱特征相似,均
有两个特征吸收峰,分别为(245 ± 2)nm,(279 ± 2)nm,在
(255 ± 2)nm波长处有最小吸收,同等稀释倍数条件下地上部
分石油醚萃取液的吸收强度大于地下部分乙酸乙酯萃取液。但
二者在 300 ~ 600 nm波长范围内吸收光谱特征差异较大,地上
部分乙酸乙酯萃取液在 300 ~ 600 nm 波长范围内有明显吸收光
谱特征,而地下部分乙酸乙酯萃取液在此范围内无特征吸收。
图 2 刺头复叶耳蕨地上与地下部分乙酸乙酯萃取液比较
Fig. 2 UV scanning lines of the ethyl acetate extracts
of aerial aerial parts and roots
3. 4. 3 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分无水乙醇萃取液吸
收光谱特征曲线及光谱数据比较
图 3 刺头复叶耳蕨地上与地下部分无水乙醇萃取液比较
Fig. 3 UV scanning lines of the ethanol extracts
of aerial aerial parts and roots
第 43 卷第 1 期 李辉敏:刺头复叶耳蕨的紫外 -可见吸收光谱特征研究 101
由图 3 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的无水乙
醇萃取液在 200 ~ 400 nm波长范围内的吸收光谱特征相似,均
有两个特征吸收峰,分别为(279 ± 2)nm,(204 ± 2)nm,在
(259 ± 2)nm波长处有最小吸收,同等稀释倍数条件下地上部
分无水乙醇萃取液的吸收强度大于地下部分无水乙醇萃取液。
3. 4. 4 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分水萃取液吸收光谱
特征曲线及光谱数据比较
由图 4 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的水萃取
液在 200 ~ 400 nm 波长范围内的吸收光谱特征相似,均在
(279 ± 2)nm有一个特征吸收峰,在 (259 ± 2)nm波长处有最
小吸收,同等稀释倍数条件下地上部分水萃取液的吸收强度大
于地下部分水萃取液。
图 4 刺头复叶耳蕨地上与地下部分水萃取液比较
Fig. 4 UV scanning lines of the distilled water extracts
of aerial aerial parts and roots
4 结 论
本试验测定了刺头复叶耳蕨 4 种萃取液的紫外 -可见光谱
扫描曲线,其均在 200 ~ 600 nm 波长范围内有特征吸收,本测
定方法的稳定性良好,4 种萃取液在 3 h内稳定性良好,同时
本测定方法重复性良好,可用于测定刺头复叶耳蕨不同萃取液
在紫外 -可见光区的吸收特征。
刺头复叶耳蕨地上与地下部分 4 种萃取液的紫外 -可见光
谱数据显示,刺头复叶耳蕨中含有脂溶性成份、水溶性成份及
中等极性的成分在内的多种化学成份。其中,石油醚(60 ~
90 ℃)萃取液,尤其是地上部分在 200 ~ 400 nm 波长范围内有
吸收,表明样品中含有非极性成份如脂肪、色素等。地上部分
与地下部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液所得谱图差异较大,说
明刺头复叶耳蕨地上与地下部分非极性成份类别与含量存在较
大差异。地上与地下部分乙酸乙酯萃取液与无水乙醇萃取液在
240 ~ 280 nm附近之间有最大吸收,提示样品可能存在黄酮类
化合物等含多个共轭体系的化合物。地上与地下部分乙酸乙酯
萃取液在 300 ~ 600 nm波长范围内吸收光谱特征差异较大,提
示刺头复叶耳蕨地上与地下部分中等极性成份类别与含量存在
差异。地上与地下部分水萃取液和无水乙醇萃取液在 200 ~
300 nm 波长范围内之间有最大吸收,提示样品可能含有氨基
酸、蛋白质及多肽等极性成份。刺头复叶耳蕨中所含单体化合
物的种类还需进一步实验研究。
本部分的研究在单一紫外谱线法鉴别中草药的基础上,将
刺头复叶耳蕨不同极性溶剂萃取部位的紫外扫描谱线相结合来
表达其特征,为今后采用紫外 -可见分光光度法鉴别刺头复叶
耳蕨,准确、全面地反映其内在品质提供了基础。
参考文献
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檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
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(上接第 98 页)
精密度实验六次测定结果的 RSD 为 0. 093%,表明用该法
测定洋葱中总黄酮精密度较好。
2. 4. 3 稳定性实验
精密吸取 1. 0 mL 样品溶液于 100 mL 容量瓶中,按 2. 3. 2
相同的方法操作并在给定时间段内每隔 20 min 测定一次吸光
度,求得 RSD,结果见表 6,评价方法的稳定性。
表 6 稳定性实验结果
时间 /min 0 10 30 50 70 90 RSD /%
吸光度 0. 512 0. 514 0. 515 0. 516 0. 514 0. 515 0. 275
表 6 显示,样品显色液在 90 min内具有足够的稳定性,便
于生产实验操作。
3 结 论
乙酸乙酯和正丁醇均可萃取出洋葱醇提液中的部分黄酮
类化合物,利用本文建立的方法测得洋葱醇提液、乙酸乙酯
和正丁醇萃取液中黄酮含量分别为 2. 96 mg /g 、1. 31 mg /g 和
1. 05 mg /g。该法准确度、精密度和稳定性都较好,操作简单。
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