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刺头复叶耳蕨的紫外-可见吸收光谱特征研究



全 文 :第 43 卷第 1 期
2015 年 1 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 43 No. 1
Jan. 2015
刺头复叶耳蕨的紫外 -可见吸收光谱特征研究*
李辉敏
(九江学院基础医学院,江西 九江 332000)
摘 要:目的:以刺头复叶耳蕨不同萃取部位谱线组的特征为依据,较全面地反映刺头复叶耳蕨的内在品质。方法:采用
紫外扫描的方式,分别对刺头复叶耳蕨石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇、水萃取部位进行扫描,得到紫外特征曲线。结
果:刺头复叶耳蕨 4 种萃取液均在 200 ~ 600 nm波长范围内有特征吸收,本测定方法的稳定性、重复性良好,4 种萃取液在 3 h内
稳定性良好,可用于测定刺头复叶耳蕨不同萃取液在紫外 -可见光区的吸收特征。结论:刺头复叶耳蕨不同极性溶剂萃取部位的
紫外扫描谱线可表达其特征,为采用紫外 -可见分光光度法鉴别刺头复叶耳蕨提供基础。
关键词:刺头复叶耳蕨;紫外 -可见吸收光谱;鉴别
中图分类号:TQ914. 1 文献标志码:B 文章编号:1001 - 9677(2015)01 - 0099 - 03
* 基金项目:江西省教育厅资助项目 (No. GJJ12737) ;江西省卫生厅资助项目 (No. 2012A014)。
作者简介:李辉敏 (1974 -) ,副教授,主要从事中药药效物质基础与作用机制研究。
Ultraviolet - visible Absorption Spectrum Characteristics
of Arachniodes Exilis Ching*
LI Hui -min
(College of Basic Medical,Jiujiang University,Jiangxi Jiujiang 332000,China)
Abstract:To reflect intrinsic quality of Arachniodes exilis ching on the ultraviolet - visible absorption spectrum
characteristics of its different extract parts. By UV scanning method, the ultraviolet - visible absorption spectrum
characteristics of four different extracts including petroleum ether (60 ~ 90 ℃) ,ethyl acetate,anhydrous alumina and
distilled water were determined. The four different extracts all had distinct characteristic absorption in the wavelength
range of 200 ~ 600 nm,the measurement method had good reproducibility,and the four kinds of extracts had good stability
within 3 h. The different extract parts of Arachniodes exilis ching was characterized by the ultraviolet - visible absorption
spectrum,which can be used in the identification for quality control.
Key words:Arachniodes exilis ching;ultraviolet - visible absorption spectrum;identification
刺头复叶耳蕨 (Arachniodes exilis Ching)为鳞毛蕨科复叶
耳蕨属植物,广泛分布于世界热带和亚热带湿润区域,以亚洲
东部和东南部种类最为丰富,我国主要分布于长江流域以南地
区及山东、河南等省,具有清热利湿,抗菌消炎,镇静作用,
民间用于治疗急性黄疸型肝炎、关节炎、腰腿疼、痢疾、烫火
伤等[1]。紫外吸收光谱法鉴别中草药具有取样量小、特征性
强、操作简便、结果准确等特点,在中草药的鉴别研究中得到
越来越多的应用。常用方法包括单一紫外光谱测定法及紫外光
谱组法[2]。本研究中采用 80%乙醇提取刺头复叶耳蕨,减压浓
缩至浸膏后,采用系统溶剂对药材进行萃取,分别得到石油醚
(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇、水萃取部位,采用紫外
扫描的方式,以谱线组的特征为依据,较全面地反映刺头复叶
耳蕨的内在品质。
1 材料与仪器
1. 1 材 料
药材:采自江西省星子县,由九江学院基础医学院高春华
教授 鉴 定 为 鳞 毛 蕨 科 (Dryopteridaceae) 复 叶 耳 蕨 属
(Arachniodes)刺头复叶耳蕨 (Arachniodes exilis Ching)。
石油醚 (60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇:均为分析纯
(AR),天津科密欧化学试剂有限公司。
1. 2 仪 器
紫外可见分光光度计(TU - 1901 型) ,北京普析通用仪器
有限公司;中草药粉碎机(FCI30 /B 型),上海中药机械厂;电
子天平(BT224S 型) ,德国赛多利斯;旋转蒸发仪(RE -
52AA),上海亚荣生化仪器厂;超声波清洗仪(PRF - Q1012) ,
无锡帕尔弗工业设备科技有限公司;循环水式真空泵(SHZ - D
(III) ) ,巩义市英峪予华仪器厂;超纯水机 (KL - UP - IV - 20
型),成都唐氏康宁科技发展有限公司。
2 方 法
参照《中国药典》2010 年版一部附录 VA所载紫外 -可见
分光光度法并参考文献[3],测定刺头复叶耳蕨不同萃取部位
的紫外特征曲线。
100 广 州 化 工 2015 年 1 月
2. 1 样品溶液的制备
取刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分粉碎过 60 目筛,得
供试粉末,60 ℃干燥。取药材干燥粉末 5 g,经 80%乙醇超声
提取,减压浓缩至浸膏,分别取 100 mL 石油醚(60 ~ 90 ℃)、
乙酸乙酯、无水乙醇、水进行萃取,得到石油醚(60 ~ 90 ℃)、
乙酸乙酯、无水乙醇、水萃取部位。
2. 2 紫外 -可见吸收光谱范围的考察
取同一批样品的 4 种萃取液,在同一台紫外 -可见分光光
度计上,分别以溶剂(石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙
醇、水)为空白对照,在 200 ~ 800 nm 范围进行波长扫描,得
到相应吸收光谱特征曲线。
2. 3 稳定性考察
取同一批样品溶液的 4 种萃取液,在同一台紫外 -可见分
光光度计上,分别以溶剂(石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无
水乙醇、水)为空白对照,在 10 min、0. 5 h、1 h、2 h、3 h测
定紫外吸收光谱特征曲线,分别考察各萃取液的稳定性。
2. 4 重复性考察
取同一批样品按 2. 1样品溶液的制备方法制得石油醚、乙酸
乙酯、无水乙醇、水萃取液各 5份,在同一台紫外 -可见分光光
度计上,分别以溶剂(石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙
醇、水)为空白对照,测定紫外吸收光谱特征曲线,分别将同
一类萃取液的 5份光谱数据进行比较,考察测定方法的重复性。
2. 5 样品测定
分别将制备好的刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分各萃取
液在同一台紫外 - 可见分光光度计上,分别以溶剂 (石油醚
(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水乙醇、水)为空白对照,测定
紫外吸收光谱特征曲线,进行比较。
3 结 果
3. 1 紫外 -可见吸收光谱范围
从同一批样品的 4 种萃取液所得到相应吸收光谱特征曲线
中可见刺头复叶耳蕨地上部分乙酸乙酯萃取液的吸收特征集中
在 200 ~ 600 nm,其他萃取液的吸收特征集中在 200 ~ 400 nm,
故选择样品测定扫描范围为 200 ~ 600 nm。
3. 2 稳定性
结果表明各萃取液在不同时间点所得光谱曲线谱形相近,
相应峰与谷的位置相同;石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无
水乙醇、水萃取液所得光谱曲线中主要峰、谷处吸光度的 RSD
分别为 1. 86%、2. 31%,1. 87%、0. 76%,1. 56%、1. 25%,
0. 89、1. 03%。说明用紫外 -可见分光光度法测定本样品光谱
特征曲线的方法稳定性良好,4 种萃取液在 3 h内稳定性良好。
3. 3 重复性
结果表明同一类萃取液的 5 份光谱特征曲线谱形相近,相
应峰与谷的位置相同;石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、无水
乙醇、水萃取液各自所得 5 份光谱曲线中主要峰、谷处吸光度
的 RSD 分别为 1. 05%、0. 65%,1. 57%、1. 67%,1. 02%、
1. 15%,1. 08%、1. 63%。说明用紫外 -可见分光光度法测定
本样品光谱特征曲线的方法重复性良好。
3. 4 刺头复叶耳蕨不同提取部位的测定
3. 4. 1 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分石油醚 (60 ~ 90 ℃)
萃取液吸收光谱特征曲线及光谱数据比较
由图 1 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的石油醚
(60 ~ 90 ℃)萃取液在 200 ~ 300 nm 波长范围内均有吸收,但
二者的吸收光谱特征差异较大,地上部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃
取液的吸收峰在(203 ± 2)nm,(255 ± 2)nm,谷在(250 ± 2)nm。
地下部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液的吸收峰在(225 ± 2)nm及
(280 ± 2)nm,谷在(216 ± 2)nm及(251 ± 2)nm。同等稀释倍
数条件下地上部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液的吸收强度大于
地下部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液。
图 1 刺头复叶耳蕨地上与地下部分石油醚萃取液比较
Fig. 1 UV scanning lines of the petroleum ether extracts
of aerial aerial parts and roots
3. 4. 2 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分乙酸乙酯萃取液吸
收光谱特征曲线及光谱数据比较
由图 2 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的乙酸乙
酯萃取液在 200 ~ 300 nm波长范围内的吸收光谱特征相似,均
有两个特征吸收峰,分别为(245 ± 2)nm,(279 ± 2)nm,在
(255 ± 2)nm波长处有最小吸收,同等稀释倍数条件下地上部
分石油醚萃取液的吸收强度大于地下部分乙酸乙酯萃取液。但
二者在 300 ~ 600 nm波长范围内吸收光谱特征差异较大,地上
部分乙酸乙酯萃取液在 300 ~ 600 nm 波长范围内有明显吸收光
谱特征,而地下部分乙酸乙酯萃取液在此范围内无特征吸收。
图 2 刺头复叶耳蕨地上与地下部分乙酸乙酯萃取液比较
Fig. 2 UV scanning lines of the ethyl acetate extracts
of aerial aerial parts and roots
3. 4. 3 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分无水乙醇萃取液吸
收光谱特征曲线及光谱数据比较
图 3 刺头复叶耳蕨地上与地下部分无水乙醇萃取液比较
Fig. 3 UV scanning lines of the ethanol extracts
of aerial aerial parts and roots
第 43 卷第 1 期 李辉敏:刺头复叶耳蕨的紫外 -可见吸收光谱特征研究 101
由图 3 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的无水乙
醇萃取液在 200 ~ 400 nm波长范围内的吸收光谱特征相似,均
有两个特征吸收峰,分别为(279 ± 2)nm,(204 ± 2)nm,在
(259 ± 2)nm波长处有最小吸收,同等稀释倍数条件下地上部
分无水乙醇萃取液的吸收强度大于地下部分无水乙醇萃取液。
3. 4. 4 刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分水萃取液吸收光谱
特征曲线及光谱数据比较
由图 4 可知,刺头复叶耳蕨地上部分与地下部分的水萃取
液在 200 ~ 400 nm 波长范围内的吸收光谱特征相似,均在
(279 ± 2)nm有一个特征吸收峰,在 (259 ± 2)nm波长处有最
小吸收,同等稀释倍数条件下地上部分水萃取液的吸收强度大
于地下部分水萃取液。
图 4 刺头复叶耳蕨地上与地下部分水萃取液比较
Fig. 4 UV scanning lines of the distilled water extracts
of aerial aerial parts and roots
4 结 论
本试验测定了刺头复叶耳蕨 4 种萃取液的紫外 -可见光谱
扫描曲线,其均在 200 ~ 600 nm 波长范围内有特征吸收,本测
定方法的稳定性良好,4 种萃取液在 3 h内稳定性良好,同时
本测定方法重复性良好,可用于测定刺头复叶耳蕨不同萃取液
在紫外 -可见光区的吸收特征。
刺头复叶耳蕨地上与地下部分 4 种萃取液的紫外 -可见光
谱数据显示,刺头复叶耳蕨中含有脂溶性成份、水溶性成份及
中等极性的成分在内的多种化学成份。其中,石油醚(60 ~
90 ℃)萃取液,尤其是地上部分在 200 ~ 400 nm 波长范围内有
吸收,表明样品中含有非极性成份如脂肪、色素等。地上部分
与地下部分石油醚(60 ~ 90 ℃)萃取液所得谱图差异较大,说
明刺头复叶耳蕨地上与地下部分非极性成份类别与含量存在较
大差异。地上与地下部分乙酸乙酯萃取液与无水乙醇萃取液在
240 ~ 280 nm附近之间有最大吸收,提示样品可能存在黄酮类
化合物等含多个共轭体系的化合物。地上与地下部分乙酸乙酯
萃取液在 300 ~ 600 nm波长范围内吸收光谱特征差异较大,提
示刺头复叶耳蕨地上与地下部分中等极性成份类别与含量存在
差异。地上与地下部分水萃取液和无水乙醇萃取液在 200 ~
300 nm 波长范围内之间有最大吸收,提示样品可能含有氨基
酸、蛋白质及多肽等极性成份。刺头复叶耳蕨中所含单体化合
物的种类还需进一步实验研究。
本部分的研究在单一紫外谱线法鉴别中草药的基础上,将
刺头复叶耳蕨不同极性溶剂萃取部位的紫外扫描谱线相结合来
表达其特征,为今后采用紫外 -可见分光光度法鉴别刺头复叶
耳蕨,准确、全面地反映其内在品质提供了基础。
参考文献
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40 - 42.
(上接第 98 页)
精密度实验六次测定结果的 RSD 为 0. 093%,表明用该法
测定洋葱中总黄酮精密度较好。
2. 4. 3 稳定性实验
精密吸取 1. 0 mL 样品溶液于 100 mL 容量瓶中,按 2. 3. 2
相同的方法操作并在给定时间段内每隔 20 min 测定一次吸光
度,求得 RSD,结果见表 6,评价方法的稳定性。
表 6 稳定性实验结果
时间 /min 0 10 30 50 70 90 RSD /%
吸光度 0. 512 0. 514 0. 515 0. 516 0. 514 0. 515 0. 275
表 6 显示,样品显色液在 90 min内具有足够的稳定性,便
于生产实验操作。
3 结 论
乙酸乙酯和正丁醇均可萃取出洋葱醇提液中的部分黄酮
类化合物,利用本文建立的方法测得洋葱醇提液、乙酸乙酯
和正丁醇萃取液中黄酮含量分别为 2. 96 mg /g 、1. 31 mg /g 和
1. 05 mg /g。该法准确度、精密度和稳定性都较好,操作简单。
参考文献
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