全 文 ：8 8 食品与药品 年第 卷第 期
大高良姜的化学成分及对人乳腺癌细胞 一的细胞毒作用研究
王文杰 , 介淑芬 , 仲 浩 , 姚庆强
山东省医学科学院药物研究所 山东省罕少见病重点实验室 , 山东 济南
摘 要 目的 研究大高良姜的化学成分及所得部分苯丙素类化合物对人乳腺癌细胞 一的细胞毒活性 。方法 用柱色谱
技术分离 、 纯化 , 通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构 细胞培养 染色法测定化合物对肿瘤细胞的毒性 。结果
分离并鉴定出 个化合物 , 分别为 二乙酸一反式一对香豆醇酷 , 对乙酞氧基苯丙烯醇 , 对乙酞氧基苯丙烯醚
, 忆乙酞氧基胡椒酚乙酸酷 , 反式对轻基桂皮醛 , 反式对轻基桂皮酸 , 反式一对轻基桂皮醛乙
酷 珊 , 二对乙酞氧基苯乙烯甲烷 姗 , 对轻基苯甲醛 以 , , 一二经基苯甲酸 化合物 对人乳腺癌细胞
一生长抑制作用较强 , 化合物 无明显细胞毒作用。结论 化合物 , 系首次从该植物中分离到 化合物 对人
乳腺癌细胞 一有一定的细胞毒作用 。
关键词 大高良姜 化学成分 细胞毒活性
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
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大高良姜为姜科山姜属植物大高良姜的干燥根 有挥发油 、二苯庚烷类 、黄酮 、苯丙素类 、糖普类等
茎 , 又名大良姜 , 广泛分布于印度 、 泰国 、 马来西亚 化学成分 。本实验系统研究了大高良姜的化学成分 ,
等东南亚国家 , 我国的广东 、广西 、 云南 、 台湾等省 共分离 、鉴定了 个化合物 , 并从细胞毒角度研究了
区也有种植 。大高良姜性温 , 味辛 , 有温胃 , 散寒 , 分离所得主要成分的抗癌活性 。
行气止痛之功效 , 主治胃脱冷痛 , 伤食吐泻等症 。 仪器 、试剂与材料
药理研究表明 , 大高良姜具有抗菌 、抗癌 、抗氧化 、 型显微熔点测定仪 温度计未校正 , 北京光
抑制黄嘿吟氧化酶等作用 。文献报道 , 大高良姜主要 学仪器三厂 型红外光谱仪 压
收稿日期 一 一
作者简介 王文杰 一, 女 , 山东菏泽人 , 硕士 , 研究方向为天然药物化学 一 ,
通`讯作者 姚庆强 , 男 , 博士 , 硕士生导师 一 ·
食品与药品 年第 卷第 期
片 ,
型质谱仪 一 型核磁
共振仪 瑞 士 。柱色谱用硅胶 一
目 , 一 目 , 青岛腾海 薄层色谱用硅胶 、
青岛海洋化工 。
水 套 式 二 氧 化 碳 培 养 箱 美
国 多标 记 检测 仪 美
国 孔 板 美 国
。
大高 良姜购于济 南药业集 团 , 经 山东中医药
大学周凤琴鉴定 。顺铂 , 齐鲁制药厂
培养基 、胰蛋白酶 美国 小 二
血清 兰州民海 二甲基亚矾 , 天津化学
试剂一厂 咪哇蓝 , 其余均为国
产分析纯 细胞株 人乳腺癌细胞 一为作者所在
单位传代培养 。
提取与分离
大高良姜干燥根茎 , 粉碎 , 乙醇加热
回流提取 次 , 减压回收溶剂 , 得浸膏 , 加入适量水
混悬 , 依次用石油醚 、 氯仿 、 乙酸乙醋 、 正丁醇提
取 , 减压回收溶剂 , 得到不同极性提取物 。用各种柱
色谱技术初步分离纯化石油醚提取物和氯仿提取物 ,
得化合物 。
结构鉴定
化合物 一 的化学结构式见图 。
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图 化合物 一 的化学结构
化 合物 白色针状 结 品 石 油醚一乙酸 乙
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定此化合物为二乙酸一反式一对香豆醇酷 一
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化 合 物 白 色 针 状 结 晶 石 油 醚 一乙 酸
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合物为对乙酞氧基苯丙烯醇 升一 一
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化 合 物 白色针状 结 晶 石油 醚一乙酸 乙
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9 O 食品与药品 年第 卷第 期
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该化合物为对乙酞氧基苯丙烯醚 , 一 , 卜 一 ·
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化 合 物 白色 针状 结 晶 石 油醚一乙酸 乙 乙酷 , 分子式 、 , ℃。 一
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合物为 一乙酞氧基胡椒酚乙酸酷 一 鉴定该化合物为 反式对轻基桂皮醛乙酷 一
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化合物 白色针状 结晶 石油醚一丙酮 , 化合物姗 白色针状结晶 石油醚一丙酮 , 分
分子式 , 一 ℃。 一 正离 子式 , 一 。 一 ,三离
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【一 一致 , 故鉴定此化合物为 反式对轻基桂皮醛 此化合物为二对乙酞氧基苯乙烯甲烷 〔 一一
一一 。 一 。
化合物 白色针状结晶 二氯甲烷一甲醇 , 化 合 物 白色 针 状 结 晶 二 氯 甲烷 一甲
分子式 , 一 。 一 正离 醇 , 分子式 。 一 正离子检
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食品与药品 年第 卷第 期
一的毒性作用试验结果见表 。
表 大高 良姜中苯丙素类化合物 对人乳腺癌细胞
一的生长抑制率
供试化合物 不同浓度 叭 的抑制率 、
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【 报道一致 , 故鉴定此化合物 为 对轻基苯甲醛
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化 合 物 自色 针 状 结 晶 二 氯 甲烷 一甲
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上 , 谱数据与文献 【报道一致 , 故鉴定此化合物
为 , 一二轻基苯甲酸 , 一 。
细胞毒性实验
供试 品配制
准确称取供试品 种各 , 分别加入 林
溶解 , 用 完全培养基稀释至终浓度
分别为 , , , , , 其
中化合物 和 溶液为白色混悬液 , 未过滤 。其余
种化合物溶液无菌过滤 , 备用 。
细胞培养
取指数生长期 一细胞 , 胰蛋白酶消
化 , 用含 小牛血清的 培养基制成单细
胞悬液 , 调整细胞数为 勺 , 按每孔 科 接
种至 孔培养板 , ℃, 培养箱中培养 。
法分析供试品对 一细胞毒作 用
取接种培养 的 一细胞 , 分别加入不同
浓度的供试 品 , 每孔 林 , 同时设 阳性对照
组 、 阴性对照组 , 每组设 个平行孔 。将加入供试品
后的细胞继续常规培养 后 , 每孔加入 林
溶液 , 置 孵箱内孵育 小时 。倾 去孔 内液
体 , 每孔加入 林 溶液振摇一 , 使结
晶充分溶解 , 于 多功能分析仪 处测
定吸光度 , 根据其 值计算各供试品对细胞生
长的抑制率 。抑制率 一供试品 阴性对照
。
结果
大 高 良姜 中苯丙 素类化 合物对人乳腺癌 细胞
、
结果表明 , 大高良姜中苯丙素类化合物 一 对
人乳腺癌细胞 一的生长抑制率基本上呈浓度依赖
性 , 低浓度时抑制率较低 。化合物 没有表现出抑制
活性 。化合物 二乙酸一反式一对香豆醇酷对人乳腺癌
细胞 一的生长有较高的抑制率 , 提示其对 一
有一定的细胞毒作用 。化合物 一 对 一的抑制
活性相对较弱 , 化合物 无明显细胞毒作用 。
参考文献
国家中医药竹理局中华本 草编委会 中华本草【 上海 几海科
技出版社 , , 一
, , , 、
【 ,。 , , 一
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【】朱小璐 , 窦颖辉 , 黄雪峰 , 等 大高良姜的化学成分研究 【月
中国现代中药 , , 一
】周惠燕 , 李 士民 竹叶的化学成分研究 】中药学 , ,
一
刘振丽 , 李林福 , 巢志茂 , 等 何 首乌炮制后化学成分的研究
【」天然产物研究与开发 , , 一 ,