全 文 ：新疆中医药
Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine
2014年 第32卷 第5期
2014 Vol.32 No.5
基金项目：新疆维吾尔自治区自然科学基金，编号:2012211A073。
作者简介：伍倩（1986-），女，硕士研究生，研究方向：心血管病中医药研究。电话:13565923058
*通讯作者：辛效毅（1963-），男，博士，教授，主任医师，博导，研究方向：心血管病中医药研究。电话：18099186590
复方唇香草颗粒对动脉粥样硬化斑块内PPARγ和MMP-9影响的研究
伍 倩1， 辛效毅2*， 张新蕾1， 陈 悦1， 袁 爽1
（1． 新疆医科大学，新疆 乌鲁木齐 83001l； 2. 新疆医科大学第一附属医院中医科，新疆 乌鲁木齐
830011）
摘要：目的 探讨复方唇香草颗粒对动脉粥样硬化（AS）斑块中PPARγ和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平影响及机理的
研究。方法 将70只6~8周龄Apo-E基因敲除小鼠，予高脂饮食喂养12w后，随机处死10只，取主动脉根部，HE染色普通光
镜下观察并确定AS形成后，其余小鼠随机分为：模型组（生理盐水）、中药对照组（血脂康）、西药对照组（辛伐他汀）及复方
唇香草颗粒高、中、低剂量每组10只给药，12w后处死，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测基质金属蛋白酶-9；用免疫组化染
色法测定PPARγ蛋白表达。结果 与模型组比较，复方唇香草颗粒高、中、低剂量组、中药对照组、西药对照组的PPAR阳
性区域面积百分比增大、血清MMP-9含量下降（P<0.01）；与中药低剂量组、中药对照组比较，中药高、中剂量组、西医对照
组的PPARγ阳性区域面积百分比增大，血清MMP-9含量下降，有统计学意义（P<0.05）。结论 复方唇香草颗粒可通过增
大AS斑块中PPARγ的区域面积百分比，降低MMP-9含量，对动脉硬化炎症反应有一定的改善和调节作用。
关键词：唇香草；AS；PPARγ；MMP-9
随着人民的生活水平的提高，AS的发病率也呈
上升趋势，严重威胁人们的生活质量。1999年 roos[1]
提出的炎性损伤学说，认为 AS斑块破裂是造成急
性心脑血管事件的主要危险因子，稳定斑块、防止
破裂，是预防心脑血管事件的重要方法[2]。随着研究
的深入，人们发现基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与冠
状动脉内径狭窄程度有密切相关系，并且与 AS斑
块破裂有关[3]。而且过氧化物酶体增殖物激活受体
（PPARγ）基因多态性不仅直接关系到冠心病发病
及严重程度，并且与冠心病的危险因素有着直接关
联[4]。复方唇香草颗粒是新疆医科大学第一附属医
院中医科几代中医人经长期临床实践将新疆维吾
尔药与传统中药组配而成，具有鲜明地域特色，临
床疗效显著。本实验拟通过复方唇香草颗粒对
PPARγ和 MMP-9的影响，研究其改善炎性反应、稳
定 AS斑块的可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 6~8 周龄 ApoE 基因敲除小鼠（品系
C57BL/6J，北京大学实验动物中心自美国 Jackson
实验室引进并培育）70只，均为雄性，体质量 18～
20g。饲以含脂肪 15%、胆固醇 2%的高脂饲料，饲养
条件为 2级，室温 22～24℃之间，相对湿度 50%。
1.2 药物、试剂与仪器 复方唇香草颗粒（唇香草、
脱力草、苦参、红景天、汉防己、葛根）由新疆医科大
学制剂室制备，根据临床人拟用量与小鼠剂量转换
因子转换的使用剂量为：高剂量组 0.317g/20g；中剂
量组 0.158/20g；低剂量组 0.079g/20g，用蒸馏水配制
成 0.84g/mL 浓度混悬液。血脂康片（规格：0.30g/
粒，国药准字 Z10950029，北大维信生物科技有限公
司），使用剂量 0.2mL/20g。辛伐他汀片（规格：20mg/
粒；国药准字 H10970385，由默沙东制药有限公司
提供）。方法同中药组用蒸馏水配制成 1mL/mg浓度
悬浮液。 OLYMPUS BH2 光学显微镜 （日本
OLYMPUS公司），LKB-V切片机（瑞典 LKB公司），
SN-695型 r测量仪（上海核子所日环光电仪器厂），
1-15K、3K15低温冷冻离心机（美国 Sigma公司），
ABI-7300 型 Real-time 检测仪（美国 ABI 公司），
CL-7200全自动生化分析仪（日本岛津公司），胆固
醇（中国医药集团上海化学试剂公司提供，批号：
20110303）；MMP-9定量测定试剂盒（北京新生命生
物制药有限公司）；免疫组化试剂盒（北京新生命生
物制药有限公司）；猪油，市售。
1.3 方法
1.3.1 模型的建立 将 6~8周龄 ApoE基因敲除小
鼠 70只，饲以含脂肪 15%、胆固醇 2%的高脂饲料
（60Coγ灭菌照射处理) 喂养，12 周后随机处死 10
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只，取主动脉，用 HE染色法普通光镜下观察，确定
As形成。
1.3.2 分组及标本处理 其余小鼠随机分为 6组：
模型组（生理盐水）、中药对照组（血脂康）、西药对
照组（辛伐他汀）、复方唇香草颗粒高、中、低剂量每
组各 10只。根据成人每日用药临床推荐的常用量，
按体质量系数比折算成小鼠用量，药物溶于蒸馏
水，灌胃给药，每日 1 次，喂养 12w 后处死全部小
鼠。
1）取小鼠眼底动脉血，置于洁净玻璃管内，
30min内放入 3000r/min离心机内离心 10min，取上
清液，置于-80℃冰箱待测。
2）分离摘取主动脉，由腹正中线纵向剪开后立
即置入 4％多聚甲醛（含 0.1％的 DEPC）固定液固定
48h，待其有一定硬度后，取出动脉，包埋、切片后标
本进行 HE染色，用光学显微镜观察斑块形成。
1.4 标本测定
1.4.1 将小鼠心底部横断面每隔 50μm连续取 6张
切片，切片厚 5μm，用免疫组化染色，采用两步法测
定斑块内 PPAR-γ 蛋白表达 (抗体稀释度为 1：
200），每组均以 PBS代替一抗作为阴性对照，每张
切片在 100倍镜下各选取 5个不同的视野，对阳性
区域累积面积进行定量测定, 以此求取斑块内阳性
区域面积占斑块面积的百分比。
1.4.2 血清 MMP-9含量测定 采用酶联免疫吸附
法（操作按说明书）。
1.5 统计学方法 采用 SPSS17.0统计软件进行分
析。计量资料采用 x±s表示，实验数据经正态性、方
差齐性检验；符合条件后，实验组组间比较用单因
素方差分析（One-way ANOVA）及 LSD 检验；当实
验数据不符合正态性、方差齐性时，采用秩和检验，
检验水准 α＝0.05。
2 结果
各组对小鼠斑块内 PPAPγ 和 MMP-9 表达的
影响见表 1。
3 讨论
动脉硬化斑块破裂、脱落是造成心血管事件中
主要危险因素，在斑块演变成易损斑块过程中炎性
反应始终贯穿其中。大量研究表明 PPAPγ，MMP-9
对炎性反应有着重要的影响。
过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARs）是核激
素受体家族中的配体激活受体，它能对控制脂质和
葡萄糖代谢的基因进行转录调控。有研究表明
PPARγ可通过抑制炎症反应、降低胆固醇、保护血
管内皮、抑制血管平滑肌细胞增殖、改善纤维帽表
面应力等多种途径来干预 AS易损斑块，从而防止
AS的形成。近年有研究发现 PPARγ基因多态性与
超重、肥胖、高血压、2型糖尿病、血脂异常有一定的
相关性，而这些因素又是预测心血管病的一个独立
危险因素。
有研究表明，基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与动
脉粥样硬化关系密切，它既参与了血管的再生又参
与的炎症反应等病理过程[5]。MMP-9属于明胶酶，
能降解各种细胞外基质。Brown等[6]观察冠状动脉旋
切术斑块中 MMP-9的表达后发现不稳定心绞痛患
者的斑块中 MMP-9 的表达较无病变的动脉呈阳
性。张涛等[7]研究发现 MMP-9升高可能直接导致了
斑块破裂。
中医认为 AS的基本病机为心脉痹阻，以心虚
为本，与肝、脾、肾三脏密切联系；以痰浊、血瘀、气
滞为标，是脏腑功能失调、气血津液失衡的共同病
理表现。复方唇香草颗粒是新疆医科大学第一附属
医院中医科根据新疆心血管发病特点研制而出，方
中维吾尔药唇香草又名苏则，维医用于治疗心脏
病、胃病等，具有芳香开泄、舒展清阳、强心利湿、理
气化痰等功效，有抗氧化活性、抗动脉硬化形成作
用；新疆地产药红景天具有调节免疫、抗缺氧的作
用，可抑制 AS的形成；汉防己有抗炎、抑制血小板
聚集、促进纤维蛋白溶解的作用；葛根有改善微循
环、抑制血小板聚集，两药可有效防止 AS斑块的形
成。苦参中的苦参碱有降血脂、抗炎作用，可使内皮
细胞对 LDL的敏感性降低，从而保护内皮细胞。诸
药合用，共奏芳香开泄、益气活血、利湿祛痰之功，
可减轻 AS程度，降低心血管病发病率。
本实验表明，复方唇香草颗粒与辛伐他汀组的
PPARγ阳性表达区域面积百分比均较空白组明显
高，而两组间比较无统计学意义。实验组、西药对照
组小鼠血清 MMP-9浓度较血脂康对照组均有不同
表 1 各组对小鼠 PPAPγ和 MMP-9的影响（x±s）
MMP-9
127.28±11.65
115.36±12.43#
96.21±11.52#*▲
110.48±11.85#
99.57±13.22#*▲
98.68±13.89#*▲
组 别
模型组
血脂康组
辛伐他汀组
复方唇香草颗粒低剂量组
复方唇香草颗粒中剂量组
复方唇香草颗粒高剂量组
n
10
10
10
10
10
10
PPAPγ（%）
9.03±0.96
7.32±1.14#
5.18±1.11#*▲
7.25±1.13#
5.26±0.99#*▲
5.28±1.01#*▲
注：与模型组相比，#P＜0.01；与血脂康组相比，*P＜0.05；与复方唇香
草颗粒低剂量组相比，▲P＜0.05。
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程度的降低，具有显著的统计学意义；实验组、西药
对照组组间差异无统计学意义。结果显示复方唇香
草颗粒和辛伐他汀均可抑制血清 MMP-9浓度，增
高 PPARγ阳性表达区域面积的百分比。提示复方
纯香草颗粒抗动脉粥样硬化的作用机制可能与辛
伐他汀相近，其作用机制和抑制炎症反应有关。
参考文献：
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[7] 张 涛，李自成，巫少荣.基质金属蛋白酶-9和 C反应蛋白与冠
心病的相关性研究[J].临床心血管病杂志，2008，24（2）：88-90.
（收稿日期：2014-09-12）
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作者简介：顾茂辉（1965-），男，新疆博乐人，实验员，主要从事中药制剂检验研究。电话：0909-2282625。
HPLC法测定复方木香片中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量
顾茂辉1， 姜 雯2
（1.博州食品药品检验所， 新疆 博乐 833400； 2.新疆医科大学第六附属医院药剂科， 新疆 乌鲁木
齐 830002）
摘要：目的 建立测定复方木香片中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量的方法。方法 采用高效液相色谱法，
SHIMADZUVP-ODS（250×4.6mm，5μm，）色谱柱，甲醇-水（68：35）为流动相，检测波长225nm，流速为1.0mL·min-1，柱温为
35℃。结果 木香烃内酯和去氢木香内酯在0.018，2mg·mL-1~0.109，2mg·mL-1（r=0.999，1，n=6）和0.019，4mg·mL-1~0.116，4
mg·mL-1（r=0.999，3，n=6）间呈良好的线性关系，平均回收率分别为98.42%、98.05%，RSD为1.81%、1.92%（n=9），稳定性RSD
为1.34%（n=6），重复性RSD为0.87%（n=6）。结论 建立的定量方法操作简单、精密度高、重现性好,可用于控制复方木香片
中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量测定。
关键词：复方木香片；木香烃内酯；去氢木香内酯；高效液相色谱法
复方木香片是木香、乳香、香附、干姜、阿纳其
根、肉豆蔻、胡椒、玫瑰花八味药组成，具有除湿、收
敛、固精，用于遗精、遗尿、肠炎、腹泻、白带等，临床
疗效显著。木香为菊科木香属植物木香（Aucklandia
lappa Decne.）的干燥根，具有健脾消食、行气止痛的
功效，以及解痉、降压和抗菌作用，中医常用其治疗
胃部胀满、消化不良、呕吐、腹痛和腹泻等症[1]。其主
要活性成分是木香烃内酯和去氢木香内酯，属于倍
半萜内酯类挥发油成分，为有效地控制其质量，现
对君药木香中木香烃内酯和去氢木香内酯含量测
定方法进行了研究 [2-4]，建立了高效液相色谱法
（HPLC）测定复方木香片中木香烃内酯和去氢木香
内酯的含量，且阴性对照无干扰，可作为复方木香
片中的含量测定方法，为其质量标准的制定提供参
考。
1 仪器与试药
1.1 仪器 SPD-10AVP型高效液相色谱仪（日本
岛津制造所），包括 LC-10ATVP二元高压泵，SPD-
10AVP 紫外检测器，CTO-10ASVP 柱温箱，SCL-
10AVP系统控制器；LibrorAEG-200电子天平（日本
岛津制造所）；Millipore simplicity-185 超纯水器（美
国密理博公司）；LS-3120超声波发生器（美国科学
系统公司）。
1.2 试药 复方木香片 （批号：20121216 -1、
201216-2和 201216-3）及其空白样品由新疆素云
诊所提供；木香烃内酯和去氢木香内酯（批号分别
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