全 文 ：收稿日期:2010-03-12; 修订日期:2010-05-20
基金项目:国家科技支撑计划(No． 2007BAI38B05)
作者简介:程东岩(1973-) ，女(汉族) ，湖北京山人，现任吉林省中医药科
学院副主任药师，学士学位，主要从事中药新药研究及植化分离工作．
* 通讯作者简介:刘永宏(1973-) ，男(汉族) ，吉林长春人，现任中国科学
院南海海洋研究所研究员，博士学位，主要从事天然药物中活性成分的分
离研究工作．
刺玫果总黄酮纯化工艺研究
程东岩1，王隶书1，范艳君 2，刘永宏3*
(1．吉林省中医药科学院，吉林 长春 130012;
2．长春中医药大学，吉林 长春 130117;3．中国科学院南海海洋研究所，广东 广州 510301)
摘要:目的 筛选刺玫果总黄酮的最佳纯化工艺。方法 采用大孔吸附树脂从刺玫果粗提物中分离纯化得到刺玫果总黄
酮，并以芦丁为对照品测定总黄酮含量。结果 最佳纯化工艺为 AB8 大孔吸附树脂吸附，50%乙醇解吸，药材与树脂比为
2∶ 1。其总黄酮含量可达 50%以上。结论 此工艺简便可行，符合工业化生产要求。
关键词:刺玫果; 总黄酮; 纯化; 大孔吸附树脂
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 03． 068
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)03-0664-01
Study on the Purification of Total Flavonoids in Fructus Rosae Davuricae
CHENG Dong-yan1，WANG Li-shu1，FAN Yan-jun2，LIU Yong-hong3*
(1． Jilin Provincial Academy of Chinese Medicine，Changchun，130062，China;2． Changchun University of Tra-
ditional Chinese Medicine，Changchun 130117，China;3． South China Sea Institute of Oceanology，Chinese Acad-
emy of Traditional Sciences，Guangzhou，510301，China)
Abstract:Objective To optimize the purification conditions of total flavonoids in Fructus Rosae Davuricae． Methods The con-
centration of total flavone was acquired from crude extracts of Fructus Rosae Davuricae using macroporous absorptive resin，and the
content of total flavonoids was measured by spectrophotometer with rutin as standard sample． Results The optimum purification
conditions were as follows:the extracted fluid was absorbed with the resin AB8;the elution was 50% enthanol;the ratio of raw ma-
terials to resins was 2:1． The content of total flavonoids was more than 50% ． Conclusion The method is simple，feasible and suit-
able for industrial production．
Key words:Fructus Rosae Davuricae; Total flavonoids; Purification; Macroporous absorptive resin
刺玫果为蔷薇科蔷薇属植物山刺玫 Rosa davurica Pall．的干
燥成熟果实，广泛分布在我国东北、华北、西北等地。果实为球形
或卵形，酸甜可食，可治肠炎、消化不良、食欲不振。主要含有黄
酮类、有机酸、香豆素类等有效物质。据报道其所含总黄酮对动
物具有减慢心率，抑制离体心房收缩，延长凝血时间，抑制血栓形
成的作用，可用于预防和治疗高血脂、血栓所致的心脑血管疾
病［1 ～ 4］。
为了综合开发利用山刺玫果实资源，本课题组在国家科技部
的支持下，对刺玫果的提取纯化进行了深入研究，从刺玫果中提
取分离得到高纯度的刺玫果总黄酮，现将相关研究资料总结如
下，以期为刺玫果的进一步开发利用提供实验依据。
1 仪器与试药
722 型可见分光光度计(上海第三分析仪器厂) ;KQ － 3200
型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ;AUW120D 电子分
析天平(日本岛津)。芦丁对照品系供含量测定用，购自中国药
品生物制品检定所，批号:0080 － 9705;刺玫果药材采自吉林省磐
石市;所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 刺玫果总黄酮含量测定方法
2． 1． 1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品 6． 25 mg，置 25
ml量瓶中，加 70%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照
品溶液。
2． 1． 2 标准曲线的绘制 精密吸取上述对照品溶液 0． 5，1，2，3，
4，5 ml分别置于 25 ml量瓶中，各加水至 6 ml，加 5%亚硝酸钠溶
液 1ml，混匀，放置 6 min，加 10%硝酸铝溶液 1 ml，摇匀，放置 6
min，加入氢氧化钠试液 10 ml，再加水至刻度，摇匀，放置 15 min。
以相应试剂为空白，于 510nm 波长处测定吸光度。以取样浓度
为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为 Y =
0． 016 6X － 0． 005 2，r = 0． 999 8，结果表明芦丁在 5 ～ 50 μg·
ml －1范围内呈良好的线性关系。
2． 1． 3 样品测定 取刺玫果总黄酮约 8 mg，精密称定，置锥形瓶
中，加 40 ml 70%甲醇溶液超声处理 30 min(功率 120 W，频率 40
kHz) ，滤过，滤液蒸干，残渣用 70%乙醇溶液适量使溶解并定量
转移至 10 ml容量瓶中，加 70%乙醇溶液至刻度，摇匀，作为供试
品溶液。精密吸取供试品溶液 2 ml，按标准曲线的绘制项下方
法自“各加水至 6 ml……”起操作，测定吸光度，根据标准曲线计
算，即得总黄酮含量。
2． 2 刺玫果总黄酮提取方法的确立 由于黄酮类化合物在水中
溶解度相对较小，故选择用乙醇提取。通过选用不同浓度乙醇提
取，以提取出的总黄酮量为考察指标，确定 80%乙醇为最优选
择。在乙醇浓度固定为 80%的前提下，以提取次数、提取时间、
固液比为研究对象，选用 L9(3
4)正交表进行正交实验，以总黄酮
提出量为考察指标，确定最佳提取条件为将刺玫果用 80%乙醇
回流提取 2 次，每次 2h，每次加醇量为药材量的 8 倍。
2． 3 刺玫果总黄酮的纯化
2． 3． 1 大孔吸附树脂型号的选择 取刺玫果 200 g，加 80%乙醇
回流提取 2 次，每次 2 h，滤过，合并滤液，浓缩至 200 ml，平均分
成 4 份，加水稀释后分别加于各类已处理好的大孔吸附树脂柱
(50 g)上，先以水洗脱至无色，再以 50%乙醇洗脱，收集洗脱液，
浓缩干燥，得刺玫果总黄酮，按“2． 1． 3”项下方法测定总黄酮含
量。结果见表 1。
由表 1 测定结果可知，AB － 8 大孔吸附树脂对分离刺玫果总
·466·
时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 3
黄酮效果最好，不仅成品纯度高，色泽浅，收率高，且树脂再生容
易，树脂利用率高，故选择用 AB － 8 大孔吸附树脂分离刺玫果总
黄酮。
表 1 不同类型大孔吸附树脂对刺玫果总黄酮质量的影响
大孔树脂
类型
总黄酮含量
(%)
收率
(%) 色泽
D101 41． 3 1． 59 深褐色
NKA －9 49． 4 1． 45 棕褐色
AB －8 62． 4 1． 21 棕黄色
ZTC － 5 52． 0 1． 52 棕褐色
2． 3． 2 大孔树脂对刺玫果总黄酮吸附容量的测定 取刺玫果
150 g，加 80%乙醇回流提取 2 次，每次加醇量为 1 200 ml，每次回
流时间为 2 h，滤过，合并滤液，浓缩至小体积，平均分成 6 份，稀
释后分 6 次加于预先处理好的大孔吸附树脂柱(45 g，AB － 8 树
脂) ，每上样 1 次后，以 300 ml 水清洗，流出液及清洗液合并蒸
干，测定总黄酮含量。结果见表 2。
表 2 大孔树脂对刺玫果总黄酮吸附容量的测定
药材量 m / g 含总黄酮量 m /mg 流出总黄酮量 m /mg
25． 0 224． 0 0
25． 0 224． 0 0
25． 0 224． 0 0
25． 0 224． 0 0
25． 0 224． 0 218． 5
25． 0 224． 0 226． 3
结果表明，45 g 大孔吸附树脂可吸附刺玫果总黄酮 901． 5
mg，相当于 100． 6 g刺玫果提取液，据此推算刺玫果和大孔吸附
树脂(AB － 8 树脂)比例约为 2． 24∶ 1，但刺玫果各批含量不尽相
同，为留有余地，适合不同批次刺玫果分离，故选定刺玫果药材与
大孔吸附树脂的比例为 2 ∶ 1(具体树脂用量视刺玫果含量而
定)。
2． 3． 3 洗脱液乙醇浓度选择 取刺玫果 250 g，加 80%乙醇回流
提取 2 次，合并提取液，滤过，滤液浓缩至小体积，平均分成 5 份，
稀释后分别加于 5 支预先处理好的大孔吸附树脂柱(25 g AB － 8
大孔吸附树脂)上，以水清洗至流液无色，再分别以 30%、50%、
70%、95%乙醇溶液洗脱至流液无色，分别收集各柱洗脱液，蒸
干，得刺玫果总黄酮，观察性状并测定总黄酮含量。结果见表 3。
表 3 洗脱液乙醇浓度的选择
编号 乙醇浓度(%) 总黄酮含量(%) 刺玫果总黄酮色泽
1 30 38． 8 黄色
2 50 57． 1 棕黄色
3 70 53． 3 棕褐色
4 95 50． 5 深褐色
结果表明，50%乙醇洗脱制得的刺玫果总黄酮色泽浅，纯度
高，故选用 50%乙醇为解吸乙醇浓度。
2． 3． 4 醇洗脱量的确定 经多次实验我们发现，当醇洗量为柱床
体积的 6 倍时，就可洗至颜色较浅，而且经薄层检识，无明显黄酮
类斑点，据此确定醇洗脱量为树脂体积(柱床体积)的 6 倍。
3 讨论
曾取样品溶液及对照品溶液各 2 ml，按标准曲线的绘制项下
方法显色，结果样品与对照品显色颜色基本一致。取两种显色后
的溶液于 370 ～ 700 nm波长范围内绘制吸收曲线，结果样品与对
照品均在 510 nm 波长处有最大吸收，故确定以芦丁为对照品测
定刺玫果总黄酮含量方法可行。
从实验结果分析，应用大孔吸附树脂富集纯化工艺，刺玫果
总黄酮含量由纯化前的 23． 4%提高到 57． 1%，证明采用此法可
较好地纯化刺玫果总黄酮，而且大孔树脂吸附法具有吸附快、易
解吸，树脂再生简便等优点，更适合于工业化大生产。
参考文献:
［1］ 于玲媛，史凤英，吴景时．山刺玫果对心脏及保护心肌缺血作用的
研究［J］．中国林副特产，2005，1:16．
［2］ 白 瑶，张 蕻，张 丽，等．山玫胶囊对急性血瘀模型大鼠血液流
变学及高血脂大鼠降脂作用的研究［J］．中国药物与临床，2007，7
(6) :447．
［3］ 于玲媛，史凤英，吴景时．山刺玫果对血清胆固醇的作用研究［J］．
中国林副特产，2005，3:37．
［4］ 焦淑萍，杨春玫，初 秋，等．山刺玫果降血脂、抗氧化及保护血管
内皮功能的实验研究［J］． 北华大学学报(自然科学版) ，2005，6
(3) :228．
收稿日期:2010-05-02; 修订日期:2010-08-18
基金项目:国家林业局科技支撑计划资助(No． 2008BADBOB06 － 01)
作者简介:杨 红(1967-) ，女(汉族) ，四川乐至人，现任西昌学院生物学
副教授，硕士学位，主要从事生物资源开发和保护研究工作．
摩梭民族药清刺的热稳定性研究
杨 红
(西昌学院·轻化工学院，四川 西昌 615022)
摘要:目的 研究加热对摩梭民族药清刺的影响。方法 用差热 －热重分析(TG － DTA)对摩梭民族药清刺进行了热分析
研究。结果 清刺根、叶、茎、油的热分解分为几个阶段，其分解特征峰明显;清刺油中存在多晶类物质。结论 清刺叶、
茎、油的特征峰可作为清刺的辅助鉴别;清刺油的提取分离以及保存使用温度不宜过高;清刺油中存在不同晶型的物质
需进一步确认。
关键词:摩梭族; 清刺; 热分析; 差热 －热重分析
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 03． 069
中图分类号:R29 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)03-0665-02
清刺 Prinsepia utilis Royle，摩梭语称“青娜”，别名青刺阿那
斯、狗奶子，为蔷薇科扁核木属植物，是摩梭人民间传统中独特且
使用极为广泛的一种药用和保健植物。摩梭民间利用清刺具有
悠久的历史。最常见的是利用清刺的果实制作青娜油，直接用于
保健和食用，摩梭人还用此油作为治疗多种疾病的药物，内服以
治胃病、肝病、头晕头痛、两肋疼痛、慢性筋骨痛等;外用局部揉止
痛去瘀。用青娜油沉淀物外用治疗疮疡、丘疹、斑块等疾患，效果
十分显著。摩梭妇女对此更是情有独钟，把它作为她们的护肤必
需品，用于预防皮肤受阳光暴晒、干燥皲裂，保持皮肤柔嫩，并用
梳子蘸该油梳头发，保持头发的乌黑光亮、不折断，不脱发等。清
刺的植物学鉴别、化学成分鉴定以及药理作用的研究等方面已有
研究［1 ～ 3］，但其热稳定性的研究还未见报道。
热分析是在程序控温和一定气氛下，测量试样的某种物理性
·566·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 3 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期