全 文 ：J TCVM
年第 4 期2015
樗白皮提取物对腹泻模型小鼠抗氧化能力的影响
杨 欣 1，2，张 霞 2，刘 宇 1，王华东 1，张继瑜 1，周绪正 1，程富胜 1
（1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 农业部兽用药物创制重点实验室 甘肃省新兽药工程重点
实验室，甘肃兰州 730050；2.甘肃农业大学生命科学学院，甘肃兰州 730070）
摘 要：为研究腹泻病理状态下樗白皮提取物对机体氧化还原状态的调节功能，采用番泻叶提取物建
立小鼠药物性腹泻模型，经不同剂量樗白皮提取物治疗，对小鼠血清中 MDA、SOD、GSH、GSSG、GSH-Px 等
抗氧化指标进行测定。结果显示，模型组 MDA 含量较正常组显著升高（P<0.05），樗白皮提取物不同剂量治
疗组均低于模型组，与治疗对照组无显著差异；模型组 SOD 酶活性显著低于其他各组（P<0.01），正常对照组
与其他实验组之间无显著差异；模型组 GSH 含量显著低于正常对照组和治疗对照组（P<0.05），高剂量组和
中剂量组高于模型组（P>0.05），低剂量组与模型组无显著差异；正常对照组 GSSG 含量显著低于其他各组
（P<0.01），模型组显著高于治疗对照组和高剂量组（P<0.01），高于中剂量组和低剂量组（P>0.05）；GSH-Px
模型组均低于其他各组，除与低剂量组无显著差异外，与其他各组差异均极显著（P<0.01）。结果表明，樗白
皮提取物能够降低腹泻模型小鼠体内氧化性物质含量，提高还原酶活性及促进还原性物质生成，对机体的
氧化还原稳态具有一定的调节作用，并且与给药剂量之间存在一定的量效关系。
关键词：樗白皮提取物；腹泻，抗氧化；番泻叶；小鼠
中图分类号：S853.7 文献标志码：A 文章编号：1000- 6354（2015）04- 0005- 04
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2015.04.001
收稿日期：2015- 05- 05
基金项目：农业部现代农业肉牛牦牛体系（CARS- 38）；科技基础
性工作专项（2013FY110600- 04）；甘肃省科技支撑项
目（1204NKCA088）；兰州市科技计划项目（2010- 1- 151）
作者简介：杨 欣（1988-），女，在读硕士，研究方向：天然药物免
疫药理学。
通讯作者：程富胜，副研究员，E- mail:chengfusheng@126.com
樗白皮为苦木科(Simaroubaceae)臭椿属植物臭椿[Ailan-
thus altissima (Miller) Swingle]的干燥树皮或者根皮，是民
间常用的传统中药，在我国大部分地区均有分布 [1]，具有
清热、消炎、燥湿、止血、杀虫、止泻、治痢等功效 [2]。樗白皮
含苦楝素、鞣质、赭朴吩、臭椿苦酮、臭椿苦内酯、乙酰臭
椿苦内酯、苦木素、新苦木素等；臭椿子含油约 35%，并含
有 2，6-二甲氧基醌、臭椿苦酮、臭椿内酯、查杷任酮、苦木
素等，其叶含异槲皮苷、维生素 C 等 [3]。《陕西中草药》记
载，臭椿皮治疗急、慢性痢疾的临床治愈率可达 95%以
上，治愈速度快，平均在 2-5 d[4]。前期研究发现，樗白皮活
性成分具有抗氧化功能 [5]，笔者等在此基础上考察樗白皮
提取物对腹泻模型小鼠的抗氧化功能。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物、试剂与仪器 番泻叶水煎液（含生药 1 g/mL），
阿司匹林，樗白皮制剂（生药含量 1 g/mL）；MDA、SOD、GSH、
GSSG、GSH-Px检测试剂盒（南京建成生物公司）；T-6 分光
光度计（北京普析），其他实验室常用试剂和设备。
1.1.2 实验动物及其分组处理 昆明系小鼠 60 只，体质
量 18-20 g，随机分为 6 组，每组 10 只，分别为正常对照
组、模型组、治疗对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。
正常对照组小鼠灌胃生理盐水，0.2 mL/次，其他 5 组在禁
食 12 h 后，首先灌胃番泻叶 0.4 mL/20 g，待小鼠腹泻症
状明显出现后，进行药物治疗，治疗对照组以阿司匹林水
溶剂灌胃，0.15 mg/d，高剂量组、中剂量组、低剂量组分别
按 0.3 mL/20 g、0.2 mL/20 g、0.1 mL/20 g 灌胃樗白皮制
剂，连续 3 d。采血并分离血清，断颈处死小鼠。
1.2 方法
1.2.1 小鼠血清中丙二醛（MDA）含量测定 MDA 含量测
定采用 TBA 法，参照试剂盒说明书进行，利用下列公式计
算被测血清样品中 MDA 含量（nmol/mL）。
MDA 含量=（测定管吸光度-测定空白管吸光度）
（标准管吸光度-空白管吸光度） ×标
准品浓度（10 nmol/mL）×样本测定前稀释倍数
1.2.2 小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 超
氧化物歧化酶（SOD）活力测定采用黄嘌呤氧化酶法，按试
剂盒说明书进行，并定义每毫升反应液中 SOD 抑制率达
50%时所对应的 SOD 量为一个 SOD 活力单位 (u)，通过下
列公式计算被测样品中的 SOD 活力。
SOD 活力/u·mL-1= 对照管吸光度-测定吸光度
对照管吸光度
÷50%
×反应体系稀释倍数×样品测定前稀释倍数
1.2.3 小鼠血清中 GSH含量测定 按试剂盒说明书进行，以
420 nm为波长测定 GSH含量，样品中 GSH含量按下式计算。
GSH含量/μmol·mL-1=测定管吸光度-测定空白管吸光度
标准管吸光度-空白管吸光度
×标准管浓度20 μmol/L ×GSH分子量（307）×样品测定前稀释倍数（5）
调
查
研
究
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1.2.4 小鼠血清中 GSSG 含量测定 按试剂盒说明书在
412 nm处进行测定，按下式计算样品中 GSSG含量。
GSSG/μmol·L -1= 测定管吸光度-测定空白管吸光度
标准管吸光度－空白管吸光度 ×
标准管浓度
50 μmol/L ×GSSG分子量（613）×样品测定前稀释倍数
1.2.5 小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测
定 按试剂盒说明书在 450 nm 处进行测定。每 0.1 mL 血
清在 37 ℃反应 5 min，扣除非酶促反应作用，使反应体系
中 GSH 浓度下降 1 μmol/L 为一个酶活性单位(u)。
1.2.6 结果统计 采用 SPSS13.0统计软件，用单因素方差
分析法比较组间差异，实验数据均以 X±S 表示。
2 结果
2.1 小鼠血清中丙二醛（MDA）含量测定结果
小鼠血清中丙二醛（MDA）含量测定结果见图 1。由图
1 可见，模型组 MDA 含量显著高于治疗对照组和正常组
（P<0.05）；不同剂量治疗组 MDA 含量均低于模型组，治疗
对照组低于不同剂量治疗组，但无显著差异；试验药物中
剂量组显著低于高剂量组和低剂量组。
/nmol·mL-1
图 1 小鼠血清中丙二醛（MDA）含量测定结果
Fig.1 MDA content in mice serum
2.2 小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性测定结果
小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性测定结果见
图 2。由图 2 可见，模型组 SOD 活性显著低于其他各组
（P<0.01），正常对照组 SOD 活性高于治疗对照组及各试
验药物组，但无显著差异；治疗对照组 SOD 活性高于其他
试验药物组，无显著差异；试验药物组 SOD 活性高剂量
组>中剂量组>低剂量组，各组间无显著差异。
/u·mL-1
图 2 小鼠血清中过氧化物歧化酶（SOD）活性测定结果
Fig.2 SOD activities in mice serum
2.3 小鼠血清中还原型谷胱甘肽（GSH）含量测定结果
小鼠血清中还原型谷胱甘肽（GSH）含量测定结果见
图 3。由图 3 可知，模型组 GSH 含量显著低于正常对照组
（P<0.01）和治疗对照组（P<0.05）；正常对照组 GSH 含量显
著高于试验药物各组（P<0.01）和治疗对照组（P<0.05）；治疗
对照组高于试验药物组，与高剂量组和中剂量组无差异显
著性（P>0.05），与低剂量组比较差异显著（P<0.05）。
/μmol·mL-1
图 3 小鼠血清中还原型谷胱甘肽（GSH）含量测定结果
Fig.3 GSH content in mice serum
2.4 小鼠血清中氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量测定结果
小鼠血清中氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量测定结果见
图 4。由图 4 可知，正常对照组 GSSG 含量极显著低于其
他各组（P<0.01）；模型组显著高于治疗对照组和高剂量组
（P<0.01）、中剂量组、低剂量组（P>0.05）；高剂量组低于中
剂量组和低剂量组，高于治疗对照组，但无显著性差异；中
剂量组和低剂量组无显著差异，但显著高于治疗对照组
（P<0.05）和正常对照组（P<0.01）。
/μmol·mL-1
图 4 小鼠血清中氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量测定结果
Fig.4 GSSG content in mice serum
2.5 小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定
结果
血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定测定
结果见图 5。由图 5 可知，模型组 GSH-Px 酶活性均低于
其他各组，除与低剂量组无显著差异外，与正常对照组和
治疗对照组差异极显著（P<0.01），与高剂量组和中剂量
组差异显著（P<0.05）；高剂量组和中剂量组 GSH-Px 酶活
性低于治疗对照组，高于低剂量组，但均无差异显著性；低
剂量组 GSH-Px 活性显著低于治疗对照组（P<0.05）。
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Effect of extract from Ailanthus altissima on antioxidant function of diarrhea model in mice
YANG Xin1,2, ZHANG Xia2, LIU Yu1, WANG Hua-dong1, ZHANG Ji-yu1, ZHOU Xu-zheng1, CHENG Fu-sheng1
（1. Key Laboratory of Veterinary Pharmaceutics Discovery of Ministry of Agriculture, Key Laboratory of New Animal Drug
Project of Gansu Province, Lanzhou Institute of Husbandry and Pharmaceutical Sciences, Chinese Academy of Agricultural
Sciences, Lanzhou Gansu 730050; 2. College of Life Sciences and Technology, Gansu Agricultural University,
Lanzhou Gansu 730070, China)
Abstract：In order to study the biological functions of extract from Ailanthus altissima on regulating redox state under
pathological conditions, the diarrhea model mice were established by using senna extract and the physiological indexes of MDA,
SOD, GSH, GSSG and GSH-Px were detected after treating with different doses of Ailanthus altissima extract. The results showed
that the content of MDA in model group was significantly higher than that in control group (P<0.05), the content of MDA in different
treated groups were all lower than that in model, and the difference was not significant among the different treated groups and
treatment control group; the activities of SOD in the model group was lower than the other groups, and there was no significant
difference between the control group and the other groups except model group. GSH content in model was significantly lower than
that in control and treatment control groups (P<0.05) and lower than that in high does and middle does groups (P>0.05), and was
equivalent to that in low does group. GSSG content of control was lower significantly than that of the other groups (P<0.01), the
/u·mL-1
图 5 小鼠血清中谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）活性测定结果
Fig.5 GSH-Px activities in mice serum
3 讨论
番泻叶致腹泻有效成分主要为番泻苷 A 和 B，以番泻
苷 A 作用为主。番泻苷能兴奋肠平滑肌上的 M-受体，使
肠蠕动增加，同时又可抑制肠细胞膜上 Na+、K+-ATP 酶，
阻碍 Na+跨肠壁转运，抑制肠道对葡萄糖、钠和水的吸收，
使肠内渗透压增高，保留大量水分，引起腹泻。番泻叶蒽苷
从小肠吸收后，经肝脏转化为苷元，刺激骨盆神经丛，增加
肠蠕动而致泻 [6]。
血清 SOD、GSH-Px 活性和 MDA、GSH、GSSG 含量是反
映机体氧化还原动态平衡的重要指标，其中 SOD和 GSH-Px
是动物体内重要的抗氧化酶，具有清除超氧化因子自由基、
保护生物膜和生物大分子免受损伤的作用；GSH 是生物体
内还原性物质，可以提供电子，通过氧化自身来保护其他易
氧化物质；MDA 是一种脂质过氧化物，是过氧化过程中中
间代谢产物，其含量反映了机体细胞受自由基攻击的程度；
GSSG是氧化型谷胱甘肽，是还原型 GSH被氧化后的产物，
在机体内与 GSH于不同的内环境条件下可以进行转化。实
验结果显示，腹泻模型小鼠血清中 MDA 含量升高，用樗白
皮提取物治疗后其含量降低，高、中剂量效果接近，与治疗
对照组比较无显著性差异。模型组 SOD活性显著低于其他
各组，经治疗后，治疗对照组 SOD活性升高明显，接近正常
对照组；不同剂量樗白皮提取物组 SOD活性明显升高，虽低
于治疗对照组，但无显著性差异，并且各剂量组之间也无显
著性差异。模型组 GSH含量显著低于正常组，经治疗后，不
同剂量樗白皮提取物组 GSH水平升高，但效果不及治疗对
照组，高剂量组和中剂量组效果相当，并均优于低剂量组。
模型组 GSSG 含量均高于其他各组，治疗后小鼠血清中
GSSG含量降低，高剂量组效果优于中剂量组和低剂量组，
后两者效果相当。小鼠 GHS-Px活性经治疗后明显增强，尤
其是高剂量组和中剂量组较模型组具有显著性差异。从实
验中各指标间的测定结果分析可知，经过药物治疗后，小鼠
体内抗氧化性指标与促氧化性指标的变化存在着一定相关
性，当抗氧化指标升高时，具有氧化作用的指标相应降低。
GSH、GSH-Px之间抗氧化作用呈现出同步性，而与 GSSG的
变化趋势恰恰相反。以上结果提示，樗白皮提取物在小鼠发
生腹泻时能够抑制机体氧化反应的进一步发生，调节氧化
还原的动态平衡。
参考文献：
[1] 中国科学院中国植物志编委会 [M].中国植物志 .北京：
科学出版社，1997.
[2] 程富胜，张 霞，崔 燕 .樗白皮提取物对溃疡性小鼠
脾脏与血清中腺苷脱氨酶的影响[J].中兽医医药杂志，
2008，27（4）：15-17.
[3] 南京中医药大学 .中药大辞典 [M].上海：上海科技出版
社，2006.
[4]《陕西中草药》陕西省革命委员会卫生局商业局 .陕西
中草药[M].北京：北京：科学出版社，1971.
[5] 程富胜，张 忠，张 霞，等.椿根皮提取物对结肠湿热
型小鼠抗氧化作用的研究//第二届中国兽医临床大会
论文集（下）[A].2010：1375-1379.
[6] 沈映君 .中药药理学 [M].上海：上海科学技术出版社，
1997：73.
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GSSG content of model group was significantly higher than that of the treat control and high does groups (P<0.01), and higher
than that of the middle does and low does groups (P>0.05). GSH-Px activities of the model was lower than that of other groups
except low does group (P<0.01). These results showed that Ailanthus altissima extract could decrease oxidizing substance in
diarrhea mice, improve reductase activity and the reducing substances, and could regulate the oxidation -reduction dynamic
balance with a dose-effect relativity.
Key words：Ailanthus altissima extract; diarrhea; anti-oxidation; senna; mice
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
家兔实验性豆状囊尾蚴病不同感染时期组织病理学变
化规律研究
范希萍，孙晓林，王雯慧，尚清炎
（甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070）
摘 要：为研究家兔感染豆状囊尾蚴后其实质器官的组织病理学变化，用不同数量六钩蚴人工感染家
兔（分为高剂量感染组和低剂量感染组，同时设对照组，每组各 6 只），隔离饲养 2 个月，分别在感染 7 d、30 d
和 60 d 捕杀，取肝脏，经 10%的中性福尔马林溶液固定，制作石蜡切片，H.E 染色，光镜观察。结果表明，感
染后 7 d，高剂量组兔有死亡，低剂量组兔出现腹泻、消瘦，剖检可见肝脏肿大、有出血点，肠壁菲薄；镜检可
见中央静脉和肝窦扩张、充血，肝细胞空泡变性，间质中可见六钩蚴。感染 30 d 后，高、低剂量组家兔均消
瘦，肝脏仍肿大、色泽变淡、有散在出血点，表面和切面均见数量不等未成熟的囊尾蚴；镜下可见虫体移行
道，其中有大量的嗜酸性粒细胞和巨噬细胞，含铁血黄素沉积，肝细胞发生严重的空泡变性；间质中观察到
发育程度不同的豆状囊尾蚴，囊壁、囊腔和虫体已经形成，头节尚未发育完全。感染 60 d后，各剂量组家兔肝
脏肿大消失、呈恢复状态，表面有灰黄色或灰白色结节，成熟囊尾蚴从肝脏中移行出来进入腹腔，黏附在大网膜
和肠系膜上；肝脏增生明显，肝细胞空泡变性和颗粒变性，但较感染中期程度轻，较感染初期严重，肝细胞分裂
增殖，可见双核和三核的肝细胞；形成特异性肉芽肿，肉芽肿中心呈典型的凝固性坏死。
关键词：家兔；实验性豆状囊尾蚴病；病理变化
中图分类号：S855.9 文献标志码：A 文章编号：1000- 6354（2015）04- 0008- 05
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2015.04.002
收稿日期：2015- 04- 08
基金项目：甘肃省科技支撑计划（1104NKCA082）“兔豆状囊尾蚴
病重组亚单位疫苗及 ELISSA检测试剂盒的研制”
作者简介：范希萍（1979-），女，实验师，主要从事基础兽医学研
究，E- mail:fanxip@gsau.edu.cn
通讯作者：尚清炎（1963-），男，兽医师，主要从事临床兽医学研
究，E- mail:shang_qy@live.cn
豆状囊尾蚴病是豆状带绦虫的中绦期幼虫——豆状
囊尾蚴寄生于家兔等啮齿类动物的肝脏、大网膜、肠系膜
和腹腔内所引起的一种绦虫蚴病，其终末宿主为犬和狐
狸，偶尔也见于猫 [1,2]。豆状囊尾蚴轻度感染时，病兔仅表
现精神沉郁，食欲下降，消化不良，生长迟缓和消瘦；严重
感染时引起家兔肝脏损害，导致消化紊乱，腹围增大，眼结
膜苍白，甚至死亡 [3,4]。该病呈世界性分布 [1-5]，我国各地均
有发生，感染率 14%~100%不等，平均感染率达 40%左右，
死亡率为 4%～23.69%[6,7]。豆状囊尾蚴病虽然不能引起家
兔大批死亡，但豆状囊尾蚴在兔体内移行对肝脏有很大的
损害作用，虫体的代谢产物及囊壁破裂后囊液被吸收，均
可引起自体中毒、抗病力减弱、消瘦，容易继发兔瘟、巴氏
杆菌病等，生长缓慢，饲料报酬降低 16.7%，经济效益降低
87.01% ，造成严重经济损失。目前较系统的研究仅见于自
然感染豆状囊尾蚴和豆状带绦虫后组织结构及病理组织
学变化的观察。笔者等采用人工感染的方法建立了家兔感
染六钩蚴动物模型，研究家兔感染六钩蚴后实质器官的动
态病理解剖学变化，以期为阐明豆状囊尾蚴的致病作用和
机理提供参考。
1 材料与方法
1.1 试剂与设备
Leica 切片机（德国莱卡公司）；KD－H 摊片机（浙江省
金华市科迪仪器设备有现公司生产）；电热恒温培养箱（上
海跃进医疗器械厂）；Olympus CX31 光学显微镜及 Olympus
CX31 显微成像系统（日本 Olympus公司）；H.E 染液（甘肃
农业大学动物医学院实验室配制）。
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