全 文 ：现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2014, Vol.30, No.4
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山莓叶抑制兔离体肠运动活性物质的
提取及活性稳定性研究

常云佩 1，刘晓娟 1，周丽萍 1，熊平 2，陈雪香 1，曹庸 1
（1.华南农业大学食品学院，广东广州 510642）（2.华南农业大学资源环境学院，广东广州 510642）
摘要：本研究以山莓叶为原料，以兔离体肠运动为模型，80%乙醇提取后采用 4 种不同极性溶剂进行提取，筛选具有抗腹泻的
活性组分，并考察温度、pH、光质、光照时间和脱鞣质处理对粗提物抑制兔离体肠运动活性的影响。结果表明：山莓叶抑制兔离体
肠运动的活性物质主要在乙酸乙酯层，其它层提取物的活性大小依次为：石油醚层>水层>正丁醇层>氯仿层；山莓叶醇提物在
30 ~60 ℃ ℃范围内抑制兔离体肠运动活性稳定，高温（90 ℃和120 ℃）条件下离体肠的张力增量变化率较30 ℃处理分别下降了15.43%
和 32.45%；pH对抑制肠运动活性影响较大，酸性条件下活性最高，其次是中性，碱性条件下抑制其活性，pH 12处理后张力增量变
化率仅为 11.90%；不同光质和不同光照时间处理后仍具有极显著抑制兔离体肠运动的作用（P<0.01）；脱鞣质处理会使山莓叶醇提物
抑制肠运动活性减弱，说明鞣质可能是山莓叶抗腹泻活性成分之一。
关键词：山莓叶；兔离体肠；提取物；抗腹泻；稳定性
文章篇号：1673-9078(2014)4-85-92
Inhibitory Effect of Rubus corchorifolius Leaves Extract on the Movement
of Isolated Intestinal from Rabbit and Its Active Stability
CHANG Yun-pei1, LIU Xiao-juan1, ZHOU Li-ping1, XIONG Ping2, CHEN Xue-xiang1, CAO Yong1
(1.College of Food Science, South China Agriculture University, Guangzhou 510642, China)
(2.College of Resource Environment, South China Agriculture University, Guangzhou, 510642, China)
Abstract: Using the movement of isolated intestinal from rabbit as the model, the extraction of anti-diarrhea active components from
Rubus corchorifolius leaves and their active stability were investigated. The active components were extracted with 80% ethanol, followed by
five different polar solvents. The effects of temperature, pH, light quality, illumination time, and the tannins removal treatment on the activity of
the extracts were also studied. The results showed that the active components mainly existed in ethyl acetate layer, the sequence of the extract
activity in different solvent layer was petroleum ether layer>water layer>n-butanol layer>chloroform layer. The ethanol extract of Rubus
corchorifolius leaves were stable in the range of 30~60 ℃. But at high temperature of 90 and 120 , the tensional variation percentage of ℃ ℃
isolated intestinal from rabbit decreased by 15.43% and 32.45%, respectively. pH showed significant influence on the activity, and the highest
activity was found under acidic conditions, followed by neutral and alkaline conditions. The tensional variation percentage was only 11.90% at
pH 12. The ethanol extract after different light qualities and different illumination time treatments still had high activity (P<0.01), while the
activity was decreased by tannin removal treatment, indicating tannin might be one of the components for anti-diarrheal activity in Rubus
corchorifolius leaves.
Key words: Rubus corchorifolius leaves; isolated intestinal from rabbit; extract; anti-diarrhea; stability

腹泻是世界性公共卫生问题，据 2013 年 4 月世
收稿日期：2013-10-13
基金项目：广东省自然科学基金博士启动项目（粤科基办字[2011]3 号）；
高等学校博士学科点专项科研基金联合资助课题（20114404120022）；广东
省科技计划农业公关项目（2012A020602038）；广东高校优秀青年创新人才
培养计划项目（育苗工程）（LYM11027）
作者简介：常云佩（1989-），女，在读研究生，研究方向为食品化学与营养
通讯作者：刘晓娟（1980-），女，博士，讲师，研究方向为食品化学与营养
界卫生组织的调查显示，全球每年约有 17 亿例腹泻
病，每年约有 76 万五岁以下儿童死于腹泻病。同时，
腹泻是常见的畜禽多发病，业已成为现代畜牧业发展
的重要障碍。抗生素是治疗腹泻的主要措施，但随着
抗生素的大量使用和不合理滥用，出现了病原菌抗药
性增强、畜禽产品药物残留增加等问题，从而间接危
害人体健康。欧盟从 2006 年 1 月起，全面禁止将抗生
素作为畜禽生长促进剂。2012 年美国和日本也先后出
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.04.049
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台了限制或者禁止抗生素在饲料中使用的规定。因此
寻找高效、安全的药物已成为防治腹泻迫切需要解决
的问题[1~2]。我国中草药种类多，来源广泛，中草药来
替代抗生素是防治腹泻的新领域。中草药含有某些特
异性生理活性物质，如挥发油、有机酸、酚类物质、
萜类成分、生物碱和多肽等，长期使用被认为是相对
安全、经济的抗生素替代物[3]。
山莓（Rubus corchorifolius L f）是蔷薇科悬钩子
属植物，作为药用植物在国内外已有很长的历史，是
湘西、鄂西北等地区少数民族长期用来治疗腹泻的传
统中草药。山莓的根、茎、叶、果实皆可入药，具有
消积食、止泻痢、解毒、活血、调经、止血等功效[4]。
比较研究山莓根、茎、叶三个部位提取物对兔十二指
肠运动的影响，表明叶的抗腹泻效果最强，且山莓叶
提取物对兔十二指肠、空肠、回肠、结肠的运动均有
抑制作用，从而揭示山莓叶可能通过抑制肠管运动的
张力使肠管内容物停留时间延长起到抗腹泻的作用
[5]。山莓叶提取物对番泻叶、蓖麻油和致泻大肠埃希
氏菌导致的小鼠腹泻均有显著抑制作用，表明其是一
种很好的抗腹泻药物[6]。离体肠模型是国内外最常用
的 研究 腹泻 的模 型之 一， 如韩 国当 地草 药
Soonkijangquebo、印度抗腹泻秘方山苍子多花蔷薇
（Litsea polyantha）树皮、中草药吴茱萸（Evodiae
fructus）等都运用了离体肠模型研究抗腹泻作用[7~9]。
但迄今为止，山莓叶起抗腹泻的主要活性物质尚不清
楚，并且活性物质的作用效果容易受到外界因素（光
照、温度和 pH 等）的干扰，如高温和强光条件下，
儿茶止泻霜剂的抗腹泻效果显著降低[10]；高温条件下
山莓叶提取物对大肠杆菌的抑菌效果明显下降[11]；短
乳杆菌分泌的抑菌物质的抑菌活性随 pH 值的升高呈
显著下降趋势[12]。
本研究以山莓叶为原料，以兔离体肠运动为模型，
采用 4 种不同极性的溶剂进行提取，筛选抗腹泻活性
最强的组分，并考察了温度、pH、光质、光照时间和
脱鞣质处理对粗提物抑制兔离体肠运动活性的影响，
为深入开展山莓叶抗腹泻活性物质的分离鉴定及其作
用机理打下研究基础。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验材料
新西兰兔，雌雄不限，4~6 月，体重 2~2.5 kg，
购于南方实验动物中心，合格证号为 SCXK（粤）
2008-0020。
1.1.2 药品与试剂
山莓叶采于湖南张家界；无水乙醇，分析纯，购
自天津市富宇精细化工有限公司；氯化钠、氯化钾、
氯化钙、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、氯化镁、葡萄糖，
盐酸、氢氧化钠，分析纯，购自天津市福晨化学试剂
厂。
1.1.3 仪器
BL-420S 型生物信号采集处理系统，成都泰盟科
技有限公司；FT-100 型张力传感器，成都泰盟科技有
限公司；FW100 型高速万能粉碎机，天津市华鑫仪器
厂；AL 104 电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）
有限公司；R204 旋转蒸发器，上海申生科技有限公司；
SHB 循环水式多用真空泵，河南省予华仪器有限公
司；Sim FD8-6P 冷冻干燥机，西盟国际公司；WZ-100
恒温水浴锅，上海申生科技有限公司；pH 计，赛多利
斯科学仪器（北京）有限公司；KQ-500B 型超声波清
洗器，昆山市超声仪器有限公司；电热高压蒸汽灭菌
锅，江阴滨江医疗设备厂。
1.2 实验方法
1.2.1 溶剂提取及药液配制
山莓叶粗提物的制备：将山莓叶阴干去杂，粉碎，
过 80 目筛。称取适量山莓叶粗粉置于瓶中，按料液比
1:10 加入 80%乙醇，密闭后常温浸提 48 h，倒出浸提
液，重复浸提 1 次，合并浸提液并过滤，用旋转蒸发
仪于 60 ℃、120 r/min 浓缩至原体积的 1%，冷冻干燥
72 h（-45 ℃，-30 Pa）得山莓叶浸膏。将得到的山莓
叶浸膏先用80%乙醇水溶液溶解，然后依次用石油醚，
氯仿、乙酸乙酯、正丁醇 4 种有机溶剂反复多次萃取，
将萃取液和最后的水层分别浓缩，冷冻干燥，分别得
石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层 5
种萃取物。分别取 4 g 粗提物和 5 种萃取物用 10 mL
含 30%乙醇的台氏液溶解，配制成浓度为 0.4 g/mL 的
药液。
1.2.2 兔离体肠模型的建立[13]
1.2.2.1 离体肠段的制备
含 30%乙醇的台氏液配制：称取氯化钠 8.0 g、氯
化钾 0.2 g、氯化钙 0.2 g、碳酸氢钠 1.0 g、磷酸二氢
钠 0.05 g、氯化镁 0.1 g、葡萄糖 1.0 g，加 300 mL 无
水乙醇后，用蒸馏水定容至 1 L。
实验前将家兔禁食 24 h，用静脉注射空气法使家
兔死亡，迅速剖开腹腔，距胃幽门 5 cm 为起点，剪取
十二指肠约 8 cm，放入 38 ℃台氏液中，剪成约 2~3 cm
的肠段。将离体肠段放在通气的 38 ℃台氏液中，充
分洗去内容物后，移入 38 ℃新鲜台氏液中通气备用。
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1.2.2.2 观察方法和指标
在（38±0.5）℃条件下，不断往台氏液中通气，
用生物信号采集处理系统记录肠段收缩曲线。观察在
正常情况下离体肠管的自动节律性收缩稳定后，然后
加入 100 μL 1.2.1 中配置好的药液，以收缩张力（g）、
收缩频率（次/min）为指标，记录一段时间。在加样
前后各选 10 个波形，计算张力增量和频率。
加样前张力
加样后张力）（加样前张力张力增量变化率 100- 
时间/波形数频率 

1.2.3 不同因素处理对山莓叶粗提物抑制兔离
体肠管运动的影响
1.2.3.1 不同温度对山莓叶粗提物抑制兔离体肠管运
动的影响
取 1.2.1 配置好的药液 4 mL，分装到四个小玻璃
瓶中，分别置于 30 ℃、60 ℃、90 ℃的水浴条件和
120 ℃热风干燥各处理 3 h 后，用兔离体肠模型来测定
提取物的活性。
1.2.3.2 不同光质和光照时间对山莓叶粗提物抑制兔
离体肠管运动的影响
取 1.2.1 配置好的药液 6 mL，分装到六个小玻璃
瓶中，将药液分别置于白炽灯和紫外光下，各处理 6 h、
9 h、12 h，另取 1 mL 药液放于暗室处理 12 h，用兔
离体肠模型来测定提取物的活性。
1.2.3.3 不同 pH 对山莓叶粗提物抑制兔离体肠管运
动的影响
取 1.2.1 配置好的药液 4 mL，分装到四个小玻璃
瓶中，用稀盐酸和稀氢氧化钠将 pH 值分别调至 3、7、
10、13，分别取 1 mL，用兔离体肠模型来测定提取物
的活性。
1.2.3.4 脱鞣质处理对山莓叶粗提物抑制兔离体肠管
运动的影响
称取粗提物样品 0.5 g，用蒸馏水充分溶解，加入
2%~5%明胶溶液，不再产生沉淀表示粗提物已充分沉
淀，静置，过滤除去沉淀，浓缩滤液后，加入乙醇使
含量达 75%以上，以除去过量明胶。脱鞣质层用兔离
体肠模型来测定提取物的活性。
1.2.4 数据处理
用 SAS 统计分析软件（v8）处理，采用配对实验
设计，实验数据以平均数±标准差表示，组间数据采
用 t 检验。采用单因素方差分析不同因素处理组之间
的张力增量变化率差异性（P<0.05），差异显著采用不
同字母表示，差异不显著采用相同字母表示。
2 结果与分析
2.1 山莓叶抑制兔离体肠运动活性物质的提
取




图1 山莓叶不同提取物加入前后兔离体肠的运动波形图（↓表
示加样）
Fig.1 Movable waving pattern of isolated intestinal from rabbit
before and after adding different Rubus corchorifolius extracts
注：a：粗提物；b：石油醚层；c：氯仿层；d：乙酸乙酯
层；e：正丁醇层；f：水层；g：30%乙醇。
为了提高山莓叶粗提物和各萃取物的溶解度，选
择含有 30%乙醇的台氏液作为溶剂。山莓叶粗提物、
5 种萃取物和含 30%乙醇的台氏液对兔离体肠运动影
响的效果如图 1 所示。由图 1 可以看出，含有 30%乙
醇的台氏液加入后，兔离体肠管的收缩张力没有明显
的改变，表明用含 30%乙醇的台氏液来溶解各层萃取
物不会对实验结果造成影响，以下实验均采用含 30%
乙醇的台氏液作为溶剂。
在加入山莓叶粗提物后，兔离体肠收缩波幅度明
显减小，说明山莓叶中存在活性很强的抗腹泻物质，
山莓叶粗提物具有显著的抑制兔离体肠运动的效果。
为了进一步分析山莓叶中抗腹泻的活性物质，采用 4
种不同极性的溶剂对山莓叶粗提物进行萃取，并将冻
干后的萃取物也用含 30%乙醇的台氏液溶解。加入各
萃取物后，乙酸乙酯层样品兔离体肠波形图变化最明
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显，离体肠收缩波幅度明显减小，而石油醚层、氯仿
层、正丁醇层、水层提取物加入后，波形图无明显变
化。
根据以上波型图，山莓叶不同提取物对兔离体肠
管张力和频率的变化如表 1 所示，并利用 SAS 软件进
行显著性差异分析，加入粗提物后，兔离体肠管的收
缩张力明显减小，与给药前比较呈极显著差异
（P<0.01），说明山莓叶粗提物具有较强抑制肠蠕动的
作用效果。加入乙酸乙酯层提取物前后的肠管张力差
异均极显著（P<0.01），其它各层提取物（石油醚层、
氯仿层、正丁醇层、水层）和 30%乙醇加入前后差异
均不显著（P>0.05），各提取物对其频率的影响均不显
著（P>0.05）。
表1 不同山莓叶提取物对兔离体肠管张力和频率的影响
（ x ±s，n=10）
Table 1 Effects of different Rubus corchorifolius extracts on the
tension and frequency of isolated intestinal from rabbit
样品
张力/g 频率/次/分
加样前 加样后 加样前 加样后
粗提物 2.81±0.09 1.11±0.08** 12.28±0.77 12.16±0.11Δ
石油醚层 3.12±0.26 2.59±0.12Δ 13.88±0.43 13.04±1.10Δ
氯仿层 3.17±0.07 2.98±0.21Δ 12.80±0.25 12.80±0.58Δ
乙酸乙酯层 3.23±0.21 0.87±0.04** 18.28±0.46 17.78±0.33Δ
正丁醇层 1.30±0.05 1.21±0.03Δ 21.86±0.67 21.00±0.14Δ
水层 2.12±0.04 1.90±0.06Δ 20.00±0.51 20.28±0.48Δ
30%乙醇 2.77±0.04 2.62±0.14Δ 13.80±0.32 13.64±0.36Δ
注：**表示与给药前比较差异极显著（P<0.01）；Δ表示与
给药前比较无显著差异（P>0.05）。

图2 山莓叶不同提取物对兔离体肠管张力增量变化率的影响
Fig.2 Effects of different Rubus corchorifolius extracts on the
tensional variation percentage of isolated intestinal from rabbit
2.2 不同因素处理对山莓叶粗提物抑制兔离
体肠管运动活性的影响
2.2.1 不同温度对山莓叶粗提物抑制兔离体肠
管运动的影响
将山莓叶粗提物用不同温度处理后，其抑制作用
受到了不同程度的影响，说明山莓叶中抑制兔离体肠
运动的有效成分在温度的影响下受到了不同程度的破
坏（如图 3）。经 30 ℃，60 ℃处理后的山莓叶粗提物
在加入 30 s 后，肠管的收缩张力趋近于一条直线，说
明山莓叶粗提物经 30 ℃和 60 ℃处理后仍具有很高的
抑制肠蠕动活性。当温度达到 90 ℃时，加样后离体
肠收缩波幅度变化较 30 ℃和 60 ℃处理的样品有所
缓和，而经 120 ℃高温处理 3 h 加样后离体肠收缩波
幅度没有明显变化，说明在高温条件下（>90 ℃），山
莓叶抑制兔离体肠运动的有效活性成分遭到了破坏。


图3 不同温度对山莓叶粗提物抑制兔离体肠运动的影响（↓表
示加样）
Fig.3 Effects of different temperatures on the movement of
isolated intestinal from rabbit before and after adding Rubus
corchorifolius extracts
注：a：30 ℃处理 3 h；b：60 ℃处理 3 h；c：90 ℃处理 3
h；d：120 ℃处理 3 h。
表2 不同温度对山莓叶提取物抑制兔离体肠管张力和频率影
响（ x ±s，n=10）
Table 2 Effects of different temperatures on the tension and
frequency of isolated intestinal from rabbit before and after
adding Rubus corchorifolius extracts
样品
张力/g 频率/次/分
加样前 加样后 加样前 加样后
30 ℃处理 2.81±0.09 1.41±0.18** 16.28±0.77 15.86±0.41Δ
60 ℃处理 1.04±0.06 0.57±0.08** 15.88±0.23 15.34±0.20Δ
90 ℃处理 1.57±0.05 1.03±0.23Δ 14.97±0.49 14.80±0.53Δ
120 ℃处理 1.67±0.11 1.38±0.14Δ 15.28±0.66 14.98±0.43Δ
30%乙醇 2.77±0.04 2.66±0.10Δ 15.80±0.62 15.64±0.56Δ
注：**表示与给药前比较差异极显著（P<0.01）；Δ 表示
与给药前比较无显著差异（P>0.05）。
利用 SAS 软件进行加样前后兔离体肠管张力和
频率显著性差异分析（表 2），30 ℃和 60 ℃处理的山
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莓叶粗提物加样前后的肠管张力差异均极显著
（P<0.01），90 ℃和 120 ℃处理的山莓叶粗提物加样
前后的肠管张力差异均不显著（P>0.05），尤其是高温
120 ℃处理后的张力变化最小，各处理组对其频率的
影响均不显著（P>0.05）。因此，山莓叶粗提物抑制兔
离体肠运动的有效成分 30 ~60 ℃ ℃范围内活性稳定，
但不耐高温，经 90 ℃处理后活性下降，而 120 ℃处
理后，抑制肠蠕动的活性已基本丧失。
不同温度对兔离体肠管张力增量变化率的影响如
图 4 所示。经 30 ℃和 60 ℃处理 3 h 后的样品加入后，
兔离体肠管运动张力增量变化率分别为 49.82%和
45.19%，表现出很强的抑制兔离体肠运动的活性。经
90 ℃处理 3 h 后的样品加入后，张力增量变化率为
34.39%，与 30 ℃和 60 ℃处理后样品有显著差异
（P<0.05），说明 90 ℃处理对山莓叶抑制兔肠蠕动的
活性有所减弱。120 ℃处理后样品加入后，兔离体肠
管张力增量变化率较 30 ℃处理降低了 32.45%，山莓
叶抑制兔离体肠蠕动的活性受到了抑制。

图4 不同处理温度对兔离体肠管张力增量变化率的影响
Fig.4 Effects of different temperatures on the tensional
variation percentage of isolated intestinal from rabbit
2.2.2 不同 pH 对山莓叶粗提物抑制兔离体肠
管运动的影响
不同 pH 处理后的山莓叶粗提物对兔离体肠运动
的影响如图 5 所示。经 pH 3 和 pH 7 处理后样品加入
后，兔离体肠收缩波幅度逐渐下降，并可以持续降低
兔离体肠管的收缩张力。而 pH 10 和 pH 13 处理后的
粗提物样品加样后，离体肠收缩波幅度与加样前相比，
已几乎不发生变化，说明在 pH 10 和 pH 13 的处理条
件下，山莓叶中抑制兔离体肠运动的活性物质受到影
响而失去活性。
利用 SAS 软件进行加样前后兔离体肠管张力和
频率显著性差异分析（表 3），与给药前相比，pH 3
和 pH 7 处理的山莓叶粗提物加样前后，肠管张力差异
均极显著（P<0.01），而 pH 10 和 pH 13 处理的山莓叶
粗提物加样前后的肠管张力差异均不显著（P>0.05），
各处理组对其频率的影响均不显著（P>0.05）。因此，
山莓叶粗提物抑制兔离体肠运动的有效成分酸性条件
下的活性最高，中性条件下的活性次之，碱性条件下
丧失活性。


图5 不同pH对山莓叶粗提物抑制兔离体肠运动的影响（↓表
示加样）
Fig.5 Effects of different pH on the movement of isolated
intestinal from rabbit before and after adding Rubus
corchorifolius extracts
注：a：pH 3；b：pH 7；c：pH 10；d：pH 13。
表3 不同pH对山莓叶提取物抑制兔离体肠管张力和频率影响
（ x ±s，n=10）
Table 3 Effects of different pH on the tension and frequency of
isolated intestinal from rabbit before and after adding Rubus
corchorifolius extracts
样品
张力/g 频率/次/分
加样前 加样后 加样前 加样后
pH 3处理 1.82±0.18 0.94±0.22** 16.28±0.77 16.16±0.41Δ
pH 7处理 1.47±0.14 0.81±0.08** 14.88±0.43 15.04±1.10Δ
pH 10处理 0.98±0.04 0.77±0.05Δ 14.80±0.25 14.80±0.58Δ
pH 13处理 2.10±0.09 1.85±0.06Δ 14.28±0.46 14.38±0.33Δ
注：**表示与给药前比较差异极显著（P<0.01）；Δ 表示
与给药前比较无显著差异（P>0.05）。

图6 不同pH处理对兔离体肠管张力增量变化率的影响
Fig.6 Effects of different pH on the tensional variation
percentage of isolated intestinal from rabbit
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不同 pH 处理对兔离体肠管张力增量变化率的影
响如图 6 所示。当 pH 3 和 pH 7 处理后的样品加入后，
兔离体肠管的张力增量变化率分别为 48.35%和
44.90%，pH 3 处理与 pH 7 处理之间有显著差异
（P<0.05），可以得知在酸性条件下，其活性大于中性。
pH 9 和 pH 12 处理张力增量变化率仅为 21.41%和
11.90%，说明碱性条件下，山莓叶中抑制肠运动活性
大大降低。综上可初步判定山莓叶中有效成分 pH 偏
酸性。
2.2.3 不同光质和光照时间对山莓叶粗提物抑
制兔离体肠管运动的影响




图7 不同光质和光照时间对山莓叶粗提物抑制兔离体肠运动
的影响（↓表示加样）
Fig.7 Effects of different light qualities and different
illumination time on the movement of isolated intestinal from
rabbit before and after adding Rubus corchorifolius extracts
注：a：紫外线照射 6 h；b：紫外线照射 9 h；c：紫外线
照射 12 h；d：白炽光照射 6 h；e：白炽光照射 9 h；f：白炽光
照射 12 h；g：暗室处理。
不同光质和光照时间处理后的山莓叶粗提物对兔
离体肠运动的影响如图 7 所示。山莓叶粗提物经紫外
光、白炽光照射 6 h、9 h 和 12 h 和暗室处理 12 h 后，
加样离体肠收缩波幅度变化都很明显。利用 SAS 软件
进行加样前后兔离体肠管张力和频率显著性差异分析
（表 4），各处理组加样前后的肠管张力差异均极显著
（P<0.01），各处理组对其频率的影响均不显著
（P>0.05）。说明经不同光质和光照时间处理后，山莓
叶粗提物仍具有显著抑制兔离体肠运动的作用。
表4 不同光质和光照时间对山莓叶提取物对兔离体肠管张力
和频率影响（ x ±s，n=10）
Table 4 Effects of different light qualities and different
illumination time on the tension and frequency of isolated
intestinal from rabbit before and after adding Rubus
corchorifolius extracts
样品
张力/g 频率/次/分
加样前 加样后 加样前 加样后
紫外光照
射 6 h 2.12±0.10 1.02±0.09
**

14.68±0.18 14.44±0.20Δ
紫外光照
射 9 h 2.22±0.06 1.09±0.18
**

15.16±0.52 14.54±0.43Δ
紫外光照
射 12 h 4.01±0.08 2.01±0.21
**

15.00±0.24 14.64±0.27Δ
白炽光照
射 6 h 1.45±0.06 0.70±0.09
**

14.74±0.15 14.42±0.11Δ
白炽光照
射 9 h 2.10±0.04 0.99±0.14
**

15.46±0.15 14.82±0.19Δ
白炽光照
射 12 h 2.05±0.06 0.98±0.10
**

15.00±0.24 14.64±0.27Δ
暗室处理 3.15±0.09 1.40±0.18** 16.33±0.77 15.86±0.41Δ
注：**表示与给药前比较差异极显著（P<0.01）；Δ 表示
与给药前比较无显著差异（P>0.05）。

图8 不同光质和光照时间处理对兔离体肠管张力增量变化率
的影响
Fig.8 Effects of different light and illumination time on the
tensional variation percentage of isolated intestinal from rabbit
不同光质和光照时间处理对兔离体肠管张力增量
变化率的影响如图 8 所示。经过紫外光和白炽光照射
后，其张力增量的变化率相比暗室来说，均有一定程
度的下降。对其进行组间方差分析得出：与暗室相比，
紫外线处理 9 h、12 h，以及白炽光处理 12 h 样品对兔
离体肠张力增量变化率有显著降低（P<0.05)。而紫外
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91
光处理 6 h、白炽光处理 6 h、9 h 均无显著差异
（P>0.05）。结合表 4 的实验结果，尽管不同光质和光
照时间处理后，山莓叶粗提物仍具有显著抑制兔离体
肠运动的作用，但与暗室组相比，不同光质和光照时
间处理后的各组均有不同程度的下降，样品保存在暗
室中的活性成分最稳定。
2.2.4 脱鞣质处理山莓叶醇提物对家兔离体肠
管运动的影响

图9 脱鞣质处理对山莓叶粗提物抑制兔离体肠运动的影响（↓
表示加样）
Fig.9 Effects of tannins removal treatment on the movement of
isolated intestinal from rabbit before and after adding Rubus
corchorifolius extracts
注：a：未脱鞣质处理；b：脱鞣质层。
由图 9 可以看出，山莓叶粗提物经脱鞣质处理后，
加样离体肠收缩波幅度变化有所降低。利用 SAS 软件
进行加样前后兔离体肠管张力和频率显著性差异分析
表明，粗提物和脱鞣质层加样前后的肠管张力差异均
极显著（P<0.01），各处理组对其频率的影响均不显著
（P>0.05）。

图10 脱鞣质处理山莓叶提取物抑制兔离体肠管张力增量变化
率的影响
Fig.10 Effects of tannins removal treatment on the tensional
variation percentage of isolated intestinal from rabbit before
and after adding Rubus corchorifolius extracts
对样品计算张力增量变化率可得（图 10），脱鞣
质样品的张力增量变化率与粗提物张力增量变化率有
显著差异（P<0.05），说明山莓叶中含有的鞣质成分有
抑制腹泻的效果。脱鞣质后的样品加入后，兔离体肠
张力增量变化率为 39.78%，仍具有很高的抑制兔离体
肠运动的活性，说明还有其它的成分存在抑制肠蠕动
的效果，因此鞣质可能是山莓起抗腹泻作用的原因之
一。王丽敏等对老鹤草总鞣质的研究表明，老鹤草总
鞣质有较好的治疗腹泻作用，可减少番泻叶或蓖麻油
所引起腹泻次数，并可显著抑制正常及推进功能亢进
小鼠的墨水胃肠推进率，提示老鹤草总鞣质具有抑制
胃肠推进运动的作用[14]。
3 结论
3.1 山莓叶山莓叶乙酸乙酯层提取物的抑制兔离体
肠运动活性显著高于粗提物和其它溶剂层提取物
（P<0.05），说明山莓叶中抗腹泻的活性物质主要在乙
酸乙酯层，其它层提取物抑制兔离体肠运动的活性大
小依次为：石油醚层>水层>正丁醇层>氯仿层。各提
取物对兔离体肠管运动频率的影响均不显著
（P>0.05）。
3.2 山莓叶粗提物在 30~60 ℃范围内抑制兔离体肠
运动活性稳定，高温（>90 ℃）条件下活性降低，120 ℃
处理活性丧失；pH 对抑制肠运动活性影响较大，酸性
条件下活性最高，其次是中性，碱性条件下（pH 9~13）
活性显著受到抑制；不同光质和不同光照时间处理后
仍具有极显著抑制兔离体肠运动的作用（P<0.01）；脱
鞣质处理会使山莓叶醇提物抑制肠运动活性减弱，说
明鞣质可能是山莓叶抗腹泻活性成分之一。
3.3 今后将在兔离体肠活性模型追踪指导下进一步
分离纯化抗腹泻活性物质，采用核磁共振、质谱、红
外等检测方法，以期鉴定其结构，深入揭示山莓叶抗
腹泻作用机理，为开发高效安全的新型抗腹泻药物奠
定基础。
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