全 文 :现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.8
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利用兔离体肠模型研究山莓叶的抗腹泻作用机理
张瑞莲 1,刘晓娟 1,张苗 1,熊平 2,陈雪香 1,曹庸 1
(1.华南农业大学食品学院,广东广州 510642)(2.华南农业大学资源与环境学院,广东广州 510642)
摘要:以山莓叶醇提物(RE)和对羟基肉桂酸乙酯(EC,活性跟踪分离到的山莓叶中活性较强的物质)为材料,以兔离
体肠运动为模型,研究了 RE 和 EC 抑制肠管运动的剂量效应,同时考察了 RE 和 EC 分别与抗腹泻相关的 4 个关键通道的 4 种
致痉剂(乙酰胆碱、酚妥拉明、组胺和氯化钡)对肠管运动的影响。结果表明:RE 浓度为 1~10 mg/mL 范围内,肠管的张力增
量变化率(TVP)均为 30%以上,且 RE 浓度为 4 mg/mL 时,TVP 达到 45.37%;浓度 10~800 μg/mL 范围内,EC 对肠管运动的
抑制作用均极显著高于阿托品(P<0.01),且 EC 浓度为 400 μg/mL 时,TVP 达到最大(70.45%);RE 主要通过作用于乙酰胆
碱通道胆碱能 M 受体和组胺通道来抑制肠管运动;EC 主要通过作用于肾上腺素 α 受体、组胺通道和钙离子通道来抑制肠管运
动。因此,RE 和 EC 是抗腹泻的高效的多靶点药物,且 RE 中的 EC 的抗腹泻效果极显著优于阿托品。
关键词:山莓叶;兔离体肠;抗腹泻;作用机理
文章篇号:1673-9078(2015)8-18-24 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.8.004
Mechanism of Anti-diarrheal Effect of Rubus corchorifolius Leaves
on Isolated Rabbit Intestine
ZHANG Rui-lian1, LIU Xiao-juan1, ZHANG Miao1, XIONG Ping2, CHEN Xue-xiang1, CAO Yong1
(1.College of Food Science, South China Agriculture University, Guangzhou 510642, China)
(2.College of Resource Environment, South China Agriculture University, Guangzhou 510642, China)
Abstract: Ethyl p-coumarate (EC), a compound with a relatively strong activity was extracted from Rubus corchorifolius leaves by
bioactivity-guided isolation. Dose responses of Rubus corchorifolius leaf extract (RE) and EC for inhibition of intestinal movement were
studied in terms of movement of isolated rabbit intestine model. The effects of RE and EC as well as four spasmogenic agents
(acetylcholine, phentolamine, histamine, and barium chloride) that are related to four key channels in antidiarrheal effects on the
movement of isolated intestine were also investigated. The results showed that the tensional variation percentage (TVP) of intestine was
above 30% when RE concentration was in the range of 1 to 10 mg/mL and reached maximum (45.37%) at 4 mg/mL. When the
concentration of EC was in the range of 10 to 800 µg/mL, the inhibitory effect on intestinal movement was significantly higher than that
of atropine (p < 0.01) at the same concentration and TVP value reached the maximum (70.45%) when the concentration of EC was
400 µg/mL. Thus, the inhibition of intestinal movement by RE was mainly achieved through its effects on the cholinergic M receptor of
acetylcholine and histamine channels, whereas that by EC was mainly achieved through its effects on the adrenergic a-receptor,
histamine channel, and calcium ion channel. Therefore, RE and EC act on different targets and are effective antidiarrheal drugs, where
EC in RE exerts a significantly stronger effect than atropine.
Key words: Rubus corchorifolius leaves; isolated rabbit intestine; antidiarrheal; mechanism
山莓(Rubuscor chorifolius L.f.)是蔷薇科悬钩
子属植物,俗称“三月泡”,在我国大部分地区均
收稿日期:2014-09-12
项目基金:广东省科技计划农业公关项目(2012A020602038);高等学
校博士学科点专项科研基金联合资助课题(20114404120022)
作者简介:张瑞莲(1991-),女,在读研究生,研究方向食品化学及
功能食品
通讯作者:刘晓娟(1980-),女,博士,副教授,研究方向食品化学
及功能食品
有分布,野生资源蕴藏量相当大。早在 17 世纪,
欧洲就有关于将悬钩子叶片制成茶和茶汤用来治
疗腹泻、喉病、感冒受凉等作用的记载。山莓在我
国的利用历史也很悠久,在古书《本草纲目》、《食
疗本草》等中都有关于山莓叶抗腹泻的记载。山莓
是湘西、鄂西北等地区少数民族长期用来治疗腹泻
的传统中草药。山莓叶的抗腹泻作用机制广泛,对
番泻叶、蓖麻油和致泻大肠埃希氏菌导致的小鼠腹
泻均有显著抑制作用,表明其是一种很好的抗腹泻
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药物[1]。目前国内外对山莓叶活性成分的研究相当
活跃,山莓叶主要含有多糖及其甙类、鞣质、黄酮
类、酚类物、强心甙、有机酸以及香豆素、甾体、
萜类等成分[2~5]。我们前期的研究表明,采用兔离
体肠活性跟踪,山莓叶中抗腹泻活性物质主要在乙
酸乙酯层,进一步采用柱层析、制备高效液相色谱、
重结晶等方法,分离到活性较强的单体化合物为对
羟基肉桂酸乙酯,其抗腹泻活性优于阿托品[6]。
山莓叶作为抗腹泻应用历史悠久,且研究表明
山莓叶的抗腹泻效果显著,迄今为止,山莓叶及其
活性物质的抗腹泻作用机制尚不明确。离体肠模型
是目前国内外最常用的研究抗腹泻的模型之一,离
体肠在合适的营养液环境中仍表现出自主肌源性
舒缩活动,从而模拟药物对肠管的作用[7~9]。本研
究以山莓叶醇提物(RE)和活性跟踪分离到的山莓
叶中活性较强的物质对羟基肉桂酸乙酯(EC)为试
验材料,以兔离体肠运动为模型,研究了 RE 和 EC
分别与 4 个通道的 4 种致痉剂(乙酰胆碱、酚妥拉
明、组胺和氯化钡)对肠管运动的影响,揭示 RE
和 EC 在肾上腺素通道、乙酰胆碱通道、组胺通道
和钙离子通道 4 个调控腹泻的关键通道的作用机
理,从而阐明山莓叶的抗腹泻作用机理,为山莓叶
的抗腹泻应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验材料
新西兰兔,雌雄不限,4~6 月,体重 2~2.5 kg,
购于广州中医药大学实验动物中心,合格证号为
SCXK(粤)2008-0020。
1.1.2 药品与试剂
山莓叶采于湖南张家界;无水乙醇,分析纯,
购自天津市富宇精细化工有限公司;氯化钠、磷酸
二氢钠,分析纯,购自天津大茂化工;无水葡萄糖、
氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、氯化镁、氯化钡,分
析纯,购自天津市福晨化学试剂厂;氯化乙酰胆碱
(Ach),99%纯,组胺 (His),97%纯,购自美国
Sigma-Aldrich 贸易有限公司;甲磺酸酚妥拉明
(Phe),98%纯,购自东京化成工业株式会社;对羟
基肉桂酸乙酯(EC),98%纯,购自上海阿达马斯试
剂公司;硫酸阿托品,98.5%纯,购自阿拉丁试剂
有限公司。
1.1.3 仪器
BL-420F 型生物信号采集处理系统,成都泰盟
科技有限公司;FT-100 型张力传感器,成都泰盟科
技有限公司;AL104 电子天平,梅特勒-托利多仪
器(上海)有限公司;R204B3 型旋转蒸发器,上海申
生科技有限公司;SH-D 循环水式多用真空泵,河
南省予华仪器有限公司;FD-1 型冷冻干燥机,北京
博医康技术公司;WZ-100 恒温水浴锅,上海申生
科技有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 山莓叶醇提物(RE)的制备及药液配
制
RE 的制备:将山莓叶阴干去杂,粉碎,过 80
目筛。称取适量山莓叶粗粉置于瓶中,按料液比1:10
加入 80%乙醇,常温下浸提 24 h,四层纱布过滤,
滤渣用同样方法再提取 2 次,合并提取液,用旋转
蒸发仪在 60 ℃,120 r/min 的条件下真空浓缩至原
体积的 1%,将浓缩液于-45 ℃,-30 Pa 条件下冷冻
干燥 72 h,得 RE[6]。分别称取 0.05 g、0.10 g、0.20
g、0.40 g、0.50 g 用 1 mL 含 30%乙醇的台氏液溶
解,配制成浓度为 0.05 g/mL、0.10 g/mL、0.20 g/mL、
0.40 g/mL、0.50 g/mL 的药液。
对羟基肉桂酸乙酯(EC)溶液的配制:准确称
取 0.5 mg、1.0 mg、5.0 mg、10.0 mg、20.0 mg EC,
分别溶于 1 mL含 30%乙醇的台氏液中,配制为 0.5
mg/mL、1.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL 和 20.0
mg/mL 的药液。
硫酸阿托品(Atr)溶液的配制:准确称取 0.5
mg、1.0 mg、5.0 mg、10.0 mg、20.0 mg Atr,分别
溶于 1 mL 含 30%乙醇的台氏液中,配制为 0.5
mg/mL、1.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL 和 20.0
mg/mL 的药液。
工具药的配制:准确称取氯化乙酰胆碱(Ach)、
甲磺酸酚妥拉明(Phe)、组胺(His)各 10.0 mg,分别
溶于 1 mL 含 30%乙醇的台氏液中,配制为 10.0
mg/mL 的药液,再用台氏液分别稀释至 100 μg/mL
的药液备用。准确称取 10 mg BaCl2,溶于 1 mL 含
30%乙醇的台氏液中,配制为 10.0 mg/mL 的药液备
用。
台氏液的配制:称取氯化钠 8.0 g、氯化钾 0.2 g、
氯化钙 0.2 g、碳酸氢钠 1.0 g、磷酸二氢钠 0.05 g、
氯化镁 0.1 g、葡萄糖 1.0 g,加蒸馏水至 1000 mL,
搅拌至充分溶解,低温存放。
1.2.2 兔离体肠模型的建立[10]
1.2.2.1 离体肠段的制备
实验前将家兔禁食 24 h,用静脉注射空气法使
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家兔死亡,迅速剖开腹腔,距胃幽门 5 cm 为起点,
剪取十二指肠约 8 cm,放入 38 ℃台氏液中,剪成
约 2~3 cm 的肠段。将离体肠段放在通气的 38 ℃台
氏液中,充分洗去内容物后,移入 38 ℃新鲜台氏
液中通气备用。
1.2.2.2 观察方法和指标
在(38±0.5)℃条件下,不断往台氏液中通气,
用生物信号采集处理系统记录肠段收缩曲线。观察
在正常情况下离体肠管的自动节律性收缩稳定后,
然后加入 100 μL 1.2.1 中配置好的药液,以收缩张
力(g)为指标,记录 3 min。在加样前后各选 10
个波形,分别计算张力增量。
加样前张力
加样后张力)(加样前张力张力增量变化率 100×−=
1.2.3 不同浓度RE和EC对兔离体肠管运动
的影响
在正常情况下离体肠管的自动节律性收缩稳
定后,于麦氏浴槽中分别加入 100 μL 1.2.1 配置好
的不同浓度的 RE 溶液、EC 溶液、Art 溶液,记录
离体肠管的运动情况,计算张力增量变化率。RE
的终浓度分别为 1 mg/mL、2 mg/mL、4 mg/mL、8
mg/mL、10 mg/mL,EC 和 Atr 的终浓度分别为 10
μg/mL、20 μg/mL、100 μg/mL、200 μg/mL、400
μg/mL、800 μg/mL。
1.2.4 RE 与 EC 的抗腹泻作用机理研究
在正常情况下离体肠管的自动节律性收缩稳
定后,每次均先在麦氏浴槽中加入 100 μL 0.20
g/mL 的 RE(终浓度为 4 mg/mL),记录 3 min 后,
再分别加入 100 μL 的 100 μg/mL 的 Ach、His、Phe
(终浓度为 2 μg/mL),或 100 μL的 10 mg/mL BaCl2
(终浓度为 200 μg/mL),用生物信号采集处理系
统记录肠管的运动情况。
1.2.5 数据处理
实验数据以“平均数±标准差”表示,用 SPSS
17.0 统计分析软件进行 t 检验和组间多重比较。
2 结果与分析
2.1 EC 和 RE 对兔离体肠管运动的影响
前期试验结果表明,山莓叶乙醇提取物(RE)成
分复杂,主要含有多糖类及其甙类、鞣质、黄酮类
等成分,且 RE 具有较强的抑制兔离体肠运动的活
性[2, 6]。为了进一步明确 RE 抑制兔离体肠运动的剂
量效应,在预实验的基础上,选定 RE 终浓度为 1~10
mg/mL 范围。不同浓度的 RE 对兔离体肠管运动的
影响如图 1 所示。由图 1 可以看出,RE 浓度在 1~10
mg/mL 范围内,离体肠管的张力增量变化率均为
30%以上,随着浓度的升高,抑制肠管运动的效果
越明显。当 RE 的浓度为 4 mg/mL 时,离体肠管的
张力增量变化率为 45.37%,当进一步提高浓度
时,抑制肠管运动没有显著提高(P>0.05),因此
采用 4 mg/mL 的 RE 溶液开展后续山莓叶抗腹泻作
用机理的研究。
图 1 RE 对兔离体肠管张力增量变化率的影响
Fig.1 Effects of RE on the tensional variation percentage of
isolated rabbit intestine
图 2 EC 和 Art 对兔离体肠管张力增量变化率的影响
Fig.2 Effects of EC and atropine on the tensional variation
percentage of isolated rabbit intestine
注:**表示同一剂量下加 EC 与加 Art 比较差异极显著
(P<0.01)。
在抑制兔离体肠运动活性跟踪下,从 RE 中分
离到活性较强的单体化合物对羟基肉桂酸乙酯
(EC),通过 HPLC 分析,EC 在 RE 中的含量较
低,RE 中可能还存在其它活性较强的物质有待进
一步分离确定。预实验结果表明,EC 在微克级别
的浓度下即可达到很强的活性。选取工具药阿托品
(Art)为对照,进一步研究 RE 抑制离体肠运动的
作用效果。Art 为有代表性的 M 胆碱能受体阻滞
药,能使胃肠道平滑肌受到抑制。由图 2 可以看
出,在 10~800 μg/mL 浓度范围内,相同浓度下,
EC 对离体肠管运动的抑制作用均极显著高于阿托
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品(P<0.01)。当 EC 浓度为 400 μg/mL 时,离体
肠管的张力增量变化率达到最大,为 70.45%。迄
今为止,EC 的生物活性研究主要集中在抗菌、抗
氧化等方面,其在抑制肠管运动方面的活性尚未
开展[11~12]。本研究首次表明,EC 在抑制兔离体肠
管运动方面的能力极显著优于 Art。
2.2 RE 和 EC 的抗腹泻作用机理研究
2.2.1 RE 和 EC 对胆碱能受体的作用
图 3 RE 和 EC 对胆碱能受体的作用效果
Fig.3 Effects of RE and EC on the cholinergic receptor
注:↓表示加样;RE 代表山莓叶乙醇提取物;EC 代表
对羟基肉桂酸乙酯;Ach 代表乙酰胆碱;a 为加入 Ach 的波形
图;b 为加入 RE 后再加入 Ach 的波形图;c 为加入 EC 后
再加入 Ach 的波形图。
乙酰胆碱是肠神经系统的一种主要神经递质,
是 M 胆碱能受体激动剂,作用于平滑肌 M 受体肠
神经丛,引起肠道运动加快[13]。从图 3a 可以看出,
乙酰胆碱的加入引起肠管明显痉挛。图 3b 结果表
明,先在肠管中加入 RE,肠管的张力明显降低,
再加入乙酰胆碱后,肠管的张力没有明显增加,从
而说明RE通过作用于M 胆碱能受体来抑制肠管运
动,是 M 胆碱能受体抑制剂。由图 3c 分析,EC 明
显抑制肠管蠕动张力,再加入乙酰胆碱后,肠管蠕
动明显激动起来,从而说明 EC 并没有通过 M 胆碱
能受体来抑制肠管蠕动。
2.2.2 RE 和 EC 对肾上腺素能受体的作用
图 4 RE 和 EC 对肾上腺素能受体的作用效果
Fig.4 Effects of RE and EC on the adrenergic receptor
注:↓表示加样;RE 代表山莓叶醇提物;EC 代表对羟
基肉桂酸乙酯;Phe 代表酚妥拉明;a 为加入 Phe 的波形图;
b 为加入 RE 后再加入 Phe 的波形图;c 为加入 EC 后再加入
Phe 的波形图。
酚妥拉明是一种肾上腺素 α受体阻断剂,能选
择性与肾上腺素 α受体结合,拮抗激动剂对 α受体
的激动作用,而对 β 受体无作用,同时,具有拟
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胆碱样作用,可以兴奋胃肠平滑肌。从图 4a
可以看出,酚妥拉明可以引起肠管明显痉挛[14]。图
4b 结果表明,先在肠管中加入 RE,肠管的张力明
显降低,再加入酚妥拉明,肠管的张力明显增加,
从而说明 RE 不是作用于肾上腺素 α受体。由图 4c
分析,EC 明显抑制肠管运动张力,再加入酚妥拉
明,肠管运动没有激动起来,从而说明 EC 通过肾
上腺素 α 受体来抑制肠管蠕动。
2.2.3 RE 和对 EC 对组胺通道的影响
图 5 RE 和 EC 对组胺通道的作用效果
Fig.5 Effects of RE and EC on the histamine channel
注:↓表示加样;RE 代表山莓叶醇提物;EC 代表对
羟基肉桂酸乙酯;His 代表组胺;a 为加入 His 的波形图;b
为加入 RE 后再加入 His 的波形图;c 为加入 EC 后再加入
His 的波形图。
组胺是一种具有明显和广泛生物活性的内源
性物质,作用于多种靶器官,组胺能激动平滑肌细
胞,对多种胃肠道平滑肌都有兴奋作用。从图 5 a
可以看出,组胺引起肠管明显痉挛。图 5b 结果表
明,先在肠管中加 RE,肠管的张力明显降低,再
加入组胺,肠管的张力稍有恢复,但是比图 5a 的
激动效果要弱,说明 RE 抑制肠蠕动部分通过组胺
通道发挥作用。由图 4c 分析,EC 明显抑制肠管蠕
动张力,再加入组胺,持续抑制肠蠕动张力,从而
说明 EC 通过组胺通道来抑制肠管运动,是组胺通
道的抑制剂。
2.2.4 RE 和对 EC 对钙离子通道的影响
图 6 RE 和 EC 对钙离子通道的作用效果
Fig.6 Effects of RE and EC on the calcium ion channel
注:↓表示加样;RE 代表山莓叶醇提物;EC 代表对
羟基肉桂酸乙酯;BaCl2 代表氯化钡;a 为加入 BaCl2的波
形图;b 为加入 RE 后再加入 BaCl2的波形图;c 为加入 EC
后再加入 BaCl2的波形图。
肠平滑肌细胞内钙离子与肠平滑肌兴奋-收缩
偶联存在紧密联系,是肠平滑肌收缩的关键调节因
子,存在于细胞膜上的钙离子通道主要有电压操纵
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性钙通道和受体操纵性钙通道,BaCl2 可以引起膜
电位的改变,从而调节电压依赖性钙通道[7]。从图
6a 可以看出,氯化钡可以引起肠管明显痉挛。图
6b 结果表明,先在肠管中加入 RE,肠管的张力明
显降低,再加入氯化钡,肠管的张力明显恢复,说
明 RE 并不是通过钙离子通道来抑制肠管运动。由
图 6c 分析,EC 明显抑制肠管运动张力,再加入氯
化钡,肠运动张力没有激动起来,从而说明 EC 是
通过钙离子通道来抑制肠管运动,是钙离子通道的
抑制剂。
2.2.5 RE 和 EC 的抗腹泻作用机制
通过将 RE 和 EC 与工具药共同作用于肠管,
可以推断 RE 和 EC 的抗腹泻作用机制。工具药采
用 4 个调控抗腹泻的关键通路的致痉剂,乙酰胆碱
(Ach)作用于乙酰胆碱通道胆碱能 M 受体,酚妥
拉明(Phe)作用于肾上腺素 α 受体,组胺(His)
和 BaCl2 分别作用于组胺通道和钙离子通道。
表 1 RE 与致痉剂对兔离体肠管张力的影响( x ±s,n=10)
Table 1 Effects of RE and spasmogenic agents on the
tension of isolated rabbit intestine ( x ±s, n=10)
样品 剂量 /(μg/mL)
张力/g
加样前 加 RE 加致痉剂
Ach 2 1.59±0.16 1.00±0.11** 1.09±0.12
Phe 2 1.18±0.06 0.67±0.14** 1.05±0.09#
His 2 1.09±0.10 0.70±0.09** 0.67±0.09
BaCl2 200 1.31±0.04 0.80±0.19** 1.22±0.17##
注:**表示与加样前比较差异极显著(P<0.01);#表
示与加 RE 后比较差异显著(P<0.05);##表示与加 RE 后
比较差异极显著(P<0.01);RE 代表山莓叶醇提物;Ach
代表乙酰胆碱;Phe 代表酚妥拉明;His 代表组胺;BaCl2
代表氯化钡。
由表 1 可以看出,RE 的加入均使肠管张力极
显著降低(P<0.01)。再加入不同的致痉剂,其中
酚妥拉明和 BaCl2 使兔离体肠管显著激动起来外
(P<0.05 或 P<0.01),加入乙酰胆碱和组胺没有使
肠管痉挛起来,从而表明 RE 主要通过作用于乙酰
胆碱通道胆碱能 M 受体、组胺通道来抑制肠管蠕
动,对肾上腺素 α 受体和钙离子通道不起作用。
由表 2 可以看出,加入 EC 后,兔离体肠管的
张力均极显著降低(P<0.01),再加入不同的致痉
剂,除了加入乙酰胆碱使兔离体肠管极显著激动起
来外(P<0.01),其它 3 种致痉剂均没有使肠管痉
挛起来,其中酚妥拉明持续抑制肠管运动,从而表
明 EC 主要通过作用于肾上腺素 α 受体、组胺通道
和钙离子通道抑制肠管蠕动,对乙酰胆碱通道胆碱
能 M 受体不起作用。
表 2 EC 与致痉剂对兔离体肠管张力的影响( x ±s,n=10)
Table 2 Effects of EC and spasmogenic agents on the
tension of isolated rabbit intestine ( x ±s, n=10)
样品 剂量 /(μg/mL)
张力/g
加样前 加 EC 加致痉剂
Ach 2 1.20±0.10 0.89±0.08** 1.12±0.08##
Phe 2 2.73±0.39 1.56±0.41** 0.75±0.22∆∆
His 2 2.79±0.16 1.92±0.25** 1.42±0.62
BaCl2 200 2.62±0.23 1.70±0.25** 1.69±0.14
注:**表示与加样前比较差异极显著(P<0.01);##
表示与加 EC 后比较差异极显著增加(P<0.01);∆∆表示与
加 EC 后比较差异极显著降低(P<0.01);RE 代表山莓叶
醇提物;Ach 代表乙酰胆碱;Phe 代表酚妥拉明;His 代表
组胺;BaCl2代表氯化钡。
综上所述,RE 和 EC 都是抑制兔离体肠管运动
的高效的多靶点药物,但两者作用的靶点有差异,
RE 的作用靶点有乙酰胆碱通道胆碱能 M 受体和组
胺通道 2 个,EC 的作用靶点有肾上腺素 α 受体、
组胺通道和钙离子通道 3 个,通过高效液相色
谱分析,尽管 EC 是活性跟踪分离到的 RE 中活性
较强的物质,但其含量很低,同时 RE 中还存在其
它抑制肠运动的活性物质有待进一步分离,因此
RE 和 EC 在抑制肠管运动方面存在不同的作用机
理。
3 结论
3.1 RE 浓度在 1~10 mg/mL 范围内,离体肠管的
张力增量变化率均为 30%以上,随着浓度的升
高,抑制肠管运动的效果越明显。当 RE 的浓度为
4 mg/mL 时,离体肠管的张力增量变化率达到
45.37%。EC 浓度 10~800 μg/mL 范围内,相同浓度
下,其对离体肠管运动的抑制作用均极显著高于
阿托品(P<0.01)。当 EC 浓度为 400 μg/mL 时,
离体肠管的张力增量变化率达到最大(70.45%)。
首次研究了 EC 的抗腹泻活性,并得出 EC 在抑制
兔离体肠运动方面明显优于工具药阿托品。
3.2 通过将 RE 和 EC 与工具药共同作用于肠管,
工具药采用 4 个调控抗腹泻的关键通道的致痉剂
(乙酰胆碱、酚妥拉明、组胺、BaCl2),从而推断
RE 和 EC 的抗腹泻作用机制。结果表明,RE 主要
通过作用于乙酰胆碱通道胆碱能 M 受体和组胺通
道来抑制肠管运动,对肾上腺素 α受体和钙离子通
道不起作用。EC 主要通过作用于肾上腺素 α受体、
组胺通道和钙离子通道来抑制兔离体肠管运动,对
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乙酰胆碱通道胆碱能 M 受体不起作用,从而表明
RE 和 EC 是抑制兔离体肠管运动的高效的多靶点
药物。
参考文献
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