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山莓的化学成分及抗腹泻药理学研究进展



全 文 :第 43 卷第 11 期
2015 年 6 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 43 No. 11
Jun. 2015
山莓的化学成分及抗腹泻药理学研究进展
周丽萍,马艳芳,刘 敏,黄日升,黄子荣
(中国广州分析测试中心,广东省分析测试技术公共实验室,广东 广州 510070)
摘 要:山莓作为一种传统的中草药,现已成为国内外研究的一个热点。因其常被用于治疗动物腹泻,本文以近年来国内
外的相关文献,对其化学成分及其抗腹泻药理学的研究进展进行综述,详细介绍了山莓在抑菌活性、对胃肠道的作用和抗炎活性
等方面的研究进展,从而为新型药物的研发提供一定的借鉴和参考。
关键词:山莓;化学成分;抗腹泻
中图分类号:TS201. 4 文献标志码:A 文章编号:1001 - 9677(2015)011 - 0035 - 03
第一作者:周丽萍 (1985 -) ,女,硕士研究生,主要从事食品功能性成分研究。
The Chemical Composition of Raspberries and Its Research
Progress of Anti - diarrhoeal Pharmacology
ZHOU Li - ping,MA Yan - fang,LIU Min,HUANG Ri - sheng,HUANG Zi - rong
(Guangdong Provincial Public Laboratory of Analysis and Testing Technology,China National
Analytical Centre,Guangdong Guangzhou 510070,China)
Abstract:As a traditional medicine,Rubus corchorifolius has become the hotspot of research at home and abroad,
which is well recognized as an effective Anti - diarrheal recipe. Based on the research at home and abroad in recent years,
the chemical components and the Anti - diarrhea mechanism of Rubus corchorifolius was summarized. The research
progress of the anti - bacterial activity,anti - inflammatory activity and the function of the gastrointestinal tract were
described in detail,so as to provide certain reference for developing new drugs.
Key words:Rubus corchorifolius;chemical components;anti - diarrhea
山莓 (Rubus corchorifolius L. f)是蔷薇科悬钩子属植物,
也叫做龙船泡、牛奶泡、悬钩子、泡儿刺、三月泡、树莓,台
湾称其为双叶悬钩子[1 - 2],其植株的高有 1 ~ 3 m;单叶互生,
卵状披针形或者是卵形,长有 4 ~ 11 cm、宽有 2 ~ 4. 5 cm,边
缘有 3 浅裂或者不裂,具有细齿,拥有微心形的基部;叶面、
叶背及叶柄有毛,托叶长条形,长约 8 mm,与叶柄贴生,主
脉及叶柄散生细钩刺,早落;花期一般为 3 - 4 月,花单朵与
叶对生或顶生,花萼 5 裂,裂片为三角状椭圆形,被柔毛,长
约为 5 ~ 7 mm,花瓣数量为 5 片,白色椭圆形;果期一般为 4
- 6 月;果为红色聚合果,近球形,直径约 1. 5 cm。
山莓多生长于山谷、荒地、灌丛、溪边和向阳山坡中,海
拔一般在 300 ~ 1500 m。除了青海、新疆、甘肃、东北外,全
国均有分布。特别是福建,全省各地都有山莓分布,其拥有相
当大的野生资源蕴藏量。山莓是湘西、鄂西北等地区少数民族
长期使用的传统中草药,王世清等研究得出在湘西地区群众常
将嫩叶捣碎饲喂动物治疗腹泻,效果良好,是公认的、安全
的、有效的抗腹泻秘方[3]。
1 山莓的化学成分研究
山莓全株含黄酮类、鞣质、香豆素化合物、酚性成分和皂
甙等,具有祛风除湿、消肿解毒、助阳明目、抗腹泻等功效。
山莓根、茎、叶和果实均可入药,而山莓叶则是目前国内对山
莓化学成分研究的主要对象。安保礼等采用正交实验方法研究
了山莓叶中茶多酚的提取工艺,测得山莓叶中茶多酚的含量大
约为 7. 2%[4]。陈炳华等从山莓叶和茎中首次发现分离出一种
香豆素成分:6 -甲氧基 - 7 -羟基香豆素,即东茛菪内酯[5]。
董振生等采用试管法和圆形滤纸层析法,鉴定了山莓叶的主要
化学成分,结果表明其中含有生物碱、有机酸、黄酮及其甙
类、多糖、香豆素及内酯,鞣质、多肽及蛋白质、酚性成分、
皂甙、蒽醌、强心苷、三萜类等多种物质[6]。张敏等从山莓叶
的乙醇提取物中分离纯化得到 7 个萜类化合物,分别为 ent -
16β - hydroxy - kauran - 17 - β - D - gluco,对映 - 3α,16β,17,
19 -四羟基 -贝壳杉院 - 19 -乙酸酯,对映 - 3α,16β,17,19 -
四羟基 -贝壳杉烷 - 19 -乙酸酯 - 17 - O - β - D -吡喃葡萄糖
苷,对映 - 3β,16β,17 -贝壳杉 -三醇,对映 - 2 -羰基 - 16β
-羟基 -贝壳杉 - 17 - O - β - D -葡萄糖苷,对映 - 3β,16β,
17,19 -贝売杉 -四醇[7,9]。陈雪香等从山莓叶中分离得到 4 个
新二萜类化合物,分别为:对映 -贝壳杉 - 16α,17 二羟基 - 2
酮,对映 - 9β,16α,17 三羟基 -贝壳杉 - 2 酮,对映 - 16α,17,
19 三羟基 -贝壳杉 - 2 酮,对映 - 2β,3α,16α,17 -四羟基 -贝
壳杉醇,一个三萜化合物为 2α、3β、23α -三羟基 - 12 -烯 -
28 -乌苏酸[8]。周双德等人从山莓叶挥发油中分离出 49 个组
分,鉴定出 45 个,分析中发现鞣质类中含没食子酸,脂溶性
香豆素类提取物中含香豆素,其中 1,2,4 一三甲氧基丁烷含
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量高达 52. 1%;并首次在山莓叶中分离出山萘酚 - 3 - O - β -
D -(6″ - 对羟基桂皮酰基)- 葡萄糖苷特征性黄酮类化合
物[10]。邬美玉从山莓乙醇提取物的石油醚部位分离得到 6 种化
合物,分别鉴定为豆甾醇(1)、谷甾醇(2)、胡萝卜苷(3)、
Homofukinolide(4)、Bakkenolide - B(5)以及 Bakkenolide - D
(6);从二氯甲烷部位分离得到 4 种化合物,分别鉴定为 4 -羟
基 - 3 -甲氧基苯甲酸(7)、芹菜素(8)、木樨草素(9)、山莓
素(10),其中,化合物 4 ~ 9 首次是从山莓子中分离得到,化
合物 10 是新化合物[11]。
2 山莓抗腹泻药理作用研究
腹泻指的是大便次数及粪便水分增加,是胃肠道最常见的
症状之一。根据病理生理和不同发病机制,腹泻可分为: (1)渗
透性腹泻; (2)渗出性腹泻; (3)分泌性腹泻; (4)肠道运
动功能异常性腹泻等。但临床上许多腹泻病往往是多种机制共
同作用的结果,并非由某种单一机制引起[15]。腹泻病由于发病
率高,已成为是世界性公共卫生问题,它也是造成小儿营养不
良、生长发育障碍及死亡的重要原因之一。同时,在现代规模
化畜禽养殖生产中,腹泻疾病也是影响畜禽健康、阻碍畜禽快
速生长的主要病害之一[16]。目前,对山莓的抗腹泻药理作用研
究主要在其抑菌活性、对胃肠道的作用和抗炎活性。
2. 1 山莓的抑菌活性
朱深海等用 80%乙醇提取提取山莓叶,获得有效活性成
分,采用管碟法和试管法进行体外抑菌效果研究,结果表明山
莓叶提取物对金黄葡萄球菌、大肠杆菌和痢疾杆菌均有显著的
抑制和杀灭作用,最低抑菌浓度(MIC)分别为 15. 6 mg /mL、
31. 3 mg /mL 和 31. 3 mg /mL,最低杀菌浓度(MBC)分别为
31. 3 mg /mL、62. 5 mg /mL和 62. 5 mg /mL。随着山莓叶的提取
物的浓度增大,其抑菌效果增强,4. 0 μg /mL 的硫酸庆大霉素
的抑菌直径同 1. 0 g /mL叶提取物抑菌直径比较无显著差异(P
> 0. 05)[12];张敏通过纸片扩散法对不同溶剂萃取物研究得
出,在相同含量的情况下,对细菌的敏感度依次为金黄色葡萄
球菌 >志贺氏痢疾杆菌 >埃希氏大肠杆菌,抑菌能力的大小依
次为乙酸乙酯提取物、醇沉部分、正丁醇提取物、水提取物和
石油醚提取物,其中石油醚提取物无抑菌活性;在低浓度条件
下,几乎对大肠杆菌不产生抑菌活性[13]。陈雪香等采用水、
80%乙醇、石油醚 3 种不同溶剂提取山莓叶中抑菌活性成分,
通过抑菌实验结果表明:80%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、
大肠杆菌、痢疾志贺氏菌均具有较强的抑制作用,水提取物有
较弱的抑菌作用,石油醚提取物则无明显抑菌作用;其中三种
提取物对酵母的抑制作用均较弱;且 80%乙醇提物经 30、50、
80 ℃的温度各处理 2 h,121 ℃下处理 20 min;光照 6 ~ 18 h,
pH 5 ~ 7 仍具有很好的抑菌效果[8]。董振生采用有机溶剂提取
法分离提取山莓叶抗菌有效成分—生物碱,进行体外抑菌试验
表明:山莓叶所含总生物碱对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、
大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌都有明显的抑菌作用,最低抑菌
浓度分别为:0. 125 g /mL,0. 25 g /mL,0. 125 g /mL,0. 5 g /
mL,0. 125 g /mL[6]。周双德对山莓叶中四大类主要功能成分如
香豆素、鞣质、挥化油和黄酮等进行分类抗菌效果试验,研究
结果表明这四大类物质都具有一定的抑菌和杀菌效果[10]。陈雪
香等研究表明山莓叶 7 个不同浓度挥发油对金黄色葡萄球菌、
沙门氏菌、大肠杆菌、苏云金杆菌和痢疾志贺氏菌均具有很好
的杀菌作用,其中对大肠杆菌的抑菌作用最强[8]。
2. 2 山莓对胃肠道的作用
朱深海等采用离体肠管试验法,将兔的十二指肠置于恒温
通气 Tyrode试液中,分别加入不同浓度的山莓根茎叶乙醇提取
物,用 Pclab 生物信号采集处理系统,以观察其对离体十二指
肠运动的影响。结果表明,山莓乙醇提取物对兔十二指肠收缩
活动有显著的抑制作用,张力减小,且不同部位的乙醇提取物
对十二指肠的运动影响存在差异,其中叶最为明显,并随着浓
度的增大而增大,但其频率的变化却不明显[12];并对山莓抗腹
泻机制进行了初步研究,提出了抑菌和影响胆碱能 M受体以抑
制肠管运动可能是山莓抗腹泻的原因[14]。张敏通过分析山莓叶
提取物对离体十二指肠活动的影响,跟踪筛选抗腹泻活性物
质,结果表明乙酸乙酯提取物能极显著地抑制小肠平滑肌收缩
张力(P < 0. 01),而其它提取物均无显著意义,从而说明乙酸
乙酯提取物中有主要抑制肠蠕动的活性物质所在[13]。
2. 3 山莓的抗炎活性
章丽等研究表明,山莓叶醇提物对番泻叶、蓖麻油和致泻
大肠埃希氏菌导致的小鼠腹泻有显著抑制作用[15],这一研究表
明山莓叶对于炎症性腹泻也有一定的治疗作用。目前国内外并
没有关于山莓叶抗炎活性的相关研究,但从山莓中已经探明的
黄酮类、东莨菪内酯、茶多酚等具有抗炎活性的成分,以及山
莓叶所属悬钩子属已知的抗炎活性来考虑,山莓叶极可能有抗
炎活性。
3 结 语
近年来,山莓的化学成分研究有较大进展,很多化合物相
继被报道,其研究较热的抗腹泻的活性也被深入研究,但多数
药效物质基础尚不明确,有效成分未确定。因此,继续深入开
展对山莓化学成分和药理活性的研究有着重要意义。
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图 3 中间体及产物的红外光谱图
Fig. 3 FTIR spectra of intermediate and product
2. 2. 3 紫外光谱表征
由于离子液体的阳离子含有咪唑环,因此在紫外光区会有
吸收峰。如图 4 所示。N - 甲基咪唑的吸收峰位置在 228 nm
处,1 -(3 -(N -胱胺)丙基)- 3 -甲基咪唑溴离子液体的紫
外吸收峰在 220 nm,说明按照该方案制备出了含有咪唑环结构
的离子液体,并且其紫外吸收峰有稍许蓝移。发生蓝移的原因
是,N原子烷基化后,孤对电子消失,使 n→π* 跃迁减弱,吸
收峰蓝移。
图 4 甲基咪唑(a)和 1 -(3 -(N -胱胺)丙基)- 3 -甲基咪唑溴盐(b)的
紫外可见光谱图
Fig. 4 The Uv - vis spectra of N - Methy imidazole(a)and P(Cyt)MIMBr(b)
3 结 论
成功合成出了 1 -(3 -(N -胱胺)丙基)- 3 -甲基咪唑溴
离子
液体,对其中间物和最终产物进行表征,结果表明,成功将胱
胺引入到离子液体中,制备出了新型的胱胺功能化离子液体,
这对扩展离子液体的应用具有一定的意义。
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