全 文 ：＊ [基金项目 ] 本课题为江西省自然科学基金资助项目 , 项目编号 2007GQY0114
　 [收稿日期 ] 2008-11-07
复叶耳蕨根中化学成分的初步分析＊
李辉敏　吴家忠
(九江学院基础医学院　江西九江　 332000)
　　摘要　目的:对鳞毛蕨科复叶耳蕨属药用植物刺头复叶耳蕨 (Arachniodesexilis)根中所含化学成分种类进
行初步分析 , 为进一步研究刺头复叶耳蕨的化学成分提供依据。方法:采用试管及滤纸片预试法。结果:刺头
复叶耳蕨根中含有黄酮及其苷 、 酚类化合物 、 有机酸 、 香豆素 、 内酯 、 糖和苷 、 强心苷 、 蒽醌 、 甾体化合物 ,
不含生物碱 、 氨基酸 、 多肽 、 蛋白质 、 皂苷。结论:本实验结果可为刺头复叶耳蕨根中化学成分的提取分离提
供依据。
　　关键词　复叶耳蕨;化学成分;提取分离
　　中图分类号　R282.5　文献标识码　A　文章编号　1006-3838 (2009)01-0043-(03)
PRELIMINARYANALYSISONCOMPONENTSINARACHNIODESEXILIS
LIHuimin;WUJiazhong
(JiujiangUniversitySchoolofBasicMedicalSciences, Jiujiang, Jiangxi332000)
ABSTRACT　OBJECTIVE:TopreliminarilyclassifycomponentsoftherootofArachniodesexilis.METHOD:Test
tubemethodandfilterpapermethodwereusedinthestudy.CONCLUSION:Arachniodesexiliscontainsflavones, flavonolgly-
cosides, phenoliccomponents, organicacids, coumarins, saccharidesandglycosides, cardiacglycoides, anthraquinones, steroids,
butdoesntcontainalkaloids, aminoacids, peptidecompounds, proteinandsaponins.
KEYWORDS　Arachniodesexilis;components;extractandisolate
　　中药中所含的化学成分较为复杂 , 在提取分
离某种中药成分之前 , 一般可先进行简单的预实
验 , 初步了解其中可能含有哪些类型的成分 , 以
便对今后的提取分离工作提供一定的参考 。本实
验是系统预试法 , 即选用简单的定性方法对复叶
耳蕨根中各类成分进行较为全面的试验。[ 1]
1实验样品制取方法 [ 1]
1.1水浸液　取复叶耳蕨根粉末 5g, 加 50mL蒸馏
水浸泡过夜 , 滤取 3mL滤液供检查氨基酸 、 多肽
和蛋白质 , 其余部分置 60℃水浴中超声 10min,
滤液供糖 、 多糖 、 有机酸 、 皂苷 、 苷类 、 酚类 、
鞣质等项的检查用。
1.2乙醇提取液　取复叶耳蕨根粉末 5g加 95%乙
醇 60mL于水浴中加热回流 20 min过滤。滤液供
黄酮类化合物 、蒽醌 、 鞣质 、 苷类 、 有机酸 、 香
豆素 、 萜类 、内酯 、 甾体等项检查用 。
1.3酸性醇提取液　取复叶耳蕨根粉末 2g, 加 5%
盐酸乙醇溶液 10mL, 水浴中加热回流 10 min过
滤 , 滤液供生物碱检查用 。
1.4乙醚提取液 　取复叶耳蕨根的粉末 5g, 加
50mL乙醚浸泡过夜后超声 4h过滤 , 滤液供挥发
油 、 油脂 、甾体检查用 。
2　试管滤纸片预试法[ 2]
2.1检测生物碱 　取酸性醇提取液 , 先用稀
NH4OH调至中性 , 水浴蒸干 , 再加 5%H2SO4 4mL
溶解残渣 , 过滤 , 滤液供以下实验用:
(1)碘化汞钾试剂 (Mayer):取滤液 1mL,
加入试剂 1 ～ 2滴 。现象:无任何变化 。结论:不
含生物碱 。
(2)碘化铋钾试剂 (Dragendorf试剂):取滤
液 1mL, 加入试剂 1 ～ 2滴。现象:无任何变化。
结论:不含生物碱 。
(3)苦味酸:取滤液 1mL, 加入试剂 1 ～ 2
滴。现象:无任何变化 。结论:不含生物碱 。
2.2检测氨基酸 、 多肽和蛋白质
(1)双缩脲实验 (Biuret反应):取 1%硫酸
酮溶液与 10%氢氧化钠溶液各 1mL混合 。取 1mL
冷水浸液加入上述试剂 , 振摇 。现象:无明显变
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化 。结论:不含多肽或蛋白质 。
(2)茚三酮试剂 (Ninhydrin试剂):取冷水
浸液 1mL, 加入 0.2%茚三酮乙醇溶液 2 ～ 3滴 ,
摇匀 , 在沸水浴中加热 5min, 冷却后观察。现象:
不变色 。结论:不含氨基酸 、 多肽 、 蛋白质。
2.3检测有机酸
(1)用 pH试纸检查:将水提取液和乙醇提
取液分别用 pH试纸检查 。现象:(普通 PH试纸)
水提液 pH=5, 醇提液 pH=6, (精密 PH试纸)
水提液 pH=3.8。结论:可能含有游离酸或酚性
成分。
(2)溴酚蓝试剂:点乙醇提取液于滤纸片上 ,
喷洒 0.1%溴酚蓝试剂。现象:蓝色背景上呈黄色
斑点 , 喷氨水 , 再暴露在盐酸气体中 , 黄色背景
上呈蓝色斑点。结论:可能含有机酸 。
2.4检查酚类化合物和鞣质
(1)1%三氯化铁试剂:取乙醇提取液 1mL,
加入试剂 1 ～ 2滴 。现象:醇提液显蓝墨绿色 。结
论:可能含有酚类或鞣质 。
(2)香草醛 -盐酸试剂:将乙醇提取液点于
滤纸片上 , 干燥后喷试剂 。现象:干燥后呈浅红
色 。结论:含具有间苯二酚结构的化合物 。
(3)三氯化铁 -铁氰化钾试剂:将乙醇 、乙
醚提取液分别点于滤纸片上 , 喷试剂。现象:均
显蓝色斑点 。结论:可能含有鞣质 、 酚类或还原
性化合物。
为进一步确证是一般酚类化合物还是鞣质 ,
取乙醇提取液 , 加入适量明胶 (利用鞣质与明胶
产生沉淀而除去鞣质)后取滤液进行实验 。现象:
蓝色斑点。结论:含有酚类或还原性化合物。
(4)4-氨基安替匹林 -铁氰化钾试剂:将乙
醇点于滤纸片上 , 喷试剂 。现象:呈橙红色。结
论:可能含有酚羟基对位无取代基的化合物。
2.5检测还原糖 、多糖和苷
(1)菲林试剂 (Fehling):取水提取液 1mL,
加入新配制的菲林试剂 4 ～ 5滴 , 在沸水浴上加热
数分钟 。现象:产生红棕色的沉淀 。结论:可能
含还原糖或其它还原性物质。
另取 4mL水提液加入 1mL菲林试剂 , 在水浴
上加热 10min, 滤去沉淀 , 滤液用 10%盐酸酸化
后 , 加入过量盐酸 1mL, 于沸水浴上加热 30min。
现象:有红色混悬物析出 。结论:可能含苷类 。
(2)α-萘酚试验 (Molish反应):取水提取
液 1mL, 加入 5%α-萘酚乙醇溶液 2 ～ 3滴 , 摇
匀 , 沿管壁缓缓加入少量浓硫酸。现象:呈红色 。
结论:含糖类 、 多糖或苷类。
(3)氨性硝酸银:取水提取液 1mL, 加入
1mL试剂 , 混匀后 , 40℃微热数分钟。现象:出
现黑色沉淀。结论:含还原性物质。
2.6检测皂苷
(1)乙酸酐 -浓硫酸反应 (Liebermann-Bur-
chard反应):取乙醇提取液 1 ～ 2mL, 挥去乙醇 ,
残渣溶解或悬浮于乙酸酐中 , 滴加 1滴浓硫酸。
现象:无任何变化 。结论:不含有皂苷 。
(2)泡沫试验:取水提取液 1 ～ 2mL于试管
中 , 激烈振摇。现象:无明显变化。结论:不含
有皂苷。
2.7检测甾体和三萜类化合物　取乙醇提取液 1 ～
2mL, 挥去乙醇 , 残渣加入 1mL冰醋酸使其溶解 ,
再加入 1ml乙酸酐 , 最后加入 1滴浓硫酸。现象:
底部出现红色物质 。结论:可能含有甾体化合物 。
2.8检测黄酮类化合物
(1)盐酸 -镁粉反应:取乙醇提取液 1mL于
试管中 , 加入镁粉少许 , 再滴入浓盐酸数滴。现
象:呈红色 , 加热后仍显红色 。结论:可能有黄
酮类化合物存在。
(2)碱液试验:取乙醇提取液点于滤纸上 ,
与氨蒸汽接触。现象:呈黄色 , 当滤纸移开后黄
色渐渐褪去。结论:可能有黄酮类化合物存在。
(3)锌粒反应 (Shinoda试剂):取锌粒 , 加
入乙醇提取液于白瓷板上 , 再加入数滴盐酸。现
象:呈红色。结论:可能有含有黄酮类化合物。
2.9检测内酯 、香豆素及其苷
(1)重氮化试剂:取乙醇提取液 1mL, 加等
量 30%碳酸钠溶液水浴煮沸 3min, 冷却后加入新
配制的重氮化试剂 1 ～ 2滴 。现象:呈红色 。结
论:可能含香豆素及其苷类 。
(2)取乙醇提取液和水提取液点于滤纸上 ,
放在紫外灯下观察 。现象:出现浅蓝色荧光 (微
弱), 加碱后变黄;水提液较醇提液明显。结论:
可能含有香豆素及其苷类。
(3)异羟肟酸铁试验 (酯的反应):取乙醇
提取液 , 加 7%盐酸羟胺甲醇与 5%氢氧化钾甲醇
各 5滴 , 沸水浴上加热 3min, 冷却后用 2%盐酸
调 PH至 3 ～ 4 , 再加入 1%三氯化铁甲醇液。现
象:呈绛红色。结论:含酯 、 内酯 、香豆素及其
苷类 。
2.10检测蒽醌类
(1)1%硼酸水溶液:取乙醇提取液点于滤纸
上 , 喷试剂 , 紫外灯 (365nm)下观察 。现象:
呈浅黄色 , 有荧光 。结论:含蒽 (下转第 48页)
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1.2013mg/g, 平均含量为 1.1987mg/g, RSD为
0.3%。
2.9加样回收率试验　取同一批号并已知含量的
降脂宁片 (批号:20041120)适量 , 研细 , 取约
1g, 精密称定 , 共 6份 , 分别加入一定量的槲皮
素对照品 , 再按含量测定方法项下测定槲皮素的
含量 , 并计算平均回收率及标准偏差 。结果平均
回收率 97.8%, RSD1.6% (见表 1)。
表 1　加样回收率试验结果
取样量(g) 样品中槲皮素量(mg)加入的槲皮素量(mg) 实测槲皮素量(mg) 回收率(%)平均回(%) RSD(%)
0.2596 1.1 987 0.3902 1.5866 99.4
0.2588 1.1 987 0.3902 1.5837 98.7
0.2569 1.1 987 0.3902 1.5783 97.3 97.8 1.6
0.2976 1.1 987 0.3902 1.5859 99.2
0.2887 1.1 987 0.3902 1.5702 95.3
0.2908 1.1 987 0.3902 1.5761 96.7
表 2　样品含量测定
批号 槲皮素含量 (mg/g)
20041202 0.4265
20041204 0.4256
20041206 0.4163
20041208 0.4201
20041210 0.4170
20041216 0.4213
20041218 0.4175
20041220 0.4173
20041222 0.4120
20041225 0.4220
2.10样品含量测定
照样品含量测定方法分别测定了 10批次降脂
宁片槲皮素含量 , 结果见表 2。
3　讨论
3.1本法对提取方法的选择:笔者以甲醇为溶剂 ,
分别以回流 , 索氏提取 , 索氏提取加柱层析加酸
水解 3种方式进行考察 , 3种方式提取供试品溶液
所含槲皮素量之间有明显差距 , 以第 3种方法最
高 , 笔者选用索氏提取加柱层析加酸水解提取。
3.2用 HPLC测定降脂宁片中槲皮素含量方法 , 经
方法学研究表明此法具回收率好 , 重现性好 , 稳
定性好等优点 , 能排除其他成分干扰 , 可用于该
制剂的质量控制。
(上接第 44页)醌及其苷类 。
(2)5%氢氧化钾水溶液:取乙醇提取液点于
滤纸上 , 喷试剂 , 紫外灯 (365nm)下观察。现
象:呈蓝色荧光 。结论:含蒽醌及其苷类 。
(3)碱性试验:取乙醇提取液 1mL。加入
1%氢氧化钠溶液 1mL, 产生红色 , 加入少量 30%
过氧化氢液 , 加热后 , 红色不褪 , 用酸液酸化 ,
红色消褪。结论:含蒽醌及其苷类 。
2.11检测强心苷
(1)三氯化铁 -冰醋酸试剂 (K-K试剂):
取乙醇提取液 , 水浴挥干乙醇 , 残渣用 1%三氯化
铁溶液 0.1mL、 冰醋酸 20mL溶解 , 沿管壁缓缓加
入硫酸 1mL, 静置分层。现象:上层为褐色 , 下
层为紫红色 。结论:含强心苷 。
(2)碱性苦味酸试剂:9mL1%苦味酸乙醇液
与 1mL10%氢氧化钠 (临用前配制)用 1mL乙醇
提取液 , 加入 1滴试剂 , 放置。现象:放置半小
时后产生红色沉淀。结论:含强心苷 。
3　讨论
3.1刺头复叶耳蕨为鳞毛蕨科复叶耳蕨属药用蕨
类植物 , 具有清热利湿作用 , 可用于痢疾 、 烫火
伤等 [ 3] , 对其成分的研究有利于该植物资源的开
发 、 利用 。
3.2本试验结果表明 , 刺头复叶耳蕨根中含有黄
酮及其苷 、酚类化合物 、 有机酸 、香豆素 、 内酯 、
糖和苷 、 强心苷 、 蒽醌 、 甾体化合物 , 不含生物
碱 、 氨基酸 、 多肽 、 蛋白质 、 皂苷 。其中结果显
示刺头复叶耳蕨根中不含生物碱与以往资料显示
蕨类植物中不含生物碱相符 [ 4] 。
3.3本实验结果可为刺头复叶耳蕨根中化学成分
的提取分离提供依据 , 只有通过进一步的分析与
鉴定 , 才能确定其具体化合物。
参　考　文　献
[ 1] 蔡柏玲 , 雷钧涛 , 唐泽波.茉莉花根中化学成分的初
步分析 [ J] .吉林医药学院学报 , 2007, (28)∶31
[ 2] 李嘉蓉.天然药物化学实验 [ M] .北京:中国医药科
技出版社 , 2002.110
[ 3] 丁恒山.中国药用孢子植物 [ M] .上海:上海科技出
版社 , 1982.230
[ 4] 刘消飞 , 秦明珠.凤尾草根茎的化学成分研究 [ J] .
中草药 , 2002, 33 (2)∶113
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