全 文 ：第３３卷第１期 河 北 科 技 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．１
２０１２年２月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｆｅｂ．２０１２
文章编号：１００８－１５４２（２０１２）０１－００３２－０４
东北铁线莲总多酚的超声提取工艺研究
王晓林，钟方丽，孙 威，王慧竹
（吉林化工学院化学与制药工程学院，吉林吉林 １３２０２２）
摘 要：探索超声波辅助提取东北铁线莲总多酚的最佳工艺条件。以东北铁线莲总多酚的提取率
作为评价指标，选择乙醇体积分数、提取时间、料液比、提取次数为考察因素，采用正交试验法确定
了东北铁线莲中总多酚的最佳工艺，采用分光光度法对提取液中总多酚的含量进行了测定，检测波
长为７６６ｎｍ。结果表明：最佳提取工艺条件中乙醇浓度为５５％（体积分数），提取时间为３５ｍｉｎ，
料液比（质量比）为１︰３０，提取次数为３次。没食子酸在质量浓度为１．１１６～１１．１６０μｇ／ｍＬ时呈
现良好的线性关系。该提取方法操作简单，结果比较可靠，适用于东北铁线莲总多酚的提取。
关键词：东北铁线莲；总多酚；超声提取；正交试验法；没食子酸
中图分类号：Ｒ２８２．７１ 文献标志码：Ａ
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｉｎ
Ｃｌｅｍａｔｉｓ Ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒ．
ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ－ｌｉｎ，ＺＨＯＮＧ Ｆａｎｇ－ｌｉ，ＳＵＮ Ｗｅｉ，ＷＡＮＧ Ｈｕｉ－ｚｈｕ
（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｊｉｌｉｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉｌｉｎ Ｊｉｌｉｎ １３２０２２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｉｓ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ（ＴＰ）ｉｎ Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ
Ｒｕｐｒ．ｂｙ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．Ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ＴＰ ｉｎ Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒ．ａｓ ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ
ｉｎｄｉｃａｔｏｒ，ｓｏｍｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆａｃｔｏｒｓ，ｓｕｃｈ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅ，ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｂｅｔｗｅｅｎ ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ ａｎｄ
ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅｓ，ａｒｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＴＰ ｉｎ Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ
Ｒｕｐｒ．ｉｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ａｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ７６６ｎｍ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ
ＴＰ ｉｎ Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒ．ｗｉｔｈ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ａｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ａｓ ｆｏｌｏｗｓ：ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｔｉｍｅ ｉｓ ３５ｍｉｎ，ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ ｉｓ １∶３０，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ ｉｓ ３ｔｉｍｅｓ ｉｓ ５５％．Ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ｇａｌｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｉｔｓ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ ｓｈｏｗｓ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ａｔ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １．１１６～１１．１６０μｇ／ｍＬ．Ｉｔ ｉｓ ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ ｔｈａｔ
ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ｉｓ ｅａｓｙ ｔｏ ｏｐｅｒａｔｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ，ｓｏ ｉｔ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ＴＰ ｉｎ
Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｌｅｍａｔｉｓ Ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒ．；ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ（ＴＰ）；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ；ｇａｌ－
ｌｉｃ ａｃｉｄ
收稿日期：２０１１－０８－３１；修回日期：２０１１－１１－１６；责任编辑：张士莹
作者简介：王晓林（１９６９－），男，山东五莲人，副教授，硕士，主要从事天然产物有效成分的提取及纯化工艺方面的研究。
通讯作者：钟方丽教授。Ｅ－ｍａｉｌ：ｆａｎｇｌｉｚｈｏｎｇ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
东北铁线莲（Ｃｌｅｍａｔｉｓ Ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｒ．）是毛茛科铁线莲，属多年生蔓生草本植物，别名辣蓼铁线莲、
山辣椒秧子，其干燥根及根茎入药，药材名为威灵仙，广泛分布于中国东北三省［１－２］。威灵仙为传统常用中药
之一，化学成分复杂，药理作用广泛，具有降压、降糖、降血清胆固醇、利尿、抗菌、抑菌、镇痛、抗炎、解痉、抗肿
瘤、利胆等作用［３－５］，常用于风寒湿痹、关节不利、四肢麻木、扁桃体炎及食道癌等疾病的治疗［６－７］。植物多酚
具有较强的抗氧化作用以及明显的抑菌、抗癌、抗老化和抑制胆固醇升高等功效。超声波辅助提取是一种新
的萃取技术，具有提取时间短、提取效率高、能耗低等优点，被广泛应用于天然香料、植物酶、中草药活性成分
等的提取［８］。笔者以东北铁线莲总多酚的提取率为评价指标，采用单因素、正交试验法优化了超声辅助提取
东北铁线莲总多酚的工艺条件，为进一步利用和研究东北铁线莲提供实验依据。
１ 仪器与材料
１．１ 仪器
ＪＢＴ／Ｃ－ＹＣＬ型超声波药品处理机（山东济宁金百特电子有限责任公司提供）；Ｒ－５２ＡＡ型旋转蒸发器
（上海亚荣生化仪器厂提供）；Ｗ５－１００ＳＰ型恒温水浴锅（上海申生科技有限公司提供）；ＢＳ－６００Ｌ型电子分析
天平（上海精密科学仪器有限公司提供）；７５２Ｎ型三用紫外分析仪（上海精密科学仪器有限公司提供）；ＲＴ－
０８型多功能粉碎机（台湾荣聪精密科技有限公司提供）。
１．２ 材料
没食子酸对照品（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用）；东北铁线莲（安徽省亳州市华申药业
有限公司提供）；东北铁线莲的干燥根（经吉林化工学院化学与制药工程学院药学系薛健飞博士鉴定为毛茛
科铁线莲属）；无水碳酸钠，钨酸钠，钼酸钠，硫酸锂，乙醇等，所用试剂均为分析纯；水为重蒸馏水。
２ 方法与结果
２．１ 总多酚含量测定
２．１．１ 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品２．７９ｍｇ，置于５０ｍＬ棕色容量瓶中，加蒸馏水溶解，并定容至刻度，即得没食
子酸对照品溶液（１ｍＬ溶液中含没食子酸０．０５５ ８ｍｇ）。
２．１．２ 供试品溶液的制备
取干燥后的东北铁线莲粉末２．５ｇ，称定，置于锥形瓶中，加５０％（体积分数）乙醇适量，超声提取２次，
超声温度为４０℃。过滤，合并滤液，浓缩，冷却，定容至５０ｍＬ的容量瓶中，摇匀。吸取１．０ｍＬ，置于５０ｍＬ
容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，作为供试品溶液。
２．１．３ Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｅａｌｔｅｕ试剂（磷钼钨酸试液）的制备
在圆底烧瓶中加入钨酸钠５０ｇ，钼酸钠１２．５ｇ，蒸馏水３５０ｍＬ，浓磷酸２５ｍＬ，浓盐酸５０ｍＬ，充分混
匀，水浴回流１０ｈ。再加入硫酸锂７５ｇ，蒸馏水２５ｍＬ，溴水数滴，开口继续沸腾１５ｍｉｎ，使溴水挥发完全为
止。冷却，过滤，定容至５００ｍＬ棕色容量瓶中。将此溶液置于冰箱中保存，使用时加入１倍体积的蒸馏水。
２．１．４ 检测波长的选择
取供试品溶液及对照品溶液各５ｍＬ，放入５０ｍＬ容量瓶中，用水稀释至刻度，再吸取此溶液５ｍＬ，置于
２５ｍＬ容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。取该溶液１．０ｍＬ，置于１０ｍＬ的容量瓶中，加４ｍＬ蒸馏水，再加
入磷钼钨酸试液１．０ｍＬ，用２９％（质量分数）的碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置３０ｍｉｎ。以相应的试剂
为空白，在波长４００～８００ｎｍ范围内进行扫描，结果发现二者最大波长均为７６６ｎｍ，故确定检测波长为
７６６ｎｍ。
２．１．５ 分析方法
精确量取１．０ｍＬ样品溶液，放入１０ｍＬ容量瓶中，加４ｍＬ蒸馏水，再加入磷钼钨酸试液１．０ｍＬ，用
２９％（质量分数）碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置３０ｍｉｎ。按照分光光度法，在７６６ｎｍ波长处测定其吸
光度［９］。
２．１．６ 线性关系考察
精确吸取没食子酸对照品溶液０．５，１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ｍＬ，放入２５ｍＬ容量瓶中，加适量蒸馏水，
再分别加入磷钼钨酸试液１．０ｍＬ，用２９％（质量分数）碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀。以相应的试剂为空
白，在７６６ｎｍ波长下测定吸光度，以吸光度Ａ为纵坐标，没食子酸质量浓度ρ为横坐标绘制标准曲线，求得
回归方程为Ａ＝０．０８６ ２８ρ＋０．０２９ １９，Ｒ＝０．９９９ ５。
３３ 第１期 王晓林等 东北铁线莲总多酚的超声提取工艺研究
２．１．７ 精密度实验
取标准曲线项下质量浓度为０．００４ ６４ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液，按“２．１．５”所述方法，连续测定５次吸光
度，得知 ＲＳＤ值为０．１３％（ｎ＝５），结果表明仪器精密度良好。
２．１．８ 稳定性实验
取供试品溶液，分别于配制后的０，３０，６０，１２０，１８０，２４０ｍｉｎ，按“２．１．５”所述方法测定吸光度。结果表
明，供试品溶液在３０ｍｉｎ内稳定，然后稳定性下降，但在６０～１８０ｍｉｎ时吸光度值比较稳定，所以供试品溶
液配制完成后应尽快进行吸光度的测定。
２．１．９ 重现性实验
取同一批号的药材粉末５份，按“２．１．２”所述方法制备，按“２．１．５”所述方法进行测定，得知ＲＳＤ值为
１．６５％（ｎ＝５），结果表明该方法重现性良好。
２．１．１０ 加样回收率实验
精密称取已知质量分数（５．５６％）的样品各０．５ｇ，共５份，精密加入没食子酸对照品２７．６ｍｇ，按“２．１．２”所
述方法制备，按“２．１．５”所述方法进行测定，计算回收率，结果见表１。
表１ 加样回收率测定结果
Ｔａｂ．１ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ
编号 取样量／ｇ 样品质量／ｍｇ 对照品加入量／ｍｇ 测得总量／ｍｇ 回收率／％ 平均值／％ ＲＳＤ值／％
１ ０．５００ ２ ２７．８１ ２７．６０ ５５．０３ ９８．６３
２ ０．５００ ８ ２７．８４ ２７．６０ ５４．７４ ９７．４８
３ ０．４９９ ６ ２７．７８ ２７．６０ ５５．３２ ９９．７８ ９８．７２ ０．８５
４ ０．５００ ４ ２７．８２ ２７．６０ ５５．０３ ９８．６０
５ ０．５００ ４ ２７．８２ ２７．６０ ５５．１７ ９９．１０
２．２ 正交试验优选东北铁线莲总多酚超声辅助提取工艺
２．２．１ 因素及水平考察
通过单因素探索试验，分别对料液比（质量比）（１∶１０，１∶２０，１∶３０，１∶４０，１∶５０），提取时间（１０，２０，
３０，４０，６０ｍｉｎ），提取次数（１，２，３，４，５），乙醇体积分数（３０％，５０％，６０％，７５％，９０％）等因素和水平进行了探
索。以东北铁线莲总多酚的提取率作为评价指标，确定较好的提取因素与水平如下：料液比为１∶２０，提取
时间为３０ｍｉｎ，提取次数为３次，乙醇体积分数为５０％。单因素探索结果可作为确定正交试验因素与水平
数的重要依据。根据单因素探索性试验结果，选择提取次数、料液比、提取时间和乙醇体积分数４个因素，每
个因素选择３个水平，设定因素水平表，见表２。
表２ 因素及水平表
Ｔａｂ．２ Ｔａｂｌｅ ｏｆ ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ
水平因素
Ａ
料液比（质量比）
Ｂ
提取次数
Ｃ
提取时间／ｍｉｎ
Ｄ
乙醇体积分数／％
１ １︰２０ １ ２５ ４５
２ １︰２５ ２ ３０ ５０
３ １︰３０ ３ ３５ ５５
２．２．２ 提取方法
取东北铁线莲粉末２．５ｇ，按Ｌ９（３４）正交试验表设计方案进行试验，加入一定体积分数的乙醇进行提
取，合并提取液，过滤。将滤液浓缩至５０ｍＬ，按“２．１．２”所述方法制备供试品溶液，按“２．１．５”所述方法测定
提取液中总多酚的含量，进而得出提取的总多酚的质量和总多酚提取率，总多酚提取率＝总多酚质量／东北
铁线莲药粉质量×１００％。正交试验结果见表３。
４３ 河 北 科 技 大 学 学 报 ２０１２年
表３ 正交试验结果
Ｔａｂ．３ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
序号
Ａ
料液比
Ｂ
提取次数
Ｃ
提取时间
Ｄ
乙醇体积分数
总多酚提取率／％
１ １ １ １ １ ２．８７
２ １ ２ ２ ２ ４．２１
３ １ ３ ３ ３ ５．３２
４ ２ １ ２ ３ ４．４７
５ ２ ２ ３ １ ４．４４
６ ２ ３ １ ２ ４．２８
７ ３ １ ３ ２ ４．１２
８ ３ ２ １ ３ ４．４０
９ ３ ３ ２ １ ５．０５
Ｋ１ｊ ４．１３ ３．８２ ３．８５ ４．１２
Ｋ２ｊ ４．４０ ４．３５ ４．５８ ４．２０
Ｋ３ｊ ４．５２ ４．８８ ４．６３ ４．７３
Ｒ ０．３９ １．０６ ０．７８ ０．６１
优水平 Ａ３ Ｂ３ Ｃ３ Ｄ３
以东北铁线莲总多酚的提取率为指标，根据正交试验结果，由表３可知适宜的实验条件为Ａ３Ｂ３Ｃ３Ｄ３。
因为所有的因素水平均为最高点，故不能确定所得实验条件是否为最佳条件，通过补充实验进行验证。由于
单因素实验结果已表明提取３次已将东北铁线莲中总多酚提取完全，所以提取次数固定为３次，由于其他条
件均为最高点，故每个因素均进行第４水平实验，即乙醇体积分数为６０％，其他３个因素都用最佳实验条
件；提取时间为４０ｍｉｎ，其他３个因素都用最佳实验条件；溶剂用量为３５倍，其他３个因素都用最佳实验条
件。实验结果见表４。
表４ 补充实验结果
Ｔａｂ．４ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
试验号 料液比（质量比） 提取次数／次 提取时间／ｍｉｎ 乙醇体积分数／％ 吸光度 总多酚提取率／％
１ １∶３０ ３ ３５ ５５ ０．５０８ ５．５５
２ １∶３５ ３ ３５ ５５ ０．５０８ ５．５６
３ １∶３０ ３ ４０ ５５ ０．４９６ ５．４１
４ １∶３０ ３ ３５ ６０ ０．４３８ ４．７４
结果表明，第４水平实验并未明显提高东北铁线莲中总多酚的提取率。所以确定东北铁线莲中总多酚
的最佳提取条件如下：料液比（质量比）为１∶３０，提取时间为３５ｍｉｎ，提取次数为３次，乙醇体积分数为
５５％。
２．２．３ 工艺验证性实验
为了验证实验所得的最佳工艺条件的稳定性，按优化工艺条件进行３次验证性实验，然后各取３０ｍＬ
提取液，倒入称重后的蒸发皿中水浴蒸干，基本蒸干后放入电热鼓风干燥箱中干燥，待其干燥至恒重后称重，
由差值得到浸膏质量，计算干浸膏总多酚的含量，结果见表５。实验结果表明：东北铁线莲中总多酚的提取
率分别为５．５５％，５．５６％，５．３３％，平均提取率为５．４８％，干浸膏中总多酚的质量分数分别为２３．４８％，
２３．４９％，２２．５３％，平均质量分数为２３．１７％。这表明优化的工艺条件重现性高，稳定可靠。
３ 讨 论
３．１ 料液比、提取时间、乙醇体积分数的选择
单因素实验中料液比（质量比）分别设定为１∶１０，１∶２０，１∶３０，１∶４０，１∶５０，提取时间分别设定为５，
（下转第８８页）
５３ 第１期 王晓林等 东北铁线莲总多酚的超声提取工艺研究
［８］ 王 月，郭 凤，林 英．Ｍｉｃｒｏ－Ｔｏｍ番茄离体再生条件的选择［Ｊ］．北方园艺（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ），２０１０（１８）：１３９－１４１．
［９］ 乔永旭．番茄再生体系的建立［Ｊ］．北方园艺（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ），２０１０（１７）：１７４－１７６．
［１０］ 毕建水，李翠翠，徐丽丽．培养基和继代时间对番茄叶片愈伤组织诱导和芽分化的影响［Ｊ］．安徽农学通报（Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ
Ｂｕｌｅｔｉｎ），２００８，１４（１３）：４１－４２．
［１１］ 蒋素华，顾东亚，崔 波，等．番茄真叶愈伤组织诱导及植株再生研究［Ｊ］．北方园艺（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ），２００９（１０）：１１３－１１４．
［１２］ 张艳芳，霍秀文，苏彩霞，等．番茄遗传转化体系的建立［Ｊ］．农业生物技术学报（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ），２００８，２４（３）：
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
５８－６１．
（上接第３５页）
１０，２０，３０，４０，６０ｍｉｎ，乙醇体积分数分别设定为３０％，５０％，６０％，７５％，９０％。结果表明：料液比（质量比）
为（１︰２０）～（１︰４０）时，总多酚提取率较高且比较稳定；提取率随提取时间的延长而增加，在３０ｍｉｎ时提
取率最高；乙醇体积分数为５０％时提取率最高。所以在正交试验中选择料液比（质量比）为１∶２０，１∶２５，
１∶３０，提取时间为２５，３０，３５ｍｉｎ，乙醇体积分数为４５％，５０％，５５％，进一步考察各因素对提取效果的影响。
表５ 验证性实验结果
Ｔａｂ．５ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｐｒｏｏｆ ｔｅｓｔ
项 目
序 号
１ ２ ３
平均值
总多酚的提取率／％ ５．５５ ５．５６ ５．３３ ５．４８
ｗ（总多酚）／％ ２３．４８ ２３．４９ ２２．５３ ２３．１７
干膏中总多酚质量／ｇ ０．１３８ ７ ０．１３９ ０ ０．１３３ ２ ０．１３７ ０
３．２ 提取次数的选择
单因素实验中提取次数的考察按如下方案进行：称取东北铁线莲药材粉末约２．５ｇ，量取２０倍量５０％
（体积分数）的乙醇，分别提取１，２，３，４，５次，每次超声（４０℃）３０ｍｉｎ，过滤。把每次的滤液定容至５０ｍＬ的
容量瓶中，按“２．１．２”所述方法制备供试品溶液，按 “２．１．５”所述方法测定提取液中总多酚的含量，进而得出
提取的总多酚质量和总多酚提取率。结果表明：提取３次可以将东北铁线莲总多酚提取完全，其中前２次即
可提取总量的８９％。
４ 结 语
通过正交试验法对东北铁线莲总多酚的超声辅助提取工艺条件进行了优化，并按最佳工艺进行了验证
试验。结果证明，该工艺提取东北铁线莲总多酚路线简单、提取率高、操作容易控制、稳定性好，为东北铁线
莲总多酚提取的工业生产提供了合理依据。
参考文献：
［１］ 许世泉，王英平，邵 财，等．东北铁线莲最佳采收期的研究［Ｊ］．特产研究（Ｓｐｅｃｉａｌ Ｗｉｌｄ Ｅｃｏｎｏｍｉｃ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｅａｒｃｈ），２００７，
２９（４）：２５－２６．
［２］ 朱有昌．东北药用植物［Ｍ］．哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，１９８９．
［３］ 方文贤．实用临床抗衰老中药［Ｍ］．沈阳：辽宁科学技术出版社，２００２．
［４］ 章蕴毅．威灵仙解痉抗炎镇痛［Ｊ］．中成药（Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｐａｔｅｎｔ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ），２００１，２３（１１）：８０８－８１１．
［５］ 吴依娜，贺文娟．中药材威灵仙的化学成分和药理研究概述［Ｊ］．中国医药导报（Ｃｈｉｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｈｅｒａｌｄ），２００８（２０）：２７－２８．
［６］ 徐小云，王云霞，李智勇．威灵仙化学成分和药理作用研究进展［Ｊ］．现代中医药（Ｍｏｄｅｒｎ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ），２００３，１５（４）：
６７－６９．
［７］ 常敏毅．抗癌良方［Ｍ］．长沙：湖南科学技术出版社，１９９３．
［８］ 牛 波，邱海霞，田景振，等．超声强化提取技术［Ｊ］．山东中医杂志（Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ），２０００，１９（１０）：
６２９－６３０．
［９］ 唐 前，罗燕英，唐 玲，等．正交实验优选金花茶种子总多酚的最佳提取工艺［Ｊ］．时珍国医国药（Ｌｉｓｈｉｚｈｅｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉ－
ｃａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ），２０１０，２１（４）：７９２－７９３．
８８ 河 北 科 技 大 学 学 报 ２０１２年