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紫外分光光度法测定虎耳草乙酸乙酯萃取物中总黄酮的含量



全 文 :298
紫外分光光度法测定虎耳草乙酸乙酯萃取物中总黄酮的含量
徐应淑,龙艳钰
(遵义医学院药化教研室,贵州 遵义 563003)
[摘 要] 目的建立紫外分光光度法测定虎耳草乙酸乙酯萃取物中总黄酮含量的方法,为考察其内在质量提供依据。
方法采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,在波长为 352.5nm处测定萃取物总黄酮的含量, 并对其精密度、稳定
性和回收率试验进行考察。结果芦丁在浓度为 0.0022~0.0242mg/mL的范围内具有良好的线性关系,R2=0.9992, 该
法的平均回收率为 99.02%, RSD=1.05%. 结论该方法简便、准确、重复性好,能有效测定虎耳草乙酸乙酯萃取物中
总黄酮的含量,从而能有效地控制虎耳草药材质量。
[关键词] 虎耳草;总黄酮;紫外分光光度法;乙酸乙酯萃取物
[中图分类号] R917 [文献标识码] B [文章编号] 1000-2715 (2011) 03-0298-02
第 34卷第 3期 遵 义 医 学 院 学 报 Vo1.34 No.3
2011年 6月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI Jun. 2011
知发展[3]。~6期所需要的铁的来源主要是胎儿期的
储备,这些储备只能维持到生后 4~6月龄。至 4~6月
龄后应添加富含铁的辅食。肉类,特别是猪肉、牛肉
等含有丰富和高生物利用率的铁、锌等微量元素[4]。9
月龄开始可以添加瘦肉,肝类。本次调查发现~9~12
月龄组血红蛋白浓度比较有显著性差异。这与这年
龄段添加动物性食物不足有关。在不合理因素构成
比中占到了 10.1%。陈旧的喂养观念认为动物性食
物不易消化吸收,喜欢给婴幼儿喂养稀饭,羹汤等食
物。造成了婴幼儿铁、锌元素缺乏,严重的可引起缺
铁性贫血,影响了婴幼儿的生长发育和智力发育。
3.4合理建议 通过本次喂养调查,发现遵义市婴幼
儿喂养主要存在以上三方面的问题,提出了以下合
理化建议:①儿保人员定期进行健康体检和喂养指
导,在体检中发现婴幼儿出现生长问题及喂养不合
理现象时及时向喂养人指出,纠正错误。并追踪观
察,使指导具有定期性和可持续性;② 医疗机构开
展形式多样的健康教育活动,定期举办各种科学育
儿专题讲座。利用周末或节假日到街上宣传喂养知
识,发放宣传单。摈弃陈旧的喂养观念,宣传科学、
正确的喂养方法;③开展社区健康促进活动,传播科
学育儿知识与社区联合定期举办学习班,向准妈妈,
孕妇,新妈妈进行健康教育,宣传喂养知识;④拓宽
宣传渠道,加强媒体作用,可与当地电视台,电台,报
社等媒体合作,制作儿童保健科普片或者采取专家
问答的形式进行宣传。
[参考文献]
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长发育和健康的影响[J].中国妇幼保健,2009,24(26):
3754.
[责任编辑:李勇 收稿日期:2011-04-21]
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虎耳草作为一种常用中草药,具有消炎、解毒的
功效。用于急性中耳炎,风热咳嗽,风疹瘙痒等,是
常用的民族药;在我国有广泛的分布[1]。刘世旺等[2]
报道虎耳草乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、苏云金
芽孢杆菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等的生长有抑制
作用。丁家欣等[3]报道虎耳草的乙酸乙酯提取物,
在体外可抑制前列腺癌细胞的增殖,诱导前列腺癌
细胞凋亡。文献[4]报道虎耳草中的化学成分主要是
黄酮类化合物,为了考察其内在质量,本论文采用紫
外分光光度法测定虎耳草乙酸乙酯提取物中总黄酮
的含量,为进一步研究和应用该药物提供依据。
1 仪器与试药
1.1仪器 TU-1901型双光束紫外-可见分光光计(北
京谱析通用仪器有限责任公司);SZ-93 自动双重
纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。
1.2试药 虎耳草(经遵义医学院生药学教研室鉴定
为虎耳草科植物虎耳草);芦丁对照品(批号
0081-9904中国药品生物制品鉴定所);
2 实验方法与结果
2.1虎耳草乙酸乙酯萃取物的制备 称取虎耳草全
草 3.5kg,粉碎。用 80%乙醇加热回流 3h,共两次。
提取液合并,减压浓缩得浸膏。加适量水,用石油醚
萃取除去叶绿素等亲脂性成分,水层再用乙酸乙酯
萃取至无色。合并,减压浓缩,过 D101大孔树脂,
用蒸馏水洗脱柱子,除去糖分等水溶性杂质,经mol-
ish反应,检测呈阴性后再用 80%乙醇洗脱柱子,收
集洗脱液浓缩,得到乙酸乙酯萃取物粉末状。通过
三氯化铝反应、盐酸 -镁粉反应均为阳性。
2.2对照品溶液的制备 精密称取芦丁标准品 5.5 mg,
置于 25mL量瓶中,加入甲醇溶解,置于水浴微热,
使其溶解完全,放冷,再用甲醇定容至刻度,摇匀,浓
度为 0.22mg/mL,备用。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取虎耳草乙酸乙酯
萃取物 0.1088g,置于 100mL容量瓶中,用甲醇超
声使溶解,用甲醇定容,浓度为 1.088mg/mL。
2.4测定波长的选择 精密移取对照品 2mL置 10mL
容量瓶中,加入甲醇至5mL,加5%NaNO2溶液0.3mL,
摇匀,放置 6min,加 10%Al(N03) 3溶液 0.3mL,再加
入 NaOH试液 3mL,用甲醇定容至刻度,同法制备
供试品溶液,以甲醇溶液作为空白,在 200~600nm
范围内进行扫描,结果在 352.5 nm两者均有最大吸
收,故确定最大吸收波长为 352.5nm。见图 1和图
2
图 1 芦丁对照品的波谱扫描
图 2 供试品溶液的波谱扫描
2.5绘制标准曲线 取上述芦丁对照品溶液为 0.1、
0.3、0.5、0.7、0.9、1.1mL,分别置于 10 mL量瓶中,
各加甲醇至 5mL,加 5%NaNO2溶液 0.3mL,加 10%
Al(N03)3溶液 0.3mL,摇匀,加入NaOH试液 3mL,
用甲醇定容至刻度,放置 15min,在 352.5nm处测
定吸光度,以吸光度为纵座标Y,浓度为横坐标X作
图,得线性方程 y=30.939x+0.0549,相关系数
R2=0.9992。结果表明,芦丁溶液浓度在0.0022~0.0242mg/
mL范围内呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验 分别精密吸取对照品溶液 0.5mL,
供试品溶液 0.2mL置于 10mL容量瓶中,加甲醇至
5.0mL,其余按“2.5”操作,在最大波长 352.5 nm处
连续进样 6次测吸光度,计算得出对照品 RSD为
0.85%,供试品 RSD为 0.91%,说明此方法的精密
度较好。
2.7稳定性实验 分别精密吸取芦丁对照品溶液
0.5mL,供试品 0.2mL置于 10mL容量瓶中,按
“2.5”项下操作,每隔 5min测吸光度,结果对照品
RSD为 1.14%,供试品 RSD为 1.56%。说明对照品
溶液和供试品溶液在 35min内基本稳定。
2.8加样回收试验 取已知黄酮含量的供试品溶液 9
份,各 1mL于 10mL量瓶中,分三组,第一组精密加
入芦丁对照品溶液 0.06mL,第二组加入 0.36mL,第
三组加入 0.66mL,按标准曲线项下操作,测定吸光
[收稿日期]2011-04-07
[基金项目]贵州省卫生厅科学技术基金项目,编号:gzwkj2009-1-01
[作者简介]徐应淑(1976—),女,贵州遵义人,硕士,副教授,研
究方向:天然药物化学。
遵 义 医 学 院 学 报 34卷
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度,平均回收率 99.02%,RSD为 1.05%。
2.9样品的含量测定 分别称取不同批次虎耳草,按
供试品制备方法制成供试品溶液,再按“标准曲线项
下”的方法,测定其吸光度,计算,即得。
表 1 样品总黄酮含量测定
批次 Abs 总黄酮含量(%)
20100109 0.4238 54.79
20101224 0.3526 44.22
3 结论
通过该方法可以简便快速地测定虎耳草乙酸乙
酯提取物中总黄酮的含量。能为虎耳草全草的质量
控制提供了新的评价指标。为资源的合理应用、保
护,为进一步对该植物开发和研究提供理论基础。
[参考文献]
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[3] 丁家欣,张立石,张玲,等.虎耳草提取物对前列腺癌细胞
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中国药科大学学报, 1988,19(12):1-3.
[责任编辑:王福军]
心包内纱布压迫止血的护理体会
吴 艳,罗培芳,闫廷容,张 莉,王安素,李 金,曾 莉
[关键词] 体外循环;术中出血;护理
[中图分类号] R473.6 [文献标识码] B [文章编号] 1000-2715 (2011) 03-0300-02
出血是心脏直视手术中常见的并发症之一,一
般通过缝合多能控制。但对于一些暴露差、局部张
力高、主动脉瘤壁薄弱,心肌组织脆弱且缺乏心外膜
覆盖部位的出血,则缝合止血往往很困难,勉强缝合
有时可导致组织撕裂造成大出血。术中出血多能通
过手指压迫控制, 根据其原理我们采用纱布压迫来
控制难治性出血, 其临床效果良好[1]。由于该止血
方法可酿成再出血及引起感染等不良后果,一般不
作为常规的止血手段,但是对于广泛渗血及汹涌的
渗血,如果出血处显露困难难以直接修补,为减少再
次转机可能,可采用纱布填塞压迫止血以保患者生
命安全。方法是采用无菌干纱布或绷带填塞压迫,
填塞处勿留死腔,要保持适当的压力,填塞时纱布数
及连接一定要绝对准确可靠,填塞时要做到有序的
折叠。观察 48h无活动性出血可拔出纱布[1],并且
做好处理再次出血的一切准备。我院于 2010年 7
月 28日采用纱布压迫止血法成功抢救左房恶性肿
瘤切除术后左房后壁广泛渗血患者 1例,现将护理
体会报告如下。
1 一般资料
患者男,52岁,因心悸、气短 20+d,心脏彩超提
示“左房粘液瘤”,于 2010年 7月 24日入院。医疗
诊断:“左房粘液瘤”。积极完善术前相关准备。2010
年 7月 28日在全麻体外循环心内直视下行左房粘
液瘤摘除术,术中探查见肿瘤已侵犯左房后壁,扩大
切除部分左房行左房后壁重建术,停机后见左房后
壁渗血较多,不能维持正常血压,纱布加压填塞后,
出血明显减少(每小时〈100mL),撤出纱布出血又
增多。由于患者渗血多,纱布加压止血效果明显,继
续留置 3块纱布填塞左房后壁止血,纱布末端从剑
突下引出固定,心包纵隔置入引流管各一枚后关胸。
第 34卷第 3期 遵 义 医 学 院 学 报 Vo1.34 No.3
2011年 6月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI Jun. 2011