全 文 ：2013 年 05 月(上)
收稿日期:2012-08-28;修回日期:2013-03-04
基金项目:山东省技术创新项目(201210916001)
作者简介:郭时金(1974 －)，男，助理研究员，硕士研究生，研
究方向为新兽药的研发与应用，gsj7877@ 126． com．
清瘟败毒颗粒中栀子苷和菝葜皂苷元
的薄层鉴别
郭时金1，2，邓旭明1，沈志强2
(1．吉林大学 畜牧兽医学院，长春 130062;2．山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600)
中图分类号:S853． 9 文献标识码:B 文章编号:1004-7034(2013)05 － 0125 － 02
关键词:清瘟败毒颗粒;栀子苷;菝葜皂苷元;薄层鉴别
摘 要:为了建立清瘟败毒颗粒中栀子苷和菝葜皂苷元的薄层鉴别方法，试验以乙酸乙酯 －丙酮 －甲
酸 －水( 10∶7∶2∶0． 5) 为展开剂，喷以 10%硫酸乙醇溶液，自 100 ℃开始加热至斑点显色清晰，于自然
光下检测栀子苷的存在;以甲苯 －丙酮( 9∶1) 为展开剂，喷以 5%香草醛硫酸溶液，自 105 ℃开始加热
至斑点显色清晰为止，自然光下检测菝葜皂苷元的存在。结果表明:在自然光下，清瘟败毒颗粒与栀
子苷、菝葜皂苷元在比移值( Rf值) 相同处有相同斑点。说明该试验建立的鉴别清瘟败毒颗粒中栀子
苷和菝葜皂苷元的方法，专属性强，重现性好，适合于快速检验。
清瘟败毒颗粒是由石膏、黄连、连翘等 14 味药材
组成的复方制剂，具有泻火解毒、凉血之功效，兽医临
床上主要用于治疗鸭传染性浆膜炎、猪高热综合征、
猪链球菌病、犬瘟热等瘟性烈性疾病。清瘟败毒颗粒
是清瘟败毒方剂的一个新剂型，目前还未建立质量
标准。
栀子苷是栀子干燥成熟果实中含有的一种环烯
醚萜苷类化合物，是栀子的主要药效成分［1］，在本方
剂中起重要作用，故试验研究了栀子苷的薄层鉴别。
知母为方中重要药味，主要含有皂苷及皂苷元，
皂苷元是皂苷水解后去掉结合糖基的产物，主要有菝
葜皂苷元、马尔可皂苷元、新吉托皂苷元和薯蓣皂苷
元等［2］，但以菝葜皂苷元最常见，故本制剂选择菝葜
皂苷元为鉴别指标。
薄层色谱法(TLC)又叫薄层层析，是色谱法中的
一种，是常用的快速分离和定性分析微量物质的一种
很重要的试验技术，重现性好，能反映组方药味的特
征色谱，广泛应用于中草药研究。本试验采用 TLC
对清瘟败毒颗粒中的主要成分栀子苷和菝葜皂苷元
的鉴别方法加以研究，建立了可行的薄层鉴别方法，
为该制剂的科学生产提供充分的试验依据。
1 材料
1． 1 主要仪器
回流提取装置、薄层色谱展开缸，上海信宜仪器
设备厂生产;三用紫外分析仪(型号为 ZF － 2) ，天津
市富兰斯电子科贸有限公司生产;电子天平(型号为
Sartorius － BT25S) ，北京赛多利斯仪器系统有限公司
生产;超声波清洗机(型号为 SB3200) ，上海新芝生物
技术研究所提供;电热恒温干燥箱(型号为 301) ，龙
口市先科仪器公司生产。
1． 2 主要试剂
菝葜皂苷元对照品(批号为 110744 － 200509) ，
栀子苷对照品(批号为 110749 － 200714) ，均由中国
药品生物制品研究所生产;GF254 硅胶板(10 cm ×
20 cm，批号为 20111228) ，烟台江友硅胶开发有限公
司生产;清瘟败毒颗粒(批号为 20120312、20120321、
20120405) ，山东绿都安特动物药业有限公司生产。
2 方法
2． 1 栀子苷的 TLC鉴别
2． 1． 1 供试品溶液的制备 取 3 个批次的清瘟败毒
颗粒各 1 g，研细，加甲醇 5 mL，超声 15 min，滤过，滤
液作为供试品溶液。
2． 1． 2 对照品溶液的制备 取栀子苷对照品，加甲
醇制成每毫升含 0． 5 mg的溶液，作为对照品溶液。
2． 1． 3 阴性对照品溶液的制备 取缺栀子苷的阴性
对照样品，按供试品溶液制备项下方法操作，制得阴
性对照品溶液。
2． 1． 4 薄层层析 吸取上述 5 种溶液各 10 μL，分
别点于均以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 板
上，以乙酸乙酯 －丙酮 －甲酸 －水(10∶7∶2∶0． 5)为展
开剂展开，取出，晾干，喷 10%硫酸乙醇溶液(显色
剂) ，自 100 ℃开始加热至斑点显色清晰为止。在供
521《黑龙江畜牧兽医》科技版
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2013.09.055
试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上可显出相同
颜色的斑点，而阴性对照品溶液中在相应位置不出现
相应斑点。
2． 2 菝葜皂苷元的 TLC鉴别
2． 2． 1 供试品溶液的制备 水饱和正丁醇溶液的配
制:将正丁醇和纯化水混合(比例为 1∶1) ，振摇混匀，
放置过夜，混合液分层，上层为水饱和的正丁醇溶液。
称取 3 个批次的清瘟败毒颗粒各 15 g，分别加 30 mL
水溶解，再各加入水饱和正丁醇溶液约 30 mL，振摇
提取 3 次，合并正丁醇溶液，置水浴上蒸干，残渣各加
1 mL甲苯使其溶解，作为供试品溶液。
2． 2． 2 对照品溶液的制备 取菝葜皂苷元对照品，
加甲醇制成每毫升含 5 mg的溶液，作为对照品溶液。
2． 2． 3 阴性对照品溶液的制备 取缺菝葜皂苷元的
阴性对照样品，按供试品溶液制备项下方法操作，制
得阴性对照品溶液。
2． 2． 4 薄层层析 吸取上述 5 种溶液各 10 μL，分
别点于均以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 板
上，以甲苯 －丙酮(9∶1)为展开剂展开，取出，晾干，喷
以 5%香草醛硫酸溶液(显色剂) ，自 105 ℃开始加热
至斑点显色清晰。在供试品色谱中，与对照品色谱相
应的位置上可显出相同颜色的斑点，而阴性对照品溶
液在相应位置不出现相应斑点。
3 结果与分析
3． 1 栀子苷的鉴别(结果见图 1)
1 ～ 3．清瘟败毒颗粒;4．阴性对照品溶液;5．栀子苷对照品溶液。
图 1 栀子苷的鉴别
由图 1 可以看出，在供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上，可显示出相同颜色的荧光斑点，
而阴性对照品溶液中不出现相应斑点。
3． 2 菝葜皂苷元的鉴别(结果见图 2)
由图 2 可以看出，在供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上显示出相同颜色的斑点，而阴性对
照品溶液无干扰。
4 讨论
4． 1 栀子苷
试验采用《中华人民共和国兽药典》中所记载的
栀子苷鉴别方法，与参考文献［3 － 5］所采用的方法
一致，其他研究人员多是对展开剂和显色剂浓度进行
1，2，3．清瘟败毒颗粒;4．菝葜皂苷元对照品溶液;
5．阴性对照品溶液。
图 2 菝葜皂苷元的鉴别
调整，展开剂中各成分的比例影响各成分的分离度及
待测成分的比移值(Rf 值) ，本试验所用方法各成分
分离良好，无拖尾现象，Rf值约为 0． 7，适合分析的需
要，显色剂显色清晰，说明该方法适合检测清瘟败毒
颗粒中的栀子苷。
4． 2 菝葜皂苷元
对知母中菝葜皂苷元进行薄层色谱鉴别研究的
方法有很多，如张蜀等［6］对丹青颗粒中的菝葜皂苷
元以甲苯 －丙酮(9∶1)为展开剂，以 10%磷钼酸乙醇
为显色剂进行了有效鉴别。路绪文等［7］以苯 －丙酮
(9∶1)为展开剂，以 5%香草醛硫酸溶液为显色剂建
立了有效鉴别黄连增液颗粒中菝葜皂苷元的 TLC 鉴
别方法，多是调整显色剂，展开剂基本相似。本试验
所采用的菝葜皂苷元 TLC 鉴别方法为《中华人民共
和国兽药典》中最常见方法，斑点清晰，方法简单，Rf
值大小合适，适于菝葜皂苷元的鉴别分析。
5 结论
清瘟败毒颗粒是复方制剂，药味繁多，是清瘟败
毒散的改剂型产品，散剂可用显微鉴别各成分，但颗
粒剂由于不具备散剂的原始纤维或药材结构特点，故
不能使用显微鉴别，因此本试验进行了清瘟败毒颗粒
中栀子苷和菝葜皂苷元的薄层鉴别研究，2 种成分的
鉴别结果是斑点清晰、专属性强，能较好地反映清瘟
败毒颗粒中栀子苷和菝葜皂苷元的质量要求。
参考文献:
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Heilongjiang Animal Science
and Veterinary Medicine № 05 2013