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宝兴地区虎耳草化学成分的定性鉴定



全 文 :四川畜牧兽医·2009·07期·总第 225期


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虎耳草系虎耳草科植物虎耳
草(Saxifraga Stolonifera Meerb)
的全草,其主要成分有岩白菜
素、槲皮素、原儿茶酸、没食子
酸、槲皮素-3-鼠李糖苷、琥珀
酸、反甲基丁烯二酸等。临床发
现虎耳草对多种疾病有治疗作
用,具有较为广阔的研究开发前
景。本研究主要对四川宝兴地区
虎耳草不同极性段萃取物进行
定性鉴定,了解其化学成分在不
同极性段的分布情况,旨在为虎
耳草的后续开发提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器 药材:虎耳
草,采自四川省宝兴县。经四川
农业大学生药室鉴定为虎耳草
科植物虎耳草的全草。
试剂:石油醚、乙酸乙酯、正
丁醇、甲醇、95%乙醇,茚三酮、
冰醋酸、次硝酸铋、硅钨酸、酒石
酸钾钠、铁氰化钾、盐酸氢胺、
3,5-二硝基苯甲酸、α-萘酚、磷
铝酸,FeCl3、NaCO3、Pb(Ac)2、KI、
HgCl、CuSO4·5H2O、NaNO2、KOH、
NaOH、AlCl3、Mg(Ac)、SbCl3等。
以上试剂均为分析纯。
仪器:ZFB2型紫外分析仪,
旋转蒸发器,YB-2 真空恒温干
燥箱,其它实验室常规器材。
1.2 方法
1.2.1 虎耳草不同极性段供试
液的制备 新鲜虎耳草洗净阴
干,100 ℃杀青 30 min,40 ℃烘
干至恒重。以 80%、10 倍量乙
醇微沸回流分别提取 60 min、
45 min、45 min共 3次,过滤,合
并 3次滤液,浓缩至生药浓度
1 g/mL。先后用石油醚、乙酸乙
酯、正丁醇萃取。萃取液回收溶
剂,浓缩成浸膏,真空低温干燥
得固体 A(石油醚萃取物)、B(乙
酸乙酯萃取物)、C(正丁醇萃取
物)、D(水溶部分)。分别将 4种
固体粉末根据需要溶于适当溶
剂中,得 A、B、C、D 4种供试液。
1.2.2 化学成分的系统化学鉴
定 采用试管法,取 1 mL供试
液于试管中,通过相应化学试剂
与供试液反应,产生颜色变化或
沉淀等现象,判定相应物质存在
与否。鉴定各类化合物的化学反
应及判定方法见表 1。
2 结果
根据各项反应现象,阳性以
“+”表示,阴性以“-”表示,“+”越
多,表示反应现象越明显。检测
结果见表 2。
何晓莉 1,李英伦 2,李亨东 2
(1.四川农业大学生命科学与理学院化学系,四川 雅安 625014;
2.四川农业大学动物医学院药学实验室,四川 雅安 625014)
中图分类号:S853.71 文献标识码:B 文章编号:1001-8964(2009)07-0021-02
摘要:为了了解虎耳草主要化学成分在不同极性段提取物中的分布,我们分别用石油醚、乙
酸乙酯、正丁醇萃取虎耳草提取液,得到包括母液在内的四段提取物,采用试管法对四段提取物
中的主要化学成分进行系统化学鉴定。 结果得出:石油醚萃取物中主要为叶绿素等脂溶性杂质,
可能含有生物碱;乙酸乙酯中主要含黄酮类、香豆素类或内酯类、蒽醌类物质,可能含有酚类成
分;正丁醇中可能含有糖和苷类、鞣质;水溶部分主要为糖和苷类、鞣质,可能含有皂甙和生物碱。
由此推断,虎耳草中大部分活性成分分布于中等极性的乙酸乙酯萃取物中。
关键词:虎耳草;化学成分;定性鉴定
收稿日期:2009-04-27
作者简介 :何晓莉 (1965-),女 ,助理
实验师,现从事分析化学相关工作。
通讯作者:李英伦(1965-),男,教授,
博士。 E-mail:liyinglun01@163.com
化学成分的定性鉴定
宝兴地区虎耳草
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四川畜牧兽医·2009·07期·总第 225期
检测项目 检测实验 阳性反应现象
糖和苷类
1.Fehling反应
2.Molish反应
1.有砖红或棕红色沉淀
2.紫色环
AA和蛋白质 双缩脲反应 显绿色
酚类
1.FeCl3实验
2.重氮化实验
1.显绿色、蓝绿色或暗紫色
2.显红色
鞣质
1.FeCl2实验
2.生物碱实验
1.显绿、蓝绿色或暗紫色
2.产生沉淀
皂甙
1.泡沫实验
2.溶血实验
3.氯仿-浓硫酸实验
1.泡沫 10min内不消失
2.红血球破裂,溶液变清亮
3.氯仿层显红色或蓝色,硫酸层有绿色荧光
黄酮
1.盐酸-镁粉实验
2.醋酸铅沉淀反应
1.试液显红色
2.有沉淀,上清加碱性醋酸铅后有沉淀
蒽醌
1.碱性实验
2.醋酸镁实验
1.产生红色,酸化后红色消失
2.红色反应
甾体及萜类 醋酐-浓硫酸反应 颜色按黄、红、紫、蓝顺序变化
生物碱
1.碘化铋钾实验
2.碘化汞钾实验
3.苦味酸实验
1.浅黄色至橘红色沉淀
2.白色或浅黄色沉淀
3.黄色沉淀
强心甙
1.3,5-二硝基苯甲酸实验
2.碱性苦味酸实验
1.红色或紫色反应
2.橙色或橙红色反应
香豆素及内酯类
1.异羟肟酸铁实验
2.重氮化实验
1.棕红色或紫色反应
2.红色反应
表 1 各类化学成分检测方法及现象




从表 2可以看出,供试液A
(石油醚萃取部分)生物碱的 3
个鉴定实验呈弱阳性反应,提示
供试液 A中可能含生物碱类成
分;供试液 B(乙酸乙酯萃取部
分)酚类、黄酮类、香豆素及内
酯类、蒽醌类呈强烈的阳性反
应,提示供试液 B中含酚类、黄
酮、香豆素及内酯、蒽醌类化学
成分;供试液 C(正丁醇萃取部
分)无强烈阳性反应,提示可能
含有糖和苷类、鞣质、黄酮、蒽
醌、香豆素及内酯类;供试液 D
(水溶性部分) 主要含糖和苷
类、鞣质成分,可能含有皂甙和
生物碱。
3 分析及讨论
3.1 中药成分的化学反应法鉴
定处理 在无机分析中,常常选
用适当的试剂,通过氧化还原反
应或配位反应将待测离子转化
为有色化合物进行测定,我们称
之为显色反应,而大部分金属离
子可与相关试剂反应生成不溶
或难溶的沉淀(氢氧化物、硫化
物、卤化物等),可用于除去或提
纯化合物,也常应用于工业废水
处理。同理,我们可以根据中药
化学成分的化学结构特点,选用
合适的试剂与之反应,产生颜色
变化或沉淀,由此判定是否存在
该类化学成分。
利用化学反应对中药化学
成分的初步鉴定已经被广泛用
于中药化学成分研究和中药快
速鉴定中。该方法操作简单、快
速,虽然其反应灵敏度不够,且
在鉴别某些颜色较深的供试液
时可能出现假阳性,但中药化学
成分复杂,要精确鉴定某一化学
物质需要进行大量工作,采用化
学反应方法,研究人员可迅速了
解各供试液中化学成分的大致
分布,为后续研究提供指导。
3.2 虎耳草中化学成分分布
虎耳草野生资源丰富,分布广
泛,其中岩白菜素、槲皮素、没食
子酸含量较高,具有较大的药用
开发价值。实验结果显示,阳性
反应的化学成分类别几乎涵盖
了所有虎耳草中的化学成分,
提示乙醇可有效提取出虎耳草
中的有效物质。供试液中,乙酸
乙酯萃取部分和水溶部分的多
种化学反应呈强烈阳性,酚类、
黄酮、香豆素、内酯和蒽醌类化
学成分集中分布于乙酸乙酯萃
取部分,提示虎耳草的主要活
性成分大多分布于中等极性的
乙酸乙酯萃取物中,虎耳草的
药用开发可针对性地围绕此部
分展开。 ■
参考文献(略)
检测项目 检测实验 A B C D
糖和苷类 1.Fehling反应 - - + +++
2.Molish反应 - - + +++
AA和蛋白质 双缩脲反应 - - - -
酚类 1.FeCl3实验 - ++ - -
2.重氮化实验 - ++ - -
鞣质 1.FeCl2实验 - - + +++
2.生物碱实验 - - + ++
皂甙 1.泡沫实验 - - - +
2.溶血实验 - - - +
3.氯仿-浓硫酸实验 - - - +
黄酮 1.盐酸-镁粉实验 - +++ + -
2.醋酸铅沉淀反应 - +++ + +
蒽醌 1.碱性实验 - ++ + -
2.醋酸镁实验 - ++ + -
甾体及萜类 醋酐-浓硫酸反应
生物碱 1.碘化铋钾实验 + - - -
2.碘化汞钾实验 + - - -
3.苦味酸实验 + - - -
强心甙 1.二硝基苯甲酸实验 - - - -
2.碱性苦味酸实验 - - - -
香豆素及内酯类 1.异羟肟酸铁实验 - +++ + -
2.重氮化实验 - ++ - -
表 2 供试液各项检测结果
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