全 文 ：第 7 卷第 9 期 总第 77 期
二〇〇九年九月•己丑年

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薄层扫描法测定地牡宁神颗粒中菝葜皂苷元的含量
张 兵 1 雷 杨 2
1 辽宁中医药大学附属第一临床医院（110032） 2 吉林省通化市食品药品检验所（134000）
摘要：目的 建立以薄层扫描法测定菝葜皂苷元含量的方法。方法 固定相系以硅胶 G 加 0.5%CMC 所制备的薄层板，展开剂为苯－丙酮
（9:1），测定波长为 λs＝443 nm，λR＝520 nm，扫描方式为双波长反射法锯齿扫描，光源为氘灯，线性参数 SX=3，振幅为 10。结果 此法测
得菝葜皂苷元在 0.515～4.120 µg 范围内浓度与峰面积线性关系良好（r=0.9997），平均加标回收率为 100.36%，RSD=0.58%。结论 用薄层扫描
法测定菝葜皂苷元的含量准确度高，重现性好，适合于快速检验。
关键词：地牡宁神颗粒；含量测定；薄层扫描法
doi：10.3969/j.issn.1672-2779.2009.09.132 文章编号：1672-2779(2009)-09-0161-02

地牡宁神颗粒是由熟地黄等十一味中药组成，有滋
补肝肾，宁神益智之功能，临床用于肝肾阴亏，肝阳偏
旺所致的小儿神思涣散，多动急躁等症。该品种没有含
量测定，参照地牡宁神口服液标准“（标准号：WS－50XX
（B－00XX）－2002）”的含量测定方法对方中知母采用
薄层扫描法进行含量测定。结果表明本方法结果准确，
方法简便，稳定性、精密度、重现性、回收率均理想，
本文就菝葜皂苷元含量测定方法的建立做一论述。
1 方法
1.1 仪器与试药 日本岛津 CS-9301(PC)S 薄层扫描
仪，微量定量毛细管（美国 Drummond 公司），硅胶 G
薄层板（青岛海洋化工厂生产，薄层层析用，预制板，
0.3 mm 厚），菝葜皂苷元对照品（由中国药品生物制品
检验所提供）批号：0744-200005，规格：供含量测定用。
试剂均为分析纯。
1.2 薄层及扫描条件 薄层条件：苯－丙酮（9:1）为展
开剂；薄层板：羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层
板；展距：8 cm；显色剂：香草醛硫酸乙醇溶液（甲液：
取水 25 ml，缓缓加硫酸 50 ml，放冷，加乙醇 25 ml，
摇匀；乙液：8%香草醛无水乙醇溶液。用时取甲液 5 份
与乙液 1 份混合），在 65℃烘约 7～10 分钟，至斑点显
色清晰。放凉，立即在薄层板上盖一同样大小的玻璃板，
周围用胶布固定。结果表明菝葜皂苷元能与其它成分良
好分离，可以定量。扫描条件：波长 λs＝443 nm，λR＝
520 nm。
1.3 对照品溶液的制备 取菝葜皂苷元对照品，加甲醇
制成每 1 ml 含 0.5 mg 的溶液，作为对照品溶液。
1.4 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品，研
细，取约 5g，精密称定，置烧杯中，以水 20 ml 分次转
移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取 4 次，每次 10
ml，合并正丁醇提取液，用氨试液 10 ml 洗涤 1 次，再
用水 10 ml 洗涤 1 次，弃去洗涤液，正丁醇液蒸干，残
渣加甲醇－25%盐酸（4:1）混合液 15 ml 使溶解，置水
浴上回流 1 小时，放冷，加 20%氢氧化钠溶液调 pH 值
至中性，加水 10 ml，转移至分液漏斗中，用醋酸乙酯提
取 4 次，每次 10 ml，合并醋酸乙酯提取液，加无水硫酸
钠适量，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯适量使溶解，
定容至 5 ml 量瓶中，作为供试品溶液。
1.5 点样方法 吸取供试品溶液 4 µl，对照品溶液 2 µl
与 4 µl，分别交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂
的硅胶 G 薄层板上。
2 方法学考察
2.1 测定波长的选择 参照标准“地牡宁神口服液（标
准号：WS－50XX（B－00XX）－2002）”的含量测定方
法的测定波长，确定本试验的测定波长为 λs＝443 nm，
λR＝520 nm。
2.2 提取方法的考察 参照标准“地牡宁神口服液（标
准号：WS－50XX（B－00XX）－2002）”的含量测定的
提取方法，而确定了正文所述的供试品溶液的制备方法。
2.3 阴性对照试验 为进一步考察试验的合理性，取不
含知母的阴性对照样品。依正文所述方法进行测定。结
果，阴性样品薄层色谱在与菝葜皂苷元对照品色谱相应
的位置上无斑点，从而证明本方法是合理可行。
2.4 标准曲线 精密吸取对照品溶液 1、2、4、6、8 µl，
分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层
板上，依法展开，测定，以对照品点样量为横坐标，以
吸收度积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程
Y=773.273 x-54.120，RSD=0.9997%，结果表明菝葜皂苷
元在 0.515～4.120 µg 范围内，呈线性关系，符合定量测
定的要求。
2.5 精密度试验
2.5.1 同板精密度 精密吸取同一供试品溶液 5 次每次
4 µl，对照品溶液 2 µl 与 4 µl，点于同一以羧甲基纤维
素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上，测定，计算其含量
RSD=1.13%。
2.5.2 异板精密度 精密吸取同一供试品溶液 4 µl，对
照品溶液 2 µl 与 4 µl，交叉点于同一以羧甲基纤维素钠
为粘合剂的硅胶 G 薄层板上，在 5 块板上重复操作 5 次，
测定，计算 RSD=0.82%。
结果表明，精密度很好。
2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 4 µl，对照品溶
液 2 µl 与 4 µl，交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合
剂的硅胶 G 薄层板上，每隔 30 分钟测定一次，计算其
含量，RSD=0.82。结果表明 2 小时内菝葜皂苷元的峰面
积值稳定。
2.7 重复性试验 取同一供试品，依正文方法独立测定
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5 次，其 RSD=1.20%。
结果表明本法具良好的重复性。
2.8 回收率试验 精密称取已知含量的供试品（批号
050401 含量为 4.05 mg/袋）6 份，分别按下表加入对照
品溶液（0.1783 mg/ml），依法测定，计算回收率，结果
见表 1。
表 1 回收率试验结果
NO 样品含量(µg) 加标量(µg) 测得量(µg) 回收率(%)
1 2.916 0.515 3.430 99.81
2 2.835 0.515 3.353 100.58
3 2.754 1.030 3.779 99.51
4 2.632 1.030 3.670 100.78
5 2.038 2.060 4.112 100.68
6 2.029 2.060 4.098 100.44
如表 1 所示，测得菝葜皂苷元的平均回收率为
100.30%，RSD=0.52%
3 样品测定结果及限度
依正文方法对 10 批中试样品进行含量测定，结果见
表 2。

表 2 10 批样品中菝葜皂苷元的含量测定结果
批号 菝葜皂苷元含量（mg/袋） 平均含量（mg/袋）
050401 4.01
050402 4.19
050403 4.26
050404 4.15
050405 4.07 4.13
050406 4.12
050407 4.04
050408 4.23
050409 4.11
050410 4.08
4 原料药材的测定
按照《中国药典》2000 年版一部知母项下方法测定
10 批知母药材的含量，结果 10 批知母药材的含量均符
合规定。
参考文献
[1] 中国药典.2000 年版(一部).
（本文校对：贾少谦 收稿日期：2009-06-09）

胶束电动毛细管色谱法
测定银杏叶粗提物中槲皮素和山奈素的含量
马玉庆 杭州万向职业学院校医院（310023）
摘要：对高效毛细管电泳(HPCE)技术的概念和基本原理作简要介绍。概括综述了 HPCE 法在中药检测分析中的应用及进展，详细阐述胶束
电动毛细管色谱法在银杏叶粗提物中槲皮素和山奈素的含量测定，比较分析高效液相色谱法和高效毛细管电泳的异同。
关键词：高效毛细管电泳；高效液相色谱法；银杏叶；黄酮；槲皮素；山奈素
doi：10.3969/j.issn.1672-2779.2009.09.0133 文章编号：1672-2779(2009)-09-0162-02

中药是我国的传统国粹，但是由于中药成分和用药
种类的复杂性，其传统研究方法已严重影响了我国中药
事业的国际化发展。为加快我国中药的现代化和国际化
进程，新的研究方法必须依赖和采用现代仪器技术的应
用。高效毛细管电泳技术作为一种新兴的分析分离技术，
由于自身的特点和优势在中药的现代研究中具有广阔的
发展前景[1]。本文简要介绍 HPCE 的基本概况和其在中
药检测分析中的应用及进展。
1 高效毛细管电泳(high performance capillary electrop-
horesis，HPCE)
1.1 概念 高效毛细管电泳，又称为毛细管电泳(CE)，
是 20 世纪 80 年代问世的一种高效液相分离技术。它是
指以高压电场为驱动力，以毛细管作为分离通道，依据
样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离
的一类液相分离技术，具有色谱和电泳两种分离机制[2]。
1.2 基本原理 粒子在电场作用下，以不同的速度向电
荷反方向迁移的现象，是一种在空芯的、微小内径的毛
细管(内径 10～200 µm)中进行的大、小分子的高效分离
技术。毛细管两端分别浸入缓冲液中，又在此两缓冲液
中分别插入连有高压电源的电极，该电压使得分析样品
沿毛细管迁移，根据被分离物之间电荷和体积的不同，
各种分子在高电压下被分离。在自由区带毛细管电泳中，
电泳的移动(带电荷分子朝相反极性的电极方向移动)和
电渗流(在毛细管内壁上的电荷和应用的势能而引起的
电解质移动)导致了分离[3]。其基本结构大概包括：毛细
管柱、进样系统、高压系统、检测系统和数据收集系统。
毛细管柱是 HPCE 的核心部件，石英毛细管是当今的首
选材料，聚四氟乙烯是毛细管的另一种材料。进样系统
采用自动进样方式，主要有流体力学和电动方式。高压
系统要能提供 30 kV 的直流电压 200～300 µA 的电流，
电压最好使用双极性电源。检测器目前最常用的是 UV-
可见光检测器和荧光检测器(包括普通荧光和激光诱导
荧光)。其中激光诱导荧光检测器是目前最灵敏的检测
器，已达到光谱分析方法的极限——单元子和单分子检
测。根据分离模式的不同，HPCE 分为毛细管区带电泳
(CZE)、胶束电动毛细管色谱(MECC/ MEKC)、毛细管凝
胶电泳(CGE)、毛细管等电聚焦电泳(CIEF)、毛细管等速
电泳(CITP)、毛细管电色谱(CEC)等等[2]。
2 高效毛细管电泳在中药检测分析中的应用
一种中药材含有多种有效成分，通常各化学组分结
构比较复杂，种类多样且在药材中含量不高，用普通的
分离方法难以完全分离和定量测定，而高效毛细管电泳