全 文 ：收稿日期:2010-07-08;　修订日期:2010-12-31
基金项目:贵州省科学技术基金项目(No.J-[ 2008] 2139);
贵阳医学院博士科研启动基金(No.C-2007-7)
作者简介:詹哲浩(1985-),男(汉族),浙江丽水人 ,现为贵阳医学院药
学院在读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事天然产物化学与新药开发研究
工作.
＊通讯作者简介:兰燕宇(1958-), 女(汉族), 贵州贵阳人 ,现任贵阳医
学院教授 ,硕士研究生导师 ,主要从事天然药物活性成分及药物新剂型 、
新技术 、新工艺研究工作.
南川斑鸠菊的化学成分研究
詹哲浩 ,廖尚高 ,张丽娟 ,王永林 ,兰燕宇＊
(贵阳医学院 ·药学院 ,贵州 贵阳 550004)
摘要:目的 研究南川斑鸠菊(Vernoniabockiana)的化学成分。方法 运用多种柱色谱方法进行分离纯化 , 根据理化性质
和波谱数据鉴定化合物的化学结构。结果 从南川斑鸠菊中分离得到了 6个化合物 , 分别鉴定为:8 -[ 4 -hydroxy-
methacryloyloxy] -10 -hydroxyhirsutinolide-13-O-acetate(1), piptocarphinF(2), lirioresinolB(3),山萘酚 -3-芸香糖
苷(kaempferol3-O-rutinoside, 4),咖啡酸乙酯(cafeicacidethylester, 5), 槲皮素(quercetin, 6)。结论 化合物 1、3、4、5、6
为首次在该植物中分离得到。
关键词:南川斑鸠菊;化学成分
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.08.050
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2011)08-1914-02
ChemicalConstituentsofVernoniabockiana
ZHANGZhe-hao, LIAOShang-gao, ZHANGLi-juan, WANGYong-lin, LANYan-yu＊
(SchoolofPharmacology, GuiyangMedicalColege, Guiyang550004, China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatethechemicalconstituentsofVernoniabockiana.MethodsVariouspreparativecolumnchro-
matographictechniqueswereusedfortheisolationandpurificationofthechemicalconstituentsandtheirstructuresweredeter-
minedbycomparisonoftheirphysicochemicalandchromatographicdatawiththoseoftheauthenticsamplesorwiththosereported
intheliterature.ResultsSixchemicalconstituentswereobtainedandidentifiedas8 -[ 4 -hydroxymethacryloyloxy] -10 -
hydroxyhirsutinolide-13-O-acetate(1), piptocarphinF(2), lirioresinolB(3), kaempferol3-O-rutinoside(4), caffeic
acidethylester(5), quercetin(6).ConclusionCompounds1, 3, 4, 5, 6 wereisolatedfromVernoniabockianaforthefirst
time.
Keywords:Vernoniabockiana;　Chemicalconstituents
　　中草药中的菊科斑鸠菊属植物大多都有一定的抗肿瘤临床
应用 [ 1] 。研究发现 , 这些植物的抗肿瘤活性大多与倍半萜内酯
(即斑鸠菊内酯)有关 [ 2] 。该类具有内酯结构的化合物通常都具
有较好的抗肿瘤活性 ,有些表现得尤为突出 [ 3] , 是一类值得深入
研究的化合物。
南川斑鸠菊(Vernoniabockiana)又名鸡菊花 ,属于菊科(Com-
positae)斑鸠菊属(Vernonia)多年生草本植物 ,在四川 、贵州 、云南
等地均有分布 [ 4] 。
在前期的研究中我们从南川斑鸠菊中分离到了 7个斑鸠菊
内酯 , 抗肿瘤活性测试表明 ,这些化合物对 P388小鼠白血病细胞
有非常强的细胞毒活性。在对该植物的进一步研究中 ,我们从其
枝叶部分分离到了包括两个倍半萜内酯(其中一个为首次从该
植物获得)在内的 6个化合物 , 其中 , 化合物 1, 3, 4, 5, 6为首次
从该植物中分离得到 。
1　仪器与材料
WatersACQUITY超高效液相色谱 -质谱联用仪(UPLC-
TQD), JEOLECX400MHz核磁共振波谱仪 , 色谱用硅胶(200 -
300目)以及硅胶 GF254板为青岛海洋化工厂生产 , RP-18反相
硅胶为德国 Merck公司生产 , SephadexLH-20为瑞士 Pharmacia
Biotech公司生产。
2　方法与结果
2.1　提取与分离 取南川斑鸠菊粉末 8.5kg, 加 3倍量 70%乙醇
冷浸 3次 , 滤液合并浓缩回收乙醇 , 得浸膏(870 g)。浸膏加蒸馏
水 2L悬浮 ,用石油醚 1∶1萃取 3次 , 水层用醋酸乙酯 1∶1萃取
3次 ,醋酸乙酯层浓缩回收溶剂得萃取物(24 g), 水层用正丁醇 1
∶1萃取 3次 ,正丁醇部分浓缩回收溶剂得萃取物(25g)。醋酸
乙酯组分浸膏上 D101大孔树脂 , 以 80%乙醇洗脱 ,回收乙醇 , 所得
固体经 MCI柱分离得到 4个组分。组分 2经过反复 SephadexLH
-20 (甲醇), RP-18 (甲醇 /水 , 30% ～ 80%), 正相硅胶(石油
醚 /醋酸乙酯 , 3∶1～ 5∶1)梯度洗脱得到化合物 1(30mg), 5(90
mg);组分 3经过 SephadexLH-20 (甲醇), 正相硅胶(石油醚 /
醋酸乙酯 , 5∶2 ～ 3∶2;氯仿 /甲醇 , 80∶1※ 50∶1)分离纯化得到
化合物 3(15 mg);组分 4经过反复 SephadexLH-20 (甲醇), 正
相硅胶(石油醚 /丙酮 /醋酸 , 6∶4∶0.1;石油醚 /醋酸乙酯 , 3∶1
～ 1∶1)分离纯化得到化合物 2(50mg)和 6(4mg)。
正丁醇部分经过 MCI(甲醇 /水 , 10% ～ 60%), SephadexLH
-20(甲醇), RP-18 (甲醇 /水 , 20% ～ 60%), 正相硅胶(氯仿 /
甲醇 /水 , 10∶1∶0.1)洗脱得到化合物 4(5 mg)。
2.2　结构鉴定
2.2.1　化合物 1 黄色无定型粉末。 ESI-MSm/z:439[ M+
H] +, 437[ M-H] -。1H-NMR(400 MHz, CD3OD):6.19(1H,s, H-5), 2.48(1H, dd, J= 14.7, 5.5 Hz, H-9), 2.14(1H,
brd, J=3 Hz, H-10 ), 4.88, 4.87(各 1H, d, J=11.7Hz, H
-13, 13), 1.16(3H, s, CH3 -14), 1.57(3H, s, CH3 -15),
6.31, 5.92[各 1H, brs, -OOCC(CH2OH)CH2), 4.26, 4.21(各 1H, brd, -OOCC(CH2OH)CH2 ] , 2.05(3H, brs, -OOC-
CH3)。13C-NMR(100MHz, CD3OD)δ:167.7 (C-12), 130.2
·1914·
时珍国医国药 2011年第 22卷第 8期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.8
(C-11), 125.4 (C-5), 108.6 (C-1), 82.5 (C-4), 77.3
(C-10), 66.6(C-8), 55.4(C-13), 38.9(C-9), 38.5 (C
-2), 34.7 (C-3), 29.8 (C-15), 24.8 (C-14),
165.2(-OOCC(CH2OH)CH2), 139.9 [ -OOCC(CH2OH)CH2]
125.6 [ -OOCC(CH2OH)CH2] , 18.8 [ -OOCC(CH2OH)CH2 ] ,
43.1 (-OCH2CH3), 19.1(-OCH2CH3)。以上数据与文献 [ 5]
报道的 8[ 4 -hydroxymethacryloyloxy] -10 -hydroxyhirsutinolide
-13-O-acetate的数据基本一致 ,故鉴定该化合物为 8 -[ 4 -
hydroxymethacryloyloxy] -10 -hydroxyhirsutinolide-13-O-ac-
etate。
2.2.2　化合物 2 黄色无定型粉末。 ESI-MSm/z:425[ M+
H] +, 423[ M-H] -。1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ:6.58(1H,d, J=9.5 Hz, H-8), 5.82(1H, s, H-5), 4.58, 4.30(1H, d,
J= 12.2 Hz, H-13), 4.07(1H, brs, OH), 3.77(1H, brs,
OH), 1.9-2.75(6H, m, CH2 -2 , CH2 -3, CH2 -9), 1.55(3H, s, CH3 -15), 1.21(3H, s, CH3 -14), 1.93[ 3H, m, -OOCC(CH
3
)CH
2
] , 6.27[ 1H, m, -OOCC(CH
3
)CH
2
] , 5.66
[ 1H, s, -OOCC(CH
3
)CH
2
] , 3.57(2H, q, J= 7.0 Hz, -
OCH2CH3), 1.21(3H, t, J= 7.0 Hz, -OCH2CH3)。13C-NMR(100 MHz, CDCl3)δ:167.6 (C-12), 130.2 (C-11), 125.4(C-5), 109.6(C-1), 82.5(C-4), 77.3(C-10), 66.6 (C
-8), 55.4 (C-13), 38.9 (C-9), 38.5 (C-2), 34.7 (C-
2), 29.8 (C-15), 24.8 (C-14), 165.9[ -OCOC(CH
3
)
CH
2
] , 139.9 [ -OCOC(CH
3
)CH
2
] , 18.8 [ -OCOC(CH
3
)
CH2 ] , 125.6[ -OCOC(CH3)CH2 ] , 43.1 (-OCH2CH3), 19.1(-OCH2CH3)。以上数据与文献 [ 6]报道的 piptocarphinF的数
据基本一致 , 故鉴定该化合物为 piptocarphinF。
2.2.3 　化合物 3 白色针型晶体。 ESI-MSm/z:419[ M +
H] +, 417[ M -H] -。1H-NMR(400 MHz, CDCl3)δ:3.89(12H, s, OCH3 ×4), 5.59(2H, brs, OH×2), 6.59(4H, s, H-2, 6, 2, 6), 4.73 (2H, d, J= 4.0 Hz, H-7, 7), 3.09 (2H,
m, H-8, 8), 3.92(2H, dd, J=9.0, 3.8Hz, H-9a, 9 a),
4.28 (2H, dd, J= 9.0, 7.5 Hz, H-9e, 9e)。13C-NMR(100
MHz, CDCl3)δ:134.2 (C-1 ), 102.6 (C-2, 6, 2, 6),
147.0(C-3, 5, 3, 5), 131.9(C-4, 4), 86.0 (C-7, 7),
54.3 (C-8, 8), 71.7 (C- 9, 9), 56.3 (-OCH3)。以上数
据与文献 [ 7]报道的 lirioresinolB的数据基本一致 , 故鉴定该化
合物为 lirioresinolB。
2.2.4　化合物 4 淡黄色粉末。 ESI-MSm/z:595[ M+H] +,
593[ M-H] -。源内 CID产生碎片 m/z147.1, 83.0, 164.1, 287.
2[ M-146-162] +, 449.2[ M-146] +。 可以判断该分子除了含
一分子鼠李糖和一分子葡萄糖外 , 尚有一个四羟基黄酮母核存
在 , 但上述质谱信息无法给出这些片断的详细信息和它们的连接
方式。1H-NMR(400 MHz, CD3OD)δ:8.05 (2H, d, J= 8.8Hz, H-2, 6), 6.88 (2H, d, J= 8.8 Hz, H-3, 5), 6.41
(1H, d, J=1.6 Hz, H-8), 6.21(1H, d, J=1.6Hz, H-6),
5.12 (1H, d, J= 7.3 Hz, H-1), 4.50 (1H, brs, H-1),
1.12(3H, d, J= 6.2 Hz, H-6)。13 C-NMR(100 MHz,
CD3OD)δ:179.4(C-4), 166.1(C-7), 163.1 (C-5), 161.5(C-4), 159.4 (C-2), 158.6 (C-9 ), 135.5 (C-3 ), 132.4
(C-2 , 6), 122.8 (C-1), 116.1 (C-3, 5), 105.7(C-10),
99.9 (C-6), 94.9 (C-8), Glc(C-1※C-6):104.6, 75.8,
78.1, 72.3, 77.3, 68.6。 Rha(C-1※C-6):102.4, 71.4, 72.1,
73.9, 69.7, 17.9。以上数据与文献 [ 8]报道的山萘酚 -3-芸香
糖苷的数据基本一致 ,故鉴定该化合物为山萘酚 -3-芸香糖苷。
2.2.5　化合物 5 白色粉末。 ESI-MSm/z:209[ M+H] +, 207
[ M-H] -。1H-NMR(400 MHz, CD3OD)δ:7.51 (1H, d, J=16.0 Hz, H-α), 7.04(1H, d, J= 1.6 Hz, H-2), 6.93
(1H, dd, J=8.5, 1.6 Hz, H-6), 6.77 (1H, d, J=8.5Hz, H
-5), 6.22(1H, d, J=16.0 Hz, H-β), 4.22(2H, q, J=7.
3 Hz, -OCH2CH3), 1.31(3H, t, J=7.3 Hz, -OCH2CH3)。13C-NMR(100 MHz, CD3OD)δ:15.1 (-OCH2CH3), 61.9 (-OCH2CH3), 115.6 (C-β ), 150.0 (C-α), 128.2 (C-1),
115.7(d, C-2), 147.3(C-3), 147.2 (C-4), 117.0 (C-
5), 123.4(C-6), 169.8(CO)。以上数据与文献 [ 9]报道的咖
啡酸乙酯的数据基本一致 ,故鉴定该化合物为咖啡酸乙酯。
2.2.6　化合物 6 黄色粉末。三氯化铁铁氰化钾反应呈阳性 ,
提示含有酚羟基;盐酸镁粉反应阳性 。 ESI-MSm/z:303[ M+
H] +, 301[ M-H] -。1H-NMR(400 MHz, CD3OD)δ:7.71(1H, d, J=2.1Hz, H-2), 7.61 (1H, dd, J=2.1, 8.5Hz, H
-6), 6.87(1H, d, J=8.5Hz, H-5), 6.37(1H, d, J=2.1
Hz, H-8 ), 6.17 (1H, d, J= 2.1 Hz, H-6)。以上数据与文
献 [ 10]报道的槲皮素的数据基本一致。与槲皮素对照品共薄层
二者 Rf值一致。 UPLC-DAD-MS分析表明 ,化合物 6与槲皮
素对照品的保留时间 、紫外吸收峰和质谱基本一致 ,故鉴定该化
合物为槲皮素。
3　讨论
本文利用溶剂提取和多种柱色谱分离方法 ,对南川斑鸠菊化
学成分进行了研究 ,从其枝叶部分分离得到 6个化合物 , 包括两
个倍半萜内酯(其中一个为首次从该植物获得)。在这 6个化合
物中 , 5个为首次从该种植物中分离得到。这些研究结果为南川
斑鸠菊的进一步研究奠定了基础。
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