全 文 ：驱虫斑鸠菊血清药物化学的初步研究＊
刘晓东 1 ,闫　明 2 ,张兰兰 1 ,霍仕霞 1
(1.新疆维吾尔自治区石河子大学药学院 , 832003;2.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所 ,乌鲁木齐　830049 )
[摘　要 ] 　目的　对维药驱虫斑鸠菊进行血清药物化学研究 ,探讨驱虫斑鸠菊药效作用的物质基础。方法　在建
立驱虫斑鸠菊高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的基础上 ,通过比较驱虫斑鸠菊水提取物 、驱虫斑鸠菊含药血清和空白血
清 HPLC指纹图谱的差异 , 确定驱虫斑鸠菊血中移行成分。结果　在驱虫斑鸠菊含药血清中发现了 9种入血成分 , 其中
5种为原型成分 ,其余 4种可能为原型成分的代谢产物。结论　9种入血成分可能是驱虫斑鸠菊的体内直接作用物质 ,
对其进行深入研究将有助于阐明驱虫斑鸠菊的药效物质基础及药效机制。
[关键词 ] 　驱虫斑鸠菊;药物化学;代谢产物;色谱法 ,高效液相;指纹图谱
[中图分类号 ] 　R286;R969　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2009)06-0713-03
PreliminaryStudyonSerumPharmacochemistryofTraditionalUighurMedicine
VernoniaAnthelmintica(L.)Wild
LIUXiao-dong1 , YANMing2 , ZHANGLan-lan1 , HUOShi-xia1(1.SchoolofPharmacy, ShiheziUniversity
ofXinjiangUighurAutonomousRegion, Shihezi832003, China;2.InstituteofTraditionalUighurMedicineof
XinjiangUighurAutonomousRegion, Urumqi830049, China)
ABSTRACT　Objective　 ToexplorethebioactiveconstituentsofVernoniaanthelmintica(L.)Wildforitsserum
pharmacochemistryresearch.　Methods　ThebloodmigratingconstituentsofVernoniaanthelmintica(L.)Willdwere
determinedbycomparingtheHPLCfingerprintsoftheaqueousextracts, drugcontainedseraandblanksera.　Results　Nine
compoundsabsorbedintobloodweredetected, fiveamongwhichwereoriginalconstituentsofVernoniaanthelmintica(L.)Willd,
therestmightbemetabolitesoftheoriginalones.　Conclusion　Thesenineconstituentsabsorbedinbloodcouldbebioactive
componentsofVernoniaanthelmintica(L.)Willd.Furtherstudiesonwhichwouldbeusefultoclarifythebioactiveconstituents
andmechanismsofactionofVernoniaanthelmintica(L.)Wild.
KEYWORDS　Vernoniaanthelmintica(L.)wild;Serumpharmacochemistry;Metabolites;HPLC;Fingerprint
　　中药血清药物化学是以传统药物化学方法为基
础 ,综合应用多种现代技术 ,针对中药口服后血中移行
成分 ,通过药效相关性研究 ,确定中药药效物质基础的
应用学科。该法已经成为中药有效成分研究及质量标
准制定的重要手段[ 1] ,且对血清中所含复方化学成分
进一步分析 、鉴定 ,把得到的成分与复方再次进行药效
学比较 ,以期揭示产生复方药效的成分[ 2, 3] 。
驱虫斑鸠菊 [ Vernoniaanthelmintica(L.)Wild] ,
为菊科(Compositae)斑鸠菊属一年生草本植物 ,别名
印度山茴香。新疆和田 、阿克苏和云南西部有栽培。
为新疆维吾尔医用药 ,具有清除异常黏液质 、驱虫 、消
[收稿日期 ] 　2008-08-30　　　[修回日期 ] 　2008-12-04
[基金项目 ] 　＊国家科技支撑计划项目 (基金编号:
2007BAI30B01;2007BAI48B06)
[作者简介 ] 　刘晓东(1980 -), 男 , 河南商丘人 , 硕士 , 从
事仪器分析新方法及新药研究。 电话:(0)15894683921, E-
mail:xiaodongliu204@hotmail.com。
[通讯作者 ] 　闫　明(1959-), 男 , 山西原平人 , 研究员 ,
从事药物分析及新药研究。 电话:0991 -2574309, E-mail:
yanming21cn@sohu.com。
肿 、散寒镇痛等作用 ,用于治疗湿寒性胃痛 、肝病 、白癜
风等病症 ,治疗白癜风有突出的疗效 。对驱虫斑鸠菊
的化学成分和药理作用已有研究 ,但笔者未见应用血
清药物化学方法研究驱虫斑鸠菊的报道。鉴于此 ,笔
者拟采用血清药物化学方法 ,在建立驱虫斑鸠菊高效
液相色谱(HPLC)指纹图谱基础上 ,通过研究比较驱
虫斑鸠菊水提取物 、给药及未给药大鼠血清的 HPLC
指纹图谱 ,确定驱虫斑鸠菊血中移行成分 ,为最终筛选
确定驱虫斑鸠菊的药效成分奠定基础 。
1　材料　
1.1　仪器　美国 Waters1525二元泵高效液相色谱
仪 , Waters2996二极管阵列检测器 , Empower数据采
集系统;Mili-Q超纯水纯化系统(18 MΨ, Milipore公
司);SGT7200HBT型超声清洗器(上海冠特超声仪器
有限公司);BS110S电子天平(北京赛多利斯有限公
司);TGL-16B型离心机(上海安亭科学仪器厂制造)。
1.2　药材　驱虫斑鸠菊购于新疆维吾尔自治区维吾
尔医医院制剂室 ,经新疆维吾尔自治区药物研究所张
彦福研究员鉴定为菊科植物驱虫斑鸠菊 [ Vernonia
·713·医药导报 2009年 6月第 28卷第 6期
anthelmintica(L.)Wild]的干燥成熟果实。
1.3　试剂 　乙腈(色谱纯 , 美国 Fisher公司);甲醇
(色谱纯 ,美国 Fisher公司);超纯水 (电阻 18 MΨ,
Milipore公司 );磷酸 (分析纯 , 天津市化学试剂三
厂);超纯氮气(纯度≥99.999%,新疆康迪实业发展
有限公司)。
1.4　动物　清洁级 Wistar大鼠 , 6 ～ 8周龄 ,体质量
(200±20)g,雄性 ,由新疆实验动物研究中心提供 ,许
可证号:SYXK(新)2003-0003。每组各 5只。
2　方法　
2.1　液相色谱条件 　Shim-packVP-ODSC18柱
(150mm×4.6 mm, 5 μm)。流动相:A液为乙腈 , B
液为 0.5%磷酸溶液 , 梯度洗脱程序:0 ～ 70 min,
10% ～ 32%乙腈;流速:1 mL· min-1;检测波长:
220nm;柱温:22℃;进样量:10μL。
2.2　供试品溶液的制备　
2.2.1　驱虫斑鸠菊灌胃液的制备　驱虫斑鸠菊药材
粗粉 520 g,用水回流提取 3次(3次用量依次为药材
的 10, 8, 8倍), 3次煎煮时间分别为 2 , 1, 1h。煎液过
滤 ,滤液减压浓缩得干浸膏 。用纯化水 100mL配制成
含药量 0.72 g· mL-1的混悬液 ,供灌胃用。
2.2.2　驱虫斑鸠菊供试液的制备　精密称取驱虫斑
鸠菊药材 4 g,精密称定 ,加水 40mL,加热回流提取 3
次(3次加水量依次为药材的 10, 8, 8倍), 3次煎煮时
间依次为 2, 1, 1 h,将各煎煮液过滤 ,合并上清液 ,置
100mL量瓶中 ,用提取溶剂定容至 100 mL,制得样品
溶液(每毫升相当于原药材 0.04 g)。
取上面所制得的样品溶液适量 ,置 10mL量瓶中 ,
用提取溶剂定容 ,溶液过孔径 0.45 μm微孔滤膜 ,取
滤液 10 μL进行 HPLC分析。
2.3　血清样品的采集和处理　
2.3.1　给药与采血　Wistar大鼠随机分为给药组和空
白组 ,每组 5只 ,禁食 12h(自由饮水),给药组以药液量
20mL·kg-1灌胃 ,空白组给予同体积的纯化水 , bid,连
续 3d。末次给药后 1.5 h,乙醚麻醉 ,大鼠腹主动脉采
血 [ 4] ,低速离心 ,分离血清 ,置 -20℃冰箱中冷冻备用。
2.3.2　血清样品的处理　取空白及给药组血清各
2 mL,加甲醇 10 mL,摇匀后 ,微量振荡器振荡 5 min,
放置 4 ～ 5h,自然沉淀蛋白 ,吸取上清液 ,置 10 mL试
管中 ,用氮气浓缩约 0.5 mL,用甲醇冲洗全部转移至
1.5mLEP管中 ,用氮气吹干[ 5] ,残渣用甲醇 0.2 mL
溶解(若浑浊可用 10 000r· min-1 , r=10 cm),上清液
过孔径 0.45 μm滤膜过滤 ,取 20 μL经 HPLC分析 。
2.4　HPLC色谱分析　按液相色谱条件 ,分别测定驱
虫斑鸠菊供试液 、驱虫斑鸠菊含药血清和空白血清的
HPLC色谱指纹图谱。
3　结果　
图 1(A～ C)分别为驱虫斑鸠菊供试液 、驱虫斑鸠
菊含药血清和空白血清的 HPLC色谱指纹图谱。由图 1
(A)可见 ,驱虫斑鸠菊供试液共分离得到 31个色谱峰 ,
其中 7, 12, 13, 14, 15, 23, 26, 27, 29号峰峰面积较大。通
过比较驱虫斑鸠菊含药血清与空白血清 ,驱虫斑鸠菊含
药血清出现了 9个新色谱峰 ,即 1, 3, 5 ～ 11号峰 ,结果
见图 1(B, C)。比较驱虫斑鸠菊供试液 、驱虫斑鸠菊含
药血清和空白血清的 HPLC色谱指纹图谱 ,含药血清的
1, 6, 9 ～ 11号峰分别与驱虫斑鸠菊供试液的 7, 23, 26,
27, 29号峰对应 ,说明有 5种驱虫斑鸠菊的原型成分吸
收入血结果见图 1(A、B、C)。而在图 1(B)中的 3, 5, 7,
8号峰是驱虫斑鸠菊含药血清的特有峰 ,可能是驱虫斑
鸠菊提取物在大鼠体内的代谢产物。比较图 1(A, B,
C)发现 ,在驱虫斑鸠菊含药血清色谱图中 2, 4号峰位
置 ,驱虫斑鸠菊供试液和空白血清在相近位置上都出现
此峰 ,该色谱峰仅是血清中的固有成分 ,还是血清固有
成分与驱虫斑鸠菊原型成分的叠加 ,有待采用质谱及磁
共振波谱等检测方法做进一步考察。
　　图 1　驱虫斑鸠菊水提取物(A)、含药血清(B)、空白血清
(C)指纹图谱　
图 A仅标注部分典型峰峰号
4　讨论　
在分析体外生药样品和给药后血清样品时 ,均采
用了完全相同的色谱条件 ,因此 ,两种样品的 HPLC指
纹图谱中的色谱峰应具有很好的对应关系 ,同时 ,对供
试液的稳定性 、仪器的精密度和测定方法的重复性进
行了考察 ,均符合相关要求 。
实验中尝试采用甲醇沉淀法 、 70%高氯酸沉淀
·714· HeraldofMedicineVol.28 No.6June2009
法 [ 6]及热水浴法对血清样品进行处理 ,从对待测组分
的影响 、干扰情况及对色谱分析条件的影响等方面进
行考虑 ,确定采用甲醇沉淀法处理血清样品 ,用氮气浓
缩法富集血中的成分 。
本研究对驱虫斑鸠菊首次采用血清药物化学的方
法 ,通过比较驱虫斑鸠菊水提取物 、驱虫斑鸠菊含药血
清和空白血清 HPLC指纹图谱的差异 ,确定 9种血中
移行成分 ,其中 5种为原型成分 ,其余 4种可能为原型
成分的代谢产物 。 9种入血成分可能是驱虫斑鸠菊的
体内直接作用物质 ,对其进行深入研究将有助于阐明
驱虫斑鸠菊治疗白癜风的药效物质基础及作用机制 。
5种直接入血成分的性质及药理作用 ,建议从原
药材中制备分离纯化进行研究 , 4种代谢产物及其前
体化合物的推导 ,建议借助液质联用及液核联用技术
进行相关的考察 。
[ DOI] 　10.3870/yydb.2009.06.011
[参考文献 ]
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灯盏花素对麻醉犬稳定型劳累性心绞痛的治疗作用
鲁卓林 1 ,徐向伟 2 ,何小云 2 ,赵专友 2 ,周则卫 1
(1.中国医学科学院 、中国协和医科大学放射医学研究所 ,天津　300192;2.天津药物研究院 , 300193)
[摘　要 ] 　目的　研究灯盏花素对麻醉犬稳定型劳累性心绞痛的治疗作用 。方法　麻醉犬狭窄冠状动脉前降支
并快速起搏心脏造成稳定型劳累性心绞痛模型 ,用心电图 ST段变化 、冠脉流量及冠脉阻力等指标观察灯盏花素静脉给
药对稳定型心绞痛的治疗作用。结果　麻醉犬狭窄冠状动脉前降支并快速起搏心脏后 , 心电图 ST段明显下降 , 硝酸甘
油可明显抑制这种变化 ,病理模型可靠;静脉注射灯盏花素可减小快速起搏后 ST段的降低程度 ,降低冠脉阻力。结论　
灯盏花素预防性给药对麻醉犬稳定型心绞痛有缓解作用。
[关键词 ] 　灯盏花素;心绞痛 ,稳定型;犬
[中图分类号 ] 　R282.71;R972.3　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2009)06-0715-04
TherapeuticEffectsofErigerononStableEffortAnginainCanine
LUZhuo-lin1 , XUXiang-wei2 , HEXiao-yun2 , ZHAOZhuan-you2 , ZHOUZe-wei1 (1.ChineseAcademyof
MedicalScience＆ PekingUnionMedicalColege, InstituteofRadiationMedicine, Tianjin300192, China;2.
TianjinInstituteofPharmaceuticalResearch, Tianjin300192, China)
ABSTRACT　Objective　Tostudythetherapeuticeffectsoferigerononastableefortanginapectorisindogs.　
Methods　Thedogsweresubjectedtoleftanteriordescendingcoronaryartery(LAD)stenosistogenerateastableeffortangina
pectorisonlywhentheheartswerepaced.TheeffectoferigeronwasevaluatedbyobservingchangesofST-segmenton
electrocardiograms, coronaryflowandcoronaryresistance.　Results　ST-segmentdescendedrapidlyonlywhenthethedogs
weresubjectedtoleftanteriordescendingcoronaryartery(LAD)stenosisandheartswerepaced.Nitroglycerinobviously
inhibitedthischange.Thepathologicalmodelwasprovedtobereliable.ErigeroninjectedthroughveinreducedST-segment
descendingbypacingandloweredthecoronaryresistance.　Conclusion　Erigeroncouldrelievethestableefortanginapectoris
inapreventionregime.
KEYWORDS　Erigeron;Angina, stableeffort;Dog
　　灯盏细辛又名灯盏花 , 是菊科植物短葶飞蓬
[ Erigeronbreviscapus(Vant.)hand.-Mazz]的全草 , 早
期多用于脑卒中后遗症的治疗 ,主要活性成分是灯盏
花素。 20世纪 90年代灯盏花素对心血管的作用逐步
·715·医药导报 2009年 6月第 28卷第 6期