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中国特有植物南川百合群体遗传多样性研究



全 文 :分子植物育种,2016年,第 14卷,第 3期,第 749-755页
Molecular Plant Breeding, 2016, Vol.14, No.3, 749-755
研究报告
Research Report
中国特有植物南川百合群体遗传多样性研究
赵玉倩 1 丁瑞华 1 李玉帆 1 刘正权 2 贾桂霞 1*
1北京林业大学园林学院,国家花卉工程技术研究中心,花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室,城乡生态环境北京实验室,北京, 100083;
2重庆市南川区森林资源监测站,重庆, 404110
*通讯作者, gxjia@bjfu.edu.cn
摘 要 南川百合(Lilium rosthornii Diels)是我国特有的野生百合种,可以作为抗逆育种的亲本,但是目前数
量急剧减少。对重庆南川和湖南怀化的南川百合群体的生境及表型性状进行调查,测量形态学指标并计算
其变异系数。从 73对 SSR引物中筛选出 6对引物,对两个群体的遗传多样性进行分析。6对引物在两个群
体中共扩增了 15个条带,其中多态性条带为 11条;根据 Popgene计算可得,南川百合两个群体的遗传多样
性在其群体平均水平为 PPF=67.44%,Ne=1.684 5,I=0.544 9,Hpop=0.3507,物种水平为 PPF=73.33%,Ne=1.730 2,I=
0.612 1,Hpop=0.390 8;其中重庆群体的遗传多样性要高于湖南群体。两个群体之间的基因流为 2.174 5,存在
着基因交流;群体间遗传变异占 10.31%,群体内的遗传变异占 89.60%。作者对南川百合野生群体进行调研并
对其群体遗传多样性进行初步研究,分析其濒危的原因,从而有利于南川百合保护、引种和育种方针的制定。
关键词 南川百合,生境, SSR,群体,遗传多样性
Studies on Genetic Diversity of Lilium rosthornii Diels Populations, the
Endemic Plants of China
Zhao Yuqian 1 Ding Ruihua 1 Li Yufan 1 Liu Zhengquan 2 Jia Guixia 1*
1 Beijing Laboratory of Urban and Rural Ecological Environment, Beijing Key Laboratory of Ornamental Plants Germplasm Innovation & Molecu-
lar Breeding, National Engineering Research Center for Floriculture, College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing,
100083; 2 Chongqing Nanchuan Forest Resources Monitoring Station, Chongqing, 404110
* Corresponding author, gxjia@bjfu.edu.cn
DOI: 10.13271/j.mpb.014.000749
Abstract Lilium rosthornii Diels is a kind of wild lily endemic to China, which can be used as an excellent parent
for stress resistance breeding, but now the species individual amount has drastically reduced. We investigated the
wild habitat and phenotypic characters, and then measured the morphology indices and calculated their variable
coefficients of L. rosthornii Diels growing in Nanchuan district Chongqing city and Huaihua city in Hunan province.
We screened 6 pairs of SSR primers from 73 pairs of primers to analyze the genetic diversity of two populations. 15
discernible DNA fragments were scored with 11 being polymorphic among two populations with the 6 pairs of SSR
primers selected before. According to calculation in POPGENE, genetic variation were revealed both at the
population level (mean PPF=67.44%, Ne=1.684 5, I=0.544 9) and the species level (PPF=73.33%, Ne=1.730 2, I=
0.612 1, Hpop=0.390 8). Among them, the genetic diversity of the population in Chongqing should be slightly higher
than the genetic diversity of population from Hunan. Gene flow between two populations was 2.174 5, which
indicated there was a gene exchange between two populations. The genetic variation between populations was
10.31%, while the genetic variation within populations was 89.60%. The author investigated the wild populations
and conducted a preliminary study on the population genetic diversity of L. rosthornii, and then analyzed the the
cause why it was endangered, as to provide theoretical basis for the protection, introduction and breeding of L.
基金项目:本研究由林业公益性行业科研专项(201204609)和大学生创新创业训练项目(S201410022034)共同资助
分子植物育种
Molecular Plant Breeding
表 1重庆与湖南南川百合的分布特点
Table 1 Distribution characteristics of L.rosthornii in Chongqing and Hunan
群体
Population
重庆群体
Population in
Chongqing
湖南群体
Population in
Hunan
海拔(m)
Altitude (m)
624-629
350-900
生境
Habitat
溪旁灌丛
Brush beside
streams
溪旁灌丛或林缘
Brush beside
streams or
forest edge
伴生植物
Associated plants
南川镰序竹,蕊被忍冬,金发草,荚果蕨,地钱,伏地卷柏等
Drepanostachyum melicoideum, Lonicera gynochlamydea,
Pogonatherum paniceum, Matteuccia struthiopteris,
Marchantia polymorpha, Selaginella nipponica, etc
乌冈栎,桦,黄心夜合,金丝桃,荚果蕨,伏地卷柏等
Quercus phillyraeoides, Betula platyphylla,
Michelia martinii, Hypericum monogynum,
,Matteuccia struthiopteris, Selaginella nipponica, etc
南川百合(L. rosthornii Diels)是中国特有植物,
具有较高的药用价值和观赏价值,并且南川百合可
以作为抗灰霉病育种的亲本(杜运鹏, 2014),具有很
高的研究和利用价值。南川百合主要分布于重庆地
区,如南川区的老洞岩、龙骨溪、石门沟、巴掌坪等地
(王瑞波, 2009)和巫山、奉节等地(周先容等, 2012),
近几年在湖北(谢孔平等, 2013)、四川务川(李黛和代
呜, 2014)、峨眉山(谢孔平等, 2013)地区以及贵州(席
彩彩等, 2015)发现了野生的南川百合。
由于南川百合对环境条件要求较高,加上人为
活动对南川百合的破坏,其生存现状岌岌可危,分布
区域被打断呈“岛形”分布,在有些分布区域甚至已
经消失(王瑞波, 2009)。目前对南川百合的研究比较
集中在野生资源调查和离体快繁技术方面,还未研
究过群体表型性状及遗传多样性。
遗传多样性是物种长期适应和进化的产物,遗
传多样性可以从不同层次表现,如群体、个体、组织、
细胞以及分子等,其中 DNA分子结构的突变是遗传
变异的主要来源,分子标记技术是检测种质资源遗
传多样性的精确而有效的方法(倪先林等, 2015)。2008
年,邓明文(2008)利用 ISSR技术对岷江百合群体进
行了遗传多样性和遗传分化的研究;荣立苹(2010)采
用形态学、抱粉学、细胞学和 RAPD标记对东北野生
百合资源进行亲缘关系和遗传多样性研究;杜方
(2014) 获利用 SSR标记分析了 69分百合材料的遗
传多样性。SSR技术在百合中已经有了较为成熟的
实验体系,因此作者采用 SSR分子标记具有较高的
可行性,通过对南川百合的两个群体的遗传多样性
进行分析,为南川百合保存策略的制定及引种时的
取材问题提供一定的理论依据。
1结果与分析
1.1南川百合生境
野生南川百合生长于海拔 350~900 m的溪边或
林缘、遮荫较好的阴坡或半阴坡。周围密生各种乔
木、灌木和草本,群落结构丰富,土壤湿润,气候凉
爽。重庆群体的伴生植物主要有南川镰序竹(Drepa-
nostachyum melicoideum)、蕊被忍冬(Lonicera gynochl-
amydea)等,湖南群体的伴生植物有乌冈栎(Quercus
phillyraeoides)、黄心夜合 (Michelia martinii)、金丝桃
(Hypericum monogynum)等(表 1)。
南川百合多呈散生状,但也有聚集分布的现象,
与王瑞波(2009)的调查结果一致。其可能的原因一是
南川百合种子重而厚,果实成熟开裂后,种子大多散
落在母株周围;二是鳞茎不断产生的新株,很容易导
致聚集分布。湖南群体处于人烟稀少区域,还未进行
大规模开发,人为干扰较轻表。重庆群体上游生存环
境破坏十分严重,遭受了较大的人为干扰,并且群体
中幼苗居多。
1.2南川百合的形态多样性
南川百合植株直立,叶散生,中下部叶片狭长披
针形,先端渐尖,基部渐狭,着生于上部的叶片呈卵
形,先端急尖;花橘黄色,有紫红色细斑点,喉部绿
色,下垂;单生或 3~9朵簇生;苞片叶状,宽卵形,先
端急尖;花被片 6,反卷,基部有流苏状突起;雄蕊 6
枚,均短于雌蕊;硕果为长圆柱形。调查过程中测量
了南川百合的茎叶形态学指标和花的形态学指标,
之后对各个形态学指标变异系数进行了分析。从表 2
中可以看出,不同形态学指标的变异系数相差较大,
rosthornii.
Keywords Lilium rosthornii Diels, Habitat, SSR, Population, Genetic diversity
坡向
Aspect
阴坡
Shady-slope
半阴坡
Half shady-slope
750
表 2南川百合形态学指标的平均值,标准差和变异系数
Table 2 Mean, standard deviation and variation coefficient of morphological indexes of L. rosthornii
茎叶
Stem and leaf

Flower
株高(cm)
Height (cm)
茎粗(mm)
Stem diameter (mm)
叶长(cm)
Leaf length (cm)
叶宽(mm)
Leaf width (mm)
叶长宽比
Leaf length-width ratio
内花瓣长(cm)
Petal length (cm)
外花瓣长(cm)
Petal length(cm)
外花瓣宽(mm)
Outer petal width (mm)
内花瓣宽(mm)
Inner petal width (mm)
花柱长(cm )
Style length (cm)
花丝长(cm)
Filament length (cm)
花药长(cm)
Anther length (cm)
子房长(cm)
Ovary length (cm)
变异系数平均值(%)
Mean of CV (%)
平均值
Mean
41.11 (11.1~64.5)
4.99 (3.12~7.74)
10.85 (6.63~13.84)
8.51 (6.19~12.38)
1.30 (0.71~1.75)
5.85 (5.07~7.08)
5.92 (5.43~6.65)
12.94 (12.56~13.91)
12.81 (11.76~13.42)
5.36 (4.59~6.05)
5.93 (5.56~6.53)
1.00 (0.79~1.14)
1.37 (1.17~1.60)
标准差
Standard deviation
9.86
0.93
1.41
1.40
0.23
0.87
0.53
0.65
0.74
0.62
0.47
0.15
0.19
变异系数(%)
Coefficient of variation
23.98
18.73
12.95
16.45
17.92
14.86
9.04
5.01
5.78
11.54
7.89
14.82
13.62
13.51
在 5.01%~23.98%范围内变化,平均变异系数为
13.51%。在 13个形态学指标中,变异程度由大到小
为:株高>茎粗>叶长宽比>叶宽>内花瓣长>花药长>
子房长>叶长>花柱长>外花瓣长>花丝长>内花瓣宽
>外花瓣宽。可以看出,花的形态学指标普遍比茎叶
的形态学指标更稳定;其中株高的变异程度最大,外
花瓣宽变异最小最稳定。
1.3南川百合群体遗传多样性
从 73对 SSR引物中共筛选出 6对多态性较好
的引物,并通过调整反应程序,得到适宜的退火温
度。利用 6对 SSR引物对来自 2个群体的 180个样
本进行扩增,共得到 15条清晰条带,其中多样性条
带 11条,平均每个引物扩增 2.5条,其中多态性条带
所占比率为 73.33%。各引物的多态信息含量在
0.137 2~0.523 9之间,其中最高为引物 L225,最低为
引物 L206 (表 3)。
南川百合两个群体的遗传多样性在其群体平均
水平为 PPF =67.44%,Ne =1.684 5,I =0.544 9,Hpop =
0.350 7,物种水平为 PPF=73.33%,Ne=1.730 2,I=
0.612 1,Hpop=0.390 8。在两个群体中,重庆群体扩增
的总条带数、多样性条带数、Shannon 信息指数和
Nei多样性指数都高于湖南群体,说明重庆群体的遗
传多样性要高于湖南群体(表 4)。
利用 Popgene软件对不同位点的基因频率计算
得出,两个群体在每个位点的等位基因频率都有所
不同。其中重庆群体扩增出了两个特有等位基因,分
别为 L225位点的 D基因和 L5位点的 A基因。两个
中国特有植物南川百合群体遗传多样性研究
Studies on Genetic Diversity of Lilium rosthornii Diels Populations, the Endemic Plants of China
形态学指标
Morphological indexes
751
分子植物育种
Molecular Plant Breeding
表 4南川百合群体的遗传多样性
Table 4 Genetic diversity of the L.rosthornii populations
群体
Population
湖南群体
Population in Hunan
重庆群体
Population in Chongqing
平均
Mean
总计
Total
扩增条带数
No. of amplified
bands Nf
13
15
14
15
多样性
条带数
No. of poly-
morphism
bands Np
8
11
9.5
11
多样性条带
百分率(%)
Percentage of
polymorphism
bands PPF (%)
61.54
73.33
67.44
73.33
有效等
位基因数
Effective
number of
alleles Ne
1.613 0
1.755 9
1.684 5
1.730 2
Shannon信
息指数
Shannons
information
indexⅠ
0.523 2
0.566 5
0.544 9
0.612 1
Nei基因
多样性
Neis expected
heterozygosity
Hpop
0.345 4
0.356 0
0.350 7
0.390 8
表 3筛选出的 6对 SSR引物的信息和扩增
Table 3 The information and amplification of six SSR primers screened
引物
Primer
L250
L225
L252
L206
L5
L10
平均
Mean
引物序列(5-3)
Primer sequence (5-3)
CGTAGTAGGTCGCATGAGCAG,
CCAAAGTGTTGCTTCAACTGAG
GCAGCCGGATATTAGTTCTACAG,
TTGAACATGAGGTCCAAGGTATTC
GCCGAGAGAAGCTGAGAAGA,
CCTGGGCAAGCTTCTAACAA
ATGATTCATCGCCACATCTTC,
AGGTTCAACCAGGTGAGCTTG
TCTCTTCGTCTTCCATTGTG,
ATCCTTGCTCACCTCCTCTG
CATACATCCATCCGATTACA,
TGGTTTCATGACGTTCGT
扩增条带数
No. of amplified
bands
2
4
2
2
3
2
2.50
多样性条带数
No. of polymo-
rphism bands
1
4
1
1
3
1
1.83
多样性条带百分率(%)
Percentage of polymor-
phism bands (%)
50.00
100.00
50.00
50.00
100.00
50.00
73.33
引物多态信息
Polymorphism
information content PIC
0.372 7
0.523 9
0.336 7
0.137 2
0.261 8
0.308 1
0.323 4
群体都扩增出了稀有等位基因,湖南群体在 L10位
点的 A基因,重庆群体在位点 L225和位点 L5都扩
增出了稀有等位基因(表 5)。
1.4南川百合群体遗传分化和基因流
两个南川百合群体的群体内近交系数 Fis 在
-0.846 3~-0.029 4之间变化,平均值为-0.469 5,表
明种群内杂合度较高;群体的总近交系数 Fit 在
-0.839 1~0.134 7之间变化,平均值为-0.3180;种群
间分化系数 Fst在 0.003 9~0.190 4之间变化,平均值
为 0.103 1,即群体间遗传变异占 10.31%,群体内的
遗传变异占 89.60% (表 6)。
2讨论
Cockerham和Weir (1993)提出 Fis、Fst和 Fit3个
固定指数用来反映群体内以及群体间的近交和遗传
分化程度,从而可以看出群体偏离 Hardy-Weinberg
平衡的程度。Fis为群体内近交系数,用来表示群体
中由于近交而导致群体内杂合度缺失的程度,其值
在-1与 1之间,Fis值越小,则群体内杂合子越多,Fis
值越大,群体内纯合子越多,群体内近交现象严重,Fis
值为 0,则说明群体是随机交配的;Fis为种群间分化
系数,是群体内平均杂合度与总群体平均杂合度的比
值,用来反映群体间的遗传分化程度;Fit为总群体近
752
表 5南川百合群体的稀有等位基因和特有等位基因数量
Table 5 The amount of the rare alleles and the specific alleles of
L.rosthornii populations
等位基因类型
Types of allele
稀有等位基因
Rare allele
特有等位基因
Specific allele
湖南群体
Population in Hunan
1 (L10-A)
0
重庆群体
Population in Chongqing
3 (L225-D, L5-A, L5-B)
2 (L225-D, L5-A)
表 6 6个微卫星位点的固定指数及基因流
Table 6 The fixed index and gene flow of 6 SSR loci
位点
Locus
L250
L225
L252
L206
L5
L10
平均
Mean
Fis
-0.846 3
-0.209 4
-0.650 0
-0.098 4
-0.029 4
-0.614 6
-0.469 5
Fst
0.003 9
0.128 4
0.098 8
0.007 0
0.159 4
0.190 4
0.103 1
Fit
-0.839 1
-0.054 1
-0.487 0
-0.090 7
0.134 7
-0.307 2
-0.318 0
Nm
63.260 0
1.696 5
2.280 8
35.380 2
1.318 3
1.063 2
2.174 5
交系数,用来反映总群体杂合度的缺失程度;Nm代表
群体间的基因流,它是根据种群间的分化系数计算
的,即 Nm=0.25 (1-Fst)/Fst,当 Nm>1时可以抵御遗传
漂变而产生的群体的遗传变异(Wright, 1931)。
根据计算的结果可以看出,南川百合群体内杂
合度较高,并且两个群体的遗传变异主要来源于群
体内部,这与和南川百合亲缘关系较近的岷江百合
研究结果一致(邓明文, 2008),说明南川百合的遗传
变异主要是由于群体内的个体差异引起的。两个群
体基因流的平均值为 2.1745,说明两个群体间存在
着基因交流。植物种群间的基因流主要依靠花粉、种
子、无性繁殖器官、重力和动物等进行,包括短距离
的传播和长距离的传播(李忠虎等, 2014 )。虽然两地
之间存在着一定的地理隔离,但是两地区河流分布
丰富,而且两地之间的贵州地区也分布有野生南川百
合(席彩彩等, 2015),因此两个群体之间可能通过河流
或鸟类传播花粉、种子等维持群体间的基因交流。
一些濒危物种由于群体受到破坏,被分隔形成
多个群体,各群体在演化过程中发生的遗传漂变可
能导致遗传基础的改变,从而使各个群体之间的遗
传多样性发生改变,同时群体的大小和栖息地的容
量也会影响群体的遗传多样性(Hébert et al., 2000)。
将两个群体对比来看,重庆群体的遗传多样性要高
于湖南群体,根据已有的调查,南川百合在重庆的多
个地点都有发现,分布范围较广,因此重庆群体在进
化过程中具有更加丰富的遗传多样性。在重庆群体
中扩增出了较多稀有等位基因,说明重庆群体中遗
传多样性流失较严重,调研的结果也显示,在重庆
的群体被人为活动干扰和破坏比较严重,个体数量
急剧减少。
总体来说南川百合的遗传多样性较低。杨敏
(2013)利用 SSR技术对 10种野生百合进行遗传多样
性分析,其中南川百合的遗传多样性明显低于其他
几种百合。通过这次野外调研得出,南川百合是一种
比较脆弱的物种,对生存环境要求较高,分布区域狭
窄,同时有些区域破坏十分严重,群体数量急剧减
少,导致群体的优良性状不断流失,使得群体的遗传
多样性降低。因此必须采取行动对南川百合进行保
护,可以就地建立自然保护区,对野生资源的分布和
数量变化进行监控;还可以进行迁地保护,扩大南川
百合的分布区域;对南川百合进行引种时,不能只针
对一个区域进行,要对每个群体都进行取样,选取差
距较大的个体,以保证丰富的遗传基础。除此之外还
要进行更多深入的研究,调查并收集更多的群体,开
发多态性丰富的分子标记,进一步揭示南川百合的
遗传多样性和群体的遗传结构,为其引种、育种和保
护提供更加丰富的理论基础。
3材料与方法
3.1材料
重庆南川区的 100株南川百合(Lilium rosthornii
Diels)作为重庆群体,湖南怀化的 80株南川百合作
为湖南群体。
3.2方法
3.2.1野外调研
分别到重庆市南川区和湖南省怀化市进行野外
调研。调查内容包括南川百合的生境、群落特征以及
形态学特征,采集南川百合的叶片置于冰盒中,带回
实验室在-80℃保存。
测量的形态学指标的标准如下(杜运鹏, 2014):
(1)株高:为地表到花基部的垂直距离,单位 cm;
(2)茎粗:为地表以上 5 cm出茎的直径,单位mm;(3)叶
长:为叶基部到叶尖的长度,单位 cm;(4)叶宽:为叶
的最宽处的长度,单位 mm;(5)内/外花瓣长:为花瓣
与花梗连接处与花瓣顶点的距离,单位 cm;(6)内/外
中国特有植物南川百合群体遗传多样性研究
Studies on Genetic Diversity of Lilium rosthornii Diels Populations, the Endemic Plants of China 753
分子植物育种
Molecular Plant Breeding
花瓣宽:为花瓣最宽处的长度,单位 mm;(7)花柱长:
花柱与子房连接处到花柱顶端的长度,单位 cm;(8)
花丝长:花丝与花梗连接点与花药连接点的长度,单
位 cm;(9)花药长:为花药与花丝连接点到其顶端的
长度,单位 cm;(10)子房长:为子房与花梗连接点与
花柱连接点的长度,单位 cm。
3.2.2 SSR分子标记的筛选
参考天根新型植物基因组 DNA提取试剂盒提
取所采标本的 DNA,之后采用 Nanodrop2000核酸
测定仪和 1%琼脂糖凝胶电泳分别检测 DNA 的浓
度和质量。
利用岷江百合的转录组信息进行引物设计,整
理分析含有 SSR 位点的 Unigene,选择合适的有
SSR位点的 Unigene,用 primer premier 6.0软件,设
计基因组随机 SSR引物 62对;并参考已发表的 11
对 SSR引物(杜运鹏, 2014),共计 73对引物,在睿博
兴科公司进行引物合成。首先利用 1%琼脂糖凝胶电
泳对引物进行第一次筛选,再利用 8%非变性聚丙烯
酰胺凝胶电泳对初筛结果进行筛选,筛选出多态性较
好的 SSR引物,对两个群体的遗传多样性进行研究。
PCR反应体系:总体积为 20 μL,其中含 10 μL
Mix,上下游引物各添加 1 μL,模板 DNA添加 2 μL,
ddH2O添加 6 μL。
PCR反应程序:预变性阶段 95℃ 5 min,第 1到
第 35 个循环变性 94℃ 30s、退火 55℃ 30s、延伸
72℃ 30 s,延伸 72℃ 5 min,4℃终止反应。
3.2.3数据处理
在 Excel中计算各个形态学指标的平均值、标准
差以及变异系数,比较各个形态学指标的变异程度。
其中变异系数 CV=(标准偏差 SD /平均值 Mean)×
100%。
利用人工读带的方式,用 0,1表格形式记录数
据,有条带记为 1,无条带记为 0。在 Popgene软件中
计算有效等位基因数(Ne)、Neis 多样性指数(Hpop)、
Shannon信息指数(I)、Fis、Fst、Fit和基因流等多个指
标,对两个群体的遗传多样性进行分析。
作者贡献
赵玉倩是本实验研究的主要完成人之一;丁瑞
华和赵玉倩完成了数据分析和论文初稿的写作;李
玉帆完成了实验方法的改进;刘正权协助完成了野
外调研;贾桂霞既是项目的构思者及负责人,也是本
实验研究的主要完成人之一,指导实验设计、数据分
析、论文写作、确定修改及定稿。全体作者都阅读并
同意最终的文本。
致谢
本研究由林业公益性行业科研专项(201204609)和
大学生创新创业训练项目(S201410022034)共同资助。
参考文献
Cockerham C.C., and Weir B.S., 1993, Estimation of gene flow
from F-statistics, Evolution, 47(3): 855-863
Deng M.W., 2008, Genetic diversity among populations of Lilium
regale, Thesis for M.S., Nanjing Forestry University, Super-
visor: Shi J.S., pp.1-32 (邓明文, 2008,岷江百合种质资源遗
传多样性研究,硕士学位论文,南京林业大学,导师:施季
森, pp.1-32)
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中国特有植物南川百合群体遗传多样性研究
Studies on Genetic Diversity of Lilium rosthornii Diels Populations, the Endemic Plants of China
Bt Research (BT)
Bt Research (ISSN 1925-1939) is an open access, peer reviewed journal published
online by BioPublisher. The Journal is publishing high quality original research on all
aspects of Bacillus thuringiensis and their toxins affecting the living organisms, as
well as environmental risk and public policy relevant to Bt modified organisms.
Topics include (but are not limited to) Bt strain identification, novel Bt toxin discovery
and bioassay, transgenic Bt plants, insecticidal mechanism of Bt toxin as well as
resistant mechanisms of target-insect to Bt toxin. Bt Research is particularly keen to
publish the original research and review article from authors in countries where the Bt
modified crops are widely used in commerce in order to provide a forum for
advocator, protestor and middle-of-the-roader. Bt Research is archived in Library and
Archive Canada and deposited in CrossRef. The Journal has been indexed by
ProQuest as well.
Email: edit@bt.biopublisher.ca
Web: http://bt.biopublisher.ca
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