全 文 ：66 • 实验研究 • February 2012, Vol.10, No.5 Guide of China Medicine
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不同生长期白茅根多糖的含量比较
刘荣华* 熊科元 马志林 段 锋 陈石生 邵 峰 黄慧莲
（江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室，江西 南昌 330004）
【摘要】目的 比较不同生长期白茅根的多糖含量，为白茅根最佳采收期的确定及开发提供科学依据。方法 以葡萄糖为对照品，采用苯酚—
浓硫酸比色，紫外可见分光光度法测定 2 个产地 ( 安徽砀山、四川安岳 ) 不同采收月份的多糖含量。结果 安徽砀山、四川安岳两地产白
茅根多糖的含量变化规律一致，3~7 月份多糖含量逐渐增加，在 7 月份达到峰值，分别为 443.48mg/g、441.92mg/g，随后有所下降，而后
在 10 月份、11 月份再次达到峰值，分别为 561.01mg/g、490.50mg/g。结论 本研究可为白茅根多糖成分合理开发、资源的利用及质量控
制提供实验依据。
【关键词】白茅根；多糖；比色法；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2012）05-0066-03
白茅根，为禾本科植物白茅Imperata cylindrica Beauv.Var.major (Nees)
C.E.Hubb.的干燥根茎，又名甜草根、兰根、地筋、茅草根等[1]，具有凉
血止血、清热生津、利尿通淋之功效[1,6]。其主要成分为多糖类，具有
抗氧化[2]，提高小鼠耐缺氧能力[3]，调节人外周血T淋巴细胞免疫功能
等作用[4,5]。然而，白茅根不同生长期多糖的动态变化还未见相关研究
报道。本文选取2个产地(安徽砀山和四川安岳)，分别按月采集白茅根
样品，采用苯酚—浓硫酸比色，紫外可见分光光度法测定其多糖的含
量，分析白茅根不同生长期多糖含量的动态变化规律，为白茅根合理
采收提供依据，同时为白茅根质量控制提供参考。
1 仪器与试药
CE-601T型万分之一电子天平（赛多利斯（北京）科学仪器有限
公司），V-2550型紫外分光光度计(日本岛津Shimadzu公司)，高速中
药粉碎机（YF-103，200g，瑞安市永历制药机械有限公司)；中国药
典专用筛（1~9号筛，浙江省上虞市华康化验仪器厂）。
葡萄糖对照品(分析纯，国药集团，批号F20071214)，所有化学试
剂均购自国药集团化学试剂有限公司（分析纯）。
白茅根采自安徽砀山和四川安岳2个产地，分别从3月至11月份每
月15日进行采集，由江西中医学院刘荣华教授鉴定为禾本科植物白茅
Imperata cylindrica Beauv.Var.major（Nees）C.E.Hubb.的根茎。凭证标
本存于江西中医学院标本室。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液制备[7]
白茅根采用95%乙醇回流脱脂2次，每次2h，脱脂后的白茅根自然
挥干至无醇味，60℃恒温干燥，粉碎，过4号药典筛，精密称量白茅
根粉末0.5g，置于100mL圆底烧瓶中，精密加入50mL蒸馏水，称重，
浸润1h，加热回流1h，放冷，加水补足缺失的重量，摇匀，抽滤，精
密吸取滤液1mL，置100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取
25mL，置于50mL容量瓶中，加水至刻度，得供试品溶液。
2.2 对照品溶液的配制
精密称定105℃干燥至恒重的葡萄糖60mg，置于100mL容量瓶
中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，充分摇匀，得到0.6mg/mL葡萄糖对
基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.30860363）
*通讯作者：E-mail:rhliu@163.com
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2012.05.042
• 实验研究 • 672012 年 2 月第 10 卷 5 期 中 国 医 药 指 南
照品溶液。
2.3 苯酚-浓硫酸比色试剂的配制
精密称取苯酚2.0g，置于50mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至
刻度，配制成4%的苯酚溶液，硫酸为浓硫酸试剂。
2.4 显色与测定
精密量取待测溶液2mL，置于10mL容量瓶中，精密加入4%的苯
酚溶液1mL，混匀，迅速贴壁加入浓硫酸7mL，摇匀，40℃水浴中静
置30min，再至于常温水中放置5min后进行测定。
2.5 方法学考察
2.5.1 最大吸收波长的选择
精密吸取以上葡萄糖对照品溶液3.0mL，置于50mL容量瓶中，
加水定容至刻度，摇匀，照2.4项下方法进行测定，以相应试剂为空
白，在200～600 nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长为485nm，
结果见图1。
2.5.2 线性关系考察[1]
精密吸取对照品试液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、5.0mL于50mL容量
瓶中，加水定容至刻度，摇匀，照2.4项下方法在485 nm处测定吸光
度。以葡萄糖对照品浓度（X）为横坐标，吸光度（Y）为纵坐标，
进行线性回归，得回归方程为：Y=63.813X+0.0043，R2=0.9981。线
性范围为0.0024mg～0.0144mg。结果见图2。
2.5.3 精密度试验
按2.5.2项下方法连续平行测定对照品溶液（0.0048mg/mL）5次。
结果吸光度平均值为0.303，RSD=0.83%（n=5）。
2.5.4 重现性试验
取安徽砀山9月份样品5份，按样品溶液制备与测定方法，分别重
复测定5次。结果吸光度平均值为0.358，RSD=1.73%。
2.5.5 稳定性试验
取安徽砀山9月份供试品溶液，分别于0、30、60、90、120、
150 min后6个时间段分别测定。测定结果表明：葡萄糖对照品吸光值
相对稳定，供试品溶液在120 min出现吸光值明显增加情况，我们初
步判断样品在2h内测定基本稳定，平均吸光值为0.1347，RSD=2.15%
（n=5）。
2.5.6 加样回收试验
精密称取白茅根（安徽砀山9月份）粉末0.25 g，分别精密加入葡
萄糖对照品适量，按供试品溶液制备方法，平行处理9份样品，测定
其吸光度，分别计算其含量与回收率，结果表明，白茅根多糖加样回
收率为98%~102%，见表1。
2.6 样品含量测定
精密量取以上供试品溶液2mL，照2.4项下方法在485 nm处测定吸
光度。结果见表2及图3。
表1 白茅根多糖加样回收实验结果(n=9)
编号 样品含量(mg) 对照品加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
1 140.25 185.38 327.52 101.02
100.57 0.97
2 140.23 185.31 325.93 100.21
3 140.27 185.29 328.84 101.77
4 140.20 150.65 290.22 99.58
5 140.25 150.62 289.20 98.89
6 140.26 150.60 290.78 99.95
7 140.28 120.35 261.67 100.86
8 140.24 120.39 262.22 101.32
9 140.25 120.41 262.54 101.56
图3 不同采收月份白茅根多糖含量 (n=3)
图1 白茅根样品及葡萄糖对照品溶液UV扫描光谱图
(A) 空白对照溶液（蒸馏水+显色剂）UV全扫描光谱图，(B) 白茅根样品及
葡萄糖对照品溶液全波长扫描图
1.样品；2.葡萄糖对照品
图2 葡糖糖溶液标准曲线
表2 不同采收月份白茅根多糖含量(n=3)
含量(mg/g)
四川安岳 安徽砀山
3月份 358.39 374.53
4月份 396.00 401.17
5月份 399.61 415.28
6月份 427.81 412.14
7月份 441.92 443.48
8月份 419.98 399.61
9月份 424.68 435.65
10月份 459.15 561.01
11月份 490.50 534.37
结果
月份
68 • 实验研究 • February 2012, Vol.10, No.5 Guide of China Medicine
3 讨 论
3.1 波长的确定
通过对空白溶液、葡萄糖对照品溶液以及白茅根样品溶液的在
200～600 nm全扫描，结果表明：对照品与供试品均在485n m处为最
大吸收，且空白溶液在该波长处无吸收干扰。
3.2 实验过程中采用苯酚—浓硫酸比色法测定，考察加入苯酚浓度是
否会影响比色测定结果，我们分别考察了文献报道中的7%与4%苯酚溶
液用量差异性，结果显示7%的苯酚的加入量会对样品紫外测定结果吸
光值会降低[7]，结合中国药典2010版要求，我们采用的4%苯酚浓度。
3.3 由表2及图3可知，安徽砀山、四川安岳两地产白茅根多糖的含量
变化规律一致。3~7月份多糖含量逐渐增加，在7月份达到峰值，分
别为443.48mg/g、441.92mg/g，随后有所下降，而后在10月份、11月
份再次达到峰值，分别为561.01mg/g、490.50mg/g，这与根类药材初
生代谢产物的积累及新陈代谢规律相符，且与白茅根传统采收时间
（夏、秋两季采收）相一致。考虑到秋季含量高于其他季节，建议白
茅根的采收期定为10月末到11月份初。
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大蒜提取物对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用
李焕宇 曲 毅
（中国人民解放军广州疗养院，广东 广州 510515）
【摘要】目的 探讨大蒜提取物对 D- 半乳糖所致衰老大鼠的保护作用。方法 大鼠腹腔注射 D- 半乳糖和生理盐水建立亚急性衰老模型组。
同时，对实验组大鼠腹腔注射大蒜提取物，连续培养 2 个月，测定大鼠肝及脑组织中 MDA 和 SOD 含量、血清 IL-2 水平、腹腔巨噬细胞
吞噬能力等指标。结果 大蒜提取物能显著提高 D- 半乳糖所致衰老大鼠肝及脑组织中 SOD 的活力、降低肝及脑组织中 MDA 含量；提高
衰老大鼠血中 IL-2 含量和腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结论 大蒜提取物可以有效对抗 D- 半乳糖所致的大鼠亚急性衰老和免疫功能降低。
【关键词】大蒜；大鼠；衰老
中图分类号：R282.710.7 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2012）05-0068-02
大蒜是百合科植物大蒜（Allium sativum L）的鳞茎，味辣，有刺
激性气味，可食用或供调味，亦可入药[1-3]。大蒜提取物为大蒜的醇
提取物，主要成分为大蒜素，目前研究表明，它具有抗菌、抗病虫作
用，增强免疫等作用[4,5]。本实验观察了大蒜提取物对D-半乳糖所致衰
老大鼠肝及脑组织中MDA和SOD含量、血清IL-2水平、腹腔巨噬细胞
吞噬能力等指标的影响，以探讨大蒜的抗衰老作用，为进一步开发应
用大蒜提供依据.
1 材 料
1.1 动物
SD大鼠，雌雄各半，体质量180～220g，SPF级，南方医科大学实
验动物中心提供。
1.2 药品与试剂
大蒜（Allium sativum L）提取物：西安天一生物工程技术有限公
司；D-半乳糖（Amresco进口分装，批号1012495）：成都格雷西亚化
学技术有限公司；IL-2、MDA、SOD测定试剂盒均为南京建成生物工
程研究所提供，批号：20090325。
1.3 仪器
UV-2550紫外分光光度计，日本岛津公司；BC-J80S型细胞培养
箱，苏州江东精密仪器有限公司。
2 方 法
2.1 D-半乳糖衰老模型的建立及给药
将大鼠40只随机分为正常组、模型组、给药组、阴性对照组，每
组10只。正常对照组大鼠每天给予生理盐水1mL腹腔注射，其他各组
每天给予100mg/L D-半乳糖300mg/kg腹腔注射，连续2个月。模型建
立后，模型组10只大鼠内眦静脉取血，处死大鼠，快速取肝、脑，检
测各项指标；给药组每日给予100mg/kg大蒜提取物灌胃，其他各组以
等量生理盐水灌胃，连续2个月，内眦静脉取血，处死大鼠，快速取
肝、脑，检测各项指标。
2.2 肝、脑组织中MDA和SOD含量测定
取肝、脑组织匀浆上清，按试剂盒操作检测SOD、MDA含量。
2.3 测定外周血IL-2含量
取血清，按照试剂盒说明书操作，放射免疫法测定IL-2含量。
2.4 腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力检测
无菌收集大鼠腹腔液，4℃离心，250×g，10min，Hanks液洗涤
细胞3次，1640培养液制备细胞悬液。取3mL置培养皿中，37℃，5%
CO2培养2h，巨噬细胞黏附于容器表面，用4℃ Hanks液吹吸，收集黏
附细胞，血球计数板计数并调整细胞密度为2×109/L，置37℃培养箱
培养2h后，弃上清和非贴壁细胞。取贴壁巨噬细胞，加0.1%中性红生
理盐水，37℃继续培养30min，弃中性红，用37℃ PBS反复冲洗巨噬
细胞，用50%乙酸和50%乙醇稀释后，用UV-2550紫外分光光度计在
540nm波长测A值。
2.5 统计学方法*通讯作者：E-mail:lihuanyu567@163.com