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广东丝瓜络多糖含量测定



全 文 :广东丝瓜络多糖含量测定
★ 林颖 徐必达 周诚 纪超 邓颖 (广州中医药大学 广州 510405)
摘要:目的:测定广东地区习用品广东丝瓜络的多糖含量。方法:苯酚-硫酸比色法。结果:测得广东丝瓜络中多糖含量为
5.08%, 平均回收率为 102.4%。结论:广东丝瓜络中多糖含量较高 , 可进一步对其进行研究。
关键词:多糖;含量测定;苯酚-硫酸比色法;广东丝瓜络
中图分类号:TQ 460.7+2  文献标识码:A
  广东丝瓜络为葫芦科 Cucurbitaceae 丝瓜属植
物广东丝瓜(棱角丝瓜)Luf fa acutangula (L.)
Roxb.除去种子后的干燥成熟老果实[ 1] ,是广东地
区的习用品 ,又叫瓜络 、絮瓜瓤[ 2] 、八棱丝瓜 、粤丝
瓜[ 3]等。其味甘 ,性平 ,归肺 、肝 、胃经[ 4] 。功能通
经活络 ,解毒消肿。临床常用于乳汁不通 ,胸胁疼
痛 ,筋脉拘挛 ,风湿麻痹 ,肺热咳嗽 ,痈肿疮毒 ,乳痈
等 。另炒炭可止血 ,用治便血 、崩漏等出血症。现代
临床研究发现其可用于治疗乳腺炎 , 且未见副作
用[ 2] 。据文献报道 ,广东丝瓜果实中除主要含有木
聚糖(xylan),甘露聚糖(mannan)、半乳聚糖(galac-
tan)、纤维素 、木质素(lig nin)等丝瓜属植物的特征
成分外[ 5] ,还含有氢氰酸[ 6] 。
现代研究表明 ,多糖具有多种生物活性 ,是理想
的免疫增强剂 ,能提高机体的免疫能力 ,对于多种肿
瘤均有较好的杀灭能力。另外 ,多糖类还有抗病毒 、
延缓衰老 、抑制溃疡 、促进造血等多方面的作用[ 7] 。
广东丝瓜络在多糖含量测定方面的文献未见报道 ,
因此 ,笔者以葡萄糖作对照品用紫外分光光度法测
定了广东丝瓜络中多糖的含量 ,以期为开拓新药源
以及为广东丝瓜络质量标准的制定 ,提供一个内在
的质量标准 。
1 实验仪器 、试剂和样品
1.1 仪器 T6系列紫外/可见分光光度计(北京普
析通用仪器有限责任公司),AEG-200 型电子分析
天平(日本岛津制作所), CQ-200 超声振荡器(上海
音波声电科技公司), TDA-8002型恒温水浴箱(余
姚工业仪表二厂)。
1.2 试剂 无水葡萄糖(批号:0403251 ,广州新成
化工厂 ,AR级),其余试剂均为国产 AR级 。
1.3 样品 广东丝瓜络购自广州中医药大学附属
骨伤科医院中药房 ,经徐必达主任药师鉴定 ,为葫芦
科 Cucurbitaceae 植物棱角丝瓜 Luffa acutangula
(L.)Roxb.除去种子后的干燥成熟老果实。
2 实验方法及结果
2.1 广东丝瓜络多糖的提取与精制 称取广东丝
瓜络粗粉 50 g ,置圆底烧瓶中 ,加石油醚(60 ~ 90
℃)400 mL ,室温浸泡 2小时 ,回流提取 1小时 ,滤
过 ,滤渣挥干溶媒 ,以 80%乙醇 400 mL 回流提取 2
次 ,每次 1小时 ,滤过 ,滤渣置圆底烧瓶中 ,加蒸馏水
600 mL浸泡 1小时后回流提取 1小时 ,滤过 ,再加
蒸馏水 400 mL 回流提取 1 小时 ,滤过 ,两滤液合
并 ,浓缩至 200 mL ,Sevage法除蛋白后加 95%乙醇
使含醇 80%,静置过夜 ,抽滤 ,滤渣以无水乙醇 、丙
酮依次洗涤多次 ,得精制多糖 ,60 ℃烘干备用。
2.2 苯酚试液的配制 取苯酚100 g ,加铝片0.1 g
和碳酸氢钠 0.05 g ,蒸馏 ,收集 182 ℃馏分。称取 5
g ,加水溶解 ,定容于 100 mL 棕色容量瓶(临用前新
配)。
2.3 测定波长的选择 精密吸取 0.02 mol/mL 葡
萄糖溶液 2.0 mL ,置 15 mL 具塞试管中 ,加苯酚试
剂1.0 mL ,混匀 ,加浓硫酸 5.0 mL ,混匀 ,放置 15
分钟 ,置 40 ℃水浴中加热 10分钟 ,取出放置 15分
钟 ,以蒸馏水同法操作为空白 ,在 460 ~ 510 nm 测
定吸收度 ,确定最大吸收波长为 488 nm 。
2.4 含量测定
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江西中医学院 学报 2 0 0 6 年 4 月第 1 8 卷第 2 期
JOURNAL OF JIANGXI UNIVERS ITY OF TCM 2006 Vol.18 No.2
 
○中药现代化○
2.4.1 标准曲线的制备 精密称取 105 ℃干燥至
恒重的葡萄糖 505.6 mg ,置50 mL容量瓶中加水溶
解并稀释至刻度 ,摇匀 ,得对照品溶液备用 。取此对
照品溶液分别稀释为 0.006 007 2 、0.010 112 、
0.020 024 、0.030 336 、0.060 072 、0.070 784 mg/
mL的 6个不同浓度的对照品溶液 。精密吸取溶液
各 2.0 mL 置 15 mL 的具塞试管中 ,加入苯酚 1.0
mL ,混匀 ,再迅速加入浓硫酸 5.0 mL ,混匀 ,放置15
分钟后置 40 ℃水浴中加热 10分钟 ,取出放置 15分
钟 ,以蒸馏水同法操作为空白 ,照分光光度法在 488
nm处测定吸收度 。以吸光度(A)为因变量 、浓度
(C)为自变量进行线性回归 , 得回归方程:A =
13.947C-0.017 5 , r=0.999 5 。
2.4.2 换算因素的测定 取 60 ℃干燥至恒重的精
制广东丝瓜络多糖 10 mg ,精密称定 ,置 50 mL 容量
瓶中 ,加水溶解并稀释至刻度 ,摇匀。精密吸取该溶
液 2.0 mL ,照标准曲线制备项下方法 ,自“加苯酚试
剂 1.0 mL”起 ,依法测定吸收度 ,按下式计算换算因
素:f=CS/C(CS 为广东丝瓜络多糖液浓度 ,C 为多
糖液中葡萄糖浓度),计算得 f=3.15。
2.4.3 稳定性试验 取样品溶液 、标准品溶液及精
制多糖溶液各 2.0 mL ,照标准曲线制备项下方法 ,
自“加苯酚试剂 1.0 mL”起 ,依法测定吸收度 ,并分
别于 0 、5 、10 、15 、20 、25 、30 、35 、40 、50 、60分钟测定 ,
分析稳定性。结果样品溶液吸收度 、标准品溶液吸
收度 、精制多糖溶液吸收度的 RSD(%)分别为
0.781 、1.01 、0.15 ,可知 ,样品液至少在 1小时内测
定是稳定的 。
2.4.4 精密度试验 取样品约 0.2 g ,精密称定 ,按
样品测定项下操作 ,测定吸收度 ,结果平均吸光度为
0.172 8 , RSD(%)=2.68。
2.4.5 重复性试验 取药材粉末 6份 ,按样品测定
项下操作 , 测定吸收度 , 结果平均多糖含量为
4.652%, RSD(%)=2.90。
2.4.6 回收率试验 取药材粉末 6份 ,每份约 0.1
g ,精密称定 ,精密加入精制多糖约 15 mg ,按样品测
定项下操作 ,测定吸收度 ,结果见表 1。
表 1 回收率试验(n =5)
取样量/g 样品中多糖含量/ mg 多糖加入量/mg 测得量/mg 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
0.1000 5.190 14.6 20.77 106.7
0.1009 5.24 14.9 20.27 100.9
0.1020 5.29 15.22 0.77 101.8 102.4 3.32
0.1005 5.22 15.22 1.11 104.5
0.1026 5.32 15.52 0.49 97.87
2.4.7 样品测定 取样品粉末(20目)约 0.2g ,共
3份 ,精密称定 ,加 80%乙醇 100 mL ,超声提取 20
分钟 ,过滤 ,滤渣用热 80%乙醇洗涤 ,挥干乙醇 ,加
蒸馏水 100 mL ,超声提取 20分钟 ,过滤 ,滤渣再加
80 mL 蒸馏水超声提取 20分钟 ,过滤 ,合并滤液 ,残
渣用热水洗涤 ,洗液并入提取液中 ,待冷后转移于
250 mL 容量瓶 ,加蒸馏水稀释至刻度 ,作供试品溶
液。精密吸取 2.0 mL 供试品溶液 ,置 10 mL 具塞
试管中 ,按“标准曲线”项下方法自“加苯酚试剂 1.0
mL”起 ,依法操作 ,测得吸收度 ,计算样品中多糖含
量。结果见表 2 。
表 2 广东丝瓜络多糖含量测定结果
  取样量/mg 多糖含量(%) 平均值多糖含量(%)RSD(%)
1 0.2026 5.40
2 0.2011 4.93
3 0.2015 5.17 5.08 5.49
4 0.2021 4.72
5 0.202 95.00
3 讨论
广东丝瓜络为广东地区的习用品 ,有较长的用
药历史 ,为通经活络 、解毒消肿类中药 ,民间常用于
气血阻滞 、痈肿疮疥 、血热所致的多种出血等疾病 ,
但是对其研究的文献报道较少 ,由文献资料所知其
主要化学成分包括多糖 ,而多糖能提高机体的免疫
功能 ,且对正常细胞没有毒副作用 ,对抗肿瘤的治疗
疗效显著 , 并且还有保肝 、降血糖 、抗辐射等作
用[ 8] 。本文采用苯酚-硫酸显色法测定了广东丝瓜
络中多糖的含量 ,测定结果为首次报道 ,可为该药的
质量标准研究提供科学依据 。
参考文献
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[ 2] 肖培根主编.新编中药志(第二卷)[ M] .北京:化学工业出版社 ,
2002.215~ 217
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2004 , 20(10):1 932~ 1 934
(收稿日期:2005-10-18)
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江西中医学院学报 2006 年第 18 卷第 2 期
 
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