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湖州铁线莲化学成分研究



全 文 :第36卷   
2014年4月    
湖 州 师 范 学 院 学 报
Journal of Huzhou University
             
   Vol.36
Apr.,2014
湖州铁线莲化学成分研究

项佳佳,谢琦婷,张佳红,葛海霞,钱 坤
(湖州师范学院 生命科学学院,浙江 湖州313000)
摘 要:利用硅胶、ODS、Sephadex LH-20等色谱方法从湖州铁线莲Clematis huchouensis Tamura中分离得到9
个化合物,根据理化性质和光谱数据,分别鉴定为正三十一烷醇(Ⅰ)、正二十五烷醇(Ⅱ)、正二十四烷酸(Ⅲ)、β-谷
甾醇葡萄糖苷(Ⅳ)、β-豆甾醇葡萄糖苷(Ⅴ)、木犀草素(Ⅵ)、芹菜素(Ⅶ)、liriodendrin(Ⅷ)和芦丁(Ⅸ).首次报道了
湖州铁线莲植物中化学成分的研究,其中化合物Ⅰ和Ⅱ首次从铁线莲属植物中分离得到.
关键词:湖州铁线莲;化学成分;正三十一烷醇
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1009-1734(2014)04-0024-03
湖州铁线莲(吴兴铁线莲)(Clematis huchouensis Tamura),又名金剪刀,为双子叶植物药毛茛科铁
线莲属植物湖州铁线莲的全草,主产于浙江,江苏.味辛、咸、微苦,性温[1].湖州铁线莲具有较好的民间应
用基础,民间中医采集其根、茎、叶,用煎服、外敷等方法治疗深部脓肿、风湿性关节炎、脑瘤、痛风、牙痛、颈
淋巴结炎、肝癌等疾病[2].目前,有关湖州铁线莲的化学成分研究在国内外未见报道,为寻找湖州铁线莲的
活性成分,阐明其药效物质基础,更好的应用和开发湖州铁线莲,本文对其进行了系统的化学成分研究,共
分离得到9个已知化合物,经鉴定分别为正三十一烷醇(Ⅰ)、正二十五烷醇(Ⅱ)、正二十四烷酸(Ⅲ)、β-谷
甾醇葡萄糖苷(Ⅳ)、β-豆甾醇葡萄糖苷(Ⅴ)、木犀草素(Ⅵ)、芹菜素(Ⅶ)、liriodendrin(Ⅷ)和芦丁(Ⅸ).
1 仪器与材料
ZK-82B型真空干燥箱、亚荣RE-52型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)、UV-Ⅱ型三用紫外分析
仪、数显恒温水浴锅 HH-2、SHB-D循环水真空泵(郑州长城仪器厂)、Brucker AV-500型和Brucker AV-
300型核磁共振仪、waters xevo G2QTof质谱仪等.柱色谱所用Sephadex LH-20为GE产品,ODS-A-
HG为YMC产品,柱色谱硅胶和硅胶GF254均为青岛海洋化工厂生产,所用试剂都为国产分析纯或化学
纯.湖州铁线莲由浙江大东吴药业有限公司提供,经湖州师范学院张海洋教授鉴定为毛茛科铁线莲属植物
湖州铁线莲Clematis huchouensis Tamura.
2 提取分离
湖州铁线莲干燥全草15kg粉碎成粗粉,用95%和50%乙醇分别提取2次,每次2h,合并提取液,减
压浓缩得浸膏2.1kg,用水混悬,依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到石油醚部分
约615g、二氯甲烷部分约536g、乙酸乙酯部分约396g、正丁醇部分约367g.二氯甲烷部分经硅胶柱层析
分离,以石油醚-丙酮系统梯度洗脱得到7个流分Fr.1~7,其中Fr.2经石油醚-乙酸乙酯洗脱,反复硅胶
柱层析分离得化合物Ⅰ;Fr.4经石油醚-丙酮洗脱,乙酸乙酯反复重结晶得化合物Ⅱ和化合物Ⅲ.乙酸乙
酯部分经硅胶柱层析分离,二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到10流分Fr.1~10.Fr.3经反复硅胶柱层析分离,
* 收稿日期:2014-03-20
基金项目:浙江省科技厅新苗人才计划项目(2013R42503);浙江省公益技术研究工业项目(2012C31G2200014);湖
州市科技攻关计划工业项目(2009GG05).
通讯作者:葛海霞,讲师,博士,研究方向:天然产物的提取分离和结构修饰.E-mail:gehaixia@hutc.zj.cn
二氯甲烷-甲醇洗脱,再经ODS-A纯化得化合物Ⅵ和化合物Ⅶ;Fr.6经反复硅胶柱层析分离,二氯甲烷-
甲醇洗脱,经Sephadex LH-20除去色素,再经ODS-A柱层析及重结晶等方法,得到化合物Ⅳ和化合物Ⅴ;
Fr.8经反复硅胶柱层析分离,二氯甲烷-甲醇洗脱,再经Sephadex LH-20反复纯化,得到化合物Ⅷ;Fr.10经
反复硅胶柱层析分离,二氯甲烷-甲醇洗脱,并经多次重结晶得到化合物Ⅸ.
3 结构鉴定
化合物Ⅰ:白色粉末,不溶于甲醇、乙醇、丙酮,微溶于乙酸乙酯、二氯甲烷,易溶于吡啶.EI-MS显示
分子离子峰452,碎片峰为438,424,410,396等.1 HNMR(PYR-D5,500MHz)δ:0.87(t,3H,J=6.5
Hz,-CH3),1.29(m,54H,(CH2)27),1.52(m,2H,-CH2-),1.76(t,2H,J=7.5Hz,-CH2-),3.88(t,2H,J
=6.5Hz,-CH2-);13CNMR(PYR-D5,125MHz)δ:62.1(1-C),33.7(2-C),32.1(3-C),29.9(4~27-C),29.5
(28-C),26.5(29-C),22.8(30-C),14.2(31-C),为典型的长链脂肪醇的氢谱和碳谱数据,与文献[3]报道的数
据一致,故鉴定化合物Ⅰ为正三十一烷醇.
化合物Ⅱ:白色粉末,不溶于甲醇、乙醇、丙酮,微溶于乙酸乙酯、二氯甲烷,易溶于吡啶.EI-MS显示分
子离子峰为368,碎片峰为354,340,326等.1 HNMR(PYR-D5,500MHz)δ:0.87(t,3H,J=6.0Hz,-CH3),
1.32(m,42H,(CH2)21),1.52(m,2H,-CH2-),1.77(m,2H,-CH2-),3.88(t,2H,J=6.5Hz,-
CH2OH);13CNMR(PYR-D5,125MHz)δ:62.1(1-C),33.7(2-C),32.1(3-C),29.9(4~21-C),29.6(22-
C),26.5(23-C),22.9(24-C),14.2(25-C),为典型的长链脂肪醇的氢谱和碳谱数据,与文献[4]报道的数据一
致,故鉴定化合物Ⅱ为正二十五烷醇.
化合物Ⅲ:白色粉末,不溶于甲醇、乙醇、丙酮,微溶于乙酸乙酯、二氯甲烷,易溶于吡啶.EI-MS显示分子
离子峰为368,碎片峰为354,340,326等.1 HNMR(PYR-D5,500MHz)δ:0.87(t,3H,J=6.5Hz,-CH3),1.32
(m,38H,(CH2)19),1.41(m,2H,-CH2-),1.81(m,2H,-CH2-),2.53(t,2H,J=7.0Hz,-CH2-);13CNMR
(PYR-D5,125MHz)δ:176.0(1-C),34.9(2-C),32.1(3-C),30.0(4~21-C),25.6(22-C),22.9(23-C),14.2
(24-C),为典型的长链脂肪酸的氢谱和碳谱数据,与文献[5]报道的数据一致,故鉴定化合物Ⅲ为正二十四烷
酸.
化合物Ⅳ:白色粉末,Molish反应和 Liebermann-burchard反应均为阳性,硫酸乙醇显色为紫红
色.ESI-MS m/z:599.4510[M+Na]+.13 CNMR(PYR-D5,125MHz)δ:37.6(1-C),30.3(2-C),
78.2(3-C),39.4(4-C),141.0(5-C),121.9(6-C),32.2(7-C),32.1(8-C),50.4(9-C),37.0(10-
C),21.3(11-C),40.0(12-C),42.6(13-C),56.9(14-C),24.6(15-C),28.6(16-C),56.3(17-
C),12.0(18-C),19.5(19-C),36.4(20-C),19.1(21-C),34.3(22-C),26.5(23-C),46.1(24-C),29.6
(25-C),20.0(26-C),19.3(27-C),23.5(28-C),12.2(29-C),102.7(1’-C),75.4(2’-C),78.7(3’-C),
71.8(4’-C),78.5(5’-C),62.9(6’-C).其NMR数据与文献[6~7]报道一致,故鉴定化合物Ⅳ为β-谷甾
醇葡萄糖苷.
化合物Ⅴ:白色粉末,Molish反应和Liebermann-burchard反应均为阳性,硫酸乙醇显色为紫红色.
ESI-MS m/z:597.4390[M+Na]+.13CNMR(PYR-D5,125MHz)δ:37.5(1-C),30.3(2-C),78.2(3-C),
39.4(4-C),141.0(5-C),121.9(6-C),32.2(7-C),32.1(8-C),50.4(9-C),37.0(10-C),21.3(11-C),40.0
(12-C),42.5(13-C),56.9(14-C),24.6(15-C),29.6(16-C),56.3(17-C),12.5(18-C),19.5(19-C),40.8
(20-C),21.5(21-C),138.8(22-C),129.5(23-C),51.5(24-C),29.6(25-C),20.0(26-C),19.5(27-C),25.
7(28-C),12.2(29-C),102.6(1’-C),75.4(2’-C),78.6(3’-C),71.8(4’-C),78.5(5’-C),62.8(6’-C).
其1 HNMR,13CNMR数据与文献[6~7]报道一致,故鉴定化合物Ⅴ为β-豆甾醇葡萄糖苷.
化合物Ⅵ:黄色粉末,盐酸镁粉反应显阳性,Molish反应呈阴性.ESI-MS m/z:309.1134[M+
Na]+,287.1277[M+H]+.1 HNMR(DMSO-D6,300MHz)δ:6.19(d,1H,J=2Hz,H-6),6.44(d,1H,J
=2Hz,H-8),6.66(s,1H,H-3),6.89(d,1H,J=8Hz,H-5’),7.39(s,1H,H-2’),7.41(d,1H,J=8
Hz,H-6’),9.69(br,2H,OH-3’,OH-4’),10.69(br,1H,OH-7),12.97(s,1H,OH-5).13CNMR(DMSO-
52第4期              项佳佳,等:湖州铁线莲化学成分研究
D6,75MHz)δ:163.8(2-C),103.7(3-C),181.6(4-C),161.4(5-C),98.8(6-C),167.1(7-C),93.8(8-C),
157.2(9-C),102.8(10-C),121.5(1’-C),113.3(2’-C),145.7(3’-C),149.6(4’-C),115.9(5’-C),118.9
(6’-C).以上数据与文献[8~9]报道一致,故鉴定化合物Ⅵ为木犀草素.
化合物Ⅶ:黄色粉末,盐酸镁粉反应显阳性,Molish反应呈阴性.ESI-MS m/z:293.1158[M+Na]+,
271.1292[M+H]+.1 HNMR(DMSO-D6,300MHz)δ:6.19(s,1H,H-6),6.47(s,1H,H-8),6.77(s,
1H,H-3),6.92(d,2H,J=8.5Hz,H-3’,H-5’),7.92(d,2H,J=8.5Hz,H-2’,H-6’),10.31(s,1H,OH-
4’),10.79(s,1H,OH-7),12.95(s,2H,OH-5).13CNMR(DMSO-D6,75MHz)δ:163.7(2-C),102.8(3-
C),181.7(4-C),161.4(5-C),98.8(6-C),164.0(7-C),93.8(8-C),161.1(9-C),103.6(10-C),121.1(1’-C),
128.4(2’-C),115.9(3’-C),157.2(4’-C),115.9(5’-C),128.4(6’-C).以上数据与文献[8~9]报道一致,
故鉴定化合物Ⅵ为芹菜素.
化合物Ⅷ:白色粉末,Molish反应呈阳性.ESI-MS m/z:765.2921[M+Na]+.1 HNMR(PYR-D5,500
MHz)δ:6.92(s,4H,H-2,H-2’,H-6,H-6’),4.94(br,2H,H-7,H-7’),4.39(m,2H,Ha-9,Ha-9’),4.36
(m,2H,Hb-9,Hb-9’),3.15(br,2H,H-8,H-8’),5.80(m,2H,2×Glc-H-1),3.80(s,12H,4×
OCH3);13CNMR(PYR-D5,125MHz)δ:154.0(3-C,3’-C,5-C,5’-C),138.3(4-C,4’-C),135.8(1-C,1’-
C),105.1(Glc-1-C,Glc-1’-C),104.9(2-C,2’-C,6-C,6’-C),86.2(7-C,7’-C),78.7(Glc-3-C,Glc-3’-C),
78.4(Glc-5-C,Glc-5’-C),76.1(Glc-2-C,Glc-2’-C),72.3(Glc-9-C,Glc-9’-C),71.7(Glc-4-C,Glc-4’-C),62.
7(Glc-6-C,Glc-6’-C),56.75(4×OCH3),54.8(8-C,8’-C).以上数据与文献[10]报道一致,故鉴定化合物
Ⅷ为liriodendrin.
化合物 Ⅸ:黄色粉末,盐酸镁粉反应和 Molish 反应呈阳性.ESI-MS m/z:633.2767[M+
Na]+,1 HNMR(DMSO-D6,300MHz)δ:0.99(d,3H,J=6.0Hz,H-6’’),5.35(d,1H,J=7.0Hz,H-
1’’),6.20(d,1H,J=1.5Hz,H-6),6.38(d,1H,J=1.5Hz,H-8),6.85(d,1H,J=9.0Hz,H-5’),7.54
(m,2H,H-6’,H-2’),12.60(s,1H,OH-5).13CNMR(DMSO-D6,75MHz)δ:156.5(2-C),133.3(3-C),
177.3(4-C),161.2(5-C),98.6(6-C),163.9(7-C),93.5(8-C),156.4(9-C),103.9(10-C),121.1(1’-C),
115.2(2’-C),144.7(3’-C),148.3(4’-C),116.2(5’-C),121.5(6’-C),101.1(1’’-C),74.0(2’’-C),76.4
(3’’-C),71.8(4’’-C),75.9(5’’-C),66.9(6’’-C),100.7(1’’’-C),70.3(2’’’-C),70.5(3’’’-C),69.9
(4’’’-C),68.2(5’’’-C),17.7(6’’’-C).以上数据与文献[11~12]报道一致,故鉴定化合物Ⅸ为芦丁.
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(下转第42页)
62 湖 州 师 范 学 院 学 报                 第36卷
An Engineering Application of the External Assemble Segment Steel Tower
XU Jiankai,CAI Jinming,ZHAO Hong,ZHANG Hua
(Zhejiang Deqing County Power Supply Company,State Grid,Deqing 313000,China)
Abstract:The analysis of the engineering mechanics for hoisting the steel tower by outward segmen-
ted puling pole,the calculation of the material strength of tool apparatus and safety examination can
theoreticaly guarantee the safety of construction and can successfuly complete the construction task of
the tower hoisting,which effectively helps solve the problem of the automobile hoists’being unable to
reach the construction site because of the traffic cause.The whole process of construction is safe and re-
liable,and the construction technique is easy to handle and the technique is fit to be applied in practice.
Key words:steel tube tower;steel pole;force analysis;construction
[责任编辑 高俊娥]
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(上接第26页)
Researches into the Chemical Constituents of Clematis Huchouen sis Tamura
XIANG Jiajia,XIE Qiting,ZHANG Jiahong,GE Haixia,QIAN Kun
(School of Life Science,Huzhou University,Huzhou 313000,China)
Abstract:We have made researches into the chemical constituents of Clematis Huchouensis
Tamura,and the findings show that the compounds are isolated by column chromatographic on silica
gel,ODS and Sephadex LH-20.Their structures are identified on the basis of their physicochemical con-
stants and spectral analysis.Nine compounds are isolated and elucidated as n-hentriacontanol(Ⅰ),
pentacosanol(Ⅱ),n-tetracosanoic Acid(Ⅲ),β-sitosterol-β-D-glucoside(Ⅳ),stigmasterol-3-O-β-D-
glucopyranoside(Ⅴ),luteolin(Ⅵ),apigenin(Ⅶ),liriodendrin(Ⅷ)and rutin(Ⅸ).It is reported the
chemical constituents of Clematis Huchouensis Tamurafor the first time,and compoundⅠandⅡwere
isolated fromClematis genus for the first time.
Key words:Clematis Huzhouensis Tamura;chemical constituents;n-hentriacontanol
[责任编辑 高俊娥]
24 湖 州 师 范 学 院 学 报                 第35卷