全 文 ：菝葜多酚类成分抗氧化活性的研究＊
赵钟祥 1 ,金　晶 3 ,方　伟 2 ,阮金兰 2
(1.广州中医药大学中药学院 , 510006;2.华中科技大学同济医学院药学院 ,武汉　430030;3.中山大学药学院 ,
广州　510080)
[摘　要 ] 　目的　对菝葜中天然多酚类化合物的抗氧化活性进行研究 , 探讨多酚类化合物在菝葜药效发挥中的作
用机制。方法　分别采用 TEAC法和 DPPH法对菝葜醋酸乙酯部位中分离得到的 9个天然多酚类化合物单体(SCE1 ～
9)的抗氧化活性进行测定 , 并初步分析它们发挥抗氧化作用的构效关系。结果　化合物 SCE1 ～ 9具有很强的抗氧化活
性 , 均能有效地清除 ABTS· +和 DPPH自由基 , 其中化合物 SCE1的活性最强 , 其清除 ABTS· +自由基的 TEAC值为
(3.11±0.04)mmol· L-1 ,在浓度 50 μmol· L-1时对 DPPH自由基的清除能力为(95.95±0.76)%。结论　菝葜中天然多
酚类化合物可能是菝葜根茎醋酸乙酯提取物发挥治疗作用的物质基础。
[关键词 ] 　菝葜;多酚类化合物;抗氧化活性
[中图分类号 ] 　R285.5　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2008)07-0765-03
AntioxidantActivityofPolyphenolicConstituentsfromSmilaxchina
ZHAOZhong-xiang1 , JINJing3 , FANGWei2 , RUANJin-lan2 (1.SchoolofChineseMedicine, Guangzhou
UniversityofTraditionalChineseMedicine, Guangzhou510006, China;2.SchoolofPharmacy, TongjiMedical
Colege, HuazhongUniversityofScienceandTechnology, Wuhan430030, China;3.SchoolofPharmaceutical
Sciences, SunYat-SenUniversity, Guangzhou510080, China)
ABSTRACT　Objective　TostudytheantioxidantactivityofpolyphenolicconstituentsfromthetraditionalChinese
medicineSmilaxchina, andprovidetheoreticalevidenceforitstraditionalapplication.　Methods　TEACassayandDPPH
methodwereusedtoevaluatethefreeradicalscavengingactivityofninepolyphenoliccompoundsSCE-1 ～ 9, whichwereisolated
fromtheethylacetatesolublefractionoftherhizomesofSmilaxchina, andtopreliminarilystudythestructure-effectrelationof
them.　Results　CompoundsSCE-1 ～ 9 showedstrongantioxidantactivity, sinceallofthemcouldefectivelyscavengefree
radicalslikeABTS· +andDPPH.InwhichthecompoundSCE-1 hadthehighestantioxidantactivity, withtheTEACvalueas
3.11±0.04mmol· L-1 , andtheDPPHfreeradicalscavengingratewas(95.95 ±0.76)% undertheconcentrationof50
μmol· L-1.　Conclusion　PolyphenolicconstituentsmightbethemainactivepartofrhizomesofSmilaxchina.
KEYWORDS　Smilaxchina;Polyphenolicconstituents;Antioxidantactivity
　　菝葜(SmilaxchinaL.)是被子植物门百合科菝葜
属植物 ,为《中华人民共和国药典 》2005年版一部新收
载药材 。菝葜的根茎入药后俗称金刚藤 ,性甘酸 、平 ,
有祛风利湿 、解毒散瘀之功效。药效学与临床实验显
示菝葜在治疗妇科炎症及肿瘤方面有着明显的疗效 ,
而且还具有降低血糖 ,镇痛的药理作用 [ 1] 。现代研究
已证实自由基所致损伤与肿瘤和炎症的发生发展有着
密切的关系 ,一些天然的抗氧剂能够有效地清除自由
基 ,从而能预防或治疗这些疾病 [ 2] 。 TEAC法和 DPPH
法是目前用来测定化合物抗氧化活性的两种常用方
[收稿日期 ] 　2007-09-20
[基金项目 ] 　 ＊湖北省科技攻关资助项目(基金编号:
2006AA301B16-5)
[作者简介 ] 　赵钟祥(1979 -), 男 , 湖北宜昌人 , 讲师 , 博
士 , 主要从事天然产物活性成分研究。 E-mail:zzx307@yahoo.
com.cn。
[通讯作者 ] 　阮金兰 , 男 ,教授 , 博士生导师。电话:027 -
83692311, E-mail:jinlan8152@163.com。
法 。为了探讨菝葜根茎醋酸乙酯部位发挥治疗作用的
物质基础 ,笔者对从中分离的 9个天然多酚类单体化
合物的抗氧化活性进行研究。
1　材料　
1.1　仪器 　紫外 -可见分光光度计 (UV-756MC
Spectrophotometer,上海精密科学仪器厂 );Perkin-
ElmerSpectrumOneFT-IR红外光谱仪 (美国 Perkin-
Elmer公司), KBr压片;BrukerAV400型磁共振仪(瑞
士 BRUKER公司),以氘代丙酮作为溶剂 , TMS为内
标;FinniganMAT95型 EI质谱仪(美国 FinniganMAT
公司);GuTelSGE 5200HE超声波仪 (工作频率
59 KHz,消耗功率 200 W,上海冠特超声仪器有限公
司);电子天平(MetlerAE160型 , Switzerland)。
1.2　试药 　DPPH [ 2, 2-Di(4-tertoctylphenyl)-1-
picrylhydrazyl] 自由 基 、 ABTS [ 2, 2′-Azinobis(3-
ethylbenzothiaoline-6sulfonicacid), diammoniumsalt]自
由基 、Trolox(6-Hydroxy- 2, 5, 7, 8-tetramethylchroman-
·765·医药导报 2008年 7月第 27卷第 7期
2-carboxylicacid), α-tocopherol,均为美国 Sigma公司
产品 ,购自于北京丰特斯化工材料有限公司;过硫酸钾
(AR,上海化学试剂有限公司);无水乙醇(AR,上海化
学振兴化工一厂)。
1.3　药材　菝葜 , 2003年 10月采自湖北郧西县 ,经
华中科技大学同济药学院张长弓副教授鉴定为百合科
菝葜属植物菝葜(SmilaxchinaL.)的干燥根茎。
1.4　样品制备　菝葜根茎(5.0 kg)粉碎后 ,用 50 %
乙醇回流提取 3次 ,每次提取 1.5 h将提取液合并 ,减
压浓缩得浸膏。然后将浸膏混悬于蒸馏水中 ,依次用
石油醚 、醋酸乙酯进行萃取 ,将两种萃取液依次进行减
压浓缩 ,分别得浸膏 15 g和 50 g。综合运用硅胶 、反
相硅胶 、SephadexLH-20等色谱分离方法对醋酸乙酯
萃取部位进行分离 ,从中分离得到了 9个化合物 ,采用
UV、IR、NMR和 MS分别鉴定 , SCE-1:表儿茶素 -(7, 8-
bc)-4α-(3 , 4-二羟基苯)-二氢-2(3H)-吡喃酮 , SCE-2:
儿茶素 -(7, 8-bc)-4β -(3, 4-二羟基苯)-二氢-2(3H)-吡
喃酮 , SCE-3:儿茶素 -(5, 6-e)-4β -(3, 4-二羟基苯)-二
氢 -2(3H)-吡喃酮和儿茶素 -(5, 6-e)-4α-(3, 4-二羟基
苯)-二氢-2(3H)-吡喃酮的混合物 , SCE-4:白藜芦醇 ,
SCE-5:氧化白藜芦醇 , SCE-6:3, 5, 3′, 4′-四羟基 ,
SCE-7:二氢山萘酚 , SCE-8:二氢槲皮素 , SCE-9:儿茶
素 。化合物 SCE-1 ～ 9的化学结构见图 1。
图 1　化合物 SCE-1 ～ 9的结构图　
2　方法与结果　
2.1　清除 ABTS· +自由基能力的检测[ 3] 　精密称取一
定量的 ABTS,配制成 7.0 mmol·L-1的水溶液 ,然后向
溶液中加入一定量的过硫酸钾 ,使得溶液中过硫酸钾的
最终浓度为 2.45 mmol· L-1 ,将上述反应溶液在室温
下 ,置于避光放置 16h。将上面配制的 ABTS· +溶液用
水稀释 ,直至溶液在 734 nm的吸光度值 (A值)为
0.700±0.003,备用。将 20 μL样品溶液加入 1.98mL
上述稀释后的 ABTS· +溶液中 ,然后记录 15 min时反应
溶液在 734nm处的 A值 ,记为 A1 ,每个样品测 3次。样
品溶液用乙醇-水溶液配制 ,样品在反应液中的浓度控
制在 0 ～ 20 μmol·L-1范围内 。用 ABTS· +溶液 +乙醇-
水溶液作为空白对照 , A值记为 A0。对 ABTS· +清除率
按下式计算:清除率 (%)=(A0 -A1)/A0 ×100%。按
照上述测定方法分别测定 Trolox反应浓度为 0, 2.5,
5.0, 10.0, 15.0μmol· L-1时的 ABTS· +清除率 ,以浓度
(C)为横坐标 、清除率(Y)为纵坐标绘制标准曲线回归
方程 , Y=0.040 6C+0.002 9(r=0.999 9)。根据该
标准曲线计算各单体化合物的 TEAC值。TEAC值是指
浓度为 1 mmol· L-1的受试物质相当于产生相同清除
ABTS· +效果的 Trolox的浓度。阳性对照化合物为槲皮
素(quercetin)。
2.2　清除 DPPH自由基能力的检测 [ 4] 　精密称取一定
量的 DPPH,用无水乙醇配制成 100 μmol·L-1的溶液 ,
将 50μL样品溶液加入 1.95mL上述 DPPH溶液中 ,混
合 ,充分振摇。室温下静置 20 min,然后测定反应溶液
在 517nm处的 A值。样品溶液用乙醇-水溶液配制 ,样
品在反应液中的浓度分别为 10和 50 μg·mL-1。DPPH
溶液 +试样溶液的 A值记为 A1 ,每个样品测 3次 。用
DPPH溶液 +无水乙醇-水溶液作为空白对照 , A值记为
A0。阳性对照化合物为 α-tocopherol,其在反应液中最
终浓度为 10和 50 μg·mL-1。化合物对 DPPH的清除
率计算如 “2.1”项。
2.3　清除 DPPH和 ABTS· +自由基能力的实验结果　
菝葜根茎中分离的单体化合物自由基清除活性测定结
果见表 1,所测试的化合物对 ABTS· +和 DPPH两种自
由基都有很强的清除活性。化合物 SCE-1 ～ 9的 TEAC
值都 >0.98mmol·L-1 ,但低于参照化合物 quercetin的
TEAC值(3.74 mmol·L-1)。在浓度为 50μmol· L-1时 ,
化合物 SCE-1 ～ 9对 DPPH自由基的抑制率均 >79%。
这些化合物中 , SCE-1的抗氧化活性最强 ,它对两种自
由基都均显示出了很强的清除能力 ,其 TEAC值为 3.11
mmol·L-1 ,在浓度为 50 μmol·L-1时 ,它对 DPPH自由
基的抑制率达到了 95.95%, 高于参照化合物 α-
tocopherol对 DPPH的抑制率(95.12%)。
3　讨论　
菝葜醋酸乙酯部位富含儿茶素和 类化合物 ,从中
分离得到的单体化合物 SCE-1 ～ 9结构中含有多个酚羟
基 ,都属于天然多酚类化合物。 SCE-1 ～ SCE3和 SCE-9
是具有黄烷-3-醇结构的儿茶素类化合物 ,这类化合物具
有很好的生物活性 ,在抑菌 、抗病毒 、防治肿瘤 、防治心
血管疾病等方面具有良好功效[ 6, 7] 。 SCE-4 ～ SCE-6属
于具有二苯乙烯结构的 类化合物。近年来大量的研
究发现 类化合物具有广泛的生物活性 , 除早已知道
的抗菌作用以外 , 还有扩张毛细血管 、改善微循环 、降
·766· HeraldofMedicineVol.27No.7 July2008
表 1　菝葜中多酚类化合物的抗氧化活性　
化合物 ABTS
· +抑制活性
/(mmol· L-1)
DPPH清除率 /%
10μmol· L-1 50μmol· L-1
SCE-1 3.11±0.04 72.32±1.84 95.95±0.76
SCE-2 3.02±0.14 70.70±1.53 94.46±1.26
SCE-3 2.86±0.05 66.56±1.65 88.03±1.29
SCE-4 0.98±0.06 33.44±3.65 79.47±4.13
SCE-5 2.90±0.06 67.93±1.77 89.89±1.00
SCE-6 2.39±0.09 66.04±1.64 93.86±2.22
SCE-7 1.38±0.13 38.42±4.19 87.75±3.26
SCE-8 1.81±0.10 65.19±4.64 92.63±2.65
SCE-9 2.40±0.06 52.39±3.85 87.75±3.50
槲皮素 3.74±0.06 - -
α-tocopherol - 52.21±0.79 95.12 ± 0.90
血脂 、降血糖 、抗肿瘤 、抗变态反应 、调控机体免疫防御
系统 、抗血栓以及抗氧化等作用 [ 8] 。
现代研究已证实自由基所致损伤与许多疾病(尤
其是肿瘤 、炎症)的发生发展有着密切的关系 ,一些天
然的抗氧剂能够有效地清除自由基 ,从而能治疗或预
防这些疾病 。本研究表明 ,从菝葜根茎分离得到多酚
类化合物 SCE-1 ～ 9均具有很强的的抗氧化活性 ,能有
效地清除 ABTS· +和 DPPH自由基。据此 ,推测多酚
类化合物可能是菝葜根茎醋酸乙酯提取物发挥治疗作
用的物质基础。
[参考文献 ]
[ 1] 　邓家刚 , 陈　壮.金刚藤活性成分与药效学及临床应用
研究 [ J] .河南中医学院学报 , 2005, 20(3):23-24.
[ 2] 　阮金兰 , 邹　健 , 蔡亚玲.菝葜抗炎活性成分研究 [ J] .
医药导报 , 2005, 24(8):670-672.
[ 3] 　RER, PELLEGRININ, PROTEGGENTEA, etal.Antio-
xidantactivityapplyinganimprovedABTSradicalcation
decolorizationassay[ J] .FreeRadBiolMed, 1999, 26:
1231-1237.
[ 4] 　AWOLAJM, ROONEYLW, WUX, etal.Screeningmet-
hodstomeasureantioxidantactivityofsorghum(Sorghum
bicolor)andsorghumproducts[ J] .JAgricFoodChem,
2003, 51(23):6657-6662.
[ 5] 　张　岚 , 蔡美琴.线粒体氧化损伤与衰老 [ J] .国外医学
卫生分册 , 2005, 32(4):218-222.
[ 6] 　刘　超 , 陈若芸.儿茶素及其类似物的化学和生物活性
研究进展 [ J] .中国中药杂志 , 2004, 29(10):1017 -
1021.
[ 7] 　夏昆华 , 周　鲁 , 左之利.黄烷醇类化合物抗氧化活性
的构效关系 [ J] .华西药学杂志 , 2003, 18(5):321 -
323.
[ 8] 　陈志强 , 吴祖泽.天然多羟基 类化合物抗病毒及抗肿
瘤活性的研究进展 [ J] .中草药 , 2003, 34(6):11-13.
中药及其复方制剂抗肺癌作用机制研究进展＊
林能明 1, 2 ,张如松 2 ,孔维月 2
(1.浙江中医药大学附属浙江省肿瘤医院药剂科 ,杭州　310022;2.浙江中医药大学药学院 ,杭州　310053)
[摘　要 ] 　对近年来中药及其复方制剂在抗肺癌作用机制方面的研究文献分成调节机体免疫功能 、抑制肿瘤细胞的
增殖 、诱导肿瘤细胞的分化和凋亡 、抗肿瘤血管生成 、改善机体微循环 、增加放射敏感性、减轻放射性肺损伤 、对化疗的增效
解毒作用 、对细胞黏附因子的影响 、逆转肿瘤细胞多药耐药的作用 、其他作用进行论述 ,对存在问题进行讨论与展望。
[关键词 ] 　中药;复方制剂;肺癌;机制
[中图分类号 ] 　R286;R734.2　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2008)07-0767-05
　　肺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一 , 其发生和病死率已占
全球多数大中城市恶性肿瘤首位 ,且其发病率在我国和其他许
[收稿日期 ] 　2007-07-27
[基金项目 ] 　 ＊浙江省中医药科技计划项目 (基金编号:
2007CA098)
[作者简介 ] 　林能明(1965-),男 ,浙江宁海人 ,主任药师 , 在读博
士 ,主要从事临床药理学与新药开发研究。 电话:0571-88122440, E-
mail:lnm1013@163.com。
[作者简介 ] 　张如松(1950-), 男 ,浙江杭州人 , 教授 , 博士生导
师 ,主要从事中药药效物质与创新药物开发研究。 电话:0571 -
86613798, E-mail:zrs789@hotmail.com。
多国家仍在不断升高。目前对肺癌的治疗是采取包括手术 、化
学药物 、放射 、免疫生物及中医中药等在内的综合治疗。 中医
中药无论在抑制或杀伤肿瘤细胞还是术后调理 , 减轻放疗 、化
疗的不良反应 ,改善患者症状和体征 , 提高生活质量等方面 ,均
可发挥重要作用。其中中药及其复方制剂由于多种活性成分
并存 ,它们是通过多种途径 、多个靶点 、多种方式在肺癌的治疗
中发挥作用。现就近几年中药及其复方制剂在抗肺癌方面的
研究文献作一综述。
1　调节机体免疫功能　
中药及其复方制剂以辨证论治中医理论为指导 ,强调通过
·767·医药导报 2008年 7月第 27卷第 7期